摘要
为掌握各型缺氧的特点并观察其对机体的影响，本实验通过制造乏氧环境，制造CO中毒环境，腹腔注射亚硝酸钠的方法复制了低张性，血液性，组织中毒性缺氧动物模型。对缺氧后小鼠行为状态，呼吸频率幅度，存活时间，每分钟耗氧量，皮肤黏膜，肝脏颜色等生理指标变化做了仔细的观察与记录。结果与对照组相比均有明显变化，与相关报道一致。证实了我们的推测并亲自验证了甲苯氨蓝的生物学作用。
关键词：缺氧；小鼠；生理指标变化
实验性缺氧
1 前言
1.1目的与任务
1.掌握各型缺氧的特点及对机体的影响
2.观察机体不同机能状态对缺氧耐受性的影响
3.了解条件因素在缺氧发病中的重要性及其临床意义
4.了解几种缺氧疾病的基本致病机理和应对办法
1.2缺氧事故现状
一氧化碳（CO）是无色、无味、无臭、无刺激性，从感观上难以鉴别的气体。亚硝酸钠为白色的晶体或粉末，有咸味，毒性很强，误食0.3 g～0.5 g，就会中毒，10分钟后就会出现明显的中毒症状，如呕吐、腹痛、紫绀、呼吸困难等。甚至抽搐、昏迷，严重时还会危及生命。
1.3原理与意义
O2是机体维持正常的生理活动所不可缺少的重要物质，它在血液中主要以HbO2的形式存在和运输。呼吸环境中氧的缺乏和氧利用结合的受阻都可使机体产生明显的生理反应。
本实验是通过不同的方法给机体制造出不同类型的缺氧条件（低张性，CO中毒性，亚硝酸钠中毒性），观察其对机体所造成的影响和各自的特点，并利用化学药品观察机体在不同机能状态下对同一缺氧条件的耐受性。对于缺氧发病的研究和治疗有一定的临床意义。
2 材料与方法
2.1实验动物
小白鼠
2.2仪器与试剂
耗氧量测定装置，CO发生装置，125ml广口瓶，1ml注射器，剪刀，手术刀，吸管，镊子等
钠石灰，甲酸，浓硫酸，1：10000肾上腺素，1：10000乙酰胆碱，5%亚硝酸钠，1%甲苯氨蓝
2.3观察指标
1.一般状态，行为
2.呼吸频率，幅度
3.每分钟耗氧量（min）
4.存活时间（min）
5.皮肤黏膜和血液（肝脏）颜色
2.4实验过程
2.4.1低张性缺氧
（1）将小鼠称重并标记，取体重相近小鼠三只，分别做以下处理：
甲腹腔注射1：10000肾上腺素0.1ml
乙腹腔注射1：10000乙酰胆碱0.1ml
丙腹腔注射生理盐水0.1ml,作为对照
（2）5min后，放入装有5g钠石灰的广口瓶，连通耗氧装置（如图2.4.1），开始计时，观察小鼠行为变化，记录上述指标，二十分钟后取出处死。
（3）解剖动物尸体，观察肝脏和血液颜色。
2.4.2 CO中毒性缺氧
（1）将装有小白鼠的广口瓶与CO发生装置连接。（如图2.4.2）
（2）用吸管吸取HCOOH3ml放入试管后，再沿管壁缓慢加入2ml浓H2SO4,立即塞紧瓶塞，观察小鼠行为变化，记录上述指标变化，直至死亡。
反应式：HCOOH-----H2O+CO
（3）解剖动物尸体，观察肝脏和血液颜色。
图2.4.1
图2.4.2
2.4.3亚硝酸钠中毒性缺氧
（1）取小白鼠两只，观察正常表现后做以下处理：
甲腹腔注射5%亚硝酸钠0.3ml，再立即注射1%甲苯氨蓝0.3ml
乙腹腔注射5%亚硝酸钠0.3ml，再立即注射生理盐水0.3ml作为对照（2）观察小鼠行为变化，记录上述指标，直至死亡。
（3）解剖动物尸体，观察肝脏和血液颜色。
3.结果
3.1低张性缺氧
（1）甲鼠在注射肾上腺素后行为状态比较活泼，放入广口瓶后较安静。5min后呼吸频率开始加大，并渐渐闭上眼睛。9min时耗氧4ml，开始躁动不安。13min时乱爬，呼吸变得非常急促。15min时趴下安静不动，急促呼吸。20min时耗氧25ml。
（2）乙鼠在注射乙酰胆碱后非常活泼，放入广口瓶后也在不断活动，7min时耗氧4ml,呼吸频率加快明显。13min时耗氧20ml，这期间一直在不停活动，洗脸，向上爬，在瓶内乱转。
15min耗氧23ml，稍显安静，呼吸非常急促。20min时耗氧27ml。
（3）丙鼠注射了同等剂量的生理盐水，为对照组。在广口瓶内时而活泼时而安静，5min时耗氧2ml,10min时耗氧5ml, 呼吸频率有所加快，12min时耗氧8ml，呼吸稍显急促，
20min时耗氧13ml。
3.2 CO中毒性缺氧
小鼠（25.3g雄）刚放入瓶内时较安静，量筒内有气泡冒出时表明已有CO通入瓶内，此时计时。1min30s后，开始剧烈跳跃挣扎，3min30s后，趴在瓶底四肢抽搐，仍在呼
吸，3min55s时死亡。
尸体全身发红，解剖后肝脏，黏膜等呈樱桃红色。
3.3亚硝酸钠中毒性缺氧
这一步实验发生了一点意外，由于实验准备时的一时疏忽，所配置的亚硝酸钠溶液浓度过低，给两只小鼠注射后均无明显中毒反应。甲鼠在注射甲苯氨蓝后，变得不活泼，动作迟缓，闭眼，腹部紧贴瓶底，后肢运动不协调。乙鼠为注射生理盐水对照组，正常。
发现错误后，我们及时做了补救措施，马上配制5%亚硝酸钠溶液并立即给两只小鼠注射，现象如下：
（1）甲鼠（24.7g雄）无明显中毒迹象，而且运动状态渐渐恢复正常，开始在瓶内活动。12min5s 后死亡。
尸体全身青紫，腹部皮肤蓝色，肝脏深咖啡色。
（2）乙鼠（23.5g雄）3min后变得非常活泼，上窜下跳，甚至跳出瓶口。4min时开始抽搐，仍然蹦跳。5min时趴在瓶底抽搐。5min30s后死亡。
尸体全身皮肤黏膜青紫，肝脏为深咖啡色。
