底泥微生物测定方法

土壤微生物测定土壤微生物活性表示土壤中整个微生物群落或其中的一些特殊种群状态，可以反映自然或农田生态系统的微小变化。

土壤微生物活性的表征量有:微生物量、C/N、土壤呼吸强度和纤维呼吸强度、微生物区系、磷酸酶活性、酶活性等。

测定指标：1、土壤微生物量(MierobialBiomass，MB)能代表参与调控土壤能量和养分循环以及有机物质转化相对应微生物的数量，一般指土壤中体积小于5Χ103um3的生物总量。

它与土壤有机质含量密切相关。

目前，熏蒸法是使用最广泛的一种测定土壤微生物量的方法阎，它是将待测土壤经药剂熏蒸后，土壤中微生物被杀死，被杀死的微生物体被新加人原土样的微生物分解(矿化)而放出CO2，根据释放出的CO2:的量和微生物体矿化率常数Kc可计算出该土样微生物中的碳量。

因此碳量的大小就反映了微生物量的大小。

此外，还有平板计(通过显微镜直接计数)、成份分析法、底物诱导呼吸法、熏蒸培养法(测定油污染土壤中的微生物量—碳。

受土壤水分状况影响较大，不适用强酸性土壤及刚施用过大量有机肥的土壤等)、熏蒸提取法等，均可用来测定土壤微生物量。

熏蒸提取-容量分析法操作步骤：（1）土壤前处理和熏蒸（2）提取-1K2SO4（图将熏蒸土壤无损地转移到200mL聚乙烯塑料瓶中，加入100mL0.5mol·L水比为1:4；w：v），振荡30min（300rev·min-1），用中速定量滤纸过滤于125mL塑料瓶中。

熏蒸开始的同时，另称取等量的3份土壤于200mL聚乙烯塑料瓶中，直接加入100mlL0.5mol·L -1K2SO4提取；另作3个无土壤空白。

提取液应立即分析。

（3）测定吸取10mL上述土壤提取液于150mL消化管（24mmх295mm）中，准确加入10mL0.018 mol·L -1K2Cr2O7—12mol·L-1H2SO4溶液，加入2~3玻璃珠或瓷片，混匀后置于175±1℃磷酸浴中煮沸10min（放入消化管前，磷酸浴温度应调至179℃，放入后温度恰好为175℃）。

从养殖池塘底泥中分离筛选出改善水体养殖水质的光合细菌一．实验目的：在养殖池塘底泥中分离筛选光合细菌光合细菌具有改善水质的能力，而且有较高的蛋白质含量，并能促进水产品的生长繁殖，故在水产养殖中具有广泛的应用前景。

因此分离得到高效的净化水产养殖水质的光合细菌，对我国水产养殖有着重要意义。

二．实验材料与器材：（1）待分离材料：取养殖池塘底污泥（或者学校东湖池底污泥）（2）培养基：使用红螺菌科富集培养基作为富集分离基础培养基。

培养基配方：乙酸钠：3.0g，丙酸钠：0.3g，NaCl：0.5g，NH4Cl：1g，七水硫酸镁：0.2g，K2HPO4：0.3g，KH2PO4：0.5g，CaCl2：0.05g，四水氯化锰：0.003g，七水硫酸铁：0.005g，酵母膏：0.1g，蛋白胨：0.01g，谷氨酸：0.2*10-3g，无菌水：1000ml，琼脂：20g，pH：7.2~7.4，121摄氏度高压灭菌30min。

三．实验方法和步骤(1)菌株的分离筛选方法取污泥10 g,装入500 mL细口无色玻璃瓶中,加入富集培养液至满,盖上瓶盖,隔绝空气,于30e, 3 000 lx光照下进行富集培养3~4 d,培养液呈绛红色后,取富集培养菌1mL,转接入培养液中,重复以上操作2次,然后采用改良的hungate厌氧培养技术滚管法进行分离纯化,用分离培养基的琼脂柱穿刺培养后保存。

(2)细胞色素光谱吸收峰值测定方法培养物离心后洗涤,将细胞悬浮于60%的蔗糖溶液中,采用722S分光光度计扫描,波长范围为340~1 000 nm。

(3)生长量的测定为比较不同培养条件下(光照、接种量、营养条件)培养物生长量的差别,采用722S分光光度计检测培养物D660 nm值。

(4)光照度对菌株生长影响的测定将已接种的光合细菌培养液于温度30摄氏度,光照强度分别为2 000、3 000、4 000、5 000 lx下培养3 d,每组3管,用722S分光光度计测定培养物菌液光密度D660 nm(用培养初刚接种的培养液为空白对照)。

底泥监测方案1. 概述底泥是水体底部的沉积物，其组成和性质对水环境的质量和生态系统的健康至关重要。

底泥监测是评估水体质量和环境状况的重要手段之一。

本文档将介绍一种底泥监测方案，旨在提供一种系统、科学、可操作的方法来监测和评估水体底泥的状况。

2. 监测目的底泥监测的主要目的是了解底泥的组成、污染程度和潜在的生态风险，以便为水环境管理和保护提供科学依据。

具体的监测目的包括：•评估底泥中的重金属、有机污染物等污染物的含量和分布情况。

•评估底泥对生态系统的潜在影响。

•监测底泥沉积速率和泥沙通量，了解水体的沉积作用。

3. 监测内容底泥监测的内容应包括以下几个方面：3.1 底泥采样底泥采样是底泥监测的基础工作。

采样点应根据具体情况进行选择，包括典型区域、可能受到污染的区域以及需要了解变化趋势的区域。

采样时应遵循以下原则：•选择适当的采样工具，如底泥采样器或底泥柱。

•采样时应注意避免底泥表层的污染，最好采集底泥的较深层。

•根据采样点的具体要求，选择适当的采样数量和采样深度。

3.2 底泥物理化学性质检测底泥的物理化学性质对了解其组成和污染程度非常重要。

常见的物理化学性质指标包括底泥的颜色、致密度、粒径分布、有机质含量、pH值等。

这些指标可以通过实验室测试或现场测试得到。

3.3 底泥污染物分析底泥污染物分析是底泥监测的重要内容。

常见的底泥污染物包括重金属、有机污染物等。

分析方法可以包括物理提取、化学分析和生物监测等。

分析结果应与国家或地方相关标准进行对比，评估底泥的污染程度和生态风险。

3.4 底泥生态风险评估底泥污染对水体生态系统的影响是底泥监测的核心内容之一。

通过对底泥样品的毒性测试和生态风险评估，可以评估底泥对水生生物的潜在危害。

常用的生态风险评估方法包括生物多样性评估、物种敏感度评估等。

3.5 底泥沉积速率和泥沙通量底泥沉积速率和泥沙通量反映了底泥在水体中的沉积作用，也是底泥监测的重要指标之一。

通过定期监测底泥沉积速率和泥沙通量可以了解水体的沉积状况和底泥的输送过程。

土壤微生物量测定方法一、土壤微生物生物量碳（氯仿熏蒸一K2SO4提取•碳分析仪器法）1、试剂（1）去乙醇氯仿制备：在通风橱中，将分析纯氯仿与蒸憾水按1?2 （v:v）加入分液漏斗中，充分摇动lmin,慢慢放岀底层氯仿于烧杯中，如此洗涤3次。

得到的无乙醇氯仿中加入无水氯化钙，以除去氯仿中的水分。

纯化后的氮仿巻于试剂瓶中，在低温（4°C）、黑暗状态下保存。

（2）氢氧化钠溶液［c （NaOH） =lmolL-1］：通常分析纯固体氢氧化钠中含有碳酸钠，与酸作用时生成二氧化碳，从而影响滴左终点判断和测左的准确度。

配制时应先除去碳酸钠, 根据碳酸钠不溶于浓碱，可先将氢氧化钠配成50% （w:v）的浓氧溶液，密闭放置3〜4d。

待碳酸钠沉降后，取56 ml 50%氢氧化钠上淸液（约19 mol L）,用新煮沸冷却的除去二氧化碳的蒸馅水释稀到1L,即为浓度1 mol L1 NaOH溶液，用橡皮塞密闭保存。

（3）硫酸钾提取剂［c （K2SO4）= mol L1］：取1742.5 g分析纯硫酸钾，用研钵磨成粉末状，倒于25 L塑料桶中，加蒸餾水至20 L,盖紧螺旋盖置于摇床（150 rmin-1）上溶解24 h 即可。

（4）六偏磷酸钠溶液［Q （Na） =5gl00mr1, pH］：称取50.0 g分析纯六偏磷酸钠溶于800 ml髙纯度去离子水中，用分析纯浓磷酸调节至pH ,用高纯度去离子水左容至1L。

要注意的是六偏磷酸钠溶解速度很慢应提前配制；由于其易粘于烧杯底部，若加热常因受热不均使烧杯破裂。

1（5）过硫酸钾溶液［Q （K2S2O8） =2gl00mn：称取20.0 g分析纯过硫酸钾，溶于髙纯度去离子水中，定容至1L。

值得注意过硫酸钾溶液易被氧化，应避光存放且最多使用7d。

（6）磷酸溶液［Q（H3PO4） = 21 g 100 ml*1］:量取37 ml分析纯浓磷酸（85%）,慢慢加入到188 ml高纯度去离子水中即可。

土壤微生物量测定方法常规培养法是最早也是最常用的土壤微生物量测定方法之一、该方法是将土壤样品经过稀释后接种到含有特定培养基的培养皿中，经过一段时间的培养，根据培养皿上的菌落数量计算土壤中微生物的数量。

常用的培养基有营养琼脂培养基、土壤细菌培养基和土壤真菌培养基等。

常规培养法的优点是简单易行，可以同时测定不同类型微生物的数量，但该方法有一些局限性，如只能测定能够在培养基上生长的微生物，不能测定需异养条件才能生长的微生物，而且该方法容易低估土壤中微生物的真实数量。

生物量测定法是一种利用土壤微生物的生物学过程测定微生物量的方法。

该方法一般分为碳饥饿法和氮饥饿法两种。

碳饥饿法是将土壤样品暴露在低碳条件下（如0.01%葡萄糖溶液中）一段时间后，测定土壤中的微生物的生物量。

氮饥饿法是将土壤样品暴露在低氮条件下（如0.01%硝酸铵溶液中）一段时间后，测定土壤中的微生物的生物量。

这两种方法都是利用微生物的生物学特性，通过测定微生物对不同养分的响应来估计微生物的数量。

生物量测定法的优点是准确度较高，可以测定土壤中广泛类型的微生物，但该方法也有一些局限性，如需要较长的试验周期，测定过程中需要严格控制温度、湿度等环境条件，且操作较为繁琐。

生物学特征法是一种通过测定土壤微生物的生物学特征来评估微生物群体数量的方法。

该方法常用的特征包括土壤酶活性、呼吸作用速率、微生物生长速率和微生物群体的磷脂脂肪酸组成等。

这些特征的测定可以通过色谱、酶反应和分子生物学技术等手段进行。

生物学特征法的优点是操作简便，消耗土壤样品较少，时间短，结果可靠。

但该方法也有一些问题，如不同微生物对环境的响应不同，结果受环境因素影响较大。

综上所述，土壤微生物量的测定方法有常规培养法、生物量测定法和生物学特征法等。

不同的测定方法各有优缺点，使用时可以根据具体的研究目的和所需数据的准确度进行选择。

此外，单一的方法往往无法全面准确地评估土壤微生物量，因此常采用多种方法综合分析，以得到更准确的结果。

河道底泥检测实施方案一、背景。

河道底泥是河流中的重要组成部分，它的质量直接影响到河流生态环境的健康和水质的稳定。

因此，对河道底泥进行检测是非常必要的，以便及时发现问题并采取相应的措施进行治理。

二、检测目的。

1. 了解河道底泥的物理和化学特性，掌握其对水环境的影响；2. 发现底泥中是否存在有害物质，评估对水生生物和人体的潜在危害；3. 为河道治理和生态修复提供科学依据。

三、检测内容。

1. 底泥样品采集，根据河道长度和水深分布，确定采样点位，并按照规定方法采集底泥样品；2. 底泥样品处理，将采集的底泥样品进行干燥、研磨等处理，以便后续的化学分析和物理性质测试；3. 底泥物理性质测试，包括颗粒度分析、含水率测试、密度测定等；4. 底泥化学成分分析，对底泥样品中的重金属、有机物质等成分进行分析，以评估其对水环境和生态系统的影响；5. 底泥毒性测试，通过生物毒性测试，了解底泥中是否存在对水生生物有害的物质。

四、检测方法。

1. 底泥采样，采用不锈钢采样器进行底泥样品的采集，避免外界污染；2. 底泥样品处理，样品干燥后，进行颗粒度分析、含水率测试等物理性质测试；3. 底泥化学成分分析，采用原子吸收光谱、气相色谱质谱联用等仪器对底泥中的重金属、有机物质等进行分析；4. 底泥毒性测试，采用水生生物（如藻类、水蚤等）进行底泥毒性测试，评估底泥对水生生物的毒性作用。

五、检测报告。

1. 底泥检测报告应包括采样点位、采样日期、检测项目、检测结果等内容；2. 对于发现的问题，应提出相应的处理建议和措施；3. 检测报告应具备科学性、准确性和可操作性，为河道治理和生态修复提供科学依据。

六、检测注意事项。

1. 底泥采样和处理过程中，应避免外界污染；2. 底泥检测过程中，应严格按照标准操作规程进行，确保数据的准确性和可靠性；3. 底泥检测报告应及时提交相关部门，以便及时采取相应的措施进行河道治理。

七、结论。

河道底泥检测是保护水环境和生态系统的重要环节，通过科学、严谨的检测方法，可以及时发现问题并采取相应的措施进行治理，为河道的生态修复和保护提供科学依据。

微生物底泥处理技术研究随着城市化进程的加快，城市污水处理量不断增加，底泥的产生量也随之增加。

而底泥是水体处理过程中不可避免的产物，污泥和底泥所含有的有机物质和氮、磷等营养元素，使其成为一种有价值的资源。

同时，底泥中也含有一定的重金属和有机污染物，若处理不当则容易导致环境污染和人类健康风险。

因此，提高底泥的资源化利用和有效处理成为亟待解决的问题。

微生物处理技术就是一种有效的底泥处理方法。

1. 微生物底泥处理技术简介微生物底泥处理技术是指利用微生物的生物反应能力，将污泥底泥中的有机物、氮、磷等进行降解和转化，从而实现对污泥底泥的分解和转化。

根据微生物底泥处理技术的不同处理方式，分为好氧和厌氧两种。

2. 厌氧微生物底泥处理技术厌氧微生物底泥处理技术是在缺氧或无氧的环境下，利用厌氧微生物进行有机物质的分解和转化的一种处理方法。

厌氧微生物能够将有机物质分解为较简单的有机化合物和气体以及底泥等。

与其他微生物底泥处理技术相比，其具有处理效率高、低能耗、处理过程稳定等优点，已经被广泛应用于城市底泥处理领域。

3. 好氧微生物底泥处理技术好氧微生物底泥处理技术是指在氧气存在的环境中，利用一系列厌氧微生物及其酶系统对有机物的进行氧化分解的一种处理方法。

好氧微生物底泥处理技术不仅可以高效降解污泥中的有机物质，还可以对氮、磷等有害物质进行转化和去除，能够有效地提高污泥的处理效率和降解能力。

4. 微生物底泥处理技术的应用前景微生物底泥处理技术在城市管理和污水处理！中具有广泛应用前景。

一方面，底泥资源化利用可以为城市管理提供有用的物质基础，并为城市节约能源、减少废弃物产生、改善环境做出贡献；另一方面，微生物底泥处理技术的应用可以有效提高城市底泥治理效率，缓解地下水和土壤的污染，为改善环境提供有力支持。

5. 结论在面对城市污泥底泥处理的挑战时，微生物底泥处理技术是一种高效、低成本的底泥处理方案。

通过厌氧微生物和好氧微生物的应用及其协同作用，可以高效稳定地实现城市污泥底泥的资源化利用和有效处理。

土壤微生物生物量测定方法
土壤微生物生物量的测定方法有很多种，一般可以分为直接和间接测定方法。

直接测定方法包括：
1. 水解法：将土壤样品经过水解处理，然后通过高密度离心和显微镜观察计数获得微生物生物量。

2. 利用滴定法：通过向土壤中添加抑制剂或适宜的滴定液，测定细菌和真菌的数量以确定生物量。

3. 融解法：将土壤样品与溶解剂混合，在特定温度下溶解土壤中的微生物，然后通过测定溶液中的生物量来计算土壤中的微生物生物量。

间接测定方法包括：
1. 培养基测定法：将土壤样品接种到特定的培养基中，利用培养基中微生物生长所需的营养物质来测定微生物生物量。

2. 脂肪酸测定法：通过提取土壤样品中的脂肪酸，并利用气相色谱仪测定来确定微生物的生物量。

3. 磷脂酸测定法：通过提取土壤中的磷脂酸，并利用色谱或质谱仪测定磷脂酸来估计微生物生物量。

这些方法各有优缺点，选择适合的方法需要考虑实验条件、样品处理的方便程度
和测定结果的准确性。

底泥监测方案1. 引言底泥监测是对水环境质量进行评估和监测的重要组成部分。

底泥是水体底部的沉积物，其中含有大量的有机质、无机物和微生物，对水体中的污染物具有吸附作用。

因此，底泥的污染状况直接关系到水体的生态安全和人类健康。

本文将介绍一种底泥监测方案，旨在为环境保护部门提供科学有效的底泥监测方法。

2. 底泥监测目标底泥监测的主要目标是评估底泥的污染程度，明确水环境中污染物的种类和浓度。

通过底泥监测，可以了解水体污染物的来源、迁移和转化过程，并为制定相应的污染防治措施提供科学依据。

3. 底泥采样方案3.1 采样地点的选择采样地点的选择应该充分考虑水体特征、流动条件和污染源分布等因素。

一般来说，采样点应选择在可能受到底泥污染的区域，如工业排污口、城市污水排放口等。

3.2 采样工具和方法底泥采样需要使用专用的采样器具，如底泥采样管。

采样前，应准备好清洁的采样工具，并将其消毒，以避免外源性污染。

在采样过程中，应采集足够量的底泥，并保证采样器具与底泥充分接触，避免采样过程中的氧化或微生物附着。

3.3 采样频次和数量底泥监测的频次和采样数量应根据具体情况进行确定。

一般来说，根据底泥的空间分布情况和污染程度的变化，确定采样点和采样频次。

采样时，应尽量采集多个不同深度和位置的底泥样品，以获取全面的监测信息。

4. 底泥样品处理和分析4.1 样品保存采集到的底泥样品应迅速进行保存和处理，以防止污染物的变化和丢失。

样品保存时，应避免阳光直射、高温和冰冻等不利条件，同时应尽量避免样品接触空气，以减少氧化作用。

4.2 样品制备底泥样品制备包括样品的干燥、研磨和过筛等步骤。

样品的干燥可以采用自然干燥或低温干燥的方法，以保持样品的原始结构和污染物的稳定性。

干燥后，样品可以进行研磨和过筛，以获得均匀的颗粒大小。

4.3 污染物分析底泥样品中常见的污染物包括重金属、有机污染物和营养物等。

对于污染物的分析，可以采用化学分析、生物监测和物理分析等方法。

实验一：培养基的配制和灭菌一、实验目的（1）熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前得准备工作。

（2）了解配制微生物培养基的基本原理，掌握配制、分装培养基的方法。

（3）学会各类物品的包装、配制（稀释水等）和灭菌技术。

二、实验原理（1）培养基是微生物生长的基质，是按照微生物营养、生长繁殖的需要，有碳、氢、氮、磷、硫、钾、钠、钙、镁、铁及微量元素和水，按一定的体积分数配制而成。

调整合适的PH，经高温灭菌后以备培养微生物之用。

（2）加压灭菌的原理在于提高灭菌器内的蒸汽温度来达到灭菌的目的，灭菌器的加热源有电、煤气等。

其特点是性能稳定，使用方便、安全。

三、实验器皿和材料高压蒸汽灭菌器、干燥箱、煤气灯、培养皿、试管、移液枪、锥形瓶、烧杯、量筒、药物天平、玻棒、玻璃珠、石棉网、药匙、铁架、表面皿、pH试纸和棉花等；牛肉膏、蛋白胨、NaCl、NaOH和琼脂等。

四、实验内容（一）玻璃器皿的准备1.洗涤玻璃器皿在使用前必须洗涤干净。

培养皿、试管、锥形瓶等可用洗衣粉加去污粉洗刷并用自来水冲净。

移液管先用洗液浸泡，再用水冲洗干净。

洗刷干净的玻璃器皿自然晾干或放入干燥箱中烘干、备用。

2.包装（1）枪头与枪头盒的包装（2）培养皿的包装：培养皿由一底一盖组成一套，用牛皮纸或报纸将10套培养皿（皿底朝里，皿盖朝外，5套、5套相对而放）包好，见图13-8，③和④。

（3）取6支试管并加入9（mL/支）蒸馏水后盖上硅胶塞，待灭菌；取1个250mL锥形瓶并加入90 （mL/瓶）蒸馏水和15（颗/瓶）玻璃珠并用锡纸包好，放在铜丝篓中待灭菌（湿热灭菌）。

（二）培养基的配制1.往干净的250m L烧杯中加入100mL蒸馏水（每组配200mL培养基），按照培养基配方称取各种成分（琼脂粉待调好pH值后再加入），依次加入水中加热溶解。

2.调节pH值用质量浓度为100g/L的NaOH溶液将配好的培养基的pH调到7.2-7.4。

然后加入琼脂粉加热溶解，待全部溶解后，加水补足因加热蒸发的水量（注意：加热过程中要不断搅拌培养基，不然琼脂很容易烧焦糊底）。