电泳的分类
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按电泳的原理分类
1. 直流电泳:电极间接通直流电流,样品在电场力的作用下向电极移动,分离各组分。
适用于蛋白质、核酸等大分子的分离。
2. 凝胶电泳:将样品与凝胶混合,通过电场力将组分分离在凝胶矩阵中。
凝胶电泳又可分为多种类型,如聚丙烯酰胺凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳等。
3. 毛细管电泳:将样品注入毛细管,然后通过电场力使样品分离。
毛细管电泳又可分为多种类型,如毛细管凝胶电泳、毛细管区带电泳等。
4. 高效液相色谱电泳:将样品分离在高效液相色谱柱中,然后通过电场力推动分离后的组分通过柱。
适用于分离蛋白质、多肽等小分子。
简述电泳的分类及其原理嘿,你问电泳的分类及其原理啊?那咱就来唠唠。
电泳呢,主要有两种大的分类。
一种是区带电泳,另一种是等电聚焦电泳。
先说区带电泳吧。
这就好比是一群小伙伴在跑道上跑步。
不同的物质就像不同的小伙伴,它们带着不同的电荷。
在电场的作用下,这些带着电荷的小伙伴就开始跑起来啦。
带正电荷的往负极跑,带负电荷的往正极跑。
而且呢,这些小伙伴跑得速度还不一样。
为啥呢?因为它们的大小、形状啥的都不一样呗。
比如说,一个小不点的带正电的粒子,可能就跑得比一个大块头的带负电的粒子快。
这样呢,不同的物质就会在跑道上分开,形成不同的区域,这就是区带电泳的原理啦。
再说说等电聚焦电泳。
这个有点像找一个平衡点。
不同的物质都有自己的等电点,就像每个人都有自己的平衡点一样。
在一个特殊的环境里,通过电场的作用,让这些物质都跑到自己的等电点那个位置。
在等电点的时候,这个物质就不带有净电荷了,也就不跑了。
这样就把不同的物质给分出来了。
比如说在生物实验室里吧,科学家们经常用区带电泳来分离蛋白质。
把蛋白质样品放在凝胶上,通上电,那些蛋白质就开始跑起来啦。
有的跑得快,有的跑得慢,最后就形成了不同的条带。
这样就能看出有哪些不同的蛋白质啦。
还有等电聚焦电泳呢,可以用来分离一些特别难分的蛋白质,找到它们的等电点,更好地了解它们的性质。
总之呢,电泳有区带电泳和等电聚焦电泳两种主要分类。
区带电泳是让不同的物质带着电荷在电场中跑,根据速度不同分开;等电聚焦电泳是让物质找到自己的等电点,不带有净电荷时停下来。
电泳1809年,俄国物理学家Reŭss首次发现电泳现象1937年,诺贝尔奖金获得者Arne Tiselius教授,发明了最早期的界面电泳,用于蛋白质分离的研究,开创了电泳技术的新纪元。
近几十年以来,电泳技术发展很快,各种类型的电泳技术相继诞生,在生物化学、医学、免疫学等领域得到了广泛应用。
概念:带电颗粒在电场作用下,向与其电荷相反的电极移动的现象。
电泳的分类显微电泳自由界面电泳:在没有支持介质的溶液中进行的电泳区带电泳:是指有支持介质的电泳,待分离物质在支持介质上分离成若干区带。
支持介质的作用主要是防止电泳过程中的对流和扩散。
是目前常用的电泳系统区带电泳按支持介质种类分类纸电泳淀粉凝胶电泳醋酸纤维素薄膜电泳琼脂糖凝胶电泳:多用于核酸的分离聚丙烯酰胺凝胶电泳:可用于核酸和蛋白质的分离区带电泳的其他分类根据支持介质形状不同,可分为:薄层电泳板电泳柱电泳据用途不同,可分为:分析电泳制备电泳定量电泳免疫电泳本章内容基本概念及原理聚丙烯酰胺凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦毛细管电泳印迹法(转移电泳)第一节泳动度概论电泳是在电场作用下产生的物质运动。
电场力阻力电泳的基本原理若将带净电荷q的颗粒放入电场,则受到的电场力为 F = E·q在溶液中,运动颗粒遵循Stoke’s Law(斯托克斯定律)F阻=6πrηv当F = F阻时E·q = 6πrηvv =颗粒的移动速度(泳动速度v)与电场强度(E)和颗粒所带电荷量(q)成正比,而与颗粒的半径(r)及溶液的粘度(η)成反比。
颗粒的泳动速度与颗粒形状有关。
如非球形分子(如线状DNA)在电泳过程中受到更大的阻力。
由(4)可知,带电颗粒的泳动速度受电场强度影响,使得同一种带电颗粒在不同电场里泳动速度不同,为了便于比较,常用泳动度(mobility,m)或迁移率(Rf)代替泳动速度表示颗粒的泳动情况。
m = v /E = q/6πrη(5)由上式可以看出,迁移率仅与球形颗粒所带电荷数、颗粒大小及溶液粘度有关,与电场强度无关,是带电颗粒的物理常数。
电泳技术综述电泳技术有着八十年的发展史,是一种先进的检测手段。
它广泛用于多个领域,还能与其他先进技术相配合,创造出惊人的结果。
它对解决当前人类所面临的食品、能源、环境和疾病等一系列迫切问题,都有积极作用。
一、电泳发展史1809年,俄国物理学家Рейсе 首次发现电泳现象。
他在湿粘土中插上带玻璃管的正负两个电极,加电压后发现正极玻璃管中原有的水层变混浊,即带负电荷的粘土颗粒向正极移动,这就是电泳现象,但是当时还不叫电泳。
1909年,Michaelis 首次将胶体离子在电场中的移动称为电泳。
他用不同pH 的溶液在U 形管中测定了转化酶和过氧化氢酶的电泳移动和等电点。
1937年,瑞典Uppsala 大学的Tiselius 对电泳仪器作了改进,创造了Tiselius 电泳仪,建立了研究蛋白质的移动界面电泳方法,并发现了血清蛋白可分为白蛋白及α、β、γ 球蛋白,使电泳技术开始用于临床研究。
但这电泳结构复杂,价格昂贵不易推广。
1948年Wieland 和Fischer 等,发明了用滤纸作为支持介质的电泳方法使该技术大为简化,而且可以使许多组分相互分离为区带,所以这类电泳被称为区带电泳。
纸电泳发明后在临床上得到广泛的应用。
1950年Durrum 用纸电泳进行了各种蛋白质的分离以后,开创了利用各种固体物质(如各种滤纸、醋酸纤维素薄膜、琼脂凝胶、淀粉凝胶等)作为支持介质的区带电泳方法。
1959年Raymond 和Weintraub 利用人工合成的凝胶作为支持介质,创建了聚丙烯酰胺凝胶电泳,极大地提高了电泳技术的分辨率,开创了近代电泳的新时代。
30多年来,聚丙烯酰胺凝胶电泳仍是生物化学和分子生物学中对蛋白质、多肽、核酸等生物大分子使用最普遍,分辨率最高的分析鉴定技术,是检验生化物质的最高纯度:即”电泳纯”(一维电泳一条带或二维电泳一个点)的标准分析鉴定方法,至今仍被人们称为是对生物大分子进行分析鉴定的最后、最准确的手段,即”Last Check”。