东北红豆杉中紫杉醇的含量分析
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高效液相色谱法测定东北红豆杉愈伤组织中紫杉醇的含量
高效液相色谱法测定东北红豆杉愈伤组织中紫杉醇的含量张艳平;刘同祥
【期刊名称】《贵阳中医学院学报》
【年(卷),期】2009(031)006
【摘要】目的:建立东北红豆杉愈伤组织中紫杉醇的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法(HPLC)法,选用C18色谱柱,流动相为乙腈:水(60:40),检测波长227nm,柱温25℃,对东北红豆杉愈伤组织中紫杉醇的含量进行了测定.结果:紫杉醇在
19.5～97.6μg·mL-1之间呈良好的线性关系,紫杉醇平均回收率为
100.41%,RSD=1.62%(n=6).结论:该含量测定方法准确可行,可以作为测定东北红豆杉愈伤组织培养中紫杉醇含量的高效液相色谱方法.
【总页数】2页(P81-82)
【作者】张艳平;刘同祥
【作者单位】河南中医学院药学院,河南郑州,450008;中央民族大学中国少数民族传统医学研究院,北京,100081
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
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若兰;吴卓娜;窦桂芳
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iData_国产红豆杉各部位紫杉醇含量分析_张鸿
回归方程: Y= 0. 66X - 0. 41, r= 0. 999 9。 2. 2 人参多糖含量: ①单糖的测定: 精密称取 0. 2 g 人参多糖置 100 m L容量瓶中加水至刻度 ,振摇 ,精 密量取 10 m L,同上法操作 ,得高锰酸钾消耗毫升数。
②多糖的测定: 精密称取 0. 2 g 人参多糖置三 角烧瓶中 ,加水 15 m L、 6 mol / L盐酸 10 m L,加热 回流 40 mi n,用 20% 氢氧 化钠 溶液调 pH值 为中
749 24 Gebh ard t R. A rznei m Fors ch, 1991, 41( 8): 800 25 W eb er N D, et al . Pl an ta M ed, 1992, 58( 5): 417
( 1999-09-27收稿 )
(上接第 434页 )
表 1 不同红豆杉各部位紫杉醇含量 (% )
云南红豆杉
南方红豆杉
东北红豆杉
皮
根
木 嫩枝 叶 种子 皮
根
木 嫩枝 叶 种子 皮
木 嫩枝 叶
0. 018 0. 0082 0. 0034 0. 0019 0. 0011 0. 01 0. 016 0. 017 0. 0025 0. 0022 0. 0025 0. 012 0. 042 0. 009 0. 0042 0. 0039
SACS 的活性在 80年代才受到少数国外学者的关
注 ,目前对大蒜及其他百合科植物中的含硫氨基酸
的研究仍然集中在国外 ,还不够系统和丰富 ,它们的
潜在价值仍有待发现。但一个已经证实的结论是: 含
硫氨基酸的确是大蒜的活性成分之一 ,它们的研究
成果对有效开发大蒜药用成分具有深远的意义。
②多糖的测定: 精密称取 0. 2 g 人参多糖置三 角烧瓶中 ,加水 15 m L、 6 mol / L盐酸 10 m L,加热 回流 40 mi n,用 20% 氢氧 化钠 溶液调 pH值 为中
749 24 Gebh ard t R. A rznei m Fors ch, 1991, 41( 8): 800 25 W eb er N D, et al . Pl an ta M ed, 1992, 58( 5): 417
( 1999-09-27收稿 )
(上接第 434页 )
表 1 不同红豆杉各部位紫杉醇含量 (% )
云南红豆杉
南方红豆杉
东北红豆杉
皮
根
木 嫩枝 叶 种子 皮
根
木 嫩枝 叶 种子 皮
木 嫩枝 叶
0. 018 0. 0082 0. 0034 0. 0019 0. 0011 0. 01 0. 016 0. 017 0. 0025 0. 0022 0. 0025 0. 012 0. 042 0. 009 0. 0042 0. 0039
SACS 的活性在 80年代才受到少数国外学者的关
注 ,目前对大蒜及其他百合科植物中的含硫氨基酸
的研究仍然集中在国外 ,还不够系统和丰富 ,它们的
潜在价值仍有待发现。但一个已经证实的结论是: 含
硫氨基酸的确是大蒜的活性成分之一 ,它们的研究
成果对有效开发大蒜药用成分具有深远的意义。
红豆杉里紫杉醇的提取分离及分析1
红豆杉里紫杉醇的提取分离及分析1.实验材料与仪器1.1 实验材料新鲜红豆杉枝叶（树枝、树叶和树皮）。
1.2 实验试剂主要试剂：试剂名称厂家乙酸乙酯（分析纯）北京化工厂丙酮（分析纯）北京化工厂甲醇（分析纯）北京化工厂石油醚（分析纯）北京化工厂三氯甲烷（分析纯）北京化工厂二氯甲烷（分析纯）北京化工厂乙酸铵缓冲液（分析纯）北京化工厂乙腈（分析纯）北京化工厂去离子水（自制）北京化工厂紫杉醇标准品（纯度≧97%）中国生物药监所1.3 实验仪器主要仪器：仪器名称厂家XZ-6A 旋转蒸发器北京科龙仪器公司CFSJ-8A粉碎机江苏瑰宝JA 3003A电子天平上海精天电子仪器有限公司岛津LC-6A高效液相色谱仪CQ-500超声波振荡器常压层析系统Pharmacia公司2.实验试液制备2.1 标准品溶液制备准确称取紫杉醇（Taxol）标准品（纯度≧97%）5.00mg于50mL 容量瓶，加入甲醇定容摇匀，配制成0.10mg/mL的标准溶液。
用HPLC 检测。
2.2 样品试液制备采集新鲜红豆杉枝叶，清水洗净，于60℃烘箱内干燥至恒重，用粉碎机粉碎，过14目筛。
准确称取过筛后的样品5.00g于50mL广口具塞三角瓶内，加入50mL乙酸乙酯-丙酮混合液（体积比1:1，下同），超声萃取30min，取上清液。
沉淀再加50mL乙酸乙酯-丙酮混合液超声萃取30min，取上清液，合并两次上清液，将提取液离心15min，转速4000r/min。
离心后取上清液加入5%活性炭粉，充分搅拌，待色素吸附完后进行真空抽滤，滤液用旋转蒸发器在40℃下蒸发至剩余少量液体。
加入石油醚（体积比1:1）充分振荡30min，静置5min，脱脂。
萃取余液用三氯甲烷（体积比2：1）充分振荡30min，萃取滤液在30℃下减压浓缩蒸干，然后用15mL甲醇溶解，制备液经0.45μm过滤器过滤，得浸膏滤液，HPLC外标法测定紫杉醇含量，均分5等份，作好标识，备用。
3.实验方法3.1 分离方法3.1.1 液-液萃取取浸膏滤液，加入二氯甲烷（浸膏/二氯甲烷的重量比为1:50），充分溶解，再加入与二氯甲烷等量的水。
东北红豆杉中紫杉醇的含量分析
东北红豆杉中紫杉醇的含量分析
朱吕会;崔岩;白索柱
【期刊名称】《齐齐哈尔大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2010(026)004
【摘要】以抗癌活性成分紫杉醇作为标准物,利用高压液相色谱法分析了东北红豆杉树叶和树干的水提取物中抗癌活性成分紫杉醇的含量,确定最佳色谱条件为:色谱柱:C18,? 4.6 ? 250 mm;流动相:甲醇∶水∶乙腈＝45∶35∶20;检测波长:225 nm;柱温:室温;流速:1.0 mL/min.结果表明:东北红豆杉树干中紫杉醇含量高于树叶.【总页数】3页(P69-71)
【作者】朱吕会;崔岩;白索柱
【作者单位】齐齐哈尔四友化工有限公司,黑龙江,齐齐哈尔,161000;齐齐哈尔市第一中学,初中部,黑龙江,齐齐哈尔,161005;齐齐哈尔四友化工有限公司,黑龙江,齐齐哈尔,161000
【正文语种】中文
【中图分类】TQ28
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1.不同采收期东北红豆杉枝叶中紫杉醇含量分析 [J], 李凤伟;凌明松
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3.东北红豆杉中紫杉醇及三尖杉宁碱含量测定方法的研究 [J], 郭娜;周志强;王洋
4.天然东北红豆杉枝中紫杉醇和三尖杉宁碱含量变化特征 [J], 常醉;周志强;夏春梅;刘彤
5.紫杉醇前体化合物10-去乙酰baccatin Ⅲ和baccatin Ⅲ在东北红豆杉中的含量[J], 方唯硕;霍然;方起程
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红豆杉提取紫杉醇后残渣中紫杉烷类成分的含量测定
号５ ４２ ０ ０ ） ３ －０ ０ １ 。
称 ¨ ，其 中 以紫 杉 醇 最 为 引 人 注 目 ，其 他 二 萜 类 化 合物 一般 也都 具 有 紫 杉 醇 的母 核结 构 ，有 些 作 为 紫
１２仪器 与试 剂 ． 万分 之一 电子 天平 （ 北京赛 多利 斯仪 器 系统 有 限
［ 要］目的 ：测定红豆杉氯仿提取紫杉醇后残 渣 中紫 杉烷类 成分 的含 量。方法 ：用 紫外分光 光度法 测定氯仿 摘
提取紫杉醇后红豆杉残渣 的醋酸 乙酯 、正 丁醇提 取物 的紫杉烷类 成分 的含量 ，测定 波长为 ２ ７ ｍ。结果 ：３种红 豆 ２ｎ
杉残渣的醋酸 乙酯提取液 中紫杉烷类成分 的含量 测定 结果 为东北 红豆杉 ＞南方红豆杉 ＞曼地亚红 豆杉 ，东北红 豆杉
紫杉 烷类 化 合 物是 从 红 豆 杉 科 （ ａａｅｅ 红 豆 Ｔ ｘｃ ａ ） 杉属 （ ａ ｕ ） 物 中分 离 得 到 的 二 萜 类 化 合 物 的 总 Ｔｘ ｓ 植
地 亚红 豆杉枝 叶均 紫 杉醇对 照 品购 自中国药品生 物制 品检 定所 （ 批
定报道 较少 。故 笔 者 采 用 紫 外 分 光光 度 法 测 定 并 比 较 了红 豆 杉 不 同 品 种 和 不 同药 用 部 位 （ 皮 、 叶 ） 树 枝 残渣 中紫杉 烷类 成分 的含 量 ，为 它们 的综 合 开发 利
２ １ １不 同 品种红 豆杉 的提取 ．．
取 ３种 红豆 杉枝 叶各
２０ ０９年 ２月
第１ １卷 第 ２期
中国现代中药 Ｍ ｄｍ ｈｎｓ ｄｃ ｅ ｏ ｅ Ｃ ｉｅｅＭｅｉｎ ｉ
质量标准
红 豆杉 提 取 紫 杉 醇 后 残 渣 中紫 杉 烷 类 成 分 的 含 量测 定△
称 ¨ ，其 中 以紫 杉 醇 最 为 引 人 注 目 ，其 他 二 萜 类 化 合物 一般 也都 具 有 紫 杉 醇 的母 核结 构 ，有 些 作 为 紫
１２仪器 与试 剂 ． 万分 之一 电子 天平 （ 北京赛 多利 斯仪 器 系统 有 限
［ 要］目的 ：测定红豆杉氯仿提取紫杉醇后残 渣 中紫 杉烷类 成分 的含 量。方法 ：用 紫外分光 光度法 测定氯仿 摘
提取紫杉醇后红豆杉残渣 的醋酸 乙酯 、正 丁醇提 取物 的紫杉烷类 成分 的含量 ，测定 波长为 ２ ７ ｍ。结果 ：３种红 豆 ２ｎ
杉残渣的醋酸 乙酯提取液 中紫杉烷类成分 的含量 测定 结果 为东北 红豆杉 ＞南方红豆杉 ＞曼地亚红 豆杉 ，东北红 豆杉
紫杉 烷类 化 合 物是 从 红 豆 杉 科 （ ａａｅｅ 红 豆 Ｔ ｘｃ ａ ） 杉属 （ ａ ｕ ） 物 中分 离 得 到 的 二 萜 类 化 合 物 的 总 Ｔｘ ｓ 植
地 亚红 豆杉枝 叶均 紫 杉醇对 照 品购 自中国药品生 物制 品检 定所 （ 批
定报道 较少 。故 笔 者 采 用 紫 外 分 光光 度 法 测 定 并 比 较 了红 豆 杉 不 同 品 种 和 不 同药 用 部 位 （ 皮 、 叶 ） 树 枝 残渣 中紫杉 烷类 成分 的含 量 ，为 它们 的综 合 开发 利
２ １ １不 同 品种红 豆杉 的提取 ．．
取 ３种 红豆 杉枝 叶各
２０ ０９年 ２月
第１ １卷 第 ２期
中国现代中药 Ｍ ｄｍ ｈｎｓ ｄｃ ｅ ｏ ｅ Ｃ ｉｅｅＭｅｉｎ ｉ
质量标准
红 豆杉 提 取 紫 杉 醇 后 残 渣 中紫 杉 烷 类 成 分 的 含 量测 定△
我国3种红豆杉各部位紫杉醇含量的比较
用 . [14~ 18] 此外枝叶中含有重要的紫杉醇半合成前体 baccatin 或 10-去乙酰 baccatin 其在枝叶中的含量与 树皮中的紫杉醇含量相当[13]. 可见 利用红豆杉枝叶提取紫杉醇是保护红豆杉资源的良好途径之一 . 4. 5 应用提取分离新技术提高紫杉醇得率
一些研究表明 紫杉醇除以游离态 还常以结合态大量存在于植物体内[1Z] 如与糖基结合的 7-木糖 紫 杉醇~ 7-木糖基-10-去乙酰紫杉醇等 并含有许多紫杉醇类似物如 7-表-紫杉醇~ N -去苯甲酰-N -苯乙酰 紫杉醇等 . 用酶解法[19]~ 离子交换剂处理法[Z0]或氧化铝层析法均可能将它们转化为游离的紫杉醇 从而 增加物料中紫杉醇的总量 缓解紫杉醇资源的短缺 . 其中采用碱性氧化铝柱层析分离和回收紫杉醇效果 显著 可以使紫杉醇的含量从小于 1. 0% 提高到大于 Z7% 紫杉醇的回收率大于 170% 起到富集和转化 的双重作用[Z1~ Z4].
紫杉醇( taxol 具有特殊的抗癌机理 它能与微管蛋白结合 并促进其聚合 抑制癌细胞有丝分裂 阻止癌细胞的增殖[ 2] 作为新型的抗癌药物 紫杉醇不仅对卵巢癌 乳腺癌 肺癌有较好的作用 近年
来 临床研究表明紫杉醇对治疗其它疾病也有一定潜力 如类风湿性关节炎[ ] 早老性痴呆[ ]和先天性多
囊肾病[ ]等 因此紫杉醇日益成为许多国家研究的热点 获取抗癌药物紫杉醇的途径主要有 红豆杉的人
二极管阵列检测器(
LC- 色谱工作站 ZF
紫杉醇为 Sigma 公司出品 其它试剂均为国产分析纯试剂
旋转蒸发器
2 测定条件及方法
2 1 色谱条件 色 谱柱 0 S Hypersil Mm C
2 mm G mm 柱温 2 C 流动相 甲醇= 水= 6 =
不同方法测定红豆杉中紫杉醇含量
不同方法测定红豆杉中紫杉醇含量王绪英;杨雨雪;左经会【摘要】采用紫外可见光光度法和高效液相色谱法对红豆杉根、茎、叶的紫杉醇含量进行测定.结果表明:紫外可见光光度法测定的结果偏高;野生红豆杉根的紫杉醇含量最高,茎次之,叶最少.【期刊名称】《六盘水师范学院学报》【年(卷),期】2018(030)006【总页数】6页(P7-12)【关键词】红豆杉;紫杉醇含量测定;高效液相色谱;紫外可见光光度法【作者】王绪英;杨雨雪;左经会【作者单位】六盘水师范学院生物科学与技术学院,贵州六盘水553001;习水县地方税务局,贵州习水564600;六盘水师范学院生物科学与技术学院,贵州六盘水553001【正文语种】中文【中图分类】R284.1红豆杉（Taxuschinensis）是红豆杉属（Taxus）植物，国家I级重点保护野生植物，产于甘肃南部、陕西南部、四川、云南东北部及东南部、贵州西部及东南部、湖北西部、湖南东北部、广西北部和安徽南部（黄山），生于海拔1 000～1 200 m以上的高山上部［1］；在贵州六盘水境内均有分布。
红豆杉全株药用，具有抗癌功能，主治卵巢癌、乳腺癌等［2］。
紫杉醇是从红豆杉树皮中分离得到的一种三环二萜类，性质不稳定，因为分离效率低导致生产成本较高，使得有限的红豆杉资源难以达到有效的利用［3］。
紫杉醇的抗癌机理比较独特，它与微管蛋白聚合，并抑制微管的解聚，从而抑制了细胞的有丝分裂，阻止癌细胞的增殖，最终导致癌细胞死亡［4-5］。
目前被用来治疗晚期卵巢癌、乳腺癌、睾丸胚胎癌、食管癌、非小细胞肺癌等多种癌症，且有重要疗效［6］。
国内对紫杉醇的研究，主要集中在以下方面：林楠利用高速逆流色谱仪分离得到纯度为97.6%的紫杉醇［7］；许素文确定了超声波提取紫杉醇的最佳条件［8］；黎乔采用离子液体提取紫杉醇［9］；李乃伟筛选出曼地亚红豆杉枝叶粗提紫杉醇的最佳方法［10］；王丽霞等发现红豆杉中紫杉醇的含量随着部位和季节的不同而不同［11］。
富含紫杉醇良种‘东北红豆杉优良种源’
关键 词 ： 东 北 红 豆 杉 ；良种 ； 选 育 良种 名称 ： 东 北 红 豆 杉 优 良种 源 良 种 编 号 ： 吉 ｓ— ｓ Ｐ— Ｔ一１ ０ ０ ９— ０ １ ９ 授 权 日期 ： ２ ０ ０ ９年 １ １月 １ ２日
中 图分 类 号 ： ￥ ７ ２ ２ ． ３ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ １— ７ ４ ８ ８ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３— ０ １ ７ ０一 Ｏ １
（ １ ． Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｂ ｅ ｉ ｈ ｕ ａ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ １ ３ ２ ０ １ ３ ； ２ ．Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ Ｂ ｕ ｒ ｅ ａ ｕ ｆ ｏ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｃ ｉ ｔ ｙ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ １ ３ ２ ０ １ ３ ；
Ａ Ｔａ ｘ ｏ ｌ － ｒ ｉ ｃ ｈ Ｅｌ ｉ ｔ ｅ Ｖａ ｒ ｉ ｅ ｔ ｙ ‘ Ｓｕ ｐｅ ｒ ｉ ｏ ｒ Ｐｒ ｏ ｖ ｅ ｎ ａ ｎｃ ｅ ｏ ｆ Ｔａ ｘｕ ｓ ｃ ｕ ｓ ｐｉ ｄ ａ ｔ ａ’ Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｙ ｏ ｕ Ｔ ａ ｎ ｇ Ｘｉ ａ ｏ ｊ ｉ ｅ 。 Ｌ ｉ ｕ Ｊ ｉ ｎ ｇ ｗ ｅ ｉ Ｌ ｉ ａ ｎ ｇ Ｃ ｈ ｕ ｎ ｘ ｉ ａ ｎ ｇ
其 它 种 源 相 同 。可 以 通 过播 种 或扦 插 方 法 繁殖 。播 种 前 积 种 需 要 层 积 处 理 ， 变 温 层 子 可 以缩 短 休 眠期 。扦 插 繁 殖 用 休 眠 枝 或 绿 枝 。苗 期 主 要 管 理 措 施 是 遮 荫 、 保湿 、 防寒 、 防 干 热 风 。林 下 造 林 成 活 率 较 高 ， 生 长 良好 。东 北 红 豆 杉 优 良种 源 适 宜 在 东 北 地 区 空 气 湿 润 、 ｐ Ｈ值 小 于 ７ ． ０的 沙 壤 土 种植 。
中 图分 类 号 ： ￥ ７ ２ ２ ． ３ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ １— ７ ４ ８ ８ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３— ０ １ ７ ０一 Ｏ １
（ １ ． Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｂ ｅ ｉ ｈ ｕ ａ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ １ ３ ２ ０ １ ３ ； ２ ．Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ Ｂ ｕ ｒ ｅ ａ ｕ ｆ ｏ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｃ ｉ ｔ ｙ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ １ ３ ２ ０ １ ３ ；
Ａ Ｔａ ｘ ｏ ｌ － ｒ ｉ ｃ ｈ Ｅｌ ｉ ｔ ｅ Ｖａ ｒ ｉ ｅ ｔ ｙ ‘ Ｓｕ ｐｅ ｒ ｉ ｏ ｒ Ｐｒ ｏ ｖ ｅ ｎ ａ ｎｃ ｅ ｏ ｆ Ｔａ ｘｕ ｓ ｃ ｕ ｓ ｐｉ ｄ ａ ｔ ａ’ Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｙ ｏ ｕ Ｔ ａ ｎ ｇ Ｘｉ ａ ｏ ｊ ｉ ｅ 。 Ｌ ｉ ｕ Ｊ ｉ ｎ ｇ ｗ ｅ ｉ Ｌ ｉ ａ ｎ ｇ Ｃ ｈ ｕ ｎ ｘ ｉ ａ ｎ ｇ
其 它 种 源 相 同 。可 以 通 过播 种 或扦 插 方 法 繁殖 。播 种 前 积 种 需 要 层 积 处 理 ， 变 温 层 子 可 以缩 短 休 眠期 。扦 插 繁 殖 用 休 眠 枝 或 绿 枝 。苗 期 主 要 管 理 措 施 是 遮 荫 、 保湿 、 防寒 、 防 干 热 风 。林 下 造 林 成 活 率 较 高 ， 生 长 良好 。东 北 红 豆 杉 优 良种 源 适 宜 在 东 北 地 区 空 气 湿 润 、 ｐ Ｈ值 小 于 ７ ． ０的 沙 壤 土 种植 。
我国3种红豆杉各部位紫杉醇含量的比较
我国3种红豆杉各部位紫杉醇含量的比较
郑德勇
【期刊名称】《福建林学院学报》
【年(卷),期】2003(023)002
【摘要】建立红豆杉试样制备方法和紫杉醇液相色谱分析条件.分析了红豆杉不同品种、不同部位的植物原料中紫杉醇含量存在明显差异.其中树干皮、根部皮、树叶、木材和枝叶的紫杉醇平均含量分别为2.94×10-4、3.11×10-4、4.30×10-5、3.08×10-5和5.59×10-5.建议以红豆杉枝叶为原料提取、分离紫杉醇,以保护和合理开发红豆杉资源.
【总页数】4页(P160-163)
【作者】郑德勇
【作者单位】福建农林大学材料工程学院,福建南平,353001
【正文语种】中文
【中图分类】TQ351.3
【相关文献】
1.不同月份的福建红豆杉中各部位紫杉醇含量分布研究 [J], 王丽霞;侯会会;孙辰晨
2.喜马拉雅红豆杉与曼地亚红豆杉中紫杉醇和三尖杉宁碱含量比较 [J], 徐晓琴;魏鸿雁;贾晓光;夏提古丽·阿不利孜;马晓玲;陈刚
3.南方红豆杉与引种德国曼地亚红豆杉茎、叶中紫杉醇和10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量的比较 [J], 宋秋烨
4.南方红豆杉各部位中紫杉醇、10DABⅢ、7-木糖紫杉醇的含量分析 [J], 李春平;
欧春燕;周贵斌
5.川东地区南方红豆杉药用部位紫杉醇含量变化研究 [J], 方应权;谢仲德;陈鸿源因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
东北红豆杉可再生部位紫杉醇含量时空动态变化规律
杉醇 在植物 中的分布规律 ， 不仅可 以为红 豆杉资源 的保 护性 开发提供指导 ， 还有 助于 阐明紫杉 醇在植物体 内的 生 物合 成途 径 和代谢 规律 。
ａ．１ ７ 它 能与微管蛋 白结合 ， Ｉ ９ １ｏ ， 并促 进其 聚合 ， 抑制
癌 细胞 有 丝分 裂 ，阻止 癌 细胞 增 殖 （ 琨 等 ，２ ０ ： 余 ０ １
收稿 日 ： ０ ６ ０ — ６ 接受 日期 ： ０ ６ １ —８ 期 ２ ０ ．９ ０ ； ２ ０ ．２１ 基金项 目：科 技部农 业科 技成果 转化 项 目（ Ｎｏ．０ ＥＦＮ２１ ４ ２ 、引进 国际先 进农 业科 学技 术创 新项 目（ ５ ００ ３ ） ７１ Ｎｏ ２ ０ ． ７ ） ０ ６ ４— ５ 、教育 部 新世纪 优秀人 才支持计 划 （ ． Ｃ Ｔ ０ ・ ３ ） Ｎｏ Ｎ Ｅ ・ ４ ０ １ 、黑龙 江省 自然科 学基金 重点项 目（ ｏＺ Ｎ ４ ０ ） ６ Ｎ ．Ｊ ０ ．３ 、人事 部 回国人 员科技 活动择 优资助
Ｋ ２ ０ Ｂ 数控 超声波清洗 器（ Ｑ．５ Ｄ ￣＿ 昆山市超声 仪器有 限 公 司）ＡＢ ０ ： １ ４电子 天平（ 瑞士 Ｍｅｔ ｔｌｄ 公 司） ｔｅｏｅ ｏ ｌ 。 乙腈 （ 色谱 纯 ，北 京百 灵 威公 司） 、水 （ 双重 蒸馏 水 ） 醇 、石油醚及 三氯 甲烷 为分析 纯 。纯度 为 ９ ％ 、乙 ７ 的紫杉醇 （ａ ｌａ ｅ） ｐ ｃｉ ｘ １ ｔ 对照 品（ 自 Ｓ ｇ 购 ｉｍａ公司） 。
疾病也有一定潜力， 如恶性 黑色素瘤（ 士德等 ， ９ ） 罗 １ ４、 ９ 类风 湿性 关节炎 （ ｉｅ ｔａ． ９ ） Ｏｌ ｒｅ １ ９ ４ 和早 老性 痴呆 ｖ ，１ （ ｕｋ ｔ １ １ ９ ） 。随着 国际市场 上对 紫杉醇需 Ｂ ｒｅｅ ． ４等 ａ，９ 求量的 日益增 长， 野生红豆杉资源遭到 了毁灭性的破坏。 人工种植红豆杉已成 为解决紫杉醇原料短缺 的重要 途径 （ 解雪梅 和温远影 ， ９ ； １ ６ 张佐 玉 ， ０ ０ 刘颖 和 肖艳 ， ９ ２０ ；
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选择最佳流动相为甲醇 ： ： 水 乙腈 ＝ ５：５：０ ４ ３ ２ ，此时出峰时问短。峰高尖且峰面积大。
２２ 最佳检 测 波长的选择 ．２ ．
进样 ２ 浓度为 １ ｇ Ｌ的紫杉醇标准品，色谱条件 ：Ｃ ８ ０ ．ｍ／ ０ ￣ １ ， ４６×２０ ｍ ． ５ ｍ色谱柱，流速为 １ Ｕ ｉ，检测波长分别为 ２５ ５ ，２５ ０ ｍ ． ｍ ｍｎ ０ ２ ，２４ ７ ，３０ｎ ，柱温为室温，以甲醇 ： ： 水 乙腈 ＝ ５ ３ ：０ ４ ： ５ ２ 为流 动相， 根据不同波长下的峰面积检测结果选择 ２５ ｍ作为分析紫杉醇的检测波长， ２ ｎ 此时峰面积最大 ， 灵敏 度高。 ２ ． 线性 关系的确定 ．３ ２
・
７ ０・
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
２ｌ ０Ｏ年
２１ 提取方 法的建立 ． 目 ，紫杉醇的提取方法多采用有机溶剂提取法。通常以氯仿为溶剂 ，但因氯仿有毒 ， 前 且易挥发 ， 增
加了实验的危险性 ，为改善上述缺点，采用水提取法 。因紫杉醇易溶于热水 ，且在加热过程中又使易于分 解的化合物分解 ，降低其它成分的含量 ，即提高提取纯度 ， 又节约了溶剂 ， 并减少了环境污染 ，同时简化 提纯工艺及提高提取率 ，所以水煮提取法代替有机溶剂萃取的方法是可行的。
过滤得水提液 ， 重复 ４ 次并合并提取液 ， 用闪式浓缩器浓缩后 ， 分别用 乙酸乙酯萃取并浓缩 ， 先后用 ０ ｏ ．ｍ 帆 ５
Ｈｓ ２０ｍ缩得 乙酸 乙酯 浸膏 ，再 用去 离子水 混悬后 以正 己
第 ２ 卷第 ４ １ ６ １ ２ １ 年 ７月 ００
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｑｈ ｒ ｉｅ ｓｔ ｏ ｒ ａ ｉａ ｖ ｒ ｉ ｏ Ｑｉ Ｕｎ ｙ
Ｖｏ．６ Ｎｏ Ｊ ． ． ２ ４
Ｊ ｌ，０ ０ ｕｙ２ １
东北红 豆杉 中紫杉醇 的含量分析
朱 吕会 ，崔岩 ，白索柱 ’
烷： 乙酸乙酯 ＝ ３ ７： 混合溶剂萃取 ， 将剩下的水层用 乙酸乙酯萃取浓缩得 ５ 和 ６ ８ 紫杉醇树叶和树 －ｇ ３ ２． ｇ ５
十粗提 物 。
１ ． 紫杉 醇的含 量分析 －２ ２
首先确定高效液相分离的最佳流动相和检测波长 ，然后绘制紫杉醇标准工作曲线 ，测定东北红豆杉树
（． １ 齐齐哈尔 四友化工有限公 司，黑龙江 齐齐哈尔 １ １０ ；２ ６０ ０ ．齐齐哈尔市第一中学 初 中部 ，黑龙江 齐 齐哈尔 １ １０） ６０ ５
摘要 ：以抗癌 活性成分紫杉 醇作 为标 准物 ，利用高压液相色谱法分析 了东北红豆杉树叶和树干的水提取物中抗癌 活性成分紫杉醇 的含量 ，确定最佳色谱条 件为：色谱柱 ：Ｃ ８ ４６×２ ０ｍｍ；流动相 ：甲醇 ： ： １， ． ５ 水 乙腈 ＝４ ５： ３ ２ ；检测波长 ：２５ｒ ５：０ ２ ｍ；柱温 ：室温 ：流速 ：１ ｍＬｍ ｎ ｉ ． ／ｉ。结果 表明 ：东北红 豆杉 树干中紫杉醇含量高于树Ｊ 。 ０ ｒ ｌ ‘ 关键词 ：东北红豆杉 ；紫杉醇 ；树 叶；树 干 ；抗癌 中图分类号 ：Ｔ ２ Ｑ８ 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１０ — ８ Ｘ２ １）４ ０ ６ — ３ ０ ７ ９ ４ （０００ — ０ ９ ０
叶 和树 干 中紫杉醇 含量 。
２ 结 果 与讨 论
收稿 日期 ：２ １－ ４ ０ ０ ００ －５ 作 者简介 ：朱 吕会 （ ９ ３ ，男 ，黑 龙 江望 褒人 ，工 程 师 ，火 ！ １７一） 擎本科 ．主要从 事农 药新 产品 开发方 丽 的研 究 ，ｚ １５ ＠ｉ３ ｏ 。 ｌ ５０ ６ ． ｉ ｈ ｃｎ
荣生化 仪器厂 ） ；闪式 浓 缩器 （Ｆ 一６ ，金 鼎科 技有 限公 司 ） ＪＣ １０ 。
１２ 实验过 程 ． １ ． 紫杉醇 的提 取 ．１ ２ 取 东北红 豆杉树 叶 （ 含小 枝 ）１ ｋ 和树 干 ２ ． ｇ ． ｇ ０ ４８ ｋ ，粗粉 后分 ＩＩ水 煮沸 ， 温 １ ９ ＩＩ 保 ， ｈ后 冷却 至室温 ，
１ 实 验 部分
１１ 材料 与仪 器 ．
１１ 材料 ．． １
（） １ 东北红豆杉 ：于 ２０ 年 ４月 ｌ ０８ ５日采集于哈尔滨苇河林场。 （） ２ 紫杉醇标准品 ：日 本新泻大学安东政义研究室提供。
１１２ 仪 器 ．．
高效液相色谱仪 （ １ ，４ ．× ５ ｍ，日本东京 Ｇ ｃ ８ ，６ ２０ ４ ｍ Ｌ科学仪器厂 ） ；核磁共振仪 （ ｒｋｒＤ Ｘ４ Ｏ Ｂｕｅ Ｒ Ｏ ， － 德国 Ｂｕｅ 公司 ） ｒ ｒ ｋ ；紫外光谱仪 （ Ｆ ２Ｃ Ｚ 一 ０ ，上海宝山顾村电光仪器厂 ） ；旋转蒸发仪 （ Ｅ ５ Ａ ，上海亚 Ｒ 一２ Ａ
紫杉醇 是 目前 广 泛使 用 的抗 癌药 物 之一 ，由于其 独特 的抗癌 作 用机 制 ，使得 该药 物 的应用 领域逐 年增
加 ，为此 ，紫杉醇的来源问题一直是抗肿瘤药物研究者所关注的热点课题” Ｉ 。虽然可通过全合成川 、半合 成 、真菌发酵及基因工程 。 获得紫杉醇 ，但至今为止国内紫杉醇 的主要来源仍是通过从天然植物中提取
获 得 ，为了充分 利用 紫杉 醇 的植物 资源 ，本文 以东北 红豆杉 的树 干 和枝 叶为原 料 ，采取 水提法 获得含 有紫 杉醇的粗 品 ，并 对其 中紫 杉醇 的含 量进 行分 析 ，检验 提取方 法 的可行 性 ，为今 后利 用东 北红 豆杉生产 紫杉 醇 提供合 理的 工艺条件 。
２２ 色谱条件优化 ．
２２１ 流动相 选择 ． ．
使用 Ｄｏｅ ｍ ８ ｉ ｅ Ｖ １０ Ｓｏｅ Ｉ １ ｉ ｘ ｕ ｐ ６０ ｏ ｘ Ｄ ７Ｕ ｈｄｘ １ 液相色谱仪 ． １ ， ４ × ５ ｍ色谱柱 ， ｎ Ｐ ｐ Ｄｎ Ｕ Ｒ ０ Ｃ８ ． ２０ ６ ｍ 流速 为 １ ｍ ／ｉ，检测波长 ２５ ｍ，柱温为室温；进样量为 １ ｍ ／ Ｌ的紫杉醇标准品 ２ 的色谱条件下 ， ． Ｌ ｎ ０ ｍ ２ｎ ． ｇ ０ ｍ ０ 分别以甲醇 ： ＝ ： 、 ５ ３ 和 ７： ，甲醇 ： ： 水 ６ ４ ６ ：５ ３ 水 乙腈 ＝ ２ ４和 ４ ： ５ ２ 为流动相进行 比较， ４： ： ５ ３ ：０ 最后
２２ 最佳检 测 波长的选择 ．２ ．
进样 ２ 浓度为 １ ｇ Ｌ的紫杉醇标准品，色谱条件 ：Ｃ ８ ０ ．ｍ／ ０ ￣ １ ， ４６×２０ ｍ ． ５ ｍ色谱柱，流速为 １ Ｕ ｉ，检测波长分别为 ２５ ５ ，２５ ０ ｍ ． ｍ ｍｎ ０ ２ ，２４ ７ ，３０ｎ ，柱温为室温，以甲醇 ： ： 水 乙腈 ＝ ５ ３ ：０ ４ ： ５ ２ 为流 动相， 根据不同波长下的峰面积检测结果选择 ２５ ｍ作为分析紫杉醇的检测波长， ２ ｎ 此时峰面积最大 ， 灵敏 度高。 ２ ． 线性 关系的确定 ．３ ２
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７ ０・
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
２ｌ ０Ｏ年
２１ 提取方 法的建立 ． 目 ，紫杉醇的提取方法多采用有机溶剂提取法。通常以氯仿为溶剂 ，但因氯仿有毒 ， 前 且易挥发 ， 增
加了实验的危险性 ，为改善上述缺点，采用水提取法 。因紫杉醇易溶于热水 ，且在加热过程中又使易于分 解的化合物分解 ，降低其它成分的含量 ，即提高提取纯度 ， 又节约了溶剂 ， 并减少了环境污染 ，同时简化 提纯工艺及提高提取率 ，所以水煮提取法代替有机溶剂萃取的方法是可行的。
过滤得水提液 ， 重复 ４ 次并合并提取液 ， 用闪式浓缩器浓缩后 ， 分别用 乙酸乙酯萃取并浓缩 ， 先后用 ０ ｏ ．ｍ 帆 ５
Ｈｓ ２０ｍ缩得 乙酸 乙酯 浸膏 ，再 用去 离子水 混悬后 以正 己
第 ２ 卷第 ４ １ ６ １ ２ １ 年 ７月 ００
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｑｈ ｒ ｉｅ ｓｔ ｏ ｒ ａ ｉａ ｖ ｒ ｉ ｏ Ｑｉ Ｕｎ ｙ
Ｖｏ．６ Ｎｏ Ｊ ． ． ２ ４
Ｊ ｌ，０ ０ ｕｙ２ １
东北红 豆杉 中紫杉醇 的含量分析
朱 吕会 ，崔岩 ，白索柱 ’
烷： 乙酸乙酯 ＝ ３ ７： 混合溶剂萃取 ， 将剩下的水层用 乙酸乙酯萃取浓缩得 ５ 和 ６ ８ 紫杉醇树叶和树 －ｇ ３ ２． ｇ ５
十粗提 物 。
１ ． 紫杉 醇的含 量分析 －２ ２
首先确定高效液相分离的最佳流动相和检测波长 ，然后绘制紫杉醇标准工作曲线 ，测定东北红豆杉树
（． １ 齐齐哈尔 四友化工有限公 司，黑龙江 齐齐哈尔 １ １０ ；２ ６０ ０ ．齐齐哈尔市第一中学 初 中部 ，黑龙江 齐 齐哈尔 １ １０） ６０ ５
摘要 ：以抗癌 活性成分紫杉 醇作 为标 准物 ，利用高压液相色谱法分析 了东北红豆杉树叶和树干的水提取物中抗癌 活性成分紫杉醇 的含量 ，确定最佳色谱条 件为：色谱柱 ：Ｃ ８ ４６×２ ０ｍｍ；流动相 ：甲醇 ： ： １， ． ５ 水 乙腈 ＝４ ５： ３ ２ ；检测波长 ：２５ｒ ５：０ ２ ｍ；柱温 ：室温 ：流速 ：１ ｍＬｍ ｎ ｉ ． ／ｉ。结果 表明 ：东北红 豆杉 树干中紫杉醇含量高于树Ｊ 。 ０ ｒ ｌ ‘ 关键词 ：东北红豆杉 ；紫杉醇 ；树 叶；树 干 ；抗癌 中图分类号 ：Ｔ ２ Ｑ８ 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１０ — ８ Ｘ２ １）４ ０ ６ — ３ ０ ７ ９ ４ （０００ — ０ ９ ０
叶 和树 干 中紫杉醇 含量 。
２ 结 果 与讨 论
收稿 日期 ：２ １－ ４ ０ ０ ００ －５ 作 者简介 ：朱 吕会 （ ９ ３ ，男 ，黑 龙 江望 褒人 ，工 程 师 ，火 ！ １７一） 擎本科 ．主要从 事农 药新 产品 开发方 丽 的研 究 ，ｚ １５ ＠ｉ３ ｏ 。 ｌ ５０ ６ ． ｉ ｈ ｃｎ
荣生化 仪器厂 ） ；闪式 浓 缩器 （Ｆ 一６ ，金 鼎科 技有 限公 司 ） ＪＣ １０ 。
１２ 实验过 程 ． １ ． 紫杉醇 的提 取 ．１ ２ 取 东北红 豆杉树 叶 （ 含小 枝 ）１ ｋ 和树 干 ２ ． ｇ ． ｇ ０ ４８ ｋ ，粗粉 后分 ＩＩ水 煮沸 ， 温 １ ９ ＩＩ 保 ， ｈ后 冷却 至室温 ，
１ 实 验 部分
１１ 材料 与仪 器 ．
１１ 材料 ．． １
（） １ 东北红豆杉 ：于 ２０ 年 ４月 ｌ ０８ ５日采集于哈尔滨苇河林场。 （） ２ 紫杉醇标准品 ：日 本新泻大学安东政义研究室提供。
１１２ 仪 器 ．．
高效液相色谱仪 （ １ ，４ ．× ５ ｍ，日本东京 Ｇ ｃ ８ ，６ ２０ ４ ｍ Ｌ科学仪器厂 ） ；核磁共振仪 （ ｒｋｒＤ Ｘ４ Ｏ Ｂｕｅ Ｒ Ｏ ， － 德国 Ｂｕｅ 公司 ） ｒ ｒ ｋ ；紫外光谱仪 （ Ｆ ２Ｃ Ｚ 一 ０ ，上海宝山顾村电光仪器厂 ） ；旋转蒸发仪 （ Ｅ ５ Ａ ，上海亚 Ｒ 一２ Ａ
紫杉醇 是 目前 广 泛使 用 的抗 癌药 物 之一 ，由于其 独特 的抗癌 作 用机 制 ，使得 该药 物 的应用 领域逐 年增
加 ，为此 ，紫杉醇的来源问题一直是抗肿瘤药物研究者所关注的热点课题” Ｉ 。虽然可通过全合成川 、半合 成 、真菌发酵及基因工程 。 获得紫杉醇 ，但至今为止国内紫杉醇 的主要来源仍是通过从天然植物中提取
获 得 ，为了充分 利用 紫杉 醇 的植物 资源 ，本文 以东北 红豆杉 的树 干 和枝 叶为原 料 ，采取 水提法 获得含 有紫 杉醇的粗 品 ，并 对其 中紫 杉醇 的含 量进 行分 析 ，检验 提取方 法 的可行 性 ，为今 后利 用东 北红 豆杉生产 紫杉 醇 提供合 理的 工艺条件 。
２２ 色谱条件优化 ．
２２１ 流动相 选择 ． ．
使用 Ｄｏｅ ｍ ８ ｉ ｅ Ｖ １０ Ｓｏｅ Ｉ １ ｉ ｘ ｕ ｐ ６０ ｏ ｘ Ｄ ７Ｕ ｈｄｘ １ 液相色谱仪 ． １ ， ４ × ５ ｍ色谱柱 ， ｎ Ｐ ｐ Ｄｎ Ｕ Ｒ ０ Ｃ８ ． ２０ ６ ｍ 流速 为 １ ｍ ／ｉ，检测波长 ２５ ｍ，柱温为室温；进样量为 １ ｍ ／ Ｌ的紫杉醇标准品 ２ 的色谱条件下 ， ． Ｌ ｎ ０ ｍ ２ｎ ． ｇ ０ ｍ ０ 分别以甲醇 ： ＝ ： 、 ５ ３ 和 ７： ，甲醇 ： ： 水 ６ ４ ６ ：５ ３ 水 乙腈 ＝ ２ ４和 ４ ： ５ ２ 为流动相进行 比较， ４： ： ５ ３ ：０ 最后