多糖含量测定的方法综述
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多糖含量测定的几种不同方法比较系别:信息学院专业:生物工程学号:姓名:指导教师:指导教师职称: 讲师多糖含量测定的几种不同方法比较摘要:本文综述了多糖含量测定的几种常用方法,主要有苯酚-硫酸法、3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)、蒽酮-硫酸法、色谱法、红外光谱定量分析多糖法等。
并对这些方法的优缺点进行了分析和比较。
这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考,并为多糖含量测定的更深入研究提供一定的理论基础。
关键词:多糖;含量;测定;方法A review of different methodsto the determination of polysaccharidesAbstract: Paper reviewed some different methods to the determination of polysaccharides, in it phenol-vitriol method, 3, 5-two nitro salicylic acid (DNS) method, anthrone-vitriol method, chromatography, infrared spectrum quantitative analysis and etc had been dealed with. And the advantages and disadvantages of these methods are analyzed and compared. It provided some related information and based theories to the determination of polysaccharides content.Key words:polysaccharides; content; determination; methods目录中文摘要 (I)英文摘要 (II)1前言 (1)2化学法测定多糖含量 (1)2.1苯酚-硫酸法 (1)2.2 3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法) (2)2.3蒽酮-硫酸法 (2)3色谱法测定多糖含量的研究 (3)3.1气相色谱法(GC) (3)3.2 液相色谱法(HPLC) (3)3.3薄层色谱法(TLC) (4)4其他方法 (4)4.1红外光谱定量分析多糖法 (4)4.2生物传感器法 (5)5结论 (5)6展望 (6)参考文献 (6)致谢 (9)1前言多糖(polysaccharides,PS)是由10个以上的单糖聚合而成的生物高分子[1]。
多糖含量的测定方法有多种,以下列举其中几种常用的方法: 1. 酚硫酸法:将样品与酚硫酸反应生成稳定的紫色化合物,通过测定紫色化合物的吸光度来确定多糖含量。
2. 蒽酮-硫酸法:样品经热水溶解后,乙醇沉淀,除去其他可溶性糖及杂质的干扰,用热水溶解沉淀物并稀释定容。
此法操作简便,测定速度快,可用于多糖的实时快速测定和定性分析。
3. 刚果红显色法:在一定条件下,刚果红显色剂能与乙酰甘露聚糖生成有色复合物,而不与麦芽糖糊精、蔗糖和葡萄糖等发生明显的显色反应。
由此可以建立定量分析芦荟多糖含量的刚果红显色分光光度法。
此外,还有其他方法如色谱法、光谱法等也可以用于多糖含量的测定。
具体使用哪种方法需要根据实验目的、样品性质和实验条件等因素进行选择。
测定多糖含量测定方法
多糖含量的测定方法有多种,以下列举几种常用的方法:
1. 酚-硫酸法:将待测样品加入酚-硫酸混合液中,经强酸催化后,产生深棕色或褐色色素,根据其吸收波长测定其光密度,即可得到多糖含量。
2. 比色法:将待测样品加入反应液中,经过酸或碱催化后,与磷钨酸等试剂发生比色反应,测定吸收波长,计算多糖含量。
3. 全甘蔗多糖含量测定法:利用全甘蔗多糖的特性,在酸性条件下能与硫酸基团结合产生黄色化合物,根据其吸收波长测定光密度,计算多糖含量。
4. 中性多糖含量测定法:利用中性多糖的特性,在加酸或碱后,能够水解为单糖,利用安替比林反应或酶法,测定水解产物里的糖含量,根据比例关系计算多糖含量。
5. 光学活性低分子糖含量测定法:利用光学活性低分子糖所具有的旋光性质,通过测定样品的旋光度,计算出其中低分子糖的含量,进而计算多糖含量。
多糖含量测定的几种不同方法比较系别:信息学院专业:生物工程学号:姓名:指导教师:指导教师职称: 讲师多糖含量测定的几种不同方法比较摘要:本文综述了多糖含量测定的几种常用方法,主要有苯酚-硫酸法、3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)、蒽酮-硫酸法、色谱法、红外光谱定量分析多糖法等。
并对这些方法的优缺点进行了分析和比较。
这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考,并为多糖含量测定的更深入研究提供一定的理论基础。
关键词:多糖;含量;测定;方法A review of different methodsto the determination of polysaccharidesAbstract: Paper reviewed some different methods to the determination of polysaccharides, in it phenol-vitriol method, 3, 5-two nitro salicylic acid (DNS) method, anthrone-vitriol method, chromatography, infrared spectrum quantitative analysis and etc had been dealed with. And the advantages and disadvantages of these methods are analyzed and compared. It provided some related information and based theories to the determination of polysaccharides content.Key words:polysaccharides; content; determination; methods目录中文摘要 (I)英文摘要 (II)1前言 (1)2化学法测定多糖含量 (1)2.1苯酚-硫酸法 (1)2.2 3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法) (2)2.3蒽酮-硫酸法 (2)3色谱法测定多糖含量的研究 (3)3.1气相色谱法(GC) (3)3.2 液相色谱法(HPLC) (3)3.3薄层色谱法(TLC) (4)4其他方法 (4)4.1红外光谱定量分析多糖法 (4)4.2生物传感器法 (5)5结论 (5)6展望 (6)参考文献 (6)致谢 (9)1前言多糖(polysaccharides,PS)是由10个以上的单糖聚合而成的生物高分子[1]。
白及药材中多糖的含量测定
白及药材中多糖的含量测定是日常药材分析中非常重要的一部分。
从早期人类开始,白及药材中的多糖含量,对其有效性和影响力至关重要。
有许多不同的方法可以用来测定白及药材中的多糖含量,最常用的是HPLC(高效液相色谱法)和萃取法。
HPLC是药材分析的一种有力的方法,可以有效地辨别和测量白及药材中的多糖含量。
它使用介质有机溶剂与水混合物,可以有效地将白及药材中的多糖和其他成分分离出来。
它还可以有效解决实验过程中其他成分可能干扰结果的问题,确保测定结果的准确性。
萃取法也可以用来测定白及药材中的多糖含量。
该方法在溶剂中添加含氮或含磷的物质,以将多糖结合起来,在形成大聚集体后可以通过滤饼把它们从溶液中分离出来。
此外,也可以使用后续的光度测定或芳香化学分析等方法,进一步测定白及药材中多糖的含量。
白及药材中的多糖含量测定,需要经过严格的操作,以保证测定的准确性。
测定过程中应该先确定标准参考物,选择正确的溶剂,然后按照测试步骤操作。
此外,做实验时,需要注意操作安全,尤其是使用有毒物质时,应当十分小心,以确保取得准确的测定结果。
总之,测定白及药材中多糖含量是一项很重要的分析任务,正确选择和操作测定方法,可以确保测定结果的准确性。
多糖含量测定的几种不同方法比较系别:信息学院专业:生物工程学号:姓名:指导教师:指导教师职称: 讲师多糖含量测定的几种不同方法比较摘要:本文综述了多糖含量测定的几种常用方法,主要有苯酚-硫酸法、3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)、蒽酮-硫酸法、色谱法、红外光谱定量分析多糖法等。
并对这些方法的优缺点进行了分析和比较。
这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考,并为多糖含量测定的更深入研究提供一定的理论基础。
关键词:多糖;含量;测定;方法A review of different methodsto the determination of polysaccharidesAbstract: Paper reviewed some different methods to the determination of polysaccharides, in it phenol-vitriol method, 3, 5-two nitro salicylic acid (DNS) method, anthrone-vitriol method, chromatography, infrared spectrum quantitative analysis and etc had been dealed with. And the advantages and disadvantages of these methods are analyzed and compared. It provided some related information and based theories to the determination of polysaccharides content.Key words:polysaccharides; content; determination; methods目录中文摘要 (I)英文摘要 (II)1前言 (1)2化学法测定多糖含量 (1)2.1苯酚-硫酸法 (1)2.2 3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法) (2)2.3蒽酮-硫酸法 (2)3色谱法测定多糖含量的研究 (3)3.1气相色谱法(GC) (3)3.2 液相色谱法(HPLC) (3)3.3薄层色谱法(TLC) (4)4其他方法 (4)4.1红外光谱定量分析多糖法 (4)4.2生物传感器法 (5)5结论 (5)6展望 (6)参考文献 (6)致谢 (9)1前言多糖(polysaccharides,PS)是由10个以上的单糖聚合而成的生物高分子[1]。
多糖含量测定的方法综述5篇第1篇示例:多糖是一类重要的生物大分子,广泛存在于自然界中的生物体内,具有重要的生物学功能。
多糖含量的测定是研究多糖在生物体内作用机制的重要手段。
本文将综述多糖含量测定的方法,旨在为研究人员提供参考。
一、概述多糖是由多个单糖单元通过糖苷键连接而成的高分子化合物。
多糖在生物体内参与多种生物学过程,如能量储存、细胞结构、免疫调节等。
测定多糖含量对于研究多糖的生物学功能、生物合成途径具有重要意义。
二、多糖含量测定方法1. 硫酸-蒽醌法硫酸-蒽醌法是一种常用于测定多糖含量的方法。
该方法通过硫酸水解多糖,生成差向性的蒽醌,并用蒽醌的颜色深浅来反映多糖的含量。
该方法简单快捷,适用于多种多糖的含量测定。
3. 酚-硫酸-钼酸法酚-硫酸-钼酸法是一种用于测定多糖含量的方法。
该方法结合了酚-硫酸法和硅钼酸显色反应,能够提高多糖的测定精确度和灵敏度。
该方法简单易行,适用于各种类型的多糖。
4. 紫外分光光度法紫外分光光度法是一种通过多糖在紫外光区域的吸收来测定多糖含量的方法。
该方法适用于对多糖进行定量和定性分析。
通过分析多糖在不同波长下的吸光度,可以得到多糖的含量和结构信息。
5. 碘液滴定法三、结语多糖含量的测定是研究多糖生物学功能的重要手段。
本文综述了常用的多糖含量测定方法,包括硫酸-蒽醌法、酚-硫酸法、酚-硫酸-钼酸法、紫外分光光度法和碘液滴定法。
研究人员可以根据不同类型的多糖选择合适的测定方法,以准确测定多糖含量。
希望本文能够为多糖研究领域提供帮助,促进多糖研究的进展。
第2篇示例:多糖是一类重要的生物大分子,包括淀粉、半纤维素、纤维素、果胶、均聚糖等多种成分。
多糖在食品工业、医药领域、环境保护等领域具有重要的应用价值,因此测定多糖含量的方法也备受关注。
本文将综述几种常用的多糖含量测定方法,包括酚-硫酸法、硫酸-酚法、差减酶法、红外光谱法等,希望能给相关研究者提供参考。
酚-硫酸法是一种经典的多糖含量测定方法。
多糖含量测定的方法综述作者:何佩娟张宇洁来源:《现代食品·下》2019年第01期摘要:多糖是生命科学中不可缺少的生物大分子,具有复杂、多方面的生物活性和功能,但由于其分子量大、结构复杂,而且缺少易于检测的发光基团,成为困扰人们对多糖进行进一步研究的一个大问题。
现结合近年文献,对多糖的含量测定进行综述。
关键词:多糖;含量测定;综述Abstract:Polysaccharides are indispensable biological macromolecules in life science, which have complex and multifaceted biological activities and functions. It has been a problem with the research of polysaccharides because of its intricate structur. In conjunction with recent literature, a review of polysaccharides has been determined.Key words:Polysaccharides; Content determination; Review中图分类号:Q53多糖(polysacharides,PS)是由糖苷键结合的糖链,至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物,可用通式(C6H10O5)n表示。
多糖在自然界分布极广,亦很重要:有的是构成动植物细胞壁的组成成分,如肽聚糖和纤维素;有的是作为动植物储藏的养分,如糖原和淀粉;有的具有特殊的生物活性,如人体中的肝素有抗凝血作用,肺炎球菌细胞壁中的多糖有抗原作用。
多糖的结构单位是单糖,多糖相对分子质量从几万到几千万。
多糖在自然界高等植物、藻类、微生物(细菌和真菌)与动物体内均普遍存在。
多糖的检测方法关于多糖含量测定,业内有两种评价方法。
一种是狭义上严格的多糖测定,即水提取多糖后,以凝胶色谱柱分离、洗脱提纯粗多糖得到较单一分子量的多糖,再水解成各种单糖,以HPLC法分离测定各单糖,即可得到比较严格意义上的多糖含量及其组成。
这种方法是科研级的多糖测定。
另一种评价方法一般是生产企业用于质控的多糖测定:一般过程是水提醇沉粗多糖后,以葡萄糖作为相比较的物质,加入特定显色剂后比色测定粗多糖的含量。
注意,这种方法测得的是以葡萄糖作为折算的多糖含量。
但这种评价方法简单实用,能反映一定的质量指标,作为质控之用可以的了。
包括中国药典和一些国标、行标都采用此方法评价多糖含量,方法大同小异,如硫酸-苯酚法,硫酸-蒽酮法。
但根据不少实际检验人的反映,要想检测结果有很好的重现性,还是有很多细节问题要注意的。
粗多糖测定多糖的测定方法,目前有碱性酒石酸铜滴定法、比色法(蒽酮比色法、硫酸-苯酚法)。
一般说来,比色法的优点是灵敏度高,样品用量少;但缺点是一般做常规检测时使用葡萄糖作标准品,误差较大,应以被测物的纯品作对照品,以求出换算因子,但要制备被测物的纯品并非每个实验室所能做到的,而且保健食品中往往是多种中草药的提取物作为原料而制成,所含多糖是不同相对分子量多糖的混合体,这就给提取纯品增加了难度。
所以当成品中多糖含量大于1%(质量浓度)时,最好选用碱性酒石酸铜滴定。
滴定法1.样品预处理取本品适量,精密称定,置于250ml磨口烧瓶中,精密加水50ml,称定重量,置沸水浴回流2小时,放置至室温,用水补足减失重量,混匀,滤过,精密吸取续滤液15ml于100ml 离心管中,加无水乙醇75ml,混匀,以4000r/min离心10min,并小心弃去上清液,再加15ml 热水(温度>90℃)冲洗离心管中沉淀物,重复一次后再以4000r/min离心30min,弃去上清液,沉淀用乙醇液(水:乙醇=15:75)洗涤两次,离心,弃去洗涤液。
多糖的提取、分离及含量测定综述作者:孙雪松来源:《金田》2014年第09期摘要:多糖具有广泛的药理作用:提高免疫力、抗肿瘤、抗衰老、抗氧化等作用。
本文对部分多糖的提取、分离以及含量测定作一综述。
关键词:多糖,提取,分离,含量测定近年来,有关多糖的研究进展迅速,其抗肿瘤作用已经被明确证实,国内外也有相关报道,我国对多糖的研究取得了较大的成就,已对上百种多糖进行了提取、分离及含量测定等方面检测,取得了较好的社会效益[1]。
1. 枸杞多糖(LBP)枸杞多糖具有调节免疫功能,降血糖、降血脂、抗衰老、抗肿瘤等作用,而其药理作用与其生物活性成分枸杞多糖密切相关。
田丽梅等人[2]用索氏提取器对枸杞进行了提取,采用Serag法和色谱柱(DEAE-纤维素)对其进行分离纯化及含量测定,实验研究表明:在枸杞多糖提取过程中,由于其多糖是与蛋白质结合的复合型多糖,蛋白质被提取出来的同时,也相对提高了多糖的纯度。
另外,LBP中含有6种单糖和GacA(半乳糖醛酸),其总糖含量高达87.32%,李艳等人[3]也采用索氏提取法对黑枸杞进行多糖的提取:脱脂挥干水提脱色醇沉洗涤干燥得黑枸杞多糖,其多糖平均含量为13.74%,平均回收率为103.2%,RSD=2.63%(n=3)。
广东省袁震林[4]采用沸水浸提法对宁夏枸杞进行提取,得枸杞多糖粗品,其含量约为60%。
2. 人参多糖(GPS)人参多糖具有滋补养气、活血化瘀、止咳平喘、延年益寿等功效[5],钟振声等人[6]以蒸馏水为提取剂,用超声波法体取人参多糖,采用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量,实验结果表明:超声波功率为200W,超声作用时间为30min,m(人参粉):m(水)=1:50,人参粒度为80目为最佳操作条件,在此条件下提取的多糖质量分数比常规的煮煎法提取3h得到的多糖质量分数还高2.3%。
3. 当归多糖(ASP)当归具有补血、活血、调经止痛、润肠通便、扶正固体之功效,刘娟等人[7]对当归多糖进行分离纯化,采用水煮醇沉法从新鲜当归中提取当归多糖,Serag法除蛋白,冷冻、干燥,苯酚-硫酸法测定总糖含量,总糖含量为96.8%,刘云[8]采用索氏提取回流法对当归进行提取,再用醇沉法制得当归多糖,也采用酚-硫酸比色法对其含量测定.测得平均结果为11.92%,RSD=1.52%(n=5)4. 灵芝多糖(GLP)灵芝多糖能显著提高吞噬细胞的吞噬能力,增强体液免疫和细胞免疫功能,还能提高红细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性[9],对人体有显著的抗瘤、抗癌作用,李钟玉等人[10]用超声波法对灵芝多糖进行提取,结果显示:在灵芝干粉中加入62.5倍体积的水,在pH2.0条件下用超声波法提取45min,得到多糖的量最多,与酸提取法相比,超声波的提取率稍高(分别为11.05%和13.85%,第一作者:2006药学专升本学生,通讯作者 Email:guosy2000@,p﹥0.005),提取物种的糖含量明显增加(分别为22.41%和34.6%,p0.01),大分子杂质明显减少(分别为1.45%和0.68%,p5. 黄芪多糖(APS)黄芪多糖是黄芪中最重要的天然有效成分,其主要生物活性表现为增强免疫功能[12]、抗肿瘤[13]、减轻心肌损伤作用。
多糖含量的测定粗多糖中的总糖含量使用苯酚-硫酸法进行测定,还原糖用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定,多糖含量 = 总糖 - 还原糖。
1、总糖含量测定实验原理:多糖在硫酸作用下,先水解成单糖,并脱水生成糖醛衍生物,与苯酚生成橙黄色溶液,在490nm处有最大吸收,吸收值与糖含量呈线性关系。
试剂:浓硫酸(分析纯)、5%苯酚溶液(分析纯)、标准葡萄糖。
操作步骤:①制作标准曲线:准确称取105 ℃烘干至恒重的葡萄糖50mg于500ml容量瓶中配成0.1 mg/ml 的标准溶液,用蒸馏水分别配成0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1 mg/ml。
1 ml标准液分别加入 5% 苯酚溶液1 ml,并迅速加入浓硫酸5 ml,静置10 min。
摇匀,30℃放置30 min后于490nm测定OD值,以葡萄糖含量为横坐标,OD值为纵坐标,制作得到标准曲线。
②样品含量测定:吸取1.0ml样品液,按照上述步骤操作测定OD490,并代入标准曲线计算样品的总糖含量。
2、还原糖含量实验原理碱性条件下,DNS可与还原糖反应生成3-氨基-5-硝基水杨酸。
此物质在煮沸条件下成棕红色,且颜色深浅在一定范围内与还原糖含量成线性关系。
据此可通过测定OD值确定还原糖含量。
试剂及配制:浓度为1mg/ml的葡萄糖标准溶液。
DNS显色液:称取3.25g DNS溶于少量蒸馏水中并转移至500ml容量瓶中,加入2mol/L的NaOH溶液162.5ml,再加入7.5ml的丙三醇,摇匀,加蒸馏水定容至500ml,摇匀。
操作步骤①标准曲线制作:在6支试管中分别加入1mg/ml葡萄糖标准溶液0.00ml,0.10ml,0.20ml,0.30ml,0.40ml,0.50ml,补蒸馏水至0.5ml,然后加入1 / 2DNS试剂1.5ml,充分混匀。
置于沸水浴中煮沸5min,然后迅速流水冷却,并分别向试管中加入4ml蒸馏水,混匀。
在540nm处读OD值。
多糖含量测定的方法综述多糖是一类重要的生物大分子,包括淀粉、葡萄糖、果糖、纤维素等多种类型。
多糖的含量测定对于食品、医药、生物工程等领域具有重要意义。
本文将对多糖含量测定的方法进行综述,并介绍其在不同领域的应用。
1. 酚硫酸法酚硫酸法是一种常用的多糖含量测定方法,其原理是将多糖与酚和浓硫酸混合反应,生成颜色复合物,通过测定颜色的深浅来确定多糖的含量。
2. 酶解法酶解法是利用酶的作用将多糖水解为单糖或低聚糖,然后通过比色法或高效液相色谱法测定生成物的含量,最终计算出多糖的含量。
4. 高效液相色谱法高效液相色谱法是利用色谱柱分离多糖,再通过检测器检测多糖的峰面积和浓度,从而确定多糖的含量。
5. 红外光谱法红外光谱法是利用多糖分子的振动特性来确定多糖的含量,通过检测特定的红外吸收峰来计算多糖的含量。
二、多糖含量测定方法的应用1. 食品工业在食品工业中,多糖含量测定方法可以用于检测食品中的淀粉、糖类和纤维素的含量,帮助生产商控制食品的质量和营养成分。
2. 医药领域在医药领域,多糖含量测定方法可以用于药物成分的测定,帮助药厂确保药物的质量和纯度。
3. 生物工程领域在生物工程领域,多糖含量测定方法可以用于检测微生物发酵产生的多糖含量,帮助研究人员确定最佳的发酵条件和提高产量。
4. 环境科学在环境科学领域,多糖含量测定方法可以用于检测土壤和水体中的多糖含量,帮助科研人员研究环境中的有机质循环和生物地球化学过程。
三、结语多糖含量测定方法具有重要的理论和应用价值,它可以帮助人们了解物质的成分和性质,为不同领域的科研和生产提供重要的依据。
随着科学技术的不断进步,相信多糖含量测定方法将会更加精确和全面,为人类社会的发展做出更大的贡献。
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在10~100mg范围内其颜色与糖的含量成正比。
在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在波长下测定。
苯酚法可用于甲基化的糖和多糖的测定方法.简单,灵敏度高,实验室基本不受蛋白住存在的干扰.2、实验药品浓硫酸苯酚3苯酚溶液的配制(1)先配制80%苯酚溶液,然后称取80。
0g苯酚加20.0g水,使之溶解,置于冰箱中,避光长期保存。
取80%苯酚37.5mL定容到500Ml。
配制成60%的苯酚溶液,避光保存。
(2)取苯酚100g,加铝片0。
资料多糖含量测定的各种方法优缺点苯酚-硫酸法测多糖含量一、原理多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
二、试剂1、浓硫酸:分析纯,95.5%2、80%苯酚:80克苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加20克水使之溶解,可置冰箱中避光长期储存。
3、6%苯酚:临用前以80%苯酚配制。
(每次测定均需现配)4、标准葡聚糖(Dextran,瑞典Pharmacia)或分析纯葡萄糖。
5、15%三氯乙酸(15%TCA):15克TCA加85克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。
6、5%三氯乙酸(5%TCA):25克TCA加475克水使之溶解,可置冰箱中长期储存。
7、6mol/L 氢氧化钠:120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。
8、6mol/L 盐酸三、操作1、制作标准曲线准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置20分钟以后于490nm测光密度,以2.0ml水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得标准曲线。
2、样品含量测定1)取样品1克(湿样)加1ml 15%TCA溶液研磨,再加少许5%TCA溶液研磨,倒上清液于10毫升离心管中,再加少许5%TCA溶液研磨,倒上清液,重复3次。
最后一次将残渣一起到入离心管。
注意:总的溶液不要超出10毫升。
(既不要超出离心管的容量)。
2)离心,转速3000转/分钟,共三次。
第一次15分钟,取上清液。
后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。
最后滤液保持18毫升左右。
3)水浴,在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀,在96℃水浴锅中水浴2小时。
4)定容取样。
水浴后,用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。
多糖的测定
多糖的测定方法
采用通用的苯酚-硫酸法测定多糖含量,以葡萄糖为标准品制作标准曲线。
本论文采用硫酸-苯酚法测定多糖含量。
标准曲线制作:准确称取100°C 烘干至恒重的标准葡萄糖25.0mg 于250mL 容量瓶中,加水至刻度并摇匀,分别取0.1mL 、0.2mL 、0.3mL 、0.4mL 、0.5mL 、0.6mL 、0.7mL 、0.8mL 葡萄糖标准溶液,分别加水补至1.0mL,然后加入5%苯酚1.6mL 及浓硫酸7.0mL,充分摇匀,室温放置25min 以后于490nm 测吸光度,以蒸馏水按同样显色操作为空白,以多糖浓度(x)为横坐标,吸光度(y)为纵坐标,绘制标准曲线,计算出回归方程。
样品含量测定:将1g 多糖样品溶于100ml 热水中,充分溶解并冷却至室温,精确吸取多糖样品溶液1.0mL,加入5%苯酚1.6mL 及浓硫酸7.0 mL,以下同标准曲线之操作,测定吸光度值。
将其代入回归方程,即可得多糖的含量。
样品多糖得率(%)=样品干重多糖含量
×100
注:所测得吸光值(OD )应标准曲线范围内,过大或过小应调整浓度或加液量。
由于苯酚-硫酸法在测定过程中葡萄糖有脱水反应,温度不能过低,一般在室温20-30°C 时测定十分稳定,另外,摇匀应充分。
多糖含量测定的方法综述1. 引言1.1 研究背景多糖是一类重要的生物大分子,广泛存在于植物、动物、微生物等生物体中。
多糖的含量对于食品、药品、化妆品等行业具有重要意义,因此对多糖含量的准确测定具有重要的研究意义。
在过去的几十年中,随着科学技术的不断发展,人们对多糖含量测定方法的研究也在不断深入。
多糖含量测定方法的不断更新和发展,为相关领域的研究工作提供了更多的选择和可能性。
传统的多糖含量测定方法虽然已经被广泛应用,但在一些特定情况下存在局限性。
近年来涌现出了许多新兴的测定方法,其原理更加先进、操作更加简便、结果更加准确。
本文将对多糖含量测定的相关方法进行综述,以便为相关领域的研究人员提供参考和借鉴。
通过对不同测定方法的优缺点比较和方法选择及应用的探讨,有助于更好地指导实际工作中的测定操作。
通过对多糖含量测定方法的综合分析和讨论,有助于促进相关领域的发展和进步。
1.2 研究意义多糖是一类生物大分子,它们在生物体内具有重要的生物功能,如提供能量、结构支持以及细胞识别等。
多糖含量的测定对于食品工业、医药领域、生物学研究以及环境监测等领域具有重要意义。
准确测定多糖含量可以帮助生产商控制产品品质,确保产品达到规定的标准;可以帮助科研人员了解生物体内多糖的含量变化,探索其对生物体功能的影响;多糖含量的测定还可以用于环境监测,帮助科学家了解环境中多糖的分布情况,从而进行环境保护和治理。
在不同领域,多糖的含量测定方法也有所不同,传统的方法主要包括酚硫酸法、酚酞法、红色邻苯二甲酸钠法等,而近年来随着科技的发展,各种新型的测定方法也在不断涌现。
对多糖含量测定方法进行综述和比较,有助于科研人员选择适合自己研究的方法,提高测定的准确性和效率。
【研究意义】2. 正文2.1 多糖含量测定方法的分类多糖含量测定方法的分类主要可以分为化学方法和物理方法两大类。
在化学方法中,常用的包括酚硫酸法、硫酸-酚反应法、巴氏酚试剂法等。
这些方法通过针对多糖中特定官能团的反应来测定其含量。
总多糖含量测定方法
总多糖的含量测定方法有多种,其中包括苯酚-硫酸法、3,5-二硝基水杨酸比色法、蒽酮-硫酸法等。
1. 苯酚-硫酸法:苯酚-硫酸试剂可与游离的或多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应,己糖在490nm波长处、戊糖及糖醛酸在480nm 波长处有最大吸收,吸收度与糖含量呈线性关系。
2. 3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法):3,5-二硝基水杨酸与多糖水解后的还原糖生成有色物质进行测定。
这种方法是在碱性条件下显色,较准确测定还原糖与总糖的含量从而求出多糖的含量,可消除还原性杂质的干扰。
3. 蒽酮-硫酸法:多糖与硫酸发生脱水反应,生成糠醛或其衍生物,与蒽酮试剂缩合生成有色物质进行测定。
此外,间羟基联苯法也是一种常用的多糖中糖醛酸含量测定方法,该法较硫酸咔唑法受中性糖残基的干扰更小。
另外还有超氧阴离子清除率和羟自由基清除率的检测方法、水分的检测方法等。
多糖含量测定的方法综述
多糖是一种以糖为主要组成成分的生物大分子,包括多种不同类型的糖类,如葡萄糖、果糖、半乳糖等。
多糖在生物体内具有重要的生理功能,包括能量供应、结构支持、细胞
识别和信号传递等。
测定多糖的含量对于分析生物体内的代谢物质和生物功能很重要。
下面将综述几种常
用的多糖含量测定方法。
1. 酚-硫酸法:酚-硫酸法是一种常用的测定糖类含量的方法。
该方法通过将样品与
酚和硫酸反应,产生带有吸收峰的复合物,然后使用紫外光谱仪测定复合物的吸光度来计
算糖含量。
该方法适用范围广,对于多种糖类都可以测定。
2. 酶法:酶法是通过特定酶对特定的糖类进行反应,生成比色物或荧光物质来测定
糖含量的方法。
常用的酶法包括葡萄糖氧化酶法、木糖醇氧化酶法和半乳糖标准酶法等。
这些方法具有灵敏、快速的特点,适用于糖类含量较高的样品。
3. 高效液相色谱法:高效液相色谱法是一种通过分离和检测糖类来测定多糖含量的
方法。
该方法使用高压注射仪将样品中的糖类分离,然后通过色谱柱进行分离,并使用检
测器测定峰的面积或高度来计算糖含量。
该方法具有高分辨率、高灵敏度和高准确性的特点,适用于多糖含量较低的样品。
4. 红磷法:红磷法是一种比色法,通过氧化红磷,使其转变成淡黄色后与不同浓度
的糖溶液比较颜色的深浅来测定糖含量。
该方法简单、快速,适用于粗测糖含量。
5. 聚合度测定法:多糖的聚合度是指多糖分子中含有的糖基个数。
测定多糖的聚合
度可以通过核磁共振和凝胶渗透色谱等方法进行。
这些方法可以确定多糖的分子量和聚合
度分布,从而间接地测定糖含量。
测定多糖含量的方法有很多种,每种方法都有其适用范围和优缺点。
在实际应用中,
根据样品的特点和研究目的选择合适的方法进行多糖含量的测定。