用于烟梗木质素降解的漆酶的分离纯化研究

漆酶的分离纯化及其应用研究漆酶是一种生物催化剂，被广泛应用于漆木器、皮革、纺织品、造纸、食品等领域。

漆酶的分离纯化及其应用已经成为当前生物技术领域研究的热点之一。

一、漆酶的分离纯化方法漆酶在微生物中的合成量较少，因此，为了进行漆酶的高效生产和利用，需要对漆酶进行分离纯化。

常见的漆酶分离纯化方法有：超滤法、离子交换层析法、凝胶过滤层析法等。

超滤法是通过超滤膜将酶与其他杂质分离，可以得到相对较为纯净的漆酶。

离子交换层析法是利用离子交换树脂将需要分离的物质分离出来。

凝胶过滤层析法则是利用化学性质不同的凝胶将需要分离的物质分离出来。

二、漆酶的应用研究漆酶的应用研究主要集中在以下几个领域：1.漆木器颜色、光泽度的成型漆木器的颜色和光泽度可以通过打磨、上光等方式达到，但这种方法比较费时费力，而且不够持久。

采用漆酶涂料，可以使漆木器的颜色和光泽度更加饱满，而且能够更持久地保持。

2.制作皮革中的保护剂对皮革进行漆酶处理，可以使皮革更加柔软、舒适，同时具有保护作用，可以延长皮革的使用寿命。

3.纺织品整理在染色后，使用漆酶整理纺织品，可以提高纺织品的匀染性和光泽度，使其更加柔软舒适。

4.造纸生产漆酶在造纸生产中也起着重要的作用。

已经有不少研究表明，使用漆酶可以比传统方法更加高效地从纸浆中分离木质素，使得纸张更加柔韧、实心、白度高。

5.食品加工漆酶被广泛应用于味精、酱油等食品加工领域。

将其添加到食品中可以改善食品口感和口感质量。

结语漆酶具有一定的生物技术优势，不仅能够提高生产效率和质量，而且还能够在生态保护方面发挥重要的作用。

不过，需要在其分离纯化和应用研究方面进一步深入探索，以更好地推动其应用。

漆酶的提取纯化及其脱色研究摘要【目的】本实验通过选取一株突变的高产漆酶的粗毛栓菌发酵液〔培养11天产生漆酶酶活最高〕，经过离心沉淀过滤，硫酸铵沉淀，Sephadex G-75凝胶过柱层析，别离纯化漆酶以及测定其纯化相关参数，并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定各步别离后的成分变化。

最后研究其脱色的效果，为漆酶应用的相关研究提供实验依据。

【方法】利用过滤，硫酸铵沉淀，Sephadex G-75凝胶过柱层析，的方法提取纯化漆酶，SDS-聚丙烯酰胺凝胶鉴定别离成分，并用光密度测漆酶的脱色率。

【实验材料】发酵液，相关试剂【预计结果】选用凝胶浓度为12%，结果可以明显看出，经过纯化的漆酶的条带是单一的，相关参数〔蛋白含量，活力回收，比活力，纯化倍数〕比拟高，另外，脱色效果比拟显著。

【结论】关键词漆酶纯化脱色应用1 前言1.1 实验的研究意义木质素是植物中产生的一类难于降解的高分子化合物的统称，主要由苯丙烷单元通过醚键和碳键等多种共价键连接而成的杂聚物，是自然界中碳循环的限速环节之一。

其降解主要由微生物完成，这类微生物主要包括真菌、放线菌和细菌。

其中白腐真菌〔white rot fungi〕被认为是生物圈中植物天然高分子物质木质素、纤维素和半纤维素的重要降解者，能使这些物质最终分解为二氧化碳和水。

白腐真菌通常通过分泌木质素过氧化物酶〔Lignin peroxidase，Lip〕、锰过氧化物酶〔Manganese peroxidase，MnP〕和漆酶〔Laccase，Ec.2〕三种主要的木质素降解酶类来降解木质素。

其中漆酶，能够将木质素降解为CO2和H2O，反响过程不需要H2O2的参与，在木质素降解中起主要作用。

其中漆酶〔Laccase〕是一种多酚氧化酶〔p-diphenol oxidase EC..2〕，属于蓝色氧化酶家族。

漆酶能催化降解多种芳香族化合物特别是酚类，是一种天然环保型酵素。

因而在纸浆生物漂白、染料脱色、废水处理、食品加工、生物质能源等领域具有广阔的应用前景，利用漆酶对木质纤维及一些高分子化合物的降解作用，进展合理的开发利用，可减少化学药品的使用量，降低生产本钱和保护环境。

酶解-温和酸解法分离烟梗木质素
楚文娟;李文伟;李颢
【期刊名称】《广东化工》
【年(卷),期】2015(42)17
【摘要】采用酶解-温和酸解法从烟梗粉中分离出木质素.研究了稀硫酸预处理对烟梗粉酶解过程的影响,优化了烟梗粉酶解的反应条件,考察了HC1浓度对酶解木质素温和酸解的影响.通过FT-IR的表征手段对木质素样品进行了表征,结果表明,烟梗木质素具有典型的紫丁香基和愈创木基特征峰,说明烟梗木质素的结构单元主要由紫丁香基和愈创木基组成.
【总页数】2页(P75-76)
【作者】楚文娟;李文伟;李颢
【作者单位】河南中烟工业有限责任公司安阳卷烟厂,河南安阳455004;河南中烟工业有限责任公司安阳卷烟厂,河南安阳455004;长江大学化学与环境工程学院,湖北荆州434023
【正文语种】中文
【中图分类】TQ353.42
【相关文献】
1.NaOH/尿素低温溶解法测定烟梗木质素含量的研究 [J], 孔浩辉;李秀丽;黄翼飞;纪楷滨;楼宏铭;邱学青;杨东杰
2.棕榈壳酶解-温和酸解木质素的结构及热解特性研究 [J], 常国璋;谢建军;杨会凯;
黄艳琴;阴秀丽;吴创之
3.毛竹酶解/温和酸水解木质素的快速热解研究 [J], 娄瑞;武书彬;董浩亮;吕高金
4.酶解木质素的碱催化温和水热降解 [J], 单增宇;马灼明;李淑君
5.醇酸体系分离木质素对酶解性能的影响 [J], 安胜欣;薛凤洋;李文志
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木质素的酶法纯化与应用的开题报告
一、选题背景
作为天然高分子化合物之一的木质素（lignin），其分子结构复杂，其三维构象的多样性，使其被广泛应用于纸浆、生物燃料、环境污染等领域。

得益于生物技术的发展，目前已经取得了一定的进展。

在不断深入的研究探讨中，有人对木质素酶法纯化所涉及的相关问题进行了初步的讨论。

二、研究目的
以木质素的酶法纯化为研究目标，旨在探究多种酶类在木质素纯化中的应用效果及其可能存在的问题，进一步提升木质素的提取纯化效果，为实际应用提供更为充分的技术支持。

三、研究方法
通过文献调研及实验室实践相结合的方式，探究多种酶类的选择、作用机理及其在纯化木质素的过程中实际应用效果等问题，进一步验证并优化酶法提取木质素的方案。

四、研究内容
1、常见的酶类及其选择
2、各种酶类对木质素的作用机理
3、酶法提取木质素的实验方案设计
4、实验结果分析及性能评价
五、预期成果
通过对木质素的酶法纯化及应用研究，预期达到以下目标：
1、建立适合不同来源和种类木质素的酶法纯化方案；
2、探索酶法提取木质素的潜在应用领域；
3、提高木质素的纯度及其应用性能，为其更广泛的应用打下技术基础。

六、研究意义
木质素的酶法纯化及应用是目前木质素研究领域的重点研究方向之一，该研究能够提升木质素的提取纯化效果，为实际应用提供更为充分的技术支持。

木质素的应用价值广泛，与环保、能源、生态建设等领域密切相关。

因此，该研究具有重要的学术价值、工程技术价值和社会经济价值。

山东农业大学学报(自然科学版),2024,55(1):076-083Journal of Shandong Agricultural University ( Natural Science Edition )VOL.55 NO.1 2024 doi:10.3969/j.issn.1000-2324.2024.01.011Trametes hirsuta漆酶的分离纯化及其对活性染料脱色研究刘飞，李治宏，张仕豪，刘璇，郑晓晴，焦若若，朱友双*济宁医学院生物科学学院，山东日照 276800摘要：漆酶是一种含铜的多酚氧化酶，在生物检测、工业染料脱色、有机农药降解、纸浆漂白及食品饮料等领域具有广泛的应用价值。

本研究使用实验室自主筛选鉴定的漆酶高产菌株粗毛栓菌（Trametes hirsuta），液态发酵后，培养液经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose FF 阴离子交换层析分离纯化，酶活总得率57.2%，纯化倍数6.0倍，比活力为758.5 U/mg，漆酶的分子量约为50 kDa。

利用粗毛栓菌粗酶液分别对结晶紫、溴酚蓝、孔雀石绿、詹姆斯绿B进行脱色，同时研究了染料浓度、脱色温度、pH和NaCl对溴酚蓝和孔雀石绿脱色率的影响。

结果表明，溴酚蓝和孔雀石绿浓度分别为40 mg/L 和50 mg/L时脱色率较高；在脱色温度为50 ℃时，漆酶对溴酚蓝和孔雀石绿的脱色率较高，最高脱色率分别为68.51%和83.06%；溴酚蓝在pH 3.5时脱色率最高达到72.61%，而孔雀石绿的脱色率在pH 4.5时最高达到83.49%；NaCl对Trametes hirsuta漆酶催化染料脱色有一定的抑制作用。

本研究表明Trametes hirsuta漆酶在染料脱色中具有较大的应用前景，在工业废水的处理中具有良好的应用潜力。

关键词：粗毛栓菌；漆酶；分离纯化；染料脱色中图法分类号：Q939.5文献标识码： A文章编号：1000-2324（2024）01-0076-08 Isolation and Purification of Laccase from Trametes hirsuta and Its Application in Reactive Dye DecolorizationLIU Fei, LI Zhi-hong, ZHANG Shi-hao, LIU Xuan, ZHENG Xiao-qing,JIAO Ruo-ruo, ZHU You-shuang*School of Biological Science/Jining Medical University, Rizhao 276800, ChinaAbstract: Laccase is a copper-containing polyphenol oxidase with a wide range of application, including bio-detection, industrial dye decolorization, organic pesticide degradation, pulp bleaching, and the food and beverage industries. We utilized a high-yield laccase strain of Tramete hirsuta identified in the laboratory. The laccase was separated and purified through ammonium sulfate precipitation and DEAE Sepharose FF anion exchange chromatography. The enzyme activity yield was 57.2%, with a purification fold of 6.0 and a specific activity of 758.5 U/mg. The molecular weight of laccase was about 50 kDa. The crude enzyme solution from Tramete hirsuta was used to decolorize crystal violet, bromophenol blue, malachite green, and Janus green B. The effects of dye concentration, temperature, pH and NaCl on the decolorization rate of bromophenol blue and malachite green were also investigated. The decolorization rates were higher when the dye concentration was 40 mg/L for bromophenol blue and 50 mg/L for malachite green. The decolorization rates of laccase on bromophenol blue and malachite green were 68.51% and 83.06%, respectively, at the temperature of 50℃. Bromophenol blue exhibited the highest decolorization rate of 72.61% at pH 3.5, while malachite green showed the highest decolorization rate of 83.49% at pH 4.5. NaCl had an inhibitory effect on the dye decolorization catalyzed by Trametes hirsuta laccase. Our study showed Trametes hirsuta laccase has a great application potential in dye decolorization and industrial wastewater treatment.Keywords: Trametes hirsuta; laccase; isolation and purification; dye decolorization漆酶是一种古老的含铜多酚氧化还原酶，最早发现于日本漆树中(Rhusvernicifera)[1]，属于铜蓝氧化酶。

烟叶中木质素的测定、裂解和降解研究的开题报告一、研究背景和意义烟叶作为我国重要经济作物之一，其烟草制品产业是国家重点支持的行业之一。

但是，烟草制品的加工过程中会释放一些有害物质，如焦油和尼古丁等，这些有害物质对人体健康造成威胁，因此近年来人们越来越关注如何减轻烟草制品对环境和人类的危害。

木质素是植物细胞壁的重要成分之一，烟草中也富含木质素。

因此，对烟草中木质素的测定、裂解和降解研究，对于减轻烟草对环境的危害，提高烟草制品的品质和降低生产成本具有重要的意义。

二、研究目的本研究的目的是测定烟草中木质素的含量，研究木质素的裂解及降解过程，为烟草制品的生产和加工提供理论基础和技术支持。

三、研究内容和方法1.烟草中木质素的测定采用高效液相色谱法测定烟草中木质素的含量。

首先将烟草样品提取，得到木质素的混合物。

然后将混合物进行分离和纯化，用高效液相色谱进行分析。

2.木质素的裂解实验采用氢氧化钠-丙酮体系进行木质素的裂解。

将烟草中木质素混合物与氢氧化钠和丙酮混合，进行加热反应，得到裂解产物。

采用气相色谱-质谱联用技术进行分析。

3.木质素的降解实验采用微生物发酵技术进行木质素的降解实验。

将烟草中木质素混合物与一定量的微生物培养物混合，并控制培养条件，观察并记录木质素的降解过程，采用高效液相色谱进行分析。

四、研究预期结果通过对烟草中木质素的测定、裂解和降解研究，可以得出以下预期结果：1.测定出烟草中木质素的含量。

2.找到一种简单可行的木质素裂解方法，并得到裂解产物。

3.通过微生物发酵技术，找到一种高效的木质素降解方法。

五、研究的实用价值本研究可为烟草制品的生产和加工提供新的思路和技术支持，减轻烟草对环境的危害，提高烟草制品的品质和降低生产成本。

此外，本研究所采用的方法和技术也可为其他植物中木质素的相关研究提供参考。

专利名称：一种酶法降解烟草中木质素的方法专利类型：发明专利
发明人：张建栋,施栩翎
申请号：CN201010560128.5
申请日：20101124
公开号：CN102058154A
公开日：
20110518
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种酶法降解烟草中木质素的方法，主要通过对木质素具有降解作用的酶对低次烟草进行处理，获得吸味更柔和的烟草产品，有效提高低次烟草的口感。

申请人：华宝食用香精香料(上海)有限公司
地址：201821 上海市嘉定区叶城路1299号
国籍：CN
代理机构：北京君智知识产权代理事务所
代理人：吕世静
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产漆酶菌株的筛选及其对烟秆降解效果的研究杨雪梅;刘彦中;刘志莲;赖泳红;陈勇能【期刊名称】《中国农学通报》【年(卷),期】2014(30)7【摘要】为烤烟秸秆中木质素降解提供理论依据,丰富降解木质素的真菌资源。

从腐殖质中分离高产漆酶的木质素降解真菌1株,对其进行形态学鉴定,并对其液态发酵产漆酶培养条件进行优化和对碳、氮源和Cu2+进行正交试验,最后测定了该株菌对烤烟秸秆的降解情况。

结果表明:(1)该株真菌形态学鉴定为半知菌亚门,粘头霉属(Moniliales Gliocephalias sp.)命名为Z-1。

基础培养基中产漆酶的最大值出现在液态发酵第4天,酶活为2.72 U/mL。

(2)单因素试验中Z-1最适宜产酶发酵条件为:麦芽糖25 g/L、酵母膏10 g/L、Cu2+浓度2.5 mmol/L。

(3)正交试验中,培养基麦芽糖30 g/L、酵母膏12 g/L、Cu2+浓度2.5 mmol/L处理产酶最高,酶活为3.24 U/mL,较基础培养基中高出18.89%。

(4)液态发酵菌株对烟秆粉末降解30天后,失重率50%、木质素降解率39.39%、纤维素降解率36%。

该株真菌产酶较高,对烤烟秸秆降解能力较强。

【总页数】6页(P52-57)【关键词】漆酶;木质素;发酵优化;烟秆降解【作者】杨雪梅;刘彦中;刘志莲;赖泳红;陈勇能【作者单位】云南农业大学烟草学院;云南大学微生物研究所;保山市烟草公司龙陵分公司【正文语种】中文【中图分类】Q554【相关文献】1.产漆酶菌株的筛选及产酶条件的优化 [J], 王巍杰;张杰;2.组成型漆酶高产菌株的筛选及其产酶条件研究 [J], 谌斌;赵亮亮;聂小琦;黄彦;余丽娟;李芳3.产漆酶菌株的筛选及产酶条件的优化 [J], 王巍杰;张杰4.产漆酶菌株筛选及一株产酶菌株的优化与鉴定 [J], 张延威;邱树毅;韩燕峰;梁宗琦5.血红密孔菌高产漆酶菌株的筛选及其对烟梗的生物降解 [J], 宋自力;张伟;廖头根;汪世华;李伟;尹文兵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。