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第三章消毒与灭菌_总结介绍几个根本概念1．灭菌：应用物理或化学方法杀灭物体中所有的病原微生物、非病原微生物以及芽胞和霉菌孢子的方法。
2．消毒：应用物理或化学方法杀灭物体中的病原微生物，而对非病原微生物及芽胞，孢子不要求全部杀死。
3．防腐：应用物理或化学方法阻止和抑制微生物的生长繁殖的方法。
4．无菌操作法：防止或杜绝一切细菌进入动物体或其他物体的方法。
5．滤过除菌：液体或气体通过滤过作用除去其中所存在的细菌。
一般用0.22微米滤膜，但不能除去病毒，霉形体及L 型细菌。
第一节物理因素⏹温度⏹ 枯燥⏹ 渗透压⏹ 辐射⏹ 过滤⏹其他物理因素一、温度〔一〕高温对微生物的影响⏹高温对微生物有明显的致死作用，其主要原因是高温能使菌体蛋白质变性或凝固，酶失去活性，核酸构造遭到破坏等，从而导致其死亡。
⏹ 多数细菌，酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50-65 ºＣ10 min可以致死。
⏹ 细菌芽孢，在121 ºＣ下５－20min 才能致死，⏹ 同种微生物老龄菌比幼菌耐热。
⏹ 干热灭菌(dry heat sterilization烘烤灭菌法；实验室用枯燥箱烘。
一般是160℃2小时即可到达灭菌目的。
⏹湿热灭菌(mosist heatsterilization在同温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好；因为：a 比干热更易使菌体蛋白凝固。
b 湿热穿透力强；c 湿热可以释放大量潜热。
⏹ 湿热灭菌法 A. 高压蒸汽灭菌法 B. 煮沸消毒法C. 流通蒸汽消毒法D. 间歇蒸汽灭菌法E. 巴氏消毒法 A 、高压蒸汽灭菌法是湿热灭菌中最好的方法，通常1.05kg/cm2,的压力下面〔此时温度121ºＣ〕处理15－30min 。
要排冷空气，否那么会形成假压力，虽然压力到达要求，温度却达不到相应温度，而影响灭菌效果。
B 、煮沸消毒法物品在水中煮沸 15min ，可杀死所有营养细胞和一局部芽孢。
在水中参加１％的Ｎa2CO3 或２－５％的石碳酸效果更好。
消毒与灭菌的定义消毒与灭菌是在卫生和医疗领域中非常重要的概念，它们都涉及到杀灭病原体和微生物的过程。
虽然这两个词经常被人们混用，但它们之间有着明显的区别。
在本篇文章中，我们将从深度和广度的角度探讨消毒与灭菌的定义、方法及其在不同环境中的应用。
一、消毒的定义消毒是指将病原体和其他有害微生物的数量降低到安全水平的过程。
通过消毒，可以减少疾病的传播和感染的风险。
消毒方法不会杀死所有的细菌、病毒和寄生虫，但可以减少它们到无害水平。
消毒的目标是在卫生条件下达到可以接受的微生物水平，以保护人体免受感染。
二、灭菌的定义与消毒不同，灭菌是指完全杀死或去除所有的微生物，包括病原体、细菌、病毒和孢子等。
灭菌过程不仅仅只是将微生物数量降低到安全水平，而是将其完全消除。
灭菌通常在医疗设备、手术器械、药品和实验室环境等需要高度无菌的地方使用。
三、消毒和灭菌的方法1. 物理方法：物理方法是通过物理性质或物理能量来杀灭或去除微生物。
其中常见的方法包括高温灭菌、蒸汽消毒和紫外线照射等。
高温灭菌是将物体暴露在高温条件下，通过破坏微生物细胞的结构和蛋白质，达到灭菌的效果。
蒸汽消毒则利用高温蒸汽将微生物杀灭。
紫外线照射使用紫外线辐射来破坏微生物的DNA和RNA，从而达到杀灭的效果。
2. 化学方法：化学方法是利用化学物质来杀灭或去除微生物。
常见的化学消毒剂包括酒精、过氧化氢、次氯酸钠和含氯漂白粉等。
这些消毒剂可以通过破坏微生物的细胞壁和细胞膜，抑制微生物的生长和繁殖，达到消毒或灭菌的效果。
3. 生物方法：生物方法是利用其他生物体来杀灭或去除微生物，常见的方法包括使用一些具有抗菌能力的微生物或酶。
使用产生抗菌物质的细菌来抑制其他病原细菌的生长，或使用具有特殊酶活性的生物杀灭对特定微生物有害的细菌。
四、消毒与灭菌的应用场景消毒和灭菌在医疗、餐饮、水处理、实验室等不同环境中有着广泛的应用。
在医疗环境中，灭菌是确保手术器械和医疗设备无菌的关键步骤。
消毒和灭菌两个词在实际使用中常被混用，其实它们的含义是有所不同的。
消毒是指应用消毒剂等方法杀灭物体表面和内部的病原菌营养体的方法，而灭菌是指用物理和化学方法杀死物体表面和内部的所有微生物，使之呈无菌状态。
物理方法1温度利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。
高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。
1)干热灭菌法：a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。
此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。
b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160℃，恒温1小时即可。
此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。
2)湿热灭菌法：在同样的温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。
另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。
该法一般在62℃，30分钟即可达到消毒目的。
此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。
若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。
此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做到完全无菌。
若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。
具体做法是：将待灭菌的物品加热至100℃，15~30分钟，杀死其中的营养体。
然后冷却，放入37℃恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。
第2天再重复上述步骤，三次左右，就可达到灭菌的目的。
简述消毒和灭菌的概念消毒和灭菌是日常生活中经常被提及的卫生概念，它们都涉及到对微生物的处理以保护我们的健康。
虽然这两个词看起来很相似，但它们在实践中有着不同的应用和目的。
一、消毒的概念消毒是指通过杀灭或去除绝大部分致病菌、病毒和其他微生物，从而降低感染和传播的风险。
消毒通常应用于非活体物品表面、设备、表层皮肤和其他非生命体表面等地方。
它是一种常用的卫生措施，可用于医疗机构、家庭、餐厅、学校等场所。
消毒方法的选择取决于所需消除的微生物类型、表面材质和所处环境。
最常见的消毒方法包括以下几种：1. 物理消毒：物理消毒方法通过使用热、辐射或过滤等方式来杀灭微生物。
高温煮沸、干热灭菌和紫外线消毒等。
2. 化学消毒：化学消毒方法使用化学物质来杀灭和去除微生物。
酒精、漂白剂、消毒液和氯等都是常用的化学消毒剂。
消毒的目标是减少病原微生物的数量，从而降低感染和传播的风险。
然而，消毒并不能完全杀灭所有的微生物，有些抵抗力较强的微生物可能在消毒过程中存活下来。
二、灭菌的概念灭菌是指通过使用物理或化学方法，以及其他特定条件，彻底杀死或去除所有微生物，包括细菌、病毒、真菌和孢子。
灭菌一般应用于医疗设备、外科手术器械和药品等需要高度清洁和无菌环境的场所。
与消毒不同，灭菌的目标是完全杀死或去除所有微生物，以确保完全无菌状态。
这样可以避免在医疗过程中引入病原微生物，减少感染和交叉感染的风险。
常见的灭菌方法包括：1. 蒸汽灭菌：通过高温和高压的水蒸气，将微生物完全灭活。
这是最常用的灭菌方法之一。
2. 干热灭菌：使用高温烘干的方式，将微生物杀灭。
这适用于对湿热敏感的物品。
3. 气体灭菌：使用带有灭菌剂的气体，如乙烯氧化物等，以达到灭菌的目的。
需要注意的是，灭菌是一个严格的过程，需要控制温度、时间、湿度和浓度等因素，以确保所有微生物都可以被彻底灭活。
灭菌后的物品应在无菌环境中密封保存，以防止再次受到污染。
三、消毒与灭菌的区别与联系消毒和灭菌都是用于控制病原微生物和传染病传播的重要手段。
实验三消毒与灭菌消毒与灭菌两者的意义有所不同。
消毒一般是指消灭病原菌和有害微生物的营养体而言，灭菌则是指杀灭一切微生物的营养体，芽孢和孢子。
消毒与灭菌的方法很多，一般可分为加热、过滤、照射和使用化学药品等方法。
一、加热法1．干热灭菌有火焰烧灯灭菌和热空气灭菌两种。
火焰烧灼灭菌适用于接种环、接种针和金属用具如镊子等，无菌操作时的试管口和瓶口也在火焰上作短暂烧灼灭菌。
涂布平板用的玻棒也可在醮有乙醇后进行灼烧灭菌。
通常所说的干热灭菌是在电烤箱内利用高温干燥空气(160℃一170℃)进行灭菌，此法适用于玻璃器皿如吸管和培养皿等的灭菌。
培养基、橡胶制品、塑料制品不能用干热灭菌。
2．湿热灭菌(1)高压蒸气灭菌法：将物品放在密闭的高压蒸气灭菌锅内，0.1MPa，121℃保持15～30min进行灭菌。
适用于培养基、工作服、橡皮物品、玻璃器皿等的灭菌。
(2）常压蒸气灭菌法：在不具备高压蒸气灭菌的情况下，常压蒸气灭菌是一种常用的灭菌方法。
适用于明胶培养基、牛乳培养基、含糖培养基等。
这种方法可用阿诺氏流动蒸气灭菌器或普通蒸笼进行灭菌。
由于常压，其温度不超过100℃，仅能使大多数微生物被杀死，而芽孢细菌却不能在短时间内杀死，因此可采用间歇灭菌以杀死芽孢细菌，达到彻底灭菌的目的。
常压间歇灭菌是将灭菌培养基放入灭菌器内，每天加热100℃，30min，连续3d，第一天加热后，其中的营养体被杀死，将培养物取出放室温下18—24h，使其中的芽孢发育成营养体，第二天再加热100℃，30 min，发育的营养体又被杀死，但可能仍留有芽孢，故再重复一次，使彻底灭菌。
(3)煮沸消毒法：注射器和解剖器械等可用煮沸消毒法。
一般煮沸消毒时间为10-15 min，可以杀死细菌所有营养细胞和部分芽孢。
如延长煮沸时间，并在水中加入l％碳酸氢钠或2%-5%石炭酸，效果更好。
(4)超高温杀菌（UHTS）：是指在温度和时间标准分别为135-150℃和2-8s的条件下对牛乳或其他液态食品（如果汁及果汁饮料、豆乳、茶、酒及矿泉水等）进行处理的一种工艺，其最大优点是既能杀死产品中的微生物，又能较好地保持食品品质与营养价值。
说说消毒与灭菌的不同在日常生活和医疗卫生中，消毒和灭菌是两个常用的概念，它们都是为了杀灭细菌和病毒，保障人民的健康安全。
但是，很多人对它们的区别并不十分清楚，甚至混淆了它们。
本文将简单介绍消毒和灭菌的概念、目的和操作方法，帮助读者了解消毒和灭菌的不同之处。
概念消毒消毒是指通过使用能够杀灭细菌和病毒的物质或设备来减少或彻底消灭受污染物表面或物品表面上的病原体的过程。
消毒的目的是降低环境和物品表面上的细菌和病毒含量，以达到控制疾病传播的目的。
灭菌灭菌是指通过使用能够杀死所有微生物的物质或设备来消灭受污染物表面或物品表面上的所有细菌、病毒、真菌等微生物的过程。
灭菌的目的是彻底消灭病原体并防止其再次繁殖，保障人民的健康和安全。
目的消毒的目的消毒的目的主要是降低环境和物品表面上的病原体含量，以达到控制疾病传播的目的。
消毒常用于医疗卫生、饮食行业、公共交通、家庭卫生等领域。
消毒一般使用消毒液等消毒剂，或者进行高温消毒、紫外线消毒等方式进行。
灭菌的目的灭菌的目的是彻底消灭病原体，保障人民的健康和安全。
灭菌可以消灭表面上的所有微生物，并防止它们的再繁殖和传播。
灭菌一般使用高压蒸汽、化学灭菌剂等手段，也可以通过紫外线灭菌、电离辐射灭菌等手段。
操作方法消毒的操作方法消毒的操作方法很多种，主要包括使用消毒液进行消毒、进行高温消毒、紫外线消毒等。
消毒液常用的有漂白粉、酒精、过氧化氢等，具体使用方法需要按照产品说明书进行操作。
高温消毒一般使用蒸气灭菌器等设备，需要注意温度和时间的控制。
紫外线消毒一般需要使用专门的杀菌灯等设备，需要注意安全使用。
灭菌的操作方法灭菌的操作方法有高压蒸汽灭菌、化学灭菌剂灭菌、紫外线灭菌、电离辐射灭菌等多种方法。
高压蒸汽灭菌一般使用蒸汽灭菌器等设备，需要注意温度和时间的控制，同时还需要注意卫生操作。
化学灭菌剂灭菌需要根据使用说明进行操作，不同的化学灭菌剂有不同的使用方法，需要注意安全操作。
紫外线灭菌和电离辐射灭菌一般使用专门的设备，需要按照说明使用。
灭菌与消毒的原理与方法随着现代医学与生物科技的发展，灭菌与消毒的重要性越来越被人们所重视。
在医院、实验室、食品生产等领域，必须采取有效的灭菌与消毒措施，以杀死细菌、病毒和真菌等微生物，保障人们的健康与安全。
本文将简要介绍灭菌与消毒的原理、分类及常用方法。
一、灭菌与消毒的原理灭菌和消毒都是为了杀死细菌、病毒和真菌等微生物，防止传染病的发生。
灭菌是彻底杀灭所有微生物的过程，而消毒则是将病原菌的数量降低到安全水平的过程。
灭菌和消毒的原理是相似的，就是通过杀灭或去除微生物的细胞壁、膜、核酸或蛋白质等结构，破坏微生物的生命活动，从而防止其繁殖和传播。
常用的灭菌与消毒方法包括物理方法和化学方法。
二、灭菌与消毒的分类1. 物理消毒方法物理消毒方法主要是利用物理因素如高温、过滤、辐射和低温等，来杀灭或去除微生物。
高温消毒：通常采用干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌通常在160-180°下，使细菌死亡，但较耗时；而湿热灭菌则在蒸汽压力灭菌器中，在121°下灭菌。
这一方法较快，但不适用于某些材料。
过滤消毒：利用特定孔径的过滤膜过滤掉细菌、病毒和真菌。
这种方式可以过滤掉直径大于0.22微米的大部分微生物。
紫外线消毒：利用特定波长的紫外线光线杀灭细菌、病毒和真菌等微生物，是一种比较温和的消毒方法。
2. 化学消毒方法常用的化学消毒剂有氯化物、过氧化物、大环内酯和醇等。
这些化学消毒剂可以杀灭微生物，有效防止病菌的传播，但存在使用安全性和副作用的问题，需要根据实际情况谨慎选择。
三、灭菌与消毒的方法1. 食品灭菌与消毒食品灭菌与消毒主要是为了杀灭或去除食品中的致病微生物，以保证食品的安全和卫生。
高温消毒是常用的灭菌方法。
对于具有抗热性的细菌和孢子，需要高温灭菌。
而利用紫外线消毒和化学消毒剂消毒并不常用于食品。
2. 医疗器械消毒医疗器械的灭菌和消毒具有重要意义，不仅可以防止交叉感染，同时还能保护医护人员和患者的健康。
消毒和灭菌是两个概念。
灭菌(Sterilization)、除菌(Disinfection)和消毒(Sanitization)这三个经常被误用的词必须加以区别。
灭菌和除菌是绝对化的术语。
灭菌是指杀灭或不活化所有生命形式；除菌则是破坏或不活化致病微生物的传染，但在应用于细菌孢子时{往无效。
灭菌法是对无菌制剂等的生产过程中的灭菌，常用的方法有：湿热灭菌法，可用无菌保证值SAL(Sterility Assurance Level)采表示效果；干热灭菌法；除菌滤过法；辐射灭菌法；环氧乙烷灭菌法。
监测灭菌效果往往使用生物指示剂——一种标准的对灭菌条件稳定的微生物。
而消毒可以说是减少微生物数量，使之达到安全或相对安全的水平，而与使用规定和使用目的相
符合。
抗微生物剂是一种用来抑制微生物繁殖或消灭微生物的试剂的总称，它包括：
(1)消毒剂能消除以细胞繁殖形态出现的微生物污染的化学试剂；
(2)灭菌剂杀灭在无生命环境内的所有微生物生命形态的化学试剂；
(3)除菌剂用来消灭在无生命物体上的病原体的抗菌剂；
(4)杀菌剂可按具体作用分类：杀细菌的称为杀细菌剂；杀霉菌的则称之为杀霉菌剂；杀病毒的则称为杀病毒剂；杀孢子的则称之为杀孢子剂；
(5)抑菌剂仅是抑制微生物生长的化学试剂。
因此灭菌和消毒是不可互换的术语，消毒剂在定义上也并不意味着是灭菌剂。
消毒是消灭采自繁殖形态的细胞的活微生物的污染，但它不保证灭菌。
(二)消毒剂的选择和配制
l．消毒剂的选择
在选择一种消毒剂时，首先要了解消毒剂的性质，但同时又应认识到没有一种消毒剂是完全理想的。
细菌学家建议理想的消毒剂应该具备以下特征：
①能广谱地杀灭微生物；
②对人体无毒；
③无腐蚀性，对设备无污染；
④具有洗涤剂作用；
⑤具有稳定性；
⑥作用迅速；
⑦不因有机物的存在而失去活性；
⑧产生所期望的后效作用；
⑨廉价。
各种试剂都有优点和局限性，应选择一种试剂或几种试剂结合使用，以最低成本获得最大效果。
2．无菌室常用消毒剂的配制
无菌室所使用的消毒剂应在净化工作台上配制，需过滤的应准备好已灭菌(122.l℃，45min)的滤膜及容器。
过滤好的消毒剂应在盛放瓶上注明消毒剂的名称、批号、配制日期及失效期，放在无菌室中。
(1)75％酒精(Alcohol)溶液(体积分数)的配制
先用定性滤纸过滤95％的乙醇溶液，再将冷却的注射用水加到滤过的乙醇溶液中充分混合，直到酒精比重计读数为75％。
将配制好的溶液用0.22μm 混合纤维素酯微孔过滤膜过滤后，放人已灭菌的瓶中待用。
此溶液须在48h 内使用。
酒精渗入细菌体内使细菌蛋白质凝固.而杀死它.75%最好.高了不能达到杀菌目的.当高浓度酒精与细菌接触后.能使其表面凝固.行成包
膜.阻碍了酒精凝固其内部的.没能彻底杀死.75%能凝固蛋白质.但不会行成包膜.能杀死.浓度低了也不行的..
(2)0.1％(体积分数)新洁尔灭(Dodecyl Dimethyl Benzylammonium Bromide，DD － BB)溶液的配制
在49ml 的注射用水中加入lml 的5％新洁尔灭溶液并搅拌均匀，将配制好的溶液用0.22μm 混合纤维素酯微孔过滤膜过滤后放人已灭菌的瓶中待用。
此溶液须在48h 内使用。
(3)Exspor 溶液的配制
按注射用水：E×spor 基质浓缩剂：Exspor 活性浓缩剂为4：1：l (体积比)的比例混合并搅拌均匀。
注意此消毒剂须放在非金属容器中配制，注射用水温度应小于20℃。
将配制好的溶液用0.22μm 混合纤维素酯微孔过滤膜过滤后放人已灭菌的瓶中待用。
此溶液须在 72h 内使用。
(4)l％(体积分数)Germ Warfare 灭菌溶液的配制
在990ml 注射用水中加入l0ml Germ Warfare 溶液并搅拌均匀。
将配制好的溶液用 0.22μm 混合纤维素酯微孔过滤膜过滤后放人已灭菌的瓶中待用。
此溶液须在72h 内使用。
(5)5％(质量分数)麝香草酚(Thymol)溶液的配制
在95g 的50％乙醇溶液中加入5g 麝香草酚并搅拌均匀。
此溶液不必过滤，但须在24h内使用。
此消毒剂主要用来杀霉菌。
(6)2％(质量分数)戊二醛(Glutaric Dialdehyde)溶液的配制
在250g 的20％戊二醛溶液中加入注射用水至2 500g，再加入1.3g 缓冲剂并搅拌均匀。
此溶液不必过滤，但须在24h 内使用。
(三)主要消毒和灭菌方法
1．干热法
是在干燥空气中加热处理的方法，基于高热作用下的氧化作用破坏微生物的原理，一般需要的温度高达160℃以上，时间长达l～2h。
2．湿热法
是用高温湿蒸汽(通常为饱和蒸汽)的灭菌方法，基于湿热作用下使细菌细胞内蛋白质凝固的原理，一般需要的温度比干热法低，时间也短，例如121℃、12min 或134℃、2min。
3．药物法
是用某种气体或药剂进行熏蒸或擦洗，其效果与药物种类及细菌对其敏感程度有关。
一些药物对一些材料有吸附侵蚀作用。
例如常用的氧化乙烯，是一种很好的灭菌剂，虽不能浸透固体，但可被塑料、橡皮之类吸收，这就需要根据洁净室的使用对象选用合适的材料。
但不要长期使用一种消毒剂，应定期更换，以防止耐药菌株的产生。
4．电磁辐射法
基于破坏细菌的蛋白质、核酸(脱氧核糖核酸，即DNA)以及被吸收后的热效应等原理。
紫外线灭菌就是这种灭菌方法之一。
5．紫外线消毒
在其他消毒方法未使用之前，是一个不可代替的必备的消毒方法，为药品生产企业普遍采用，主要用在洁净工作台、层流罩、物流传递窗、风淋室乃至整个洁净房间的消毒。
紫外灯的杀菌力取决于紫外线的波长，短波具有杀菌力，长波可能对人体有害，所以它的使用受到限制。
紫外线波长为136～390nm，消毒用的紫外灯应限制在短波的波长范围内，以253.7nm的杀菌力最强，但由于制造厂测定波长比较困难，故发展不快。
据国外最新研究表明，紫外线灭菌仍有广阔的前景，具有安装方便、无耐药菌株产生等特点，关键是解决短波的测定问题。
还有一种方法是采用气相循环消毒灭菌。
如果能让空气有组织地循环流过紫外灯的有效照射区，既增加了紫外线对空气的照射时间，而又设法不让紫外线外泄伤人，并且不产生臭氧，因此紫外线对于空气的消毒作用就大大提高了。
6．臭氧消毒
臭氧(O3)的消毒原理是：臭氧在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧 (O2)和单个氧原子(O)，后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，可氧化分解细菌内部氧化葡萄糖所必需的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。
多余的氧原子则会自行重新结合成为普遍氧分子(O2)，不存在任何有害残留物，故称无污染消毒剂。
臭氧不但对各种细菌(包括肝炎病毒、大肠杆菌、绿脓杆菌及杂菌)有极强的杀灭能力，而且对杀死霉菌也很有效。
生产臭氧的原料主要是空气和电能，一般通过高频臭氧发生器(电子消毒器)来获得。
消毒时直接将臭氧发生器置于房间中即可。
空气中使用臭氧消毒的浓度很低，只有百万分之几，可根据房间体积及臭氧发生器的臭氧产量来计算得到。
7．气体消毒
对环境空气灭菌的传统做法是采用某种消毒液，在一定条件下让其蒸发产生气体来熏蒸。
常用消毒液有甲醛、环氧乙烷、过氧乙酸、石炭酸和乳酸的混合液等。
8．消毒剂消毒
洁净室的墙面、天花板、门、窗、机器设备、仪器、操作台、车、桌、椅等表面以及人体双手(手套)，在环境验证及日常生产时应定期清洁并用消毒剂喷洒。
常见的消毒剂有异丙醇(75％)、乙醇(75％)、戊二醛、洁尔灭等。
我国药厂无菌室消毒传统的方法是用甲醛熏蒸。
国外因认为甲醛对人体有一定的危害，现普遍采用戊二醛(Glutaraldehyde)喷洒，其方法是将戊二醛放在带有时间控制的自动喷雾器中，在下班后或周末，无菌室内无人时自动喷洒，其喷洒量可以调节，时间可以设定，在喷洒期间空调系统应停止工作。
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