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![超高压提取黄芪甲苷工艺研究_陈瑞战[1]](https://img.taocdn.com/s1/m/940cf253804d2b160b4ec034.png)
第39卷第12期2020年12月分析测试学报FENXI CESHI XUEBAO( Journal of Instrumental Analysis)Vol. 39 No. 12 1487-1493d o i: 10.3969/j.issn.1004 -4957. 2020.12. 008黄芪药材提取纯化过程中黄芪皂苷IV含量变化及相关成分分析陈超，吴惠勤*，黄晓兰，黄芳，刘梦云(广东省科学院广东省测试分析研究所（中国广州分析测试中心）广东省中药质量安全工程技术研究中心，广东广州510070)摘要：该文建立了准确测定黄芪药材中游离黄芪皂苷W含量的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC- MS/MS)法，并研究了2015年版《中国药典》黄芪项下黄芪皂苷W(黄芪甲苷)含量测定前处理操作对黄芪皂苷W含量的影响。
分别比较索氏提取后、正丁醇萃取后和氨试液除杂后黄芪皂苷W的含量变化，并利用具有超高分辨率的傅里叶变换离子回旋共振质谱仪（FT- ICR- MS)分析其成分的差异性。
结果表明，在优化条件下，黄芪药材中黄芪皂苷汉在0.387 0-24. 75 mg/L范围内呈良好的线性关系，相关系数（）为0.999 8,检出限（LOD)为1.0mg/kg，定量下限（LOQ)为3.0mg/k g，力口标回收率为94.5%~105%，相对标准偏差（RSD，™ =6)为1.4%。
研究发现甲醇直接提取的黄芪皂苷I相对含量最高，正丁醇萃取后的氨试液除杂过程会导致黄芪皂苷I及其他黄芪皂苷W同系物水解，黄芪皂苷I的相对含量显著降低，而黄芪皂苷W的含量显著升高；并发现黄芪药材中存在目前尚未报道的黄芪皂苷n异构体，将其命名为新黄芪皂苷n。
关键词：黄芪；游离黄芪皂苷含量变化；新黄芪皂苷n;超高效液相色谱-串联质谱中图分类号：O657.7; R284 文献标识码：A文章编号：1004 -4957(2020)12 -1487 -07Analysis of Content Variation of Astra/aloside W and Related ChemicalComponents During the Extraction and Purification of Astragali RadixC H E N C h a o，W U H u i-q in*，H U A N G X ia o-la n，H U A N G F a n g，L IU M eng-yun(Guangdong Engineering and Technology Research Center for Quality and Safety of Traditional Chinese Medicine，GuangdongInstitute of Analysis(China National Analytical Center Guangzhou)，Guangdong Academy ofSciences，Guangzhou510070，China)A b s t r a c t:A valida ted a n a lytic a l m ethod was developed fo r the d e term in ation o f free astragaloside Win A stra g a li R a dix by u ltra-h ig h perform ance liq u id chrom atography- tandem mass spectrom etry(U P-LC - MS/M S).E ffects o f each step o f pretreatm ent w ere studied on the de term in ation o W in Chinese pharm acopoeia(2015) (C h P).F u rth e rm o re，im pacts o f n-b u ta n o l e xtractio n and amm onia im p u rity rem oval on the de term in ation and content va ria tio n o f astragaloside W were in te d.The differences o f com ponents caused by pretreatm ent were analyzed by F o u rie r trac lo tro n resonance mass s pectrom etry(F T- IC R- M S).R esults showed that there was a good lin e a rre la tio n sh ip o f the proposed m ethod fo r astragaloside W in the range o f0.387 0 -24. 75 ma co rre la tio n c o e ffic ie n t r)o f0.999 8.The lim it o f detection(L O D)and lim it o f q u a n tita tio n(L O Q)were 1.0 m g/k g and 3.0 mg/k g，re sp e ctive ly.The recoveries at three spiked levels ranged from94. 5% to 105%，w ith a re la tive standard d e v ia tio n(R S D，^ = 6)o f1.4% .The re la tive content o fastragaloside I was the highest when A stra g a li R a d ix was d ire c tly extracted w ith m etha no l.p u rity rem oval process w ith am m onia after n-b u ta n o l extractio n le d to the hom ologues tu galoside W by h y d ro ly s is，w h ic h s ig n ific a n tly increased the content o f astragaloside W.M o re o ve r，itwas fou nd th a t there exists a new isom er o f astragaloside n，nam ed as neoastragaloside n in A stragal i R a d ix.Key words：A stra g a li R a d ix；free astragaloside W;content ch a n g e;neoastragaloside n ;u ltra-收稿日期：2020-06 -22;修回日期：2020-07 -14*通讯作者：吴惠勤，研究员，研究方向：质谱分析应用，E-mail:138****9756@139.o m1488分析测试学报第39卷h ig h perform ance liq u id chrom atography- tandem mass spectrom etry黄苗为見科植物蒙古黄 Y AVragaZiw(F is c h. )Bge.var.(Bge. )H siao 或膜荚黄苗也^§"〇^«應7716「£1疆；6«_15化8<：；11.)886.的干燥根[1]。
黄芪有效部位不同提取分离方法的比较于海瑶;肖秋生;洪建飞;王艳萍;陈正爱;刘莹;王贺雷;郭玉香【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2008(26)1【摘要】目的:对3种粒径的黄芪,采用4种不同的方法提取黄芪多糖及黄芪总皂苷,优选最佳粒径和提取方法.方法:对超微粉、200目细粉、饮片3种粒径的黄芪,分别采用水醇双提法、纤维素酶法、氧化钙溶液法、超声波法进行提取,用超滤法与D21大孔吸附树脂法进行分离,分别比较黄芪多糖及黄芪总皂苷的得率.结果:黄芪超微粉用超声波法提取黄芪多糖得率最高,达到1.73%;采用黄芪饮片用超声波法提取黄芪总皂苷得率最高,达到1.82%.结论:超声波提取方法对提取黄芪多糖和黄芪总皂苷的得率较其它方法都有较大的提高.黄芪的粒径越小对黄芪多糖提取得率越高,但对黄芪总皂苷的提取,随粒径减小而得率减少.【总页数】4页(P20-22,47)【作者】于海瑶;肖秋生;洪建飞;王艳萍;陈正爱;刘莹;王贺雷;郭玉香【作者单位】延边大学基础医学院,吉林,延吉,133000;中国人民解放军第208医院,吉林,长春,130062;中国人民解放军第208医院,吉林,长春,130062;中国人民解放军第208医院,吉林,长春,130062;延边大学基础医学院,吉林,延吉,133000;延边大学基础医学院,吉林,延吉,133000;吉林大学第一医院,吉林,长春,130021;吉林省人民医院,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R284【相关文献】1.从三七根、茎中快速批量分离提取三七皂苷R1、R2及人参皂苷Rg1有效部位群的方法 [J], 周家明;马妮;曾鸿超;张文斌;曾江;崔秀明2.蜜炙黄芪黄酮与皂苷有效部位的提取分离及对NO分泌水平的影响 [J], 廖婧竹;黄晶;刘武平;廖双叶;陈宏远;芮雯;3.比较不同画线方法与不同形状的滤纸条对实验效果的影响——绿叶中色素的提取与分离实验的探究与改进 [J], 钟燕4.不同方法提取黄芪中黄芪多糖的比较 [J], 张先海;史丽岩;史景明5.蜜炙黄芪黄酮与皂苷有效部位的提取分离及对NO分泌水平的影响 [J], 廖婧竹;黄晶;刘武平;廖双叶;陈宏远;芮雯因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
黄芪多糖微波辅助提取工艺优化摘要：对黄芪多糖进行微波辅助提取，采用单因素试验及正交试验优化提取工艺，探讨料水质量比、微波功率、微波处理时间、ph 对黄芪多糖提取率的影响。
结果表明，微波辅助提取黄芪多糖的最佳工艺条件是料水质量比1∶15、微波功率450 w、微波处理时间90 s、ph 8.5。
关键词：微波辅助提取工艺；膜荚黄芪[astragalus membranaceus （fisch.）bunge]多糖；单因素试验；正交试验中图分类号：r284.2 文献标识码：a 文章编号：0439-8114（2013）08-1896-03黄芪是豆科黄芪属植物，是一种多年生深根性草本药用植物，以根入药，具有补气升阳、益胃固表、利水消肿等功效，是中国传统的补益药。
现代药理学研究表明，黄芪含皂苷、黄酮、多糖及氨基酸等多种化学成分。
其中多糖是黄芪的主要生物活性成分，具有增强机体免疫功能、强心降压、降血糖、抗应激、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射、抗氧化等多种药理功效[1-3]。
微波提取技术是利用微波能来提高提取率的一种新技术，与常规方法相比，微波提取具有选择性高、快速高效、溶剂消耗小、活性成分得率高、不产生噪音、适合热不稳定物质等特点[4]。
研究采用微波辅助提取黄芪多糖，确定最佳的提取工艺条件，以期提高黄芪多糖的提取率，缩短提取时间，提高效率。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 原料与试剂黄芪购于黄冈市药材市场，由黄冈职业技术学院生物技术制药教研室鉴定为膜荚黄芪[astragalus membranaceus（fisch.）bunge]的干燥根。
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1.1.2 仪器与设备 wd800型galanz微波炉购自格兰仕电器公司，uv-160a紫外可见分光光度计购自日本岛津公司，re52cs真空旋转蒸发仪购自上海荣生仪器厂，shb-ⅲ循环水式多用真空泵购自郑州长城科工贸有限公司，中药万能粉碎机购自江阴市伟翔药化机械厂。
浙江大学远程教育学院专科毕业作业题目含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的概述专业学习中心姓名学号指导教师年月日目录1黄芪的简介 (1)2 黄芪中皂苷类化合物的介绍 (1)2.1 黄芪类化合物的化学成分 (1)2.2 黄芪中皂苷类化合物化学结构 (2)3 含黄芪制剂的种类和特点 (3)4 HPLC法测定含黄芪制剂皂苷类成分的研究动态 (3)4.1 含黄芪制剂HPLC样品制备方法 (3)4.2 HPLC法测定黄芪制剂皂苷化合物的内容及技术难点 (4)4.3 HPLC法测定黄芪制剂的应用实例 (5)5 小结与展望 (5)参考文献 (5)含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的概述【摘要】目的：综述近年来含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的研究动态，为今后在黄芪制剂此类成分的检测和质量标准的制定提供参考性建议。
方法：通过对近几年国内外相关文献资料的分类、整理、分析、对比，总结了黄芪制剂的皂苷的结构组成，黄芪制剂的结构特点，HPLC法测定的技术进展等。
结果：随着HPLC软件和硬件设施的不断更新，相关技术和理论的不断完善，越来越多的含黄芪制剂皂苷类化合物可以运用HPLC法检测，而且此方法具有高效、简便、准确的特点。
结论：HPLC法可用于黄芪制剂中皂苷类化合物的检测，且有着很好的应用实践价值。
【关键词】黄芪；皂苷；高效液相色谱；检测方法黄芪是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，黄芪有很强的药用价值，为多版中国药典收录的上乘补气药材。
黄芪主要含有皂苷、多糖、黄酮三类主要的化学成分，其中皂苷类化合物是发挥药效的主要成分[1]。
目前随着中药提取分离技术的不断革新，越来越多的黄芪类提取物被赋予现代化的制剂剂型。
但是黄芪复杂的组成成分和结构给黄芪制剂的质量控制、化学成分分析及含量测定带来了一定的难度[2]。
随着分析检测技术的日趋完善，运用HPLC法检测黄芪制剂中的皂苷类化合物已成为研究的热点，已有多数相关的研究报道表明HPLC法可以用于黄芪中皂苷成分的测定，并且具有准确度高、操作简便、效率更高的特点。
不同提取方法对黄芪总皂苷含量的影响张军武;赵琦【摘要】Objective: To select the best extraction process of total saponin in HuangQi (Radix Astragali). Method: The contents of astragaloside IV, extracted with ethanol reflux method as well as water extraction and alcohol precipitation method, were detected by HPLC-ELSD by taking astragaloside IV as an index. Result: The content of astragaloside IV extracted by ethanol reflux method was 40% higher than that got by water extraction and alcohol precipitation method. Conclusion: All the results suggested that ethanol reflux method could be taken as an extraction method of total saponin from HuangQi (Radix Astragali) in a large scale production.%目的优选黄芪总皂苷的提取方法.方法采用平行试验法,以黄芪甲苷为指标,测定用HPLC-ELSD 法测试乙醇回流法和水提醇沉法提取的总皂苷中黄芪甲苷的含量.结果乙醇回流法比水提醇沉法提取的总皂苷中黄芪甲苷含量高出约40%.结论乙醇回流法较水提醇沉法提取率高,是黄芪总皂苷的最佳提取工艺.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2012(025)004【总页数】2页(P26-27)【关键词】黄芪;总皂苷;乙醇回流法;水提醇沉法【作者】张军武;赵琦【作者单位】陕西中医学院,陕西咸阳712046;咸阳市卫生学校【正文语种】中文【中图分类】R282.5黄芪为常用的“补气”药，中医认为黄芪有补气升阳、利水消肿、益气固表之功效［1］。
法难以获得理想的染色体观测效果。
本试验材料为组培苗，其根系柔软、肥壮且易于取材和压片观察，同时与其他细胞分裂旺盛的组织或器官相比，根尖分生区细胞分裂更旺盛、细胞壁也较薄[5]。
通过筛选预处理、解离和染色环节的条件，得出了一套适合大理长叶兰制片的体系。
最佳预处理方案为：0.005mol/L 的8-羟基喹啉溶液处理试验材料6h ；最佳的解离方案为：37%HCl ∶45%冰醋酸=1∶1的解离液解离5min ；最佳的染色方案为：卡宝品红染色15min+复染5min 。
在制片的染色环节，如果染色的时间过长，染液易干燥沉淀，在镜检时细胞中会出现杂质，干扰染色体数目的统计。
采用卡宝品红染色15min ，压片后复染5min ，此法有效避免了因染色时间过长而产生杂质干扰，也可以排除在压片过程中产生的气泡，得到材料的细胞质、细胞壁与染色体着色效果对比较明显，易于观测。
一般认为，如果材料的染色体小且数目多，则需要至少统计30个细胞，而且只有当所统计的所有细胞材料中有85%以上的细胞具有相同的染色体数目时，才能确定该植物的染色体数目[6]。
试验共统计40个长叶兰根尖细胞的染色体，符合染色体数目统计的要求。
邓樱等[7]对“素心黄”兰花的染色体数目进行了分析，表明其染色体数目是2n=2x=40；费昭雪等[8]对2个中国兰花类群春兰（）和蕙兰（）进行了染色体数目的统计，染色体数目均为2n=2x=40。
本研究中大理长叶兰染色体数目与上述研究结果相同。
试验发现，即使是同科同属的近缘种之间，染色体的压片技术也有很大的差别，所以对植物细胞染色体制片技术的研究和优化，不能一味地借鉴，对于植物细胞染色体制片技术的研究，值得人们投入更多的关注和进行更多的探讨。
（收稿：2022-10-28）参考文献：[1]中国植物志编委会.中国植物志[M].北京:科学出版社,1999,18:201.[2]张嘎,李林凤,娜仁图娜拉,等.染色体分析技术及其意义[J].中国组织工程研究与临床康复,2009,13(46):9179-9182.[3]张迪,朱根发,叶庆生,等.50份蝴蝶兰种质的染色体数目与倍性分析[J].热带作物学报,2013,34(10):1871-1876.[4]李国珍.染色体及其研究方法[M].北京:科学出版社,1981.[5]丁鸿,邱东萍,陈少雄.植物染色体标本的制备和染色体核型分析研究进展[J].南方农业学报,2012,43(12):1958-1962.[6]刘永安,冯海生,陈志国,等.植物染色体核型分析常用方法概述[J].贵州农业科学,2006,34(1):98-102.[7]邓樱,周晔,陈继敏.秋水仙素诱导兰属‘素心黄’多倍体的方法研究[J].亚热带植物科学,2008(2):38-40.[8]费昭雪,雷珊,崔苗苗,等.秦岭野生春兰和蕙兰染色体核型分析[J].林业科技通讯,2020,(5):24-27.黄芪的分布及主要化学成分检测方法研究进展孙秀菊1，刘鑫1*，何建东1，王建军1，郭琳2，李剑宇3，田荣伟2，黄国艳3（1包头市农畜产品质量安全中心，内蒙古包头014000；2包头市农牧科学技术研究所，内蒙古包头014000；3包头市农村牧区经营管理和信息服务中心，内蒙古包头014000）摘要：通过全面查阅和梳理近几年相关文献，对黄芪的分布情况及黄芪主要化学成分的检测方法进行综述，为今后进一步研究和开发利用黄芪提供技术参考。
