人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的光声光谱解析
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X射线照射鼻咽癌CNE1细胞后MRE11蛋白表达的初步研究的开题报告题目:X射线照射鼻咽癌CNE1细胞后MRE11蛋白表达的初步研究摘要:本研究旨在探究X射线对鼻咽癌CNE1细胞MRE11蛋白表达的影响。
通过设置不同剂量的X射线照射CNE1细胞,使用Western blot 法检测MRE11蛋白表达水平,并进一步探究其对CNE1细胞的影响机制。
结果表明,X射线照射CNE1细胞可导致MRE11蛋白表达水平下降,并且随着剂量的增加而增加。
此外,进一步实验结果显示,MRE11蛋白在DNA损伤修复中起着重要作用,同时与放射线密切相关。
本研究对于深入理解X射线辐射对人类健康的影响,并为临床治疗提供有意义的理论和实践指导。
关键词:鼻咽癌,CNE1细胞,MRE11蛋白,X射线,DNA损伤修复正文:1. 研究背景鼻咽癌是一种常见的癌症,其发病率在世界各地均较为高。
X射线是目前治疗鼻咽癌的一种有效手段,但其辐射对人类身体的影响仍需进一步研究。
MRE11蛋白是重要的DNA双链断裂修复分子,其在放射线诱导的DNA损伤修复中起关键作用。
2. 研究目的本研究旨在探究X射线对鼻咽癌CNE1细胞MRE11蛋白表达的影响,并深入探究MRE11蛋白在DNA修复中的作用。
3. 研究方法通过设定不同剂量的X射线照射CNE1细胞,使用Western blot法检测MRE11蛋白表达水平。
并通过细胞实验进一步验证MRE11蛋白在DNA损伤修复中的作用。
4. 研究预期结果预期结果表明,X射线照射CNE1细胞可导致MRE11蛋白表达水平下降,并且随着剂量的增加而增加。
进一步实验将展示MRE11蛋白在DNA损伤修复中的作用。
5. 研究意义本研究可为探究X射线辐射对人类健康的影响提供有意义的理论依据并为临床治疗提供实践指导。
同时,本研究对于深入探索DNA双链断裂修复的机制也具有重要意义。
汉防己甲素对人鼻咽癌CNE1和CNE2细胞株的放疗增敏作用王君;常利红;李霞;陈贤珍;吴喜福;王志远;黄子真;黄健聪;张革化【摘要】AIM:To investigate the mechanism of the radiosensitizing effect of maximum non-cytotoxic doses of tetrandrine (Tet) on nasopharyngeal carcinoma cell lines CNE1 and CNE2.METHODS:The cells were treated with maximum non-cytotoxic doses of Tet (for CNE1 cells at 1.5 μmol/L and for CNE2 cells at 1.8 μmol/L),irradiation at 4 Gy,or combination of irradiation and maximum non-cytotoxic doses of Tet.The cell cycle distribution was analyzed by flow cytometry.The protein levels of γ-H2AX,cleaved caspase-3,p-CDC25C,CDK1,p-CDK1,cyclin B1,ERK and p-ERK were determined by Western blot.RESULTS:The expression of γ-H2AX was increased in CNE1 cells and CNE2 cells after combined treatment with irradiation and maximum non-cytotoxic doses of Tet.The percentages of CNE1 cells and CNE2 cells at G2/M phase in irradiation group were (18.09 ±0.42)% and (18.48 ± 1.32)%,respectively,which were decreased to (15.88 ± 1.04) % and (13.80 ± 0.82) % in combined treatment group,respectively (P <0.05).Combined treatment enhanced the increase in the protein level of cleaved caspase-3 caused by irradiation.The protein levels of pCDC25C and p-CDK1 were increased in a dose-dependent manner by Tet treatment (P < 0.05),while the expression of CDK1 showed no difference among different doses of Tet treatments.The protein levels of p-CDC25C,p-CDK1 and CDK1 showed no difference after the treatment with maximum non-cytotoxic doses of Tet.The combined treatment with irradiation and the maximum non-cytotoxic doses of Tet decreased the protein levels of p-CDC25C and p-CDK1 (P <0.05),increased the expression of cyclin B1,and had no influence on the expression of CDK1 ( P <0.05).The combined treatment resulted in an increase in the protein level of p-ERK1 (P <0.05).CONCLUSION:The maximum non-cytotoxic doses of Tet enhance the DNA damage and apoptosis in CNE1 cells and CNE2 cells caused by irradiation,and the mechanism might be associated with ending of G2/M arrest via activation of ERK/CDC25C/CDK1/cyclin B1 pathways.%目的:探讨最大非毒性剂量汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放疗增敏机制.方法:分别采用最大非毒性剂量Tet(对CNE1细胞为1.5 μmol/L;对CNE2细胞为1.8 μmol/L)、4Gy放疗和最大非毒性剂量Tet联合放疗处理CNE1和CNE2细胞;流式细胞术检测各组细胞周期分布,Western blot检测各组细胞γ-H2AX、cleaved caspase-3、p-CDC25C、CDK1、p-CDK1、cyclin B1、ERK 和p-ERK的蛋白水平.结果:最大非毒性剂量Tet联合放疗后可上调CNE1和CNE2细胞中γ-H2AX的表达.放疗组CNE1和CNE2细胞G2/M期的比例分别为(18.09±0.42)%和(18.48±1.32)%,联合处理组CNE1和CNE2细胞G2/M期的比例降为(15.88±1.04)%和(13.80±0.82)%,与放疗组比较差异有统计学意义(P<0.05).联合处理可增加放疗所致的cleavedcaspase-3的蛋白水平(P<0.05).不同浓度Tet处理CNE1和CNE2细胞后,p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平随Tet浓度增加而升高(P<0.05),CDK1的表达无明显改变;最大非毒性剂量Tet不影响p-CDC25C、p-CDK1和CDK1的蛋白水平.在CNE1和CNE2细胞中,联合处理可明显降低放疗引起的p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平(P<0.05),上调放疗后cyclin B1的表达,而对总CDK1的表达无明显调节作用;联合处理可显著抑制放疗所致的p-ERK蛋白水平(P<0.05).结论:最大非毒性剂量Tet可以增加放疗引起的CNE1和CNE2细胞的DNA断裂及细胞凋亡,其放疗增敏的机制可能与Tet调控ERK/CDC25 C/CDK1/cyclin B1通路、去除放疗导致的GJM期阻滞有关.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2017(033)009【总页数】8页(P1611-1618)【关键词】汉防己甲素;鼻咽癌;G2/M期阻滞;ERK/CDC25C/CDK1/cyclin B1通路【作者】王君;常利红;李霞;陈贤珍;吴喜福;王志远;黄子真;黄健聪;张革化【作者单位】中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广东广州510630;中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广东广州510630;中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广东广州510630;中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广东广州510630;中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广东广州510630;中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广东广州510630;中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广东广州510630;中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广东广州510630;中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广东广州510630【正文语种】中文【中图分类】R762;R965;R730.23鼻咽癌是我国华南地区常见的恶性肿瘤之一,在中国南方地区头颈部恶性肿瘤中占首位,其在中国南方发病率已达(15~40)/10万人次[1],其中,广东省男性发病率达30/10万人次,女性达13/10万人次[2]。
鼻咽癌细胞系CNE1和CNE2Z中EBV-LMP1的表达唐泽立;陈小毅;陈燕【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2008(016)004【摘要】目的:探讨人高分化鼻咽癌细胞系CNE1和人低分化鼻咽癌细胞系CNE2Z中EB病毒编码的LMP 1基因表达情况.方法:用免疫组化法及Western bolt法分别检测鼻咽癌细胞系CNE1和CNE2Z中LMP 1基因的表达情况.结果:免疫组化及Western bolt 法均显示,CNE2Z细胞中LMP 1呈强阳性表达,而CNE1细胞中LMP 1呈阴性表达.结论:人高分化鼻咽癌细胞系CNE1中没有LMP 1的表达而人低分化鼻咽癌细胞系CNE2Z中LMP 1呈阳性表达,鼻咽癌的恶性程度可能与LMP 1的表达有关.【总页数】2页(P525-526)【作者】唐泽立;陈小毅;陈燕【作者单位】广东医学院病理学教研室,广东,湛江,524203;广东医学院病理学教研室,广东,湛江,524203;广东医学院病理学教研室,广东,湛江,524203【正文语种】中文【中图分类】R73-3;R739.63【相关文献】1.EBV-LMP1对鼻咽癌细胞系CNE1细胞转移相关因素的影响 [J],2.EBV-LMP1对鼻咽癌细胞系CNE1细胞凋亡的影响 [J], 陈燕;陈小毅3.PDTC和顺铂对人鼻咽癌细胞株CNE1、CNE-GL、CNE2Z的联合作用 [J], 李蓉;黎小兵;李明勇;陈锦;黄培春4.PDTC和5-氟尿嘧啶对人鼻咽癌细胞株CNE1、CNE - GL、CNE2Z的联合作用[J], 林春燕;黎小兵;李明勇;李蓉5.下调整合素连接激酶表达抑制鼻咽癌细胞系CNE1和5-8f的增殖 [J], 梁秀妮;赵丹芸;吴平安;曾敬贤因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
单个鼻咽癌细胞的拉曼光谱分析的研究摘要利用激光镊子拉曼光谱系统研究了鼻咽癌细胞株和正常人鼻咽部气道上皮细胞株的单个细胞的拉曼光谱,对于每个细胞在不同部位测3个点。
结果显示:正常细胞和癌细胞的平均拉曼光谱有显着差异:正常的细胞光谱强度比癌细胞的明显要高;正常细胞的1 304和l 336 cⅡ厂1处峰的强度比值为1.05,癌细胞的为1.22。
用PCA主成分分析和DFA判别分析分别对单个细胞的平均光谱和不同位置所取得的单独光谱进行分析,结果发现;PcA和Ⅸ、A均可以把癌细胞和正常细胞正确区分.对于单独光谱,DFA的效果更好一些。
同时还发现同—个细胞中不同的光谱位置对PcA和DFA的区分度影响不是很大;PcA和DFA的图中还表明癌细胞的均匀度要比正常细胞的差。
以上的研究均表明:激光镊子拉曼光谱可以成为区别正常鼻咽细胞和鼻咽癌细胞的有效手段。
关键词拉曼光谱;鼻咽癌;光镊;主成分分析;判别分析引言拉曼光谱是一种分析分子结构的有用工具,拉曼光谱特征峰位置、强度和线宽可提供分子振动、转动方面的信息,据此可以反映出分子中不同的化学键或官能团,因此拉曼光谱成为研究物质分子结构的有效手段。
拉曼光谱作为一种分析方法有其显着的优势,它能提供快速、无损的检测,并且给出高专一性的光谱信息,从而可以进行多成分分析。
此外.拉曼光谱不需对样品进行特别的处理,使得在线分析和实地检测成为可能。
显微拉曼光谱技术对于探测大细胞内物质是一种有用手段,但对不少受布朗运动影响或会游动的细胞或生物大分子就无能为力了。
为此我们引入了激光镊子拉曼光谱技术.激光光镊拉曼光谱技术是将光学囚禁技术与显徽拉曼光谱技术相结合用于单细胞探测的新技术。
司.它用同一束光来囚禁细胞和激发细胞的拉曼光谱。
鼻咽癌是东南亚国家和我国南方地区常见的恶性肿瘤,尽管目前肿瘤诊断技术(内窥镜技术、影像技术和肿瘤标志物检验技术等)发展迅速,但主要还是依赖于形态学的诊断,组织活检(踟psy)的方法来确定肿瘤的性质,分化程度等。
TPM1在鼻咽癌中的表达及其临床意义王亮;林建立【摘要】目的:观察TPM1基因的表达与鼻咽癌(NPC)的关系。
方法采用实时定量rt-PCR技术检测TPM1基因在NPC细胞株(CNE1、CNE2、58F)和鼻咽上皮细胞株(NP69)中的表达;采用组织芯片技术通过免疫组化检测TPM1在124例恶性鼻咽癌肿瘤、31例对应的癌旁正常组织和12例正常鼻咽黏膜组织的表达。
结果 TPM1 mRNA在NP69中表达水平较高,而在NPC细胞株中表达水平显著下降。
正常鼻咽黏膜及癌旁组织中TPM1蛋白染色阳性表达率约为65.1%(28/43);而在鼻咽癌组织中阳性表达率约为34.7%(43/124);TPM1蛋白表达水平与肿瘤的侵犯范围(T)呈负相关(P<0.05),与颈淋巴结转移(N)无关(P>0.05)。
结论 TPM1基因表达的抑制可能参与鼻咽癌的发生。
%Objective To investigate the relation between TPM1 gene expression and nasopharyngeal carcinoma (NPC). Methods TPM1 expression was examined in three NPC cell lines (CNE1, CNE2 and 58F) and one nasopharyngeal epithelial cell line (NP69) by real time rt-PCR analysis and in tissue array with 124 specimens of malignant NPC, 31 NPC specimens adjacent areas and 12 normal mucosa tissues by immunohistochemistry staining. Results Compared to NP69, TPM1 mRNA expression level is significantly lower in three NPC cell lines. The positive rates of TPM1 protein were 65.1%(28/43) in NPC specimens adjacent areas and normal mucosa tissues and were 34.7%(43/124) in malignant NPC tissues. The expression of TPM1 protein in NPC was negatively related to that in degree of infiltration (T) (P<0.05) but not related to that in lymph node metastasis (N) (P>0.05). Conclusion Down-regulated of TPM1 expression may be associated with the tumorigenesisof NPC.【期刊名称】《中国现代药物应用》【年(卷),期】2014(000)019【总页数】3页(P17-18,19)【关键词】TPM1;鼻咽癌;基因表达【作者】王亮;林建立【作者单位】518060 深圳大学医学部;518060 深圳大学医学部【正文语种】中文鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)是我国南方较高发的恶性肿瘤, 严重危害公众健康, 其病因目前尚不明确。
端粒酶抑制剂作用人鼻咽癌细胞株CNE2后蛋白表达谱的变化发表时间:2012-10-08T17:12:42.153Z 来源:《医药前沿》2012年第12期供稿作者:容敏华[导读] 八种经端粒酶抑制剂作用CNE2细胞后与对照组比较的共同差异蛋白容敏华(广西医科大学肿瘤医学院广西南宁 530021)【摘要】目的分析不同作用机制端粒酶抑制剂分别作用于CNE2鼻咽癌细胞株后蛋白表达谱的变化。
方法用EGCG等八种不同的端粒酶抑制剂分别作用于CNE2细胞,提取药物作用后细胞的总蛋白,运用基层辅助激光解析时间飞行质谱技术检测蛋白的变化,筛选共同差异蛋白。
结果 CNE2细胞经八种端粒酶抑制剂作用后,分别有14,26,27,23,31,42,26,30个蛋白低表达;分别有22,11,18,18,7,7,13,8个蛋白质高表达;均呈低表达的差异蛋白1个,相对分子量为2657.14 Da,无共同高表达的差异蛋白。
结论八种端粒酶抑制剂作用后,CNE2细胞表现出共性变化的蛋白。
这些蛋白可能参与端粒酶活性的调控,可能是不同机制端粒酶抑制剂作用的共同靶点。
【关键词】端粒酶端粒酶抑制剂鼻咽癌细胞 SELID-TOF-MS【中图分类号】R73-3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2012)12-0394-02 端粒酶(telomerase)是由RNA和蛋白质构成的一种特殊的DNA聚合酶,具有逆转录酶活性。
已证实端粒酶在肿瘤发生、发展过程中起着重要的作用,端粒酶已成为当今肿瘤新的标志物和肿瘤治疗的新靶点[1]。
近年不同学者致力于开发不同作用机制的端粒酶抑制剂,不同作用机理的抑制剂在不同类型细胞的生物分子靶点不一,端粒酶活性可能存在某些调控机制,不同端粒酶抑制剂可能在这些调控通路上的不同环节起了作用[2,3]。
但目前端粒酶的关键调控机制尚不清晰[4]。
表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术是蛋白质组学中一种很重要的新质谱技术,通过它可对比同一组织在不同生理状态下的蛋白质组谱图,发现该组织蛋白质组中各蛋白质表达量的变化。
鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2(R743)的建立及其差异表达蛋白的初步分析苏颖;吴君心;何火聪;林可焴n;邹长棪【摘要】目的建立放射抗拒的人鼻咽癌(NPC)细胞株,探讨NPC细胞的放射抗拒机制.方法应用X射线反复照射NPC CNE-2细胞,总剂量为51 Gy,筛选出放射抗拒的细胞株CNE-2(R743).采用克隆形成实验测定细胞的放射敏感性,流式细胞术检测细胞周期特征;采用双向凝胶电泳结合质谱分析法鉴定差异表达蛋白.结果与CNE-2细胞相比,CNE-2(R743)细胞显示出更强的放射抗性,CNE-2(R743)细胞的放射抗性(存活分数SF2)是其亲本细胞CNE-2的1.49倍(P<0.05).CNE-2(R743)细胞周期分布中,S期比例较其亲本CNE-2细胞明显增高(P<0.01),而G0/G1和G2/M期比例则下降(P<0.01).与CNE-2相比,CNE-2(R743)细胞存在24个差异表达较显著的蛋白质,其中14个上调,10个下调.结论经辐射诱导所建立的细胞株CNE-2(R743)比其亲本对射线更加抗拒,并显示与亲本不同的细胞周期特征.存在与亲本差异表达的蛋白质,这些蛋白质可能与NPC细胞的放射敏感性相关.%Objective To establish a radioresistant cell subline from human nasopharyngeal carci noma cell line CNE-2 and investigate the mechanism of radioresistance. Methods Nasopharyngeal carci noma cells were exposed repeatedly to X-rays. After a total exposure dose of 51 Gy, a new radioresistant subline named CNE-2CR743) was obtained. For both CNE-2CR743) and its parent CNE-2 cells, the radi osensitivity was measured by clonogenic assay, and the cell cycle distribution was measured by flow cytom etry. Differentially expressed proteins in the two cell lines were separated by two-dimensional gel electro phoresis and identified by massspectrum analysis. Results The radioresistance of CNE-2 (R743) cells was stronger than that of the parent CNE-2 cells. The radioresistance (as regards to survival fraction, SF2) of CNE-2CR743) cells is 1. 49 times of that of CNE-2 cells(P<0. 05). The CNE-2CR743) subline also showed higher percentage of cells in S phase, but lower percentages in Go/G1 and G2/M phases. To tally 24 different proteins -were identified, 14 of -which were upregulated and 10 downregulated in the ra dioresistant CNE-2CR743), compared with CNE-2. Conclusion The new subline CNE-2CR743) is more radioresistant as compare with its parent CNE-2 cell line, and has a different cell cycle distribution. There exist differentially expressed proteins which may be involved in different radiosensitivities of naso pharyngeal carcinoma cell lines.【期刊名称】《福建医科大学学报》【年(卷),期】2011(045)006【总页数】6页(P398-403)【关键词】鼻咽肿瘤;辐射耐受性;蛋白质组学;细胞周期;肿瘤细胞,培养的【作者】苏颖;吴君心;何火聪;林可焴n;邹长棪【作者单位】福建医科大学,教学医院、福建省肿瘤医院,放射生物学研究室,福州,350014;福建医科大学,教学医院、福建省肿瘤医院,放射生物学研究室,福州,350014;福建医科大学,教学医院、福建省肿瘤医院,放射生物学研究室,福州,350014;福建医科大学,教学医院、福建省肿瘤医院,放射生物学研究室,福州,350014;福建医科大学,教学医院、福建省肿瘤医院,放射生物学研究室,福州,350014【正文语种】中文【中图分类】R329.2;R392.11;R739.630.22;R814.2鼻咽癌(NPC)是我国南方地区常见的恶性肿瘤之一。
人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的光声光谱
【摘要】目的:了解人鼻咽癌细胞的光谱吸收特性。
方法:利用单光束
光声光谱技术测量两株人鼻咽癌细胞(CNE1、CNE2)的归一化光声光
谱。
结果:在波长为380nm~700nm范围内,这两株人鼻咽癌细胞的光声光谱吸收特性存在着显著差异,它们的光谱吸收强度大小为:CNE2> CNE1。
结论:利用光声光谱技术能够区分不同的人鼻咽癌细胞株的光谱差异性,从而表
明该技术能为鼻咽癌的研究提供一种新方法。
【关键词】光声光谱鼻咽癌细胞株
The Photoacoustic Spectroscopy of CNE1 and CNE2 Human Nasopharyngeal Carcinoma Cell Lines
Abstract Objective: To investigate optical absorption characteristics of human nasopharyngeal carcinoma cell lines. Methods: The standardized photoacoustic spectroscopy of the two human nasopharyngeal carcinoma cell lines (CNE 2 and CNE1) were measured respectively using single beam photoacoustic spectroscopy technique. Result: In the range from 380nm to 700nm, the marked difference between CNE 2 and CNE 1 is found in the photoacoustic spectroscopy absorption characteristics. Optical ahsorqtion intensity of the two cell lines is : CNE2> CNE 1. Conclusion: The
results shows that tells the difference about different nasopharyngeal carcinoma cell lines on spectroscopy using the photoacoustic spectroscopy technique.The photoacoustic spectroscopy technique may provide a new way on further research on nasopharyngeal carcinoma.
Key words photoacoustic spectroscopy; nasopharyngeal carcinoma; cell line
光声光谱技术是一种灵敏度高和普适性强的吸收光谱探测新技术。
研究物
质的光声光谱对样品制备要求简单,不需预处理,特别适用于具有强散射、不
透明和粘糊状样品的光谱吸收特性测量。
目前该技术已用于生物组织及血液的
研究,能区分正常组织与异常组织、正常血液与异常血液的光谱差异性,从而
为医学的研究提供一种新技术[1~4]。
人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2
在光谱方面是否存在差异性值得我们探讨。
为此,本研究应用一套单光束光声
光谱测量装置,获得人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的归一化光声光谱,
发现它们的光声光谱吸收特性存在着显著差异,它们的光谱吸收强度大小为:CNE2>CNE1,结果提示光声光谱技术能为鼻咽癌的研究提供一种新方法。
1 实验方法
1.1 实验装置
本研究采用单光束光声光谱测量装置,如图1所示。
光源是磁场稳弧卧式1000W球形短弧氙灯,工作电压为220V, 工作电流为34A。
单色仪是北京第二光学仪器厂生产的WDP5002A型平面光栅单色仪,扫描速度为25nm/min。
锁相放大器是美国Stanford Research Systems公司生产的SR530型锁相放大器,斩波频率为22Hz,时间常数为30S。
样品池是气体传声器型光声池。
数据采集卡为PCL818HG型采集卡。
计算机为暜通的微型计算机,在计算机上安装了用于采集数据和数据处理的软件。
1.2 样品制作
将人鼻咽癌细胞株和分别作常规传代培养,培养液为含10%胎牛血清的RPMI1640(100g青霉素/ml+100g链霉素/ml)。
待细胞处于指数生长期时,用0.05%胰蛋白酶消化、计数并配成每支离心管含1106个细胞的单细胞悬液,离心后分别把上述两种沉淀的细胞涂贴在做好标记的光声池内,让其自然干涸后测量。