如何进行献血员HIV检测
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您献出的血液要经过哪些检验要想成为一名光荣的无偿献血者,需要严格按照国家所规定的献血标准要求,对献血者进行一系列检查,检查的内容包括健康史咨询,血液初步筛查等。
体检的项目包括体重、脉搏、血压、体温等,血液的初步筛查内容包括血型、谷丙转氨酶、乙肝表面抗原及血红蛋白检测等。
为了提升血液的质量,做好血液质量检测工作尤为重要。
一、血液检验流程第一,操作前试管的准备。
严格按照血站中的采血要求,做好检验单核对工作,准备好试管和抽血的器材,检查试管有无出现松动、裂痕,是否到有效期等。
第二,操作前查对评估。
对献血者的姓名进行核对,对献血者的生命体征、意识状态、静脉充盈、肢体活动度及穿刺部位进行评估。
积极与献血者进行沟通和交流,确保能够了解到献血者的自身指标是否符合采血的要求,明确采血的目的,确保能够得到献血者的配合。
第三,采血-查对。
在对献血者进行采血时,需要将采血器材挪移到献血者的面前,再次对献血者的姓名、采血管进行核对。
应保证静脉选择的合理性,为献血者扎止血带,对献血者采血处进行消毒,叮嘱献血者应握拳。
做好穿刺工作,将头皮针固定好,与采血真空管相连接,反折枕头,将采血管拔掉,松止血带,松拳头,迅速拔针,在对穿刺点进行按压时使用棉签,并告知献血者相关的注意事项。
第四,采血结束的核对。
对献血者的姓名进行核对,填制采血申请单,记录献血者的血量,对试管上的标签做好粘贴,在试管上写上采血者的姓名,对献血者的穿刺点部位处有无出现渗血及不适反应进行检查,对其他空腹检查的项目进行核对,并告知献血者能否进食。
第五,整理送检。
对献血者在采血过程中使用的物品进行处置,做好登记及送检工作。
二、注意事项第一,检查前,要求献血者应配合血站工作人员将自己的姓名写好,避免同名而引发不必要的麻烦,以提升抽血效果及抽血质量,节约诊断时间。
第二,在血液检查时,需要在空腹状态下进行抽血,是指在清晨未进餐之前,静脉血的抽取时间为前一餐约12-14时。
1.范围本标准规定了献血者体格检查和血液检验的项目和要求。
本标准适用于全国各级血站(血库),并用于该机构的管理和评审。
2. 定义本标准采用下列定义。
2.1 预检献血者要求经体检、检验合格后再献血的献血者。
2.2 非预检献血者预先只进行体检,而不要求进行检验即可献血的献血者。
3. 总则3.1 为了保证献血者的身体健康和受血者的输血安全,对预检献血者每次献血前必须进行体格检查、血液检验(初验),合格后采血,采出的血液必须经复检合格后,方可供临床应用。
3.2 对非预检献血者经健康情况征询和体格检查合格后即可采血。
采出的血液必须进行初检和复检,合格后方可供临床应用。
3.3 献血者血液初检和复检不得用同一试剂厂生产的试剂,同一标本的初检和复检不得由同一人进行操作。
3.4 本标准中的献血健康征询项目,适用于不具备血液检验条件的采血车和采血点的无偿献血活动。
3.5 献血者体格检查和血液检验应以血站结果为准,有效期为两周。
3.6 本标准是血站实施献血者体检、检验技术操作管理和进行质量审核的重要依据。
4. 献血者健康检查要求4.1 献血者体格检查标准4.1.1 年龄:18~55周岁。
4.1.2 体重:男≥50kg,女≥45kg。
4.1.3 血压:90mmHg~140mmHg/60mmHg~90mmHg,脉压:≥30mmHg或: 12.0KPa~18.7KPa/8.0KPa~12.0KPa,脉压:≥4.0KPa。
4.1.4 脉搏:节律规整,60次~100次/min,高度耐力的运动员≥50次/分。
4.1.5 体温正常。
4.1.6 皮肤无黄染,无创面感染,无大面积皮肤病,浅表淋巴结无明显肿大。
4.1.7 五官无严重疾病,巩膜无黄染,甲状腺不肿大。
4.1.8 四肢无严重残疾、无严重功能性障碍及关节无红肿。
双臂静脉穿刺部位无皮肤损伤,无静脉注射药物痕迹。
4.1.9 胸部:心肺正常,无病理性呼吸音及病理性心脏杂音,心率60次~100次/分。
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导语:我国在献血人群中成功检测出艾滋病的比例99 97%。
尽管这0 03%的失败率在概率论上看来是“无概率事件”,可是万一这万分之三概率的
我国在献血人群中成功检测出艾滋病的比例——99.97%。
尽管这0.03%的失败率在概率论上看来是“无概率事件”,可是……万一这万分之三概率的事件真的发生了,那么问题就十分严重了,那么能不能用献血查艾滋呢?
HIV抗体(HIV Ab)的窗口期
理论上HIV抗体在人体感染艾滋病病毒的最初就会出现,但当时浓度极低,已超越了常用检测手段的范畴。
当人体感染艾滋病1.5周左右就可以双原夹心法(俗称“金标法”)进行检测,但此时由于抗体浓度较低,在检测上存在一定的误差。
当人体感染艾滋病病毒达到14~28天,大多数检测方法包括酶联法和双原夹心法就可以得到相当准确的结果。
人体感染艾滋病病毒42天,也就是6周左右的时候,人体HIV抗体的浓度达到峰值,随后缓慢下降。
HIV抗原(HIV Ag)的窗口期
病毒抗原检测是相对抗体检测更为准确且可以得到量化结果的方式。
如上图所示,HIV Ag在4周左右就可以达到峰值,可以较HIV抗体早一周得到可靠的结果。
但由于艾滋病抗原在人体的含量在达到峰值后迅速降低,6周左右就会降低到可以检测水平以下,因此艾滋病抗原检测多用于科研分析而不是临床用途。
目前随着艾滋病检测技术的不断发展,就目前广泛采用的第三代双原夹心法和酶联法以及化学发光法等检测手段而言艾滋病的窗口期可
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献血检验艾滋病的方法简介艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一种严重的免疫系统疾病。
它通过血液、性行为、输血及母婴传播。
在献血过程中,检测献血者是否携带HIV病毒是非常重要的,以确保献血安全。
献血前的检测在献血前,献血者需要接受一系列的体检和问卷调查,以排除潜在的艾滋病感染风险。
这些检测包括:1. 体检献血者需要接受基本的体检,包括测量血压、体温、心率等,以确保献血过程对其个人健康安全。
2. 问卷调查献血者需要填写一份详细的问卷,其中包括个人健康、医疗历史和性行为等方面的问题。
这些问题旨在筛查潜在的艾滋病感染风险。
献血后的检测即使献血者通过了前期的筛查,献血后仍需要进行一系列的检测来确保献血样本没有艾滋病病毒。
1. 抗体检测抗体检测是最常用的艾滋病检测方法之一。
该方法通过检测献血者体内是否存在HIV特异性抗体来判断是否感染艾滋病。
这种检测方法属于间接检测方法,在感染后的2到8周内可以得到初步结果。
然而,在病毒感染后的数月内,该方法可能无法准确检测到HIV抗体。
2. 抗原检测抗原检测是另一种常用的艾滋病检测方法。
该方法通过检测血浆中是否存在HIV特异性抗原来判断是否感染艾滋病。
与抗体检测不同的是,抗原检测可以在感染后的几天内得到初步结果。
然而,抗原检测的敏感性相对较低,可能会出现假阴性结果。
3. 核酸检测核酸检测是一种直接检测HIV病毒核酸的方法。
该方法可以通过提取献血样本中的DNA或RNA,并使用特定的试剂盒进行检测来确定是否感染艾滋病。
核酸检测具有高度准确性和敏感性,可以在感染后的几天内得到初步结果。
4. 病毒培养病毒培养是一种比较复杂和耗时的方法,用于检测献血样本中是否存在活跃的HIV病毒。
这种方法需要将献血样本放入培养基中,让病毒在培养基上生长,然后再进行检测。
5. 抗体亲和性测定抗体亲和性测定是一种用于检测HIV抗体亲和性的方法。
这种方法可以检测病毒进一步进化和演变的程度,从而提供更准确的感染情况判断。
献血者健康检查标准来源:卫生部一、总则1、为确保医疗用血的质量,保证献血者的身体健康和受血者的安全, 献血者每次献血前须进行体格检查和血液检验, 献出的血液必须按规定项目检验。
2、献血者献血前的体格检查及血液检验以血站结果为准,有效期为两周。
3、献血者在献血前要填写“献血登记表” 、“健康情况征询表” (见附表4、非固定点献血者只进行体格检查和填写“健康情况征询表” (见附表5、献血者血液化验初复检不得用同一试剂厂生产的试剂,同一标本的初复检化验不得由同一人进行。
二、献血者体格检查标准1、年龄:18—— 55周岁。
2、体重:男≥ 50千克,女≥ 45千克。
3、血压:12—— 20/9—— 12K/pa, 脉压差:≥ 4Kpa (千帕。
或: 90—— 140/60—90mmHg.4、脉搏:60—— 100次 /分,高度耐力的运动员≥ 50次 /分。
5、体温正常。
6、皮肤无黄染,无创面感染,无大面积皮肤病,浅表淋巴结无明显肿大。
7、五官无严重疾病,巩膜无黄染,甲状腺无肿大。
8、四肢无严重残疾,无严重功能性障碍及关节无红肿。
9、胸部:心肺正常(心脏生理性杂音可视为正常。
10、腹部:腹平软、无肿块、无压痛、肝脾不肿大。
三、献血者血液检验标准1、血型:ABO 血型(正反定型法。
Rho (D 血型,在有条件的地区以及 Rh 阴性率高的地区作测定。
2、血比重筛选:硫酸酮法男≥ 1.052, 女≥ 1.050, 或者比色法。
3、丙氨酸氨基转移酶(ALT 酮体粉法:阴性,或者赖式法:≤ 25单位。
4、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg 酶标法:阴性(快速诊断法仅限于非固定采血点的初检使用。
5、丙型肝炎病毒抗体(HCV 抗体酶标法:阴性。
6、艾滋病病毒抗本(HIV 抗本酶标法:阴性。
7、梅毒试验 RPR 法或 TRUST 法:阴性。
8、复检上述 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7项。
9、甲型肝炎临床治愈一年后连续三次每次间隔一个月化验正常可能参加献血(以临床化验报告为准。
武汉献血检测报告有什么内容背景介绍献血是指将血液通过适当的渠道捐献给需要血液的人。
作为一种无私奉献的行为,献血不仅可以拯救他人的生命,还能为自己的身体健康作出贡献。
在武汉市,献血者需经过严格的身体检查,其中最重要的一项便是献血检测报告。
那么,武汉献血检测报告中都包含哪些内容呢?接下来将从血液成分、传染病筛查等方面进行介绍。
血液成分检测献血检测报告首先会对献血者的血液成分进行检测。
血液成分检测是评估献血者血液健康状况的重要指标,其中包括血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数等项目。
- 血红蛋白:血红蛋白是血液中负责携带氧气的重要成分,其水平反映了献血者的氧合能力。
正常血红蛋白水平能保证身体组织的正常运转。
- 红细胞计数:红细胞是携带氧气的主要细胞,红细胞计数是评估献血者体内红细胞数量的指标。
正常范围内的红细胞计数有助于维持正常的氧气供应。
- 白细胞计数:白细胞是身体的免疫系统的组成部分,白细胞计数能够反应献血者免疫力的强弱情况。
正常范围内的白细胞计数有助于维护身体的免疫功能。
- 血小板计数:血小板是血液中负责止血的细胞,血小板计数是评估献血者止血功能的重要指标。
正常范围内的血小板计数能够保证正常的止血反应。
传染病筛查除了血液成分检测,献血检测报告还会对献血者血液中常见传染病的筛查结果进行报告。
这些传染病包括艾滋病、乙肝、丙肝等。
- 艾滋病:艾滋病是由人类免疫缺陷病毒引起的一种严重的免疫系统疾病。
献血检测中常常会检测献血者血液中是否含有艾滋病病毒(HIV)。
- 乙肝:乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的病毒性肝炎。
献血者是否携带乙肝病毒的检测结果对于保证献血的安全与健康至关重要。
- 丙肝:丙型肝炎是由丙型肝炎病毒引起的病毒性肝炎。
献血检测报告亦会将丙肝病毒相关指标纳入其中,以保障献血的安全性。
血型鉴定献血检测报告中还会对献血者的血液样本进行血型鉴定。
血型鉴定是评估血液适配性的重要指标,帮助医生筛选适用的献血者和血液受体者。
献血者健康检查标准来源:录入时间:2005年2月28日一、总则1.为确保医疗用血的质量,保证献血者的身体健康和检验,献血者每次献血前须进行体格检查和血液检验,献出的血液必须按规定项目检验。
2.献血者献血前的体格检查及血液检验以血站结果为准,有效期为两周。
3.献血者在献血前要填写"献血登记表"、"健康情况征询表"(见附表)。
4.非固定点献血者只进行体格检查和填写"健康情况征询表"(见附表)。
5.献血者血液化验初复检不得用同一试剂厂生产的试剂,同一标本的初复检化验不得由同一人进行。
二、献血者体格检查标准1.年龄:18-55周岁。
2.体重:男≥50千克,女≥45千克。
3.血压:12-20/8-12Kpa,脉压差:≥4Kpa(千帕)。
或:90-140/60-90mmHg,脉压差:≥30mmHg。
4.脉膊:60-100次/分,高度耐力的运动员≥50次/分。
5.体温正常。
6.皮肤无黄染,无创面感染,无大面积皮肤病,浅表淋巴结无明显肿大。
7.五官无严重疾病,巩膜无黄染,甲状腺不肿大。
8.四肢无严重残疾,无严重功能性障碍及关节无红肿。
9.胸部:心肺正常(心脏生理性杂音可视为正常)。
10.腹部:腹平软、无肿块、无压痛、肝脾不肿大。
三、献血者血液检验标准1.血型:ABO血型(正反定型法)。
Rho(D)血型,在有条件的地区以及Rh阴性率高的地区作测定。
2.血比重筛选:硫酸酮法男≥1.052 女≥1.050,或者比色法。
3.丙氨酸氨基转移酶(ALT)酮体粉法:阴性,或者赖式法:小于等于25。
4.乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)酶标法:阴性(快速诊断法仅限于非固定采血点的初检使用)。
5.丙型肝炎病毒抗体(HCV抗体)酶标法:阴性。
6.艾滋病病毒抗体(HIV抗体)酶标法:阴性。
7.梅毒试验RPR法或TRUST法:阴性。
8.复检上述1、3、4、5、6、7项。
9.甲型肝炎临床治愈一年后连续三次每间隔一个月化验正常可参加献血(以临床报告为准)。
无偿献血者HIV初筛检测策略及确证结果对比施克飞【期刊名称】《《世界复合医学》》【年(卷),期】2019(005)007【总页数】3页(P52-54)【关键词】无偿献血; ELISA法; HIV抗体【作者】施克飞【作者单位】江苏省常州市中心血站溧阳分站江苏溧阳213300【正文语种】中文【中图分类】R735人类免疫缺陷病毒(HIV)是造成获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的主要病原体,具有传染性,已经受到全世界的关注[1]。
我国目前的艾滋病疫情呈现总体低流行、地区高流行的状态,多由高危人群扩散至低危人群,感染人群多样化。
HIV的主要传播途径是血液传播,我国卫计委对血液制品潜在HIV风险也非常重视[2]。
根据《献血者健康检查要求》和《血站质量管理规范》中的要求,溧阳分站对血液样本开展了严格的ELISA检测,对于复查结果仍为1种或2种检测试剂均为有反应性,则将标本送常州CDC进行确诊。
该文对2012年1月—2015年12月的筛查结果进行回顾性分析,现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取江苏常州市中心血站溧阳分站32 811例标本作为该次研究对象。
该研究所选病例经过伦理委员会批准,患者或家属知情同意。
1.2 仪器和试剂使用酶联免疫吸附法对所有标本筛查,使用人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒(上海科华、北京万泰、英科新创),检测HIV-1型、HIV-2型抗体以及HIV的p24抗原。
酶免检测所使用仪器为E-STAR全自动酶免仪。
如果检测结果有反应性,则按照《全国艾滋病检测技术规范》的要求,用2种试剂进行复试,若检测结果为1种或2种检测试剂均为有反应性,则将标本送常州CDC进行确诊。
1.3 统计方法使用Pass Spring System穿越安全输血标准化软件、Liswell实验室系统,建立Excel数据库,使用统计学软件SPSS 23.0统计学软件进行分析处理。
2 结果2012年1—12月送检标本8 851例,抗-HIV阳性数7例、送检CDC标本数3例、确诊2例,确诊率为66.67%;2013年1—12月送检标本8 293例,抗-HIV阳性数8例、送检CDC标本数6例、确诊3例,确诊率为50.00%;2014年1—12月送检标本8 229例,抗-HIV阳性数5例、送检CDC标本1例,确诊率为20.00%;2015年1—12月送检标本7 438例,抗-HIV阳性数4例、送检CDC标本4例、确诊1例,确诊率为25.00%,见表1。
中华人民共和国国家标准《献血者健康检查要求》 中华人民共和国国家标准GB18467--2011代替GB18467--2001献血者健康检查要求whole blood and component donor selection requirements 《献血者健康检查要求》2012年新国标2011-12-30发布2012-07-01实施中华人民共和国卫生部发布中国国家标准化管理委员会目次前言 I1 范围 12 规范性引用文件 13 术语和定义 14 总则 15 献血者知情同意 16 献血者健康征询 37 献血者一般检查 58 献血前血液检测 59 献血量及献血间隔 510 献血后血液检测 6附录A(资料性附录)献血者知情同意及健康状况征询表 7附录B(资料性附录)献血前检查及采血记录 11前言本标准的第4章、第5章、第9章、第10章、第8.2、8.3条为强制性的,其余为推荐性的。
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准代替GB18467-2001《献血者健康检查要求》,与GB18467-2001相比,主要技术变化如下:--调整标准结构,增加目次、引用文件、献血者知情同意,删除原附录C;--调整规范性技术条款的章节结构;调整免疫接种后献血的有关条款,按疫苗生产工艺分类管理;--调整强制性条款,除原有的献血前检测、献血量和献血间隔、捐献血液的检测要求外,增加献血者知情同意;--增加献血者有关生活经历和旅行经历的健康征询;--删去献血后血液检测有关检测方法、检测标志物等内容;--调整献血年龄、献血量、血色素标准、单采血小板采集标准和献血间隔;--修订眼科疾患、同性恋以及免疫接种后献血的有关条款;--修订附录A献血者知情同意及健康征询表有关内容;--修订附录B献血前血液检测和献血记录有关内容。
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准主要起草单位:北京市红十字血液中心。
本标准主要起草人:高东英、刘江、戴苏娜、郭瑾、周倩、陈霄、刘志永、江峰、赵冬雁、庄光艳。
HIV实验室诊断人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)及其相关标志的检测是预防HIV感染和艾滋病临床治疗中重要的环节,在艾滋病的防治工作中具有重要作用,如艾滋病的诊断、HIV感染的诊断、血源及器官供体的筛选、流行病学调查、艾滋病病人及HIV感染者的病情动态观察、临床治疗疗效考核以及HIV疫苗的安全性和效果鉴定等。
HIV感染标志分为病毒标志、免疫标志和相关标志三大类。
病毒标志是指直接从HIV感染者体内分离出病毒或检出HIV组成成分(抗原或核酸)。
免疫标志是指HIV感染所产生的HIV抗原、抗体等免疫物质。
相关标志是指HIV感染后与艾滋病病情进展有密切关系的某些标志,如CD4细胞、CD8细胞,β2微球蛋白、有关细胞因子等。
这些标志的测定可为HIV感染及临床疗效的考核提供极为重要的诊断、治疗和预后指征。
目前HIV抗体的检测是艾滋病实验室检测中最常用的方法,因为HIV抗体是患者感染HIV后最容易检出并且持续时间最长的免疫学标志,而且抗体的检测方法大多简便、经济,易于推广应用。
在介绍各种HIV实验室诊断方法之前,为了使实验室工作人员能够有效地确保结果准确、可靠、优质,我们必须对作为一种感染因子的HIV以及由它所导致的致命性危害有基本的认识。
实验室工作人员应特别注意病毒的结构、抗原组成,人体的免疫反应,诊断试验的基本原理、试验结果的解释,以及为了准确而有效地提供实验诊断所必需的质量保证措施。
如果由于缺乏技术专长或基本知识而造成不正确的试验结果是不可原谅的。
现将有关内容扼要介绍如下:一、人类免疫缺陷病毒(HIV)概述(一)艾滋病病原体的发现和命名(二)HIV病毒的形态结构、分类和分型HIV病毒是带有包膜的RNA逆转录病毒,在分类上属于逆转录病毒科中的慢病毒亚科。
目前发现有HIV-1和HIV-2两型。
现已将HIV-1分为M组,共10个亚型(A-J)和O组,HIV-2也至少有6个亚型(A-F)。
如何进行献血员HIV检测
对献血员HIV的检测主要包括初筛试验和确认试验。
初筛检测的方法有金标法、ELISA、明胶颗粒凝集试验、各种快速检测实验。
其中使用最多的是ELISA,其间接法和双抗原夹心法最常用。
确认试验常用免疫印迹法(WB法)。
对于初筛为阳性的标本应做双孔复测,若均为阳性或一阴一阳则应做确认试验。
各项指标的实验技术原理
一、HIV抗体
WHO和我国卫生部推荐使用HIV感染诊断方法,是血清学抗体检测。
抗体检测是筛选的重要依据。
1、酶联免疫吸附法(ELISA夹心法):
原理:将HIV抗原包被固相载体上,标本中HIV抗体与包
被的HIV抗原结合形成复合物,利用抗体的多价性,又与
酶标记的同类HIV抗原形成抗原抗体复合物,最后加入底
物,在酶作用下发生显色反应,测定光密度值。
2、金(硒)标记法:
原理:是用HIV重组抗原和羊抗鼠IgG分别固定于硝酸
纤维素膜,并和包被有胶体金标记的HIV重组抗原及鼠
IgG的玻璃纤维纸片及其他试剂组成。
应用胶体金免疫
层析技术,采用双抗原夹心的原理检测人类血清及血浆
样本中的HIV 1/2抗体。
其特点是比较稳定,操作简单快
速,但该方法诊断特异性低于其他方法,假阳性率高。
灵敏
度也低。
仅用于无偿献血员现场初筛及临床紧急情况的使
用。
3、明胶颗粒凝集试验:
原理:是使用明胶颗粒吸附HIV抗原,检测被筛查品中
HIV1/2抗体。
该方法也不需仪器设备,其灵敏度高于ELISA
法。
二、 HIV抗原
在HIV感染的早期会出现一过性的抗原血症,此期间血浆中的病毒抗原是可能被检测到的,大多数感染者在随后相当长的一段时间内测不到抗原,在疾病晚期,部分患者可再次出现可检测到的抗原。
抗原的检测一般来说用的比较少,可作为定性检测的辅助诊断。
主要是检测抗原P24。
1、ELISA法:
原理:主要是在固相上包被抗P24抗体,以捕获样品中的抗
原成分,再用酶标记的另一抗P24抗体与被捕获得抗原反
应,通过对酶催化显色的强度测定判断结果。
2、第四代以重组的多肽抗原和抗P24 抗体包被的双抗原夹
心法试剂盒,可同时检测抗原抗体,使窗口期收拢了2-3
周。
三、淋巴细胞
HIV感染人体后,细胞免疫功能受损,CD4+T淋巴细胞进行性
减少,CD4+/CD8+比例下降,总淋巴细胞数减少。
1、流式细胞仪法:
原理:利用血球计数仪检测淋巴细胞数量,再根据流式细胞
仪得到的细胞群体百分比,计算得到每微升的淋巴细胞数量 2、非流式细胞仪法
(1)Cyto-Spheres方法:CD4+计数试剂盒包含CD4+微球试剂,即包被有单克隆抗体的惰性乳胶微球,可以通过光
学显微镜鉴别和手工计数新鲜全血中CD4+T淋巴细胞
的绝对数。
其原理是人和动物的T淋巴细胞表面有红细
胞受体,因此红细胞可以粘附到T淋巴细胞的周围而形
成玫瑰花样的细胞团。
(2)Dynabeads方法:以免疫磁珠细胞分离方法为基础,使用包被CD4+和CD8+抗体的Dynabeads磁珠,从全血中捕获
分离CD4+和CD8+T淋巴细胞;另一种CD14微球用来阻
隔单核细胞。
用龙胆紫和胎盘兰染色分离出来的CD4+T
淋巴细胞,在光学显微镜下或自动细胞计数仪上计数。
四、RNA
HIV病毒RNA主要存在于病毒颗粒内,其定量测定主要反映了病毒存在的水平。
病毒RNA的测定方法通常以定量为主。
1、. 核酸序列依赖性扩增(NASBA)
原理:NASBA技术是一种等温扩增系统,其扩增基础在于
系统内的混合酶系统,此系统内含有逆转录酶AMV-RT和
T7-DNA多聚酶以在体外模拟逆转录病毒核酸体内复制过
程。
扩增后的产物使用NASBAQR电化学发光(ECL)系统
进行检测和定量。
2、. HIV-1定量检测逆转录PCR系统(RT-PCR):
原理:RT-PCR方法较为简单,基本原理是通过逆转录酶
的作用将样品种RNA逆转录合成DNA后进行聚合酶链式
反应(PCR)。
定量系统通过比较病毒核酸和QS的扩增产物
量来完成,通过计算可定量病毒的拷贝数。
3、全自动核酸检测系统MPLC-COBAS:
原理:用MPLC提取核酸,再用COBAS分析仪对靶病毒进行
扩增和检测,一轮检测周期中能检测240份标本。
核酸扩增
和检测是在密闭容器进行,结果的阴性和阳性符合率为
100%,灵敏度为100%。
4、HIVRNA定量检测的分支DNA测定法(bDNA):
原理:分支DNA测定技术基于其独特的信号放大系统,即
分支DNA信号放大系统,这是一个人工合成的分支DNA,
分支DNA的分支可结合多个酶标记物,从而将病毒的信号
放大,以便进行检测。
五、DNA
PCR技术:PCR是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法,在诊断方面,DNA检测通常作为辅助性检测手段。
各项指标的优缺点。