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口蹄疫病毒受体猪源β1亚基基因的克隆和分子特征

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高 闪电， 军政 ， 惠芸 ， 建华 ， 独 常 周 谢庆 阁
（ 国农 业 科 学 院 兰州 兽 医 研 究 所 ， 中 国家 口蹄 疫 参 考 实验 室 ， 畜 疫 病 病原 生 物 学 国家 重 点 实验 室 家
农业 部 畜禽 病 毒 学 重 点 开放 实验 室 ， 肃 兰州 ７ ０ ４ ） 甘 ３０６
摘要 ： 次从 Ｆ Ｄ 首 Ｍ Ｖ试 验 感 染 康 复 猪 的舌 皮 和肺 组 织 中克 隆 到 了整 联 蛋 白 Ｂ 亚 基 的 基 因并 对 其 核 苷 酸 序 列 和 推 １ 导 的 氨 基 酸 序列 以及 蛋 白结 构 进 行 了分 析 。 猪整 联 蛋 白 Ｂ 亚 基 基 因 的 编 码 区 含 有 ２３７个 核 苷 酸 ， 码 ７８个 氨 基 １ ９ 编 ９ 酸 残 基 ， 有 １ 个 潜 在 的 糖 基 化 位 点 （ ｘｒ／ ｘ ｘ ， 表 皮 生 长 因子 相 似 结 构 域 和 ３个 半 胱 氨 酸 丰 富 区 。其 信 号 含 ０ Ｎ Ｎ ｓ ）２个 ｘ
８ ．％和 ７ ．％ ， 导 的氨 基 酸 序 列 一 致性 分 别 为 ９ ．％ ， ．％ ，７５ ，６７ ，４２ ，２４ ６５ ７４ 推 ９９ ９ ９ ９ ．％ ９ ．％ ９ ．％ ９ ．％和 ９ ．％ 。通 过 生 物 ３ ４９
学 软 件 分析 发现 Ｂ 亚 基形 成 复杂 的二 、 级 结 构 ， 中 １ ０位 、２ ～７ ７位 氨 基 酸 区段 疏 水 性 较 强 ， 别 是 该 亚 基 １ 三 其 ～２ ７９ ５ 分
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的 信 号 肽 和跨 膜 区 。为 进 一 的 侵入 机制 等 问题 奠 定 了基 础 。 ＭＤ 与 病 关 键 词 ：Ｉ 疫 病 毒 ； 体 ； 整 联 蛋 白 Ｖ蹄 受 猪
中 图 分 类 号 ：８２６ ；７ ￥ ５ ．５ Ｑ ８
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肽 由２ ０个 氨 基 酸 组 成 ， 外 域 由 ７ ８个 氨 基 酸 组成 ， 膜 区 由 ２ 胞 ０ 跨 ９个 氨 基 酸 组 成 ， 浆 域 由 ４ 个 氨基 酸 组 成 。猪 基 胞 １
因与 牛 、 猩 、 、 、 、 鼠 和 鸡 的 猩 猫 犬 人 小
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维普资讯
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华 北 农 学 报 ・ ０ ７， ２ ６ １ — ２ ０ ２ （ ）： ４ １ ８
口蹄 疫 病 毒 受体 猪 源 Ｉ ］ ； １亚基 基 因的克 隆和分 子 特征
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基 因 ； 子 特 征 分
文 章 编 号 ：００—７ ９ （０ ７ ０ —０ １ —０ １０ ０ １２ ０ ）６ ０ ４ ５
文 献标 识 码 ： Ａ
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口蹄疫

口蹄疫

中国动物卫生与流行病学中心国际兽医事务处发布的：2011年12 月—2012 年1 月全球重大动物疫情综述中指出关于口蹄疫疾病中国台湾、哈萨克斯坦再次发生口蹄疫。

2011年12月22日，台湾台南市一农场发生O型口蹄疫，983头猪感染。

2011年12月27日，哈萨克斯坦东哈萨克斯坦州3个村庄发生O型口蹄疫，500头牛感染。

纳米比亚、南非、巴拉圭再次发生口蹄疫。

2011年12月27日，纳米比亚Caprivi地区一村庄发生SAT1型口蹄疫，17头牛感染。

2012年1月9日，南非普马蓝加省一村庄发生SAT2型口蹄疫，6头牛感染。

2012年1月3日，巴拉圭中部圣贝竹省一农场发生O型口蹄疫，15头牛感染。

口蹄疫( foot and mout h disease , FMD)又称口疮热, 是由口蹄疫病毒引起的偶蹄动物多发的一种急性、热性和传播极为迅速的接触性传染病。

其特征为嘴周围、口内、蹄、乳头和乳房上形成水疱。

口蹄疫首次发现于1514年(意大利), 但直到1898年才由Loffler等证明本病原为滤过性病毒。

该病的发病率几乎达100 %,但病程一般呈良性经过,死亡率只有2 % ~3 % ,犊牛及仔猪和恶性病型, 死亡率可达50 % ~70%,除动物死亡造成直接经济损失外,动物在患病期间肉和奶的生产停止, 病后肉和奶产量长期减少以及种用价值丧失也可造成较大的损失, 最为严重的是由于该病传染性极强, 对病畜和怀疑处于潜伏期间的同群动物必须紧急处理,对疫点周围的广大范围必须隔离封锁, 禁止动物移动和畜产品调运上市,由此可导致一个国家的畜产品进出口贸易停止,造成巨大的经济损失和政治影响, 并能在全球大规模流行,所以国际兽疫局将该病列为A类家畜传染病之首, 并列入世界范围内重要传染病研究行列。

口蹄疫病毒属于核糖核酸病毒科的口蹄疫病毒属,是一种RNA病毒. 病毒呈球形, 其直径为( 23±2) nm, 不具有囊膜.病毒感染动物的血清. 口蹄疫病毒具有型多易变的特点.已知的病毒型为A、O、C和南非1、2、3型以及亚洲1型( Asia-1)。

家畜传染病全课件-口蹄疫

家畜传染病全课件-口蹄疫

家畜传染病全课件-口蹄疫口蹄疫一、概述口蹄疫（Footandmouthdisease，FMD）是由口蹄疫病毒（Footandmouthdiseasevirus，FMDV）引起的急性、热性、接触性传染病，主要侵害偶蹄兽,偶见于人和其他动物。

临诊上以口腔黏膜、蹄部及乳房皮肤发生水泡和溃烂为特征。

二、病原1．形态特征口蹄疫病毒（FMDV）属于微核糖核酸病毒科（picornaviridae）中的口蹄疫病毒属（Aphthavirus）。

病毒粒子直径为23～25nm,呈圆形或六角形，由60个结构单位构成20面体。

病毒内部为单链线状的正连RNA，无囊膜，成熟病毒粒子约含30%的RNA，其余70%为蛋白质。

2.血清学特性:★FMDV含有4种结构多肽（VP1～VP4）。

VP1、VP2和VP3组成核衣壳蛋白亚单位，VP4则与RNA紧密结合，构成病毒粒子的内部成分。

★VP1全长213个氨基酸，是序列依赖型表位的主要构基础，分离的VP1可诱生中和抗体，是近年来免疫、诊断制剂的重点。

★VP3的56位残基的Arg对硫酸乙酰肝素受体的识别具有决定性的作用。

★VP4与诱导产生中和抗体有关，完整的病毒粒子和空壳体有免疫原性，而壳微体没有，差别的形成是由于后者缺少VP4。

VP1发挥免疫原性，可能需要VP4的存在。

FMDV有O型、A型、C型、SAT1型（南非I型）、SAT2型（南非Ⅱ型）、SAT3型（南非Ⅲ型）、Asia1型（亚洲I型）等7个血清型。

每一型内又有亚型。

各型彼此无相互免疫关系。

3.培养特性：口蹄疫病毒能在许多种类的细胞培养内增殖，并产生致细胞病变（CPE）。

常用的有牛舌上皮细胞、牛甲状腺细胞、猪和羊胎肾细胞、乳仓鼠肾细胞等，其中以犊牛甲状腺细胞最为敏感，并能产生很高的病毒滴定，因此常用于病毒分离鉴定。

猪和仓鼠的传代细胞系，如PK15、BHK21和IB－RS－2等细胞也很敏感，常用于本病毒的增值。

培养方法有单层细胞培养和深层悬浮培养，后者适用于疫苗生产。

猪口蹄疫

猪口蹄疫

鼻拱部结痂和溃疡面； 舌表面的溃疡面；
临床症状：
鼻拱部水泡破裂形成的 鲜红溃疡面及舌表面水 痘破裂形成的溃疡面；
临床症状：
蹄踵、蹄叉部红肿、溃 疡，部分蹄壳开始脱落；
临床症状：
蹄踵部蹄叉部溃疡，蹄 壳开始脱落；
临床症状：
蹄踵部水泡破裂后，露出 出血的皮下组织，部分蹄 壳开始脱落；
猪口蹄疫
﹙Foot and mouth disease﹚
猪口蹄疫：
一.概述； 二.病原； 三.流行病学； 四.临床症状； 五.病理变化； 六.诊断； 七.综合防制；
一.概述：
1.口蹄疫﹙Foot and mouth disease ,FMD﹚是由FMDV感 染引起的偶蹄动物共患的急性、热性、接触性传染病； 2.分七个血清型：O型、A型、C型、Asia-1型、SAT1型、 SAT2型、SAT3型等；每个主型内又有若干个血清亚型； 3.不同的血清型的病毒感染动物所表现的临床症状基本一 致，但无交互免疫性；同一主型内的不同亚型之间也 只有部分交互免疫性； 4.易感动物：黄牛、水牛、牦牛、猪、绵羊、山羊、骆驼 和鹿；此外还有象、刺猬、鼠等33种野生动物；
病毒对外界的抵抗力：FMDV在畜舍干燥垃圾 内存活时间为14天；在潮湿垃圾内为8天；在 土壤表面秋季为28天夏季为3天；在干草中为 140天；在畜舍污水中为21天；在-30℃的阴暗 低温环境中存活期达12年；
病原：
消毒药物： ①FMDV对酸很敏感，pH值6.0时，每分钟损 失90％，pH值5.0时每分钟又损失90％； ②2％苛性钠、3％-4％甲醛、0.5％-1％过氧乙 酸、10％新鲜石灰乳等常用消毒剂在15-25℃ 下经0.5-2小时才能杀灭病毒； ③碘酊、石炭酸、来苏儿、新洁尔灭等对 FMDV无杀灭效能； ④对紫外线敏感；
口蹄疫

口蹄疫

口蹄疫1 病原学2 流行病学3 致病机理4临床症状5 病理变化6 流行现状7 诊断8 综合防治9 综合防治重点难点解析参考文献口蹄疫（foot-and-month disease, FMD），在我国曾经被称为五号病，是由口蹄疫病毒（foot-and-month disease virus, FMDV）感染引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。

主要感染对象为牛、羊、猪等偶蹄类家畜及野生偶蹄动物。

该病由于发病率高，传播速度快，一旦暴发，将对畜牧业生产乃至整个国民经济带来重大损失，被国际兽疫局和联合国粮农组织列为A类传染病之首，我国也将该病列为一类传染病之第一位。

2013年初以来，随着免疫效果确切的O型口蹄疫疫苗研制成功并被批准在生产上应用，该病已经完全可以通过免疫有效预防，个别猪场即使不幸出现该病流行，也可以通过紧急免疫的办法有效快速被控制。

以下如无特别需要，有关口蹄疫的叙述，以猪口蹄疫为主：1 病原学FMDV属于小核糖核酸病毒科（Aphthovirus）口蹄疫病毒属，为已知最小的动物RNA病毒，正二十面体（近似球形）结构，无囊膜，病毒粒子直径为20~25nm（如图1）。

成熟病毒粒子约含30%的RNA，其余70%为蛋白质。

基因组为单股线状、约含8500个核苷酸的正链RNA。

5’端无帽子结构，以共价链与一个小分子蛋白3B（VPg）相连。

离5’末端400～500个核苷酸处是一个长约100～200个核苷酸的富含胞嘧啶核苷Poly（C）区，Poly（C）区后还有一个800个核苷酸左右的非编码区，往后是一个长达6500个核苷酸的编码区。

3’端有一非编码区，并带有Poly（A）尾巴。

Poly（C）前靠5’端一侧的较小部分可能仅与病毒RNA复制起始有关，Poly（C）后靠3’端一侧的较大部分包含编码蛋白的全部信息。

图1 口蹄疫病毒（图片来源：网上公开技术资料）FMDV基因组只有一个开放阅读框，病毒侵入机体后，病毒粒子与宿主细胞表面相互作用，通过受体介导的内吞作用进入宿主细胞内部，脱去衣壳的RNA在细胞内进行翻译，形成一个大的融合蛋白。