硫酸-高氯酸-钼锑抗比色法测定土壤全磷的注意事项

植株全磷含量测定钼锑抗比色法
植株全磷含量测定是一种常用的分析方法，钼锑抗比色法是其中一种常用的测定方法。

该方法基于钼酸钠在酸性条件下与磷酸盐形成复合物，被还原的钼酸钠被锑砷汞反应还原为蓝色化合物，通过比色法测定其吸光度来计算样品中磷的含量。

该方法的具体步骤如下：
1. 样品制备：将植株样品取适量，经过研磨、筛选等处理后，按照规定的方法进行矿酸或硝酸-过氧化氢消化。

2. 样品处理：取消化后的样品，加入硝酸、氯化钾等试剂，使磷酸盐转化为磷酸根离子。

3. 钼锑试剂的制备：将钼酸钠、醋酸和硫酸混合，加入氯化锑钠，制备钼锑试剂。

4. 反应：将处理后的样品加入钼锑试剂中，经过适当时间的反应后，被还原的钼酸钠被锑砷汞反应还原为蓝色化合物。

5. 吸光度测定：将反应产物在特定波长下进行比色测定，根据标准
曲线计算样品中磷的含量。

该方法的优点是简单、快速、精确，适用于大面积的植物磷素含量测定。

但是该方法也存在一些限制，例如样品中的其他化合物可能会影响测定结果，需要进行干扰消除等处理。

1土壤全磷的测定(硫酸一高氯酸消煮法)方法原理在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。

操作步骤1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。

2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。

3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。

轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。

同时做空白试验。

4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。

5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。

6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数。

7.工作曲线的绘制。

分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml 容量瓶中，加水稀释至约30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。

即得0，0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,mg/LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。

在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。

结果计算全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106)×100式中：显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L；显色液体积—本操作中为50ml；分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积；106—将ug换算成gW—土样重(g)。

测土配方施肥中土壤有效磷测定注意事项探析作者：石淑华来源：《种子科技》 2017年第8期摘要：针对应用碳酸氢钠提取-钼锑抗比色法测定土壤有效磷过程中，影响测定值的因素进行了阐述,并说明了测定过程中各环节应注意的事项,以供参考。

关键词：Olsen 法；土壤有效磷；土液比；温度；振荡频率；振荡时间测土配方施肥工作中最关键和最基础的环节之一是土壤有效养分测试方法的选择。

土壤有效磷是土壤肥力的重要指标之一，测定土壤速效磷的目的是为了确定作物高产质优、高效益的磷肥施用量。

在土壤肥力的常规测定中，土壤有效磷提取的影响因素最为复杂。

因磷肥的大量施用造成磷矿资源的加速枯竭，农田土壤磷素施用过多，造成了地下水污染和地下水富营养化日益严重的局面。

通过土壤速效磷的测定，有助于了解近期土壤磷素的供应情况，为合理施用肥料及提高磷的利用率提供可靠依据。

在国家农业标准中，采用的碳酸氢钠浸提-（Olsen 法）测定土壤中的有效磷含量，其中回归方程或校准曲线比较容易做出或求出测定结果，因此也较容易测定。

但要提高其测定精度，减少劳动工作量，还需要注意下面内容。

1 化学试剂的使用测试中要严格按《操作规程》要求准确配制所用的试剂，在配制化学试剂的过程中，要时刻注意观察去离子水、药剂和试剂的颜色变化，如发现异常情况，应及时查找原因。

（1）需选用质量合格的化学试剂、纯水、检测仪器及药品等，要求检测人员首先对将要使用的仪器进行校准。

化学剂要干燥、提纯等，以防药品、试剂带来误差和影响。

（2）试剂取出后，不可放回原瓶中，防止污染整瓶试剂。

在试剂的配制过程中，注意观察颜色，如果发现异常情况，应及时查找原因。

测试所需试剂、溶液、药剂称量和吸取要精确。

配制试剂时所使用的各种玻璃器皿，都要反复冲洗，保持清洁干净。

存放试剂的试剂瓶应干燥清洁。

（3）抗坏血酸很容易氧化变质，所以必须是棕色包装瓶，开启后观察是否发生变色。

抗坏血酸是白色晶体，如出现发黄或者有铁锈则表明已失效，不能继续使用。

土壤磷含量测定方法一、土壤磷含量测定方法土壤里的磷含量测定呀，这可有点小复杂，但也超有趣呢！1. 钼锑抗比色法这种方法原理其实就是利用磷和钼酸铵、抗坏血酸等试剂发生反应，生成一种有色的络合物。

然后我们就可以通过比色来确定磷的含量啦。

具体操作步骤：首先要采集土壤样品哦，就像寻宝一样，在我们想要研究的土地上取适量的土。

然后把土壤样品带回实验室，经过风干、研磨等处理，让土壤变得细细的。

接着进行土壤的消解，这一步就像是给土壤来个大变身，把里面的磷都释放出来。

把消解后的溶液定容到一定体积。

之后取适量的溶液，加入钼酸铵、抗坏血酸等试剂，混合均匀后，静置一会儿。

最后就可以用分光光度计来比色啦，根据标准曲线就能算出土壤中的磷含量。

不过这过程中要注意试剂的用量一定要准确，就像做菜放盐一样，多一点少一点都可能影响结果呢。

2. 酸溶 - 全磷测定法原理就是利用酸把土壤中的磷全部溶解出来，不管是有机磷还是无机磷。

操作的时候呢，也是先采集土壤。

然后在土壤里加入强酸，像硫酸、高氯酸等混合酸。

在加热的情况下让土壤和酸充分反应，这个时候可得小心啦，加热的温度要控制好，不能太高也不能太低，不然土壤里的磷可能就不能完全溶解出来或者会有其他物质干扰。

反应结束后，把溶液冷却，然后经过过滤、定容等步骤。

最后用合适的方法测定溶液中的磷含量，比如也可以用比色法或者其他仪器分析的方法。

3. 碱熔 - 全磷测定法这个方法的原理是利用碱来分解土壤中的磷。

开始也是采集土壤啦。

然后把土壤和氢氧化钠等碱试剂混合，在高温下熔融。

这一步就像在给土壤做一次超级变身的魔法，把磷都释放出来。

熔融后的样品冷却后，用水溶解，再经过酸化、定容等操作。

最后再用相应的测定方法来确定磷的含量。

不过在碱熔的时候要注意安全，高温和碱试剂都有点危险，就像和小怪兽打交道一样，要小心翼翼的。

土壤磷含量测定方法有这么多，我们可以根据不同的土壤类型、研究目的等选择合适的方法呢。

希望大家都能在探索土壤磷含量的世界里玩得开心！。

土壤全磷的测定（硫酸-高氯酸消煮钼锑抗比色法）2015-3-91 原理：土壤含磷矿物及有机物经与高沸点硫酸和强氧化剂高氯酸作用完全分解成正磷酸盐，高氯酸可加速氧化有机质，分解矿物质，有助于胶状硅脱水，络合三价铁离子，抑制硅铁干扰。

用5.5N酸度的钼锑抗比色测定。

如果同时测钾，可用NaOH熔融法。

2 试剂2.1 高氯酸2.2 硫酸2.3 5.5N钼锑显色剂，称取0.5g酒石酸氧锑钾（K（SbO）C4H4O6）（分子量667.85，二聚体）溶解到100ml 水中，称取10g钼酸铵（NH4）6Mo7O24.4H2O，溶于450ml水中，缓慢加入153ml浓硫酸，搅拌，将酒石酸氧锑钾溶液加入到钼酸铵溶液中，加水定容1000ml，混匀，避光保存。

2.4 钼锑抗显色液：取1,。

5gVc用100ml钼锑显色剂溶解，当天使用。

2.5 二硝基酚，称取0.2g 2,6-二硝基酚(变色点pH2.0-4.4无色-黄色)或2,4-二硝基酚(变色点pH2.0-4.0，无色-黄色)溶于100ml水中（饱和）。

2.6 40%氢氧化钠溶液：称取400g 氢氧化钠于1000ml烧杯中，在通风厨内，加水溶解，冷却后加水至1000ml，混匀。

2.7 50ppm磷标准溶液：50ppm磷标准液：105度烘干的磷酸二氢钾（分子量136.09）0.2195g加硫酸5ml，定容1000ml。

或者4.394g磷酸二氢钾加水800ml，硫酸10ml，冷却后定容1000ml为50ppm工作液。

3 操作：称取过100目筛土壤0.250xxg于100ml消煮管中，以少量水湿润，加浓硫酸5ml，摇动后（最好过夜），消煮前，加高氯酸1ml，360-380度消煮，土壤变白且管中冒白烟后继续消煮20分钟，冷却后，加水放热，定容，摇匀，过夜静置后待测。

4 测定：吸取待测液5ml，加水20ml，以2-4-二硝基酚（2滴）为指示剂，加40%氢氧化钠调整刚出现黄色，如果调整失误，可用稀硫酸调回。

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土壤全磷测定方法之一—— HClO4—H2SO4法一方法原理：用高氯酸分解样品，因为它既是一种强酸，又是一种强氧化剂，能氧化有机质，分解矿物质，而且高氯酸的脱水作用很强，有助于胶状硅的脱水，并能与Fe3+络合，在灰的比色测定中抑制了硅和铁的干扰。

硫酸的存在提高消化液的温度，同时防止消化过程中溶液蒸干，以利消化作用的顺利进行。

本法用于一般土壤样品分解率达97%～98%，但对红壤性土壤样品分解率只有95%左右。

溶液中磷的测定采用钼锑抗比色法。

二主要仪器： 721型分光光度计；LNK-872型红外消化炉。

三试剂：浓硫酸、高氯酸、二硝基酚指示剂溶液、4mol·L-1氢氧化钠溶液、2mol·L-1（1/2H2SO4）溶液、钼锑抗试剂、磷标准溶液。

四操作步骤：（1）待测液的制备准确称取通过100目筛子的风干土样0.5000～1.0000g，置于50mL开氏瓶（或100mL消化管）中，以少量水湿润后，加浓H2SO48mL，摇匀后，再加70%～72%HClO410滴，摇匀，瓶口上加一个小漏斗，置于电沪上加热消煮（至溶液开始转白后继续消煮）20min。

全部消煮时间为40～60min。

在样品分解的同时做一个空白试验，即所用试剂同上，但不加土样，同样消煮得空白消煮液。

将冷却后的消煮液倒入100mL容量瓶中（容量瓶中事先盛水30～40mL），用水冲洗开氏瓶（用水应根据少量多次的原则），轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，加水定容。

然后用干的定量滤纸过滤，将滤液接收在100mL干燥的三角瓶中待测定。

（2）测定吸取滤液5mL注入50mL容量瓶中，用水冲稀至30mL，加二硝基酚指示剂2滴，滴加4mol·L-1 NaOH溶液直至溶液变为黄色，再加2mol·L-1（1/2H2SO4）溶液数滴，使溶液的黄色刚刚褪去。

然后加钼锑抗试剂5mL，再加水定容50mL，摇匀。

30min后，用880nm 或700nm波长进行比色，以空白液的透光率为100（或吸光度为0），读出测定液的透光度或吸收值。

1土壤全磷的测定(硫酸一高氯酸消煮法)方法原理在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。

操作步骤1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。

2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。

3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。

轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。

同时做空白试验。

4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。

5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。

6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数。

7.工作曲线的绘制。

分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml 容量瓶中，加水稀释至约30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。

即得0，,,,,,,mg/LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。

在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。

结果计算全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106)×100式中：显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L；显色液体积—本操作中为50ml；分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积；106—将ug换算成gW—土样重(g)。

钼锑抗比色法测定土壤全磷的最佳显色条件
和比色波长
抗比色法测定土壤全磷是用于评价土壤养分的有效方法，在现实生活中最常见的方法之一是使用抗比色法测定土壤全磷。

抗比色法是一种利用含量物质与试剂反应生成易溶性比色色谱的方法，为了有效测定土壤全磷，需要找到最佳显色条件和比色波长。

首先，在抗比色法测定土壤全磷之前，对样品进行氯化处理，以使磷分解为可溶性的磷酸盐，以便测定。

在进行抗比色分析时，使用硫正甲酸溴（Br2-MSA）溶液作为比色剂，将磷离子与硝酸盐离子有机化合物结合生成一个红色比色色谱。

其次，在获得最佳显色条件之前，需要对反应条件进行研究，包括试剂比例、反应温度和反应时间等。

经过几次试验，我们发现，最佳比色条件是613nm的比色波长，4:1的Br2-MSA溶液比例，反应时间为10min，反应温度为25℃。

另外，在实践中，可以根据抗比色测定结果，逐步优化比色条件，以得到更准确的结果。

最后，建议使用613nm的比色波长，4:1的Br2-MSA溶液比例，反应时间为10min，反应温度为25℃这一组最佳显色条件来进行抗比色法测定土壤全磷。

这一显色条件能够有效提高测定精度，从而保证测定结果的准确性和可靠性。

FHZDZTR0057 土壤 全磷的测定 酸溶光度法F-HZ-DZ-TR-0057土壤—全磷的测定—酸溶光度法1 范围本方法适用于土壤全磷的测定。

2 原理土样用硫酸-高氯酸溶解，然后在一定酸度和三价锑离子存在下，磷与钼酸铵形成锑磷钼混合杂多酸，以抗坏血酸还原为磷钼蓝进行光度法测定。

3 试剂3.1 高氯酸（ρ1.67g/mL ）。

3.2 硫酸（ρ1.84g/mL ）。

3.3 氢氧化钠溶液：4mol/L ，称取16.0g 氢氧化钠溶于水，再加水稀释至100mL 。

3.4 对硝基酚指示剂：称取0.20g 对硝基酚，溶于100mL 水中。

3.5 硫酸溶液：0.5mol/L ，量取28.0mL 硫酸（ρ1.84g/mL ），缓慢加入水中，再加水稀释至1000mL 。

3.6 钼锑贮存液：量取153mL 硫酸（ρ 1.84g/mL ），缓慢地加入400mL 水中，搅拌，冷却。

另取10g 钼酸铵[(NH 4)6Mo 7O 24·4H 2O]溶解于约60℃的300mL 水中，冷却。

然后将硫酸溶液缓慢倒入钼酸铵溶液中，再加入100mL 5g/L 酒石酸锑钾（KSbOC 4H 4O 6·21H 2O ）溶液，最后用水稀释至1000mL ，避光贮存。

3.7 钼锑抗显色剂：称取1.50g 抗坏血酸（C 6H 8O 6），溶于100mL 钼锑贮存液中，随用随配。

3.8 磷标准溶液：称取在105℃烘2h 的磷酸二氢钾（KH 2PO 4）0.4394g(精确至0.0001g)溶于水中，加5mL 硫酸（ρ1.84g/mL ），再加水稀释至1000mL ，此溶液1mL 含100µg 磷。

吸取10.00mL 上述标准溶液置于200mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，此溶液1mL 含5µg 磷，不宜久存。

4 仪器4.1 分光光度计。

4.2 凯氏烧瓶，100mL 。

4.3 容量瓶，50mL ，100mL 。

・土壤肥料・编号试剂消光值#消光值#吸待测液$%&’’()*+"’()*+" !’’()*,"’()*+( *’’()*-’’()*+! "’’()*+(’()*+"’’’()*-.’()*+* ,’’()*-!’()*+& -’’()*,!’()*+( +’’()*-(’()*+( .’’()*-!’()*+& &(’’()*,-’()*+&加,)’/硫酸钼锑抗显色液$%加"/硫酸钼锑抗显色液$%按照新疆维吾尔自治区地方标准012,’((1&&&""’—+-新疆土壤分析方法标准，土壤全磷测定方法，用,)’/硫酸钼锑抗显色液，其结果平行样误差大，重现性差。

主要原因：样品经高氯酸———硫酸酸溶、定容，吸取待测液，以饱和碳酸钠（因消煮液酸浓度较大，需要较多的碱去中和）和’3硫酸调节溶液呈微黄色。

在分析大批样品时，逐一中和，操作较繁，需要很长的时间，调节酸度（颜色深浅）的差异直接影响样品的真实性。

因此，将,)’/硫酸钼锑抗显色剂改为"/硫酸钼锑抗显色剂，效果显著，误差小，表一&、钼锑抗法要求显色中4!56"浓度为()"’7 (),’/，土壤消煮时加浓4!56"*$%，高氯酸+滴约*)"$%，消煮后大约尚残留!)’7!)-$%定容’($%（每毫升溶液中4!56"为()(’"$%），此液4!56"浓度为&).+-!/，从中吸取’$%置于’($%容量瓶，稀释，此液4!56"浓度为()&.+-!/。

!、"/硫酸钼锑抗显色剂：取4!56"&(+)-$%，定容&((($%，（每$%溶液中4!56"为()&(+-$%），显色时加’$%，定容’($%，此液酸度为()"(((/。

硫酸-高氯酸-钼锑抗比色法测定土壤全磷的注意事项摘要针对应用硫酸-高氯酸-钼锑抗比色法测定土壤全磷过程中影响测定值的因素进行了阐述,包括样重、消煮时间、定溶浓度、显色时间与温度等,并说明了测定过程中各环节应注意的事项,以供参考。

关键词硫酸-高氯酸-钼锑抗比色法;测定;土壤全磷;影响因素;注意事项从2007年起至今,门源县农业技术推广中心依托农业部实施的《测土配方施肥补贴》项目,采集全县不同地区不同土质,并就氮、磷、钾、有机质、酸碱度等指标进行了分析测定。

土壤中含磷化合物绝大部分是难溶性的,能被水或弱酸溶解的数量很少,很难被作物吸收利用,因此门源地区农作物经常出现缺磷症状。

通过对土壤含磷量的测定,可以了解土壤中磷的丰缺状况,为合理施用磷肥提供科学依据。

全磷的测定方法有硫酸—高氯酸—钼锑抗比色法、硫酸—高氯酸—钼抗比色法等多种,其中前者是最常用的一种,该方法具有操作简单、对酸度要求不太严格的特点,适应于一般化验室分析。

1影响硫酸—高氯酸—钼锑抗比色法全磷测定值的因素一是样重。

样重过大,如0.220 1g,用吸光值计算P2O5在土壤中的含量时数值会偏小,使得平行样出现不平行情况。

样重过小,则数值偏大。

二是消煮时间。

消煮时间一般要求45~60min。

若消煮时间过短,小于45min,煮出的溶液颜色和溶液粘度均达不到要求,溶液颜色呈现为灰白色。

溶液粘度小,还会影响调整酸度时的颜色变化,引起加入的氢氧化钠溶液的量过多或过少,影响结果计算的准确性。

消煮时间大于60min,会造成溶液焦糊。

三是定容浓度。

定容时超过容量瓶刻度线,造成溶液浓度过稀,定容显色后溶液呈现的微蓝色过淡,在分光光度计中读出的吸光值与同等样品相比,数值偏小。

四是显色时间。

显色时间达到30min,显色完全。

显色时间达不到30min,会使显色不完全,测出的吸光值偏小;显色时间过长,待测液颜色过浓,测出的吸光值偏大,或使分光光度计不读值。

五是显色温度。

(完整word版)钼锑抗比色法测定土壤全磷钼锑抗比色法测定土壤全磷1、称取通过0。

149mm孔径筛的风干土样0.25g，小心放入镍坩埚底部，切勿黏在壁上。

加入无水乙醇3～4滴，润湿样品，在样品上平铺2.0g氢氧化钠。

将坩埚放入高温电炉,升温。

当温度升至400℃左右时切断电源，暂停15分钟。

然后继续升温至720℃，并保持15分钟，取出稍冷。

2、在坩埚中加入80℃的水10ml，待熔块溶解后无损转入100ml容量瓶中,同时用3mol/L的硫酸溶液l0ml和水多次洗坩埚，洗涤液也一并移入容量瓶。

冷却，定容。

用无磷滤纸干过滤或离心澄清.同时做两个空白试验。

3、吸取待测样品溶液5~10mL于50mL容量瓶中，用水稀释至约30mL。

加入2～3滴二硝基酚指示剂，并用100g/L的碳酸钠溶液或5％硫酸溶液调节溶液至刚呈微黄色。

加入5.00mL钼锑抗显色剂，摇匀，加水定容.在室温20℃以上条件下，放置30分钟后待测。

4、分别吸取5ug/mL的磷标准溶液0、1。

00、2。

00、3。

00、4.00、5。

00、6.00ml于50ml容量瓶中，同时加入与显色测定所用的样品溶液等体积的空白试液，用水稀释至约30ml，同样品测定调节酸度,显色，定容。

用水稀释至约30ml，加入5.00ml钼锑抗显色剂，定容，即得含磷量分别为0。

0、0.1、0.2、0。

3、0.4、0.5、0.6ug/mL的系列溶液.于20℃以上温度放置30分钟后，以磷含量为零的系列溶液调节仪器零点，于波长700nm处,在分光光度计上用1cm光径比色皿进行比色测定。

记录下样品浓度数值。

5、把样品浓度数值代入公式，计算土壤样品的全磷含量（g/kg），计算结果保留小数点后两位。

1实验内容和原理1.1土壤全磷（P ）是指土壤中各种形态磷素的总和。

土壤全磷含量的高低，受土壤母质、成土作用和耕作施肥的影响。

土壤中的磷可以分为无机磷和有机磷：无机磷以吸附态和钙、铁、铝等的磷酸盐为主，有机磷组成和结构较为复杂，尚不可知，但大多数以高分子形态存在。

1.2土壤样品的分解（HClO 4—H 2SO 4消煮法）利用HClO 4分解样品，其为强酸和强氧化剂，能氧化有机质，分解矿物质。

利用H 2SO 4提高反应温度，防止消化过程中溶液蒸干。

本法用于一般土壤样品分解率达97%-98%，但对红壤性土壤样品分解率只有95%左右。

1.3溶液中磷的测定（钼锑抗-硫酸比色法）（1）原理采用钼锑抗-硫酸体系测定。

（2）配置A 溶液（5g ·L -1酒石酸氧锑钾溶液）。

B 溶液（钼酸铵—硫酸溶液）。

1.4土壤全磷计算公式土壤全磷（P ）（g ·kg -1）=式中：ρ———待测液中磷的质量浓度（g ·kg -1）；V———样品制备溶液的mL 数；m———烘干土质量（g ）；V 1———吸取滤液体积（mL ）；V 2———显色的溶液体积（mL ）；10-3———将μg 数换算成的g ·kg -1乘数。

2实验器材与仪器2.1主要仪器722型分光光度计、LNK-872型红外消化炉；2.2试剂浓硫酸（H 2SO 4，ρ≈1.84g·cm -3，分析纯）、高氯酸（HClO 4≈70%-72%，分析纯）、二硝基酚指示剂溶液（指示剂的变色pH≈3，酸性时无色，碱性时呈黄色）；4mol ·L -1氢氧化钠溶液；2mol ·L -1（1/2H 2SO 4）溶液；钼锑抗试剂；磷标准溶液（准确称取在105℃烘箱中烘干的KH 2PO 4（分析纯）0.2195g，溶解在400mL 土壤中的磷检测方法吴焕峰（菏泽市牡丹区牡丹办事处农业综合服务中心，山东菏泽274000）摘要土壤有效磷是土壤中可以被吸收的组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷以及有机磷。

钼锑抗比色法测定可溶性磷含量解磷细菌解磷量测定,土壤,水体可溶性磷测定试剂准备：钼锑贮存溶液：量取153ml浓硫酸(分析纯，密度1.84g/ml)，缓缓加入到400ml蒸馏水中，不断搅拌，冷却。

另称取经磨细的钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·H2O，分析纯]10g溶于温度约60℃300ml水中，冷却。

然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。

再加入0.5％酒石酸锑钾[KSbOC4H4O6·1/2H2O，分析纯]溶液100ml，冷却后，加水稀释至1000ml，摇匀，贮于棕色试剂瓶中，此贮备液含钼酸铵1％，硫酸2.75mol/L。

钼锑抗显色剂：称取1.50g抗坏血酸溶于100ml钼锑贮存溶液中，此溶液有效期不长，宜随配随用。

5mg/L磷标准溶液：0.4394g在50℃烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4。

分析纯)，100ml水，加5ml浓硫酸(防腐)，用水定容到1L，浓度为100mg/L磷(P)，此溶液可以长期保存。

吸取上述溶液10ml于200ml容量瓶中，加水至标度，浓度为5mg/L磷(P)标准溶液，此溶液不宜久存。

标准曲线的绘制：分别准确吸取5mg/L磷（K2HPO4）标准溶液（也可用摩尔浓度）0、2、4、6、8、10ml于50ml容量瓶中，同时加入与显色测定所用的样品溶液等体积的空白溶液，加入二硝基酚指示剂2~3滴，并用100g/L碳酸钠溶液或50ml/L硫酸溶液调节至溶液刚呈微黄色，准确加入5ml钼锑抗显色剂，摇匀，加水定容，即得含磷(P)量分别为0.0、0.2、0.4、0.8、1.0mg/L的标准溶液系列。

摇匀，于室温15℃以上，放置30min。

在波长700nm处，测定其吸光度，以吸光度为纵坐标，磷浓度(mg/L)为横坐标，绘制标准曲线。

可溶性磷测定（显色与比色）：将待测液体（细菌真菌培养液离心后取上清）适量(第一次做需摸索加入量)移至50ml容量瓶中，用水稀释至总体积约3/5处，加入二硝基酚指示剂1~2滴，并用100g/L碳酸钠（或氢氧化钠）溶液或50ml/L硫酸（或盐酸）溶液调节至溶液刚呈微黄色，准确加入5ml钼锑抗显色剂，摇匀，加水定容，室温15℃以上，解磷细菌解磷量测定,土壤,水体可溶性磷测定放置30min（8h内）。