虎杖甙(白藜芦醇甙、虎杖苷、Polydatin)

DOI :10.11895/j.issn.0253⁃3820.140654定量核磁共振波谱法同时测定中药虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的含量禹珊1　郭强胜1　王会琳2　高建平2　许旭*1,31(上海应用技术学院化学与环境工程学院,上海201418)2(上海中医药大学中药学院,上海201203)3(中国科学院天然产物有机合成化学重点实验室,上海200032)摘　要　建立了定量核磁共振波谱法同时测定虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的方法㊂样品用80%乙醇和丙酮两次超声提取净化,再用定量核磁共振波谱法测定㊂考察了样品预处理和核磁共振实验条件对测定结果的影响,选择氘代二甲亚砜⁃重水(10∶1,V /V )为溶剂,用基准物质邻苯二甲酸氢钾标定的2,3,5⁃三碘苯甲酸为内标,选择脉冲延迟时间为5s,采样次数为32次㊂定量峰为6.388~6.391(白藜芦醇:H⁃2,6,d,2H)和6.322~6.330(虎杖苷:H⁃4,t,1H)㊂结果表明,NMR 测定的精密度均小于0.6%,线性相关系数(r )均大于0.999,白藜芦醇和虎杖苷的检出限分别为0.23和0.24g /L,定量限分别为0.69和1.57g /L,包括样品提取过程的回收率分别为97.7%~103.5%(RSD =2.4%)和94.5%~99.2%(RSD =1.6%),显示出定量核磁共振法在中药定量时的可靠性㊂实际测定4种虎杖饮片及配方颗粒样品中白藜芦醇和虎杖苷含量分别为3.57~5.69mg /g 和12.73~24.07mg /g㊂关键词　定量核磁共振;虎杖;白藜芦醇;虎杖苷　2014⁃08⁃20收稿;2014⁃10⁃05接受本文系中国科学院天然产物有机合成化学重点实验室研究基金资助项目(2013⁃2014)*E⁃mail:xuxu3426@1　引　言虎杖为蓼科植物虎杖(Poilgonum cuspidatum Sieb.et Zucc )的干燥根茎及根,主要功效为利湿退黄,清热解毒,散瘀止痛,具有抗菌抗病毒㊁扩张血管㊁抗肿瘤㊁调节代谢等药理作用[1]㊂虎杖作为常用中药已收入中国药典[2],不久也会被收入欧洲药典[3]㊂虎杖含有大黄素和大黄素甲醚等蒽醌类化合物㊁白藜芦醇和虎杖苷(白藜芦醇苷)等二苯乙烯类化合物㊁鞣质和多糖等成分㊂其中,白藜芦醇和虎杖苷是虎杖中两种主要药效成分[1,2](化学结构见图1),这两种成分测定主要以高效液相色谱[2,4]和液相色谱⁃　图1　白藜芦醇和虎杖苷的结构式Fig.1　Chemical structure of resveratrol and polydatin质谱联用[5]为主㊂定量核磁共振波谱(Quantitative nuclear magnetic resonance spectroscopy,qNMR)方法简单㊁快捷,实际样品测定时可以不使用待测组分的对照品[6]㊂已先后被美国药典㊁英国药典[7]㊁欧洲药典收录,中国药典2010版也已收录[8]㊂近几年来,qNMR 方法已被广泛用于化学药物[9~13]㊁中药与植物提取物[14~19]㊁体液样品[20,21]㊁异构体[22]㊁食品[23,24]等的定量分析㊂本研究在对虎杖样品进行有效提取的基础上,建立了qNMR 定量测定其中白藜芦醇和虎杖苷两种药效成分的方法,考察了实验条件的影响,对所建立的方法进行了验证,并用于实际样品分析㊂2　实验部分2.1　仪器与试剂Bruker AVANCE III 500MHz 核磁共振谱仪(德国Bruker 公司);M2P 精密天平(精度0.001mg,德第43卷2015年1月 分析化学(FENXI HUAXUE)　研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry 第1期69~7407 分析化学第43卷国Startorius公司);AB204⁃N天平(精度0.1mg,上海世义精密仪器有限公司);PS⁃20超声波清洗仪(东莞市洁康超声设备公司);RE⁃52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)㊂dDMSO(氘代二甲基亚砜,Dimethyl Sulphoxide⁃D6,99.9%D)和D2O(重水,Deuterium Oxide, 99.9%D)(Cambridge Isotope Laboratories Inc.);白藜芦醇(南京泽朗医药科技有限公司,批号ZL130705008YY);虎杖苷(南京泽朗医药科技有限公司,批号ZL20120907YY);2,3,5⁃三碘苯甲酸(Aladdin公司,批号23527);邻苯二甲酸氢钾(基准物质,99.05%~100.05%,国药集团上海化学试剂公司,批号20091218);无水乙醇和丙酮(分析纯,国药集团化学试剂公司)㊂实验用水为某品牌蒸馏水㊂样品1为虎杖中药超微饮片(湖南春光九汇现代中药有限公司,规格:1.2g/袋,批号130439);样品2为虎杖中药配方颗粒(华润三九医药股份有限公司,规格:1g/袋,批号1109001S);样品3为虎杖中药配方颗粒(江阴天江药业有限公司,规格:1g/袋,批号1109081);样品4为虎杖中药饮片(中药原产地:浙江,上海华浦中药饮片有限公司生产,批号:XD13032601)㊂2.2　实验方法2.2.1　样品制备　虎杖样品研细,准确称取粉末1g,加入30mL乙醇⁃水(4∶1,V/V)摇匀,室温超声30min,抽滤,滤液于55℃水浴旋干㊂称重后称取部分产物与20mL丙酮混匀,超声30min,抽滤,残渣重复丙酮提取一次,合并滤液,于40℃水浴上旋干得产物并称重㊂称取适量产物及内标2,3,5⁃三碘苯甲酸于塑料离心管中,加入0.55mL dDMSO⁃D2O(10∶1,V/V),混合,超声2min,转移至5mm核磁管中待测㊂2.2.2　核磁共振定量　核磁共振(NMR)采集条件:脉冲序列zg30,脉冲宽度14.4μs㊂选择延迟时间5s,扫描次数32次,测定样品的NMR谱图㊂积分时,先将NMR谱图基线调平,选定峰积分区间,每个峰积分3~5次,相对标准偏差(RSD)<1%时取平均值㊂用中国药典2010版中的绝对定量公式计算待测组分的重量[9]:W s=W r×(A s/A r)×(E s/E r)(1)其中W r为内标物的重量,A s和A r分别为供试品特征峰和内标峰的峰面积,E s和E r分别为供试品和内标物的质子当量重量(质量)(以分子量除以特征峰的质子数计算得到),然后根据称样量计算组分在样品中的含量㊂3　结果与讨论3.1　样品制备方法的选择3.1.1　样品提取条件的优化　虎杖中有效成分提取方法已有不少研究[25,26],相对传统的醇提法和水提法等,超声辅助提取法更适用于虎杖中热敏性物质白藜芦醇和虎杖苷的提取,提取时间短,提取率高㊂故采用超声提取法㊂虎杖中的白藜芦醇和虎杖苷在70~80℃时会发生部分分解,强光照射也会造成部分损失[26,27],常温下稳定性良好㊂故本实验的超声提取在室温进行,无强光照射,提取时间30min,旋蒸温度均在60℃以内㊂根据文献[25,26],以样品2为研究对象,先用一种溶剂提取,比较了甲醇㊁80%甲醇㊁80%乙醇㊁丙酮㊁以及混合溶剂80%乙醇⁃丙酮(1∶1,V/V)的提取效果㊂结果表明,甲醇㊁80%甲醇㊁80%乙醇以及80%乙醇⁃丙酮(1∶1,V/V)一次提取即可达到提取完全的效果,但测试谱图杂峰较多,影响定量;而丙酮重复提取3次后仍可检测到较高残留,但谱图杂峰较少且不干扰待测组分的定量峰㊂因此考虑两步提取的方式㊂选择80%乙醇做第一步完全提取的溶剂;第二步提取选择丙酮为溶剂净化产物,结果表明,丙酮两次提取即可基本提取完全(第三次提取产物旋蒸后测组分定量峰信噪比仅为17,残留很少,基本不影响定量结果)㊂实验确定样品提取的条件为:室温,无强光照射,80%乙醇一次超声提取,产物旋干后再经丙酮两次超声提取,时间均为30min㊂3.1.2　氘代溶剂　单独以dDMSO为溶剂时,待测样品图谱中白藜芦醇和虎杖苷的定量峰旁边存在干扰峰㊂尝试dDMSO⁃D2O混合溶剂,两定量峰可获得较好分离,且没有干扰㊂最终选定氘代溶剂为dDMSO⁃D 2O(10∶1,V /V )㊂3.2　内标物的选择尝试了邻苯二甲酸氢钾㊁顺丁烯二酸㊁反丁烯二酸㊁对苯二甲醛㊁苯甲酸㊁3,5⁃二硝基苯甲酸㊁2,3,5⁃三碘苯甲酸㊂仅有2,3,5⁃三碘苯甲酸不与样品峰互相干扰㊂故选择2,3,5⁃三碘苯甲酸为内标㊂3.3　NMR 峰归属及定量峰的确认3.3.1　NMR 峰归属　用2.2节的方法,分别对白藜芦醇㊁虎杖苷㊁内标以及3者的混合物进行NMR检测㊂对比图2中各图,归属混合物谱图(D)中的各信号峰㊂δ6.0~8.5区间段内为白藜芦醇峰:δ6.097~6.105(t,1H),6.388~6.391(d,2H),6.743~6.760(d,2H),6.783~6.816(d,1H),6.922~6.955(d,1H),7.376⁃7.393(d,1H);虎杖苷峰:6.322~6.330(t,1H),6.573(s,1H),6.715(s,1H),6.747~6.764(d,2H),6.846~6.878(d,1H),7.010~7.043(d,1H),7.388~7.404(d,1H);2,3,5⁃三碘苯甲酸:7.727~7.730(d,1H),8.329~8.332(d,1H)㊂图2　对照品和内标的NMR 测试结果在化学位移δ6.0~8.5区间段放大图Fig.2　NMR spectra of chemical references and internal standard in δ6.0-8.5range白藜芦醇(A);虎杖苷(B);2,3,5⁃三碘苯甲酸(C);A㊁B 和C 的混合物(D)㊂Resveratrol (A);Polydatin (B);2,3,5⁃triiodobenzoate (C);the mixture of A,B and C (D).3.3.2　定量峰确认　取样品1,用2.2节的方法测得NMR 谱图(图3A),与纯品混合图谱(图2D)比较,选定H⁃2,6(6.388~6.391,d,2H)(图3B 中峰1)为白藜芦醇定量峰;虎杖苷定量峰为H⁃4(6.322~6.330,t,1H)(图3B 中峰2);内标峰为H⁃6(8.329~8.332,d,1H)(图3B 中IS)㊂3.4　对2,3,5⁃三碘苯甲酸,白藜芦醇和虎杖苷的含量校正以dDMSO⁃D 2O(4∶1,V /V )为溶剂,基准物质邻苯二甲酸氢钾的NMR 峰H⁃3,6(7.917~7.935,2H,dd)与3种纯品的NMR 定量峰互不干扰,故选其作为校准2,3,5⁃三碘苯甲酸(定量峰为H⁃6(8.189~8.193,1H,d)),白藜芦醇(定量峰H⁃4(6.097~6.105,1H,t))和虎杖苷(定量峰H⁃4(6.322~6.330,1H,t))含量的内标,采用qNMR 绝对定量模式对3种纯品进行含量校正㊂实验测得2,3,5⁃三碘苯甲酸含量为96.64%,RSD 为0.6%;白藜芦醇纯品含量为98.64%,RSD 为0.4%;虎杖苷纯品含量为98.45%,RSD 为0.6%㊂下面的实验使用校正后的含量值进行㊂3.5　方法验证3.5.1　精密度　称取样品4制备的旋干产物和内标,用2.2节的方法分别在日内和日间各做6组测试,结果白藜芦醇峰面积/内标峰面积(A 1/A r )日内RSD 为0.2%,日间RSD 为0.5%;虎杖苷峰面积/内标峰面积(A 2/A r )日内RSD 分别为0.4%,日间RSD 为0.5%,精密度好,也说明样品稳定性好㊂3.5.2　线性　精密称取6组白藜芦醇0.960~3.318mg,分别加入虎杖苷0.860~3.500mg 和2mg 内标,加入0.50mL 溶剂混匀,超声溶解后按2.2节的方法获得NMR 谱图㊂以(样品/内标)质量比为横坐标(x ),NMR 定量峰面积比为纵坐标(y ),用纯品对照品评价的零截距标准曲线分别为:白藜芦醇y =4.4368x ,相关系数R =0.9994;虎杖苷y =1.2885x ,R =0.9995㊂理论计算线性曲线的斜率对白藜芦醇为17第1期禹珊等:定量核磁共振波谱法同时测定中药虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的含量 图3　虎杖提取样品与混合对照品的NMR 谱图Fig.3　NMR spectra of Polygonum Cuspidatum sample and mixed chemical references样品1处理后测定的NMR 谱图(A);(A)图中6.0⁃8.5化学位移区间段放大图(B);白藜芦醇,虎杖苷,内标物混合物NMR谱图6.0~8.5化学位移区间段放大图(C)㊂(A)Polygonum Cuspidatum sample 1;(B)The enlarge part of δ6.0-8.5in Fig.A;(C)The enlarge part of δ6.0-8.5in NMRof mixture of resveratrol,polydatin and 2,3,5⁃triiodobenzoate.4.3797,对虎杖苷为1.2803㊂两者接近,可以直接用绝对定量模式测定㊂3.5.3　检出限和定量限　qNMR 检出限(LOD)和定量限(LOQ)可由LOD =3.3σ/S,LOQ =10σ/S 得到,式中σ指非零截距线性回归曲线Y 轴截距的偏差,S 指非零截距线性回归曲线斜率[6,17]㊂由此算得白藜芦醇LOD =0.057,LOQ =0.173;虎杖苷LOD =0.059,LOQ =0.179㊂根据本实验中溶剂和内标的量计算白藜芦醇的LOD =0.23g /L,LOQ =0.69g /L;虎杖苷LOD =0.24g /L,LOQ =0.72g /L㊂英国药典[8]对核磁定量方法要求在S /N ≥150∶1,这也可以作为LOQ 的指标,以样品1的NMR 测定谱图,根据绝对定量公式[8]算得白藜芦醇和虎杖苷的LOQ 分别为0.47和1.57g /L㊂综上,本方法qNMR 对白藜芦醇和虎杖苷的LOQ 分别为0.69和1.57g /L,LOD 分别为0.23和0.24g /L㊂表1　虎杖样品白藜芦醇和虎杖苷的含量测定(n =3)Table 1　Quantitative result of resveratrol and polydatin in polygonum cuspidatum samples(n =3)样品Sample 白藜芦醇Resveratrol 平均值Mean (mg /g)RSD (%)虎杖苷Polydatin 平均值Mean (mg /g)RSD (%)样品1Sample 1 5.00 2.816.43 1.4样品2Sample 2 5.690.6724.07 1.1样品3Sample 3 3.57 2.023.76 2.1样品4Sample 4 5.43 1.112.73 1.23.5.4样品分析　按2.2节的方法,对市售4种虎杖样品中测定白藜芦醇和虎杖苷的结果见表1㊂与相关文献[4]中HPLC 法测定饮片中白藜芦醇(1.1~5.1mg /g )和虎杖苷(6.3~29.0mg /g)的含量对比,本实验药材饮片(样品4)中该两种成分含量基本相符㊂3.5.5　样品提取后qNMR 方法的回收率　取样品1提取后产物,用2.2节的qNMR法测定其中所含白藜芦醇和虎杖苷的含量;加入白藜芦醇和虎杖苷后再测定含量,计算加标回收率㊂结果白藜芦醇回收率为99.6%~102.3%,RSD为1.0%(n =6);虎杖苷回收率为98.7%~101.1%,RSD 为0.9%(n =6)㊂3.5.6　包括样品提取过程的白藜芦醇和虎杖苷回收率　分别准确称取6份0.5g 左右样品1,向其中每份均加入精密称取的白藜芦醇和虎杖苷,用2.2节的方法提取并测定含量,计算回收率㊂得到包括样品提取过程的白藜芦醇回收率为97.7%~103.5%,RSD =2.4%(n =6);虎杖苷回收率为94.5%~99.2%,RSD =1.6%(n =6)㊂考虑qNMR 回收率,显示组分提取较为完全且重现㊂研究结果表明,本方法可同时定量分析中药虎杖中白藜芦醇和虎杖苷,方法精密度好,线性评价显示可以直接用绝对定量公式计算含量,定量分析结果准确㊂致谢　感谢中科院上海有机化学研究所李光玉在定量NMR 方法方面提供的帮助㊂27 分析化学第43卷References 1　FAN Hui⁃Ting,DING Shi⁃Lan,LIN Hong⁃Sheng.China Journal of Chinese Materia Medica ,2013,38(15):2545-2548樊慧婷,丁世兰,林洪生.中国中药杂志,2013,38(15):2545-25482　National Pharmacopoeia Committee.The Pharmacopoeia of the People′s Republic of China (Part I,2010Ed.),Beijing:China Medical Science Press,2010:194-195国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部,2010年版),北京:中国医药科技出版社,2010:194-1953　Frédérich M,Wauters J N,Tits M,Jason C,De Tullio,P,Van der Heyden,Y,Fan G,Angenot L.Planta Med.,2011,77(1):81-864　QI Hui,ZHANG Mian,WANG Zheng⁃Tao.China Journal of Chinese 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Polydatin inPolygonum Cuspidatum by Quantitative Nuclear MagneticResonance SpectroscopyYU Shan1,GUO Qiang⁃Sheng1,WANG Hui⁃Lin2,GAO Jian⁃Ping2,XU Xu*1,3 1(School of Chemical and Environmental Engineering,Shanghai Institute of Technology,Shanghai201418,China)2(Department of Pharmacology,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai201203,China)3(Key Laboratory of Synthetic Chemistry of Natural Substances,Shanghai Institute of Organic Chemistry,Chinese Academy of Sciences,Shanghai200032,China)Abstract　A quantitative nuclear magnetic resonance spectroscopic(qNMR)method was established for the simultaneous determination of resveratrol and polydatin in Polygonum Cuspidatum traditional Chinese herb cuts and granule.The2⁃step ultrasonic extraction method using80%alcohol and acetone was used for fully extracting these two components in samples before qNMR determination.The qNMR experimental conditions were investigated and deuterated dimethyl sulphoxide⁃deuterium oxide(10∶1,V/V)was selected as solvent, the pulse delay time was5s,the scan number was32,2,3,5⁃triiodobenzoate was used as internal standard which was calibrated with primary standard substance of potassium hydrogen phthalate.The1H⁃NMR peaks at δ6.388-6.391(d,2H)of resveratrol andδ6.322-6.330(t,1H)of polydatin were chosen as the quantitative peaks.Method validation was performed in terms of precision(RSD<0.6%),linearity (correlative constants R2>0.999),limit of detection(0.23g/L for resveratrol and0.24g/L for polydatin) and limit of quantitation(resveratrol0.69g/L,polydatin1.57g/L),recovery(resveratrol97.7%-103.5%,RSD=2.4%,polydatin94.5%-99.2%,RSD=1.6%,including the sample extraction and preparaton process).The results showed the reliability of qNMR for traditional Chinese medicine assay.The resveratrol and polydatin in Polygonum Cuspidatum real cuts and granule samples were experimental determined as3.57-5.69mg/g and12.73-24.07mg/g,respectively.Keywords　Quantitative nuclear magnetic resonance;Polygonum cuspidatum;Resveratrol;Polydatin(Received20August2014;accepted5October2014)。

虎杖中白藜芦醇苷提取分离工艺研究虎杖中白藜芦醇苷是一种具有抗氧化、抗炎症、抗肿瘤等多种生物活性的天然产物。

本文通过对虎杖中白藜芦醇苷的提取分离工艺进行研究，旨在寻找一种高效、经济、环保的提取方法，为进一步开发利用虎杖资源提供科学依据。

我们需要选择适宜的提取溶剂。

根据文献报道，乙醇是一种常用的提取溶剂，具有良好的溶解性和萃取效果。

因此，我们选择乙醇作为虎杖中白藜芦醇苷的提取溶剂。

我们需要确定合适的提取方法。

常用的提取方法有浸提法、超声波提取法、微波提取法等。

经过比较，我们选择了浸提法进行实验。

具体操作步骤如下：取一定量的虎杖粉末，加入适量的乙醇溶液中，与溶剂充分接触，反复搅拌一段时间，使白藜芦醇苷充分溶解于乙醇中。

然后，用滤纸过滤得到提取液。

提取液中的乙醇可以通过旋转蒸发或冷冻浓缩等方法进行回收利用，以提高经济效益。

同时，为了进一步提高提取效果，可尝试不同浓度的乙醇溶剂、不同提取时间和不同提取温度等条件进行优化。

接下来，我们需要对提取液进行分离纯化。

常用的分离纯化方法有固相萃取、薄层色谱、高效液相色谱等。

根据白藜芦醇苷的理化性质，我们选择了高效液相色谱进行分离纯化。

通过调整流动相组成、流速和检测波长等参数，可以实现白藜芦醇苷的有效分离。

我们对提取得到的白藜芦醇苷进行结构鉴定和质量分析。

常用的鉴定方法有紫外-可见光谱、红外光谱、质谱等。

这些方法可以帮助我们确定白藜芦醇苷的化学结构和相对分子质量，从而确保提取分离的物质具有一定的纯度和活性。

虎杖中白藜芦醇苷的提取分离工艺研究是一项重要的科研课题。

通过选择合适的提取溶剂、优化提取条件，以及采用适当的分离纯化方法，可以获得高纯度、高活性的白藜芦醇苷制剂。

这对于虎杖资源的开发利用具有重要的意义，也为相关药物的研发提供了有力支持。

希望本研究能为虎杖资源的深度开发与利用提供一定的参考和指导。

【产品名称】白藜芦醇【别名】虎杖甙元【化学名】 (E)-5-[2-（4-羟苯基）-乙烯基]-1,3-苯二酚；3,5,4''-三羟基芪；芪三酚；Trans-3-4' -trihydroxystilbene，【分子式】 C14H12O3【分子量】 228.25【物理性质】无味、白色晶体粉末；难溶于水，易溶于乙醇，丙酮等有机溶剂。

【功能主治】白藜芦醇是一种天然的抗氧化剂，可降低血液粘稠度，抑制血小板凝结和血管舒张，保持血液畅通，可预防癌症的发生及发展，具有抗动脉粥样硬化和冠心病，缺血性心脏病，高血脂的防治作用。

抑制肿瘤的作用还具有雌激素样作用，可用于治疗乳腺癌等疾病。

通过药理研究证实，白藜芦醇具有抗菌、抗炎、抗过敏、抗血栓作用；明显的抗氧化、抗自由基的作用，而自由基是引起衰老、癌症、关节炎等疾病的起因；对冠心病、高血脂的防治作用；抗癌、抗诱变的作用，从而抑制肿瘤的产生。

千年之交，中国食品工业协会公布，我国食品与药物化学家从葡萄酒中分离并检测出可降低冠心病、动脉硬化症以及抑制肿瘤发生的功效成分白藜芦醇。

一时，白藜芦醇不仅是业界研究的热点问题，也引起人们普遍的关注。

通过药理研究证实，白藜芦醇具有抗菌、抗炎、抗过敏、抗血栓作用；明显的抗氧化、抗自由基的作用，而自由基是引起衰老、癌症、关节炎等疾病的起因；对冠心病、高血脂的防治作用；抗癌、抗诱变的作用，从而抑制肿瘤的产生。

令人感兴趣的是，在我国许多传统的中药如虎杖、首乌等都含有白藜芦醇，而作为治疗药物使用。

根据检测数据表明，我国优质干红葡萄酒中，白藜芦醇的含量每升已达到5—10毫克，从保健医疗角度看来，已达到了治疗的剂量。

白藜芦醇是葡萄生长过程中，为防止灰色霉菌感染导致葡萄腐烂，而产生的一种植物抗毒素。

它主要存在于葡萄果皮之中，果肉与果汁中含量甚少。

专家在检测时发现，白藜芦醇在葡萄中的含量，每升仅为几微克的级别，达不到治疗的效果。

在葡萄酒发酵生产过程中，由于葡萄汁酶的作用，而使酒中白藜芦醇的数量骤然增加。

虎杖苷对AML细胞增殖、迁移、侵袭及肿瘤生长的影响Δ华敏＊，张伟丽 #（滕州市中心人民医院输血科，山东滕州　277599）中图分类号 R965文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2024）06-0701-06DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2024.06.11摘要目的探讨虎杖苷（PD）对急性髓系白血病（AML）细胞增殖、迁移、侵袭及肿瘤生长的影响。

方法将人AML细胞KG-1分为正常组，低、中、高浓度PD组（10、30、60μmol/L的PD），SQ22536组[环磷酸腺苷（cAMP）抑制剂，100μmol/L]，高浓度PD和SQ22536联用组（60μmol/L的PD+100μmol/L的SQ22536），考察PD对细胞活力、凋亡率、侵袭和迁移能力、cAMP水平和上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白、蛋白激酶A（PKA）蛋白表达的影响。

以BALB/c裸鼠为对象，通过皮下接种KG-1细胞悬液建立AML 裸鼠移植瘤模型，并分为对照组、PD组、SQ22536组、PD+SQ22536组（每组6只），考察PD对其瘤体体积及质量的影响。

结果与正常组细胞或对照组裸鼠比较，PD各浓度组的细胞活力、迁移细胞数、侵袭细胞数和波形蛋白、锌指转录因子Snail蛋白的相对表达量，以及PD组裸鼠的瘤体体积及质量均显著降低，而细胞凋亡率、cAMP水平、PKA和上皮钙黏素的相对表达量均显著升高，且呈浓度依赖性（P＜0.05）；SQ22536对细胞和裸鼠的作用效果与PD相反，并可显著逆转PD的抗肿瘤活性（P＜0.05）。

结论PD可能通过激活cAMP/PKA信号通路来抑制AML细胞的增殖、迁移、侵袭，诱导细胞凋亡，抑制EMT进程及肿瘤生长，从而发挥抗AML作用。

关键词虎杖苷；急性髓系白血病；增殖；迁移；侵袭；上皮-间充质转化；环磷酸腺苷/蛋白激酶A信号通路Effects of polydatin on the cell proliferation， migration， invasion and tumor growth of AMLHUA　Min，ZHANG　Weili（Dept. of Blood Transfusion，Tengzhou Central People’s Hospital，Shandong Tengzhou 277599， China）ABSTRACT OBJECTIVE To investigate the effects of polydatin （PD）on cell proliferation，migration，invasion and tumor growth of acute myeloid leukemia （AML）.METHODS Human AML cell KG-1were divided into normal group，PD low-，medium- and high-concentration groups （10，30，60μmol/L PD），SQ22536group [cyclic adenosine monophosphate （cAMP）inhibitor，100μmol/L]，high concentration of PD+SQ22536group （60μmol/L PD+100μmol/L SQ22536）. The effects of PD on cell activity，apoptotic rate，invasion and migration ability，cAMP level，the expression of epithelial-mesenchymal transition （EMT） related proteins and protein kinase A （PKA） were investigated. Using BALB/c nude mice as subjects， a transplanted tumor model of AML nude mice was induced by subcutaneous inoculation of KG-1cell suspension and then divided into control group，PD group，SQ22536group and PD+SQ22536group （with 6mice in each group）. The effects of PD on tumor volume and mass were measured.RESULTS Compared with the normal group or control group，the cell viabilities，the number of migrating cells，the number of invasive cells，the relative expressions of vimentin and Snail as well as the tumor volume and mass were decreased significantly in PD groups，while the apoptotic rates，cAMP levels，the relative expressions of E-cadherin and PKA were significantly increased，with a dose-dependent manner （P＜0.05）. SQ22536had opposite effects on cells and nude mice compared to PD， and could significantly reverse the anti-tumor activity of PD （P＜0.05）. CONCLUSIONS PD may inhibit the proliferation，migration，invasion and EMT process of KG-1cells，induce apoptosis，and inhibit tumor growth，by activating the cAMP/PKA signaling pathway， thereby exerting anti-AML effects.KEYWORDS polydatin；acute myeloid leukemia；proliferation；migration；invasion；epithelial-mesenchymal transition；cAMP/ PKA signaling pathway急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）是一种异质性血液系统恶性肿瘤，以骨髓、血液和其他组织中髓系原始细胞克隆性扩增为主要特征[1―2]。

有毒中草药之虎杖虎杖为蓼科植物虎杖 Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. 的干燥根茎和根。

有毒。

下面是店铺为大家整理的相关知识，欢迎阅读!虎杖的性质虎杖味苦，性平。

入肝、胆、肺经。

功能：祛风利湿、破淤定痛、通经、止咳化痰。

主治：风湿筋骨疼痛、湿热黄疸、淋浊带下、妇女经闭、产后恶露不下、癥瘕积聚、痔漏下血、跌扑损伤、烫伤、恶疮癣疾。

内服：煎汤，10～30g;浸酒或入丸、散。

外用：研末、烧灰撒，熬膏涂或煎水浸渍。

【医家论药】“虎杖之主治，其行血似与天名精类，其疗风似与王不留行类，第前哲多谓其最解暑毒，是则从血所生化之原以除结热，故手厥阴之血脏与足厥阴之风脏，其治如鼓应桴也。

”(《本草述》)“虎杖，暑月和甘草煎，色如琥珀，可爱堪看，尝之甘美，瓶置井中，令冷澈如冰，白瓷器及银器中盛，似茶啜之，时人呼为冷饮子，又且尊于茗。

”“治大热烦躁，止渴，利小便，压一切热毒。

”(《药性论》)“治产后恶血不下，心腹胀满。

排脓，主疮疖痈毒，妇人血晕，扑损淤血，破风毒结气。

”(《日华子本草》)“攻诸肿毒，止咽喉疼痛，利小便，走经络。

治五淋白浊，痔漏，疮痈，妇人赤白带下。

”(《滇南本草》)虎杖的现代研究主要成分：根和根茎含蒽醌类化合物，如大黄素(Emodin)、大黄素-6-甲醚(Physcion)、大黄酚(Chrysophanol)、大黄酸(Rhein)、蒽甙A(Anthraglycoside A，即大黄素甲醚8-β-D-葡萄糖甙)、蒽甙B(Anthraglycoside B，即大黄素8-β-D-葡萄糖甙)、虎杖甙(Polygonin)。

根中含白藜芦醇(Resveratrol)、白藜芦醇甙(虎杖亭，Polydatin)。

还含有利尿成分黄酮醇甙(Flavonol glycoside)。

亦含鞣质和多糖。

从根中分离出的酚性成分有：迷人醇(Fallacinol)、6-羟基芦桧大黄素(Citreorosein)、大黄素-8-单甲醚(Questin)、6-羟基芦桧大黄素-8-单甲醚(Questinol)、原儿茶酸(Protocatechuic acid)等。

虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取及含量测定一、本文概述本文旨在探讨虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取方法及其含量测定技术。

虎杖作为一种具有广泛药用价值的天然植物，其中含有的白藜芦醇和白藜芦醇苷是其主要活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

因此，研究虎杖中这两种成分的有效提取和准确测定方法对于深入理解虎杖的药理作用以及优化其临床应用具有重要意义。

本文将综述当前虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取技术，包括溶剂提取、超声波辅助提取、微波辅助提取等，并评价其优缺点。

本文还将介绍含量测定的常用方法，如高效液相色谱法、紫外可见分光光度法等，并探讨其准确性和可靠性。

通过本文的综述，旨在为虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的深入研究和应用提供有益的参考。

二、虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取方法虎杖，作为一种具有丰富生物活性的中草药，被广泛用于传统医学中。

其内含的白藜芦醇和白藜芦醇苷具有显著的抗氧化、抗炎和抗肿瘤等生物活性，因此，对这两种成分的提取和含量测定具有重要的意义。

以下将详细介绍虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取方法。

我们需要新鲜的虎杖根茎，确保其来源清洁、无污染。

随后，将虎杖根茎进行清洗、干燥和粉碎，以便后续的提取操作。

由于白藜芦醇和白藜芦醇苷均具有一定的极性，因此，我们常选用极性溶剂如甲醇、乙醇等进行提取。

这些溶剂能够有效地溶解并提取出虎杖中的目标成分。

常用的提取方法包括浸泡提取、回流提取和超声波辅助提取等。

考虑到效率和提取效果，我们通常采用回流提取法。

具体操作如下：将粉碎后的虎杖粉末与提取溶剂混合，置于回流装置中，加热回流一定时间，使溶剂充分与原料接触，从而充分提取出白藜芦醇和白藜芦醇苷。

提取完成后，需要对提取液进行处理，以去除其中的杂质，提高目标成分的纯度。

常用的处理方法包括过滤、浓缩和干燥等。

通过以上步骤，我们可以有效地从虎杖中提取出白藜芦醇和白藜芦醇苷。

这为后续的含量测定和进一步研究提供了基础。

虎杖中虎杖苷的微生物发酵转化研究摘要:从中药材虎杖中筛选到一株具有转化虎杖苷能力的根霉菌株T-34,利用该菌株产生的B-葡萄糖苷酶能将虎杖苷转化为白藜芦醇.虎杖的液体发酵动力学研究结果显示:根霉菌T-34能够直接利用虎杖煮提液中的碳源、氮源等作为其生长所需的营养,并且产生的B-葡萄糖苷酶与底物虎杖苷的转化具有相对应的关系,用HPLC测得虎杖苷的转化率达98%.关键词:微生物转化;虎杖;虎杖苷;白藜芦醇;B-葡萄糖苷酶Biotransformation of polydatin fromPolygonum cuspidatumbyRhizopussp. T-34Abstract:, isolated by strain-screening test, could transform polydatin into resveratrolduring fermentation ofPolygonum cuspidatumin this experiment. Kinetics of fermentation was studied tofollow the transformation process, and the results suggested could utilize carbon re-source, nitrogen resource and etc directly as its nutrition, furthermore,B-glucosidase produced by the strainwas correspondingly related to the transformation of polydatin, and the transformation rate of polydatin couldreach 98%.Key words:microbial transformation,Polygonum cuspidatum,polydatin, resveratrol,B-glucosidase1 引言虎杖始载于5名医别录6,为蓼科植物虎杖的干燥根茎,主要有效成分为二苯乙烯类和蒽醌类化合物,前者包括白藜芦醇及其糖苷[1].据报道白藜芦醇具有抑制肿瘤、抗氧化、抗自由基、抗血栓、抗过敏、抗动脉粥样硬化和具有冠心病、缺血性心脏病、高血脂症的防治作用,白藜芦醇已被列为抗心血管、抗癌最有前途的药物之一[2].干燥虎杖根茎中白藜芦醇含量仅为%~% ,而虎杖苷含量约为2%左右[3],虎杖苷可在肠道中被糖苷酶分解释放出白藜芦醇,发挥其药理作用[4].目前有研究用酸水解法对虎杖苷进行分解[5],但是酸碱会造成环境污染,降低产量,因此不宜用化学法进行水解.也有用改性纤维素酶直接对虎杖苷进行分解[6],但成本较高、工艺较为复杂,不利于推广应用.本项研究采用微生物发酵法转化虎杖苷,即没有强烈的酸碱反应发生,又无需粗提苷,有效的避免了上述两种方法存在的缺陷.因此利用专一微生物进行发酵是提高虎杖中白藜芦醇含量的有效2008年4月第45卷第2期四川大学学报(自然科学版)Journal of Sichuan University (Natural Science Edition) Apr. 2008途径之一.2 材料和方法材料2.1.1 仪器和试剂虎杖购于成都同仁堂药房,并经成都中医药大学药用植物鉴定室鉴定为蓼科植物虎杖的根茎.白藜芦醇标准品(购于成都思科华有限责任公司),高效液相色谱仪(美国Waters公司),Tu-1800紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司),GBRT全自控10L发酵罐(烟台高新区海洋生物工程研究所).2.1.2 培养基初筛平板:主要成分为%NaNO3, 0. 1% K2HPO4, 0. 05% KCl, 0. 05%MgSO4, % FeSO4, 1%虎杖苷.发酵培养基(复筛培养基):主要成分为虎杖煮提液.方法2.2.1 菌种的筛选取自然长菌的虎杖粉1 g,加入20 mL的无菌水,摇匀,静置片刻,取上清液mL梯度稀释,各吸取 mL于初筛平板上按常规涂布方法30e培养3~4 d,挑选长势良好的单菌落,得到青霉,黄曲霉,木霉,根霉等四十株菌种,保藏待用.将初筛菌种接入复筛培养基中,32e,170 r/min摇床中发酵3 和HPLC法检测发酵产物.2.2.2 TLC检测法见文献[7] .2.2.3 HPLC检测法高效液相色谱仪测定白藜芦醇和虎杖苷的色谱分析条件:色谱柱C18柱(416@150 mm);柱温25e;流动相是甲醇:水为40B60;流速1 mL/min,进样量20LL;检测波长305 nm.根据标准样的峰面积和进样浓度作回归曲线,白藜芦醇的回归方程为y=@108x+1121@104,相关系数R=,在20@10-6g/mL~100@10-6g/mL范围内和峰面积成线性关系;虎杖苷的回归方程为y=@105,相关系数R=,在20@10-6g/mL~100@10-6g/mL范围内和峰面积成线性关系.2.2.4 发酵动力学研究采用GBRT全自控发酵罐10 L进行发酵罐培养,发酵罐装培养液量为8 L,接种量为5%,孢子悬液浓度为?@108cfu/mL,发酵温度为32e,转速为300 r/min,通气量为0.06 m3/h,初始pH为,发酵周期132 h.发酵动力学的研究内容包括了菌体生长量,碳源,氮源,酶活,pH,苷和苷元变化.菌体生长量的测定方法采取细胞干重法;多糖的测定方法用苯酚硫酸法进行测定;还原糖的测定法是用DNS法进行测定;总蛋白的测定方法是凯氏定氮法;用PNPG作底物进行B-葡萄糖苷酶酶活的测定[8];溶氧采用GBPT全自控发酵罐溶氧测定仪测定;发酵罐在线检测pH值;苷和苷元的检测方法如21213所述.3 结果与分析菌种的筛选将初筛保存的40株菌种分别接种虎杖煮提液(复筛培养基),32e,170 r/min摇床中发酵3 d,发酵液作产物TLC检测,结果如下.表1 转化虎杖苷的菌种筛选Screen microorganisms for biotransformationof polydatin菌种虎杖苷白藜芦醇空白对照CK + -青霉Penicillium chrysogenum+ +黄曲霉Aspergillus flavus+ -黑曲霉Aspergillus niger+ +木霉Trichodermasp - -根霉T-7Rhizopussp T-7 + -根霉T-13Rhizopussp T-13 + +根霉T-16Rhizopussp T-16 + +根霉T-26Rhizopussp T-26 + +根霉T-34Rhizopussp T-34 - +根霉T-38Rhizopussp T-38 + ++: TLC上检测到明显的物质;-: TLC上未检测到明显的物质由表1结果可以看出,其中根霉T-34菌种的虎杖发酵液的TLC结果表明虎杖苷斑点完全消失,白藜芦醇斑点加深明显,此菌株即为目标菌株,该菌株与虎杖共发酵能成功将虎杖苷转化为白藜芦醇.发酵产物的HPLC检测在所述发酵条件下进行液体发酵,并采用HPLC法对发酵转化产物进一步检测.图1为虎杖苷转化产物的HPLC检测结果.对比色谱图Ñ,Ò,可以看出保留时间 min虎杖苷的吸收峰完全消失,保留时间 min白藜芦醇的吸收峰增加明显,这充分证明了该根霉菌与虎杖的共发酵达到了完全转化虎杖苷的目的,生成了目标物白藜芦醇.438四川大学学报(自然科学版)第45卷图1 虎杖苷转化产物的HPLC分析 HPLC analysis of transformation product of PolydatinÑ发酵前的虎杖提取液(10 g/L);Ò发酵后的虎杖提取液(10 g/L )发酵动力学的研究在2.2.4的发酵罐培养条件下进行发酵,每隔一段时间取样,研究发酵过程中菌体量、总糖(多糖和还原糖)、总蛋白、苷和苷元、酶活、溶解氧、pH的变化.进一步揭示了根霉T-34转化虎杖苷的发酵机理,也为该菌种的实际应用提供了参考数据:产物白藜芦醇的积累与酶活密切相关,与菌体生长直接偶联;菌体生长过程中消耗了大量的碳氮源,36h菌体生长进入稳定期,虎杖苷转化为白藜芦醇也在36 h基本完成.这预示着生产过程中若要连续培养,36 h是最佳的补料时间.3.3.1 菌体的生长动力学由图2可知:在整个发酵周期中,碳氮比例变化范围为~,此碳氮比例能满足根霉菌种的生长.在36 h前,总糖(还原糖和多糖)和总蛋白都迅速降低,为菌体的大量生成提供丰富的碳源和氮源.36 h后随着菌体量达到最大,碳源和氮源的消耗速度大幅度的减缓;其中还原糖有缓慢增加的趋势,可能的原因是稳定期中微生物产生了多种酶类如糖化酶、纤维素酶等,这些酶水解淀粉、纤维素等又产生了少量还原糖.3.3.2 菌体量、pH和溶解氧的动力学曲线由图3可知:发酵过程中随着菌体量的增加,溶液的pH由下降到,可能的原因是根霉菌生长能够利用碳源产生了少量有机酸;36 h以后pH变化趋于平缓,92 h后又有所下降;发酵过程中,溶解氧由100%下降到80%,是由于发酵罐中高速的搅拌速度和较高的通风量使溶氧量维持在较高水平.图2 菌体量,还原糖,多糖以及总蛋白的动力学曲线Kinetic curves of biomass, reducing sugar,amylase and total protein3.3.3 酶和底物、产物的动力学曲线由图4可知:24 h前虎杖苷和白藜芦醇的变化不明显,24~36 h,由于B-葡萄糖苷酶的水解作用,虎杖苷由0153 g/L迅速降低直至转化完全,白藜芦醇由0104 g/L迅速增加到最大量0.332 g/L,36 h以后白藜芦醇的量逐步减少.从酶活曲线可见,B-葡萄糖苷酶酶活从12 h开始增加,36 h酶活基本达最大值 U/mL,36 h后酶活缓慢降低.由此可见酶活的变化趋势和底物虎杖苷的转化是相对应的.另外要指出的是白藜芦醇的分子量228,虎杖苷分子量408,根据该图中虎杖苷的最大量和白藜芦醇的增加量计算出虎杖苷转化为白藜芦醇的转化率可达98%.439第2期田天丽等:虎杖中虎杖苷的微生物发酵转化研究图3 菌体量、pH和溶解氧的动力学曲线Kinetic curves of biomass, pH valueand dissolved oxygen图4 虎杖苷,白藜芦醇以及B-葡萄糖苷酶酶活的动力学曲线Kinetic curves of polydatin , resveratrol,andB-glucosidase activity4 讨论微生物有着非常强大的分解转化物质的能力,并能产生丰富的酶系,这些丰富而强大的酶系就可能成为中药化学成分在较温和的条件下催化化学反应的物质基础,也就是微生物可以用来发酵转化中药的理论根据[9].本文在此理论基础上对中药虎杖进行微生物的发酵转化,培养基直接采用中药虎杖,不需添加其他成分,发酵条件易控制,且虎杖苷成分转化效率高.通过微生物发酵转化虎杖,一方面提高虎杖中苷元含量,可获得高产苷元提取物;另一方面,有利于中药材虎杖资源的开发和利用.本文建立筛菌模型,对转化虎杖的B-葡萄糖苷酶产生菌进行筛选,具有特异性高,快速简便的优点,筛选到的一株具有转化虎杖中虎杖苷的根霉菌种T-34.通过对发酵产物的TLC、HPLC分析,证实了这株菌种能够转化虎杖苷,并且转化效率达98%以上,从而将虎杖中白藜芦醇含量提高到相当水平.通过研究发酵罐条件下微生物转化虎杖的发酵动力学,证明了该根霉菌能直接利用中药中的碳氮源生长,产生的B-葡萄糖苷酶也能高效水解虎杖苷为白藜芦醇;有关发酵动力学研究所阐述的多种因素的变化和目标产物的变化,提示我们可以通过对培养条件进一步优化,缩短发酵时间使酶活能够更快的达到最高,使得培养条件更加适合虎杖苷的转化,更好的引导实际的中试发酵和生产.参考文献:[1] 刘树兴,程丽英.虎杖有效成分开发现状及展望[J].食品科技, 2005(2): 96.[2] 曹庸,于华忠,张敏,等. HPLC法测定虎杖白藜芦醇的含量及其稳定性研究[J].林产化学与工业,2004, 6(2): 61.[3] Zhao R Z, Liu S J, Zhou L L,et al. Rapid quantita- tive HPTLC analysis, on one plate, of emodin, resvera- trol, and polydatin in the chinese herb Polygonum cusp- idatum[J]. Chromatographia, 2005, 61(5-6): 311.[4] 牛培勤,郭传勇.白藜芦醇药理作用的研究进展[J].医药导报, 2006, 6(6): 524.[5] Rommel A, Wrolstad R E. Influence of acid and base hydrolysis on the phenolic composition of red raspberry juice[J]. J Agr Food Chem A, 1993, 41: 1237.[6] 向海艳,周春山,陈龙胜,等.酶法提取虎杖中白藜芦醇新工艺研究[J].林产化学与工业, 2004, 24(4): 77.[7] 周国海,于华忠,李国章,等. TLC法测定虎杖中白藜芦醇的含量[J].湖南林业科技, 2005, 32(3): 11.[8] Kuo L C, Cheng W Y, Wu R Y,et al. Hydrolysis of black soybean isoflavone glycosides by Bacillus subtilis natto[J]. Appl Microbiol Biotechnol, 2006, 1: 1007. [9] 左风,严梅桢,周钟鸣.肠道菌群对中药有效成分代谢作用的研究进展[J].中国中药杂志, 2002, 27(8):568.[责任编辑:白林含]440四川大学学报(自然科学版)第45卷。

中药有效成分中英文对照PiceatannolPiceatannol-3’-0-β-D-glucopyranoside Piceatannol-4’-0-β-D-glucopyranoside PicroetoposidePicroetoposide hydroxy acid PicropodophyllotaxinPilocarpine hydrochloride 毛果云香碱盐酸盐Pimpinollin 虎耳草素Pinitol 松醇Pinostrobin 球松素Piperine 胡椒碱PlantarenalosidePlatypetaloside APlumbagin 矾松素Podocarpusflavone 罗汉松双黄酮B Podophyllotoxin 鬼臼毒素Podophyllotoxin glucoside PodophyllotoxonePolydatin 虎杖甙,白藜芦醇甙Polystachoside 蓼属甙Ponticin 土大黄甙(素)Populnetin 山奈酚,山奈素,山奈黄素,山奈黄酮醇,四氢基黄酮,崁非醇,猫眼草素I,白蕊草素III, Populin 白杨甙Praeruptorin A 白花前胡甲素Praeruptorin B 白花前胡乙素Praeruptorin C 白花前胡丙素Praeruptorin D 白花前胡丁素Praeruptorin E 白花前胡甲素Praeruptorin F 白花前胡甲素Pregnanediol 孕二醇Progeserone 孕烯醇酮Precasin 相思豆碱ProcesterolProtocatechuic acid 原儿茶酸Protocatechualdehyde 原二茶醛Protopanaxadiol 原人参二醇Protopanaxatriol 原人参三醇Protopine 原阿片碱Pseud aconitine 伪乌碱Pseudo ephedrine 伪麻黄碱d-Pseudu-ephedrine hydrochloride 盐酸伪麻黄碱Pseudo ginsenoside F11 拟人参皂甙F11 Pseudo ginsenoside Rt5 拟人参皂甙Rt5 Pseudo laric acid B 土荆皮乙酸Pseudo lycorine 伪石蒜碱PseudophedrinePseudo protopine 伪原阿片碱Psoralen 补骨酯素Puerarin 葛根素Pyrogallic acid 焦性没食子酸PyrogallolQingdanone 青黛酮Qinghaosu I 青蒿甲素Qinghaosu II 青蒿乙素Qinghaosu III 青蒿丙素QingyangshenggeninQuebrachitolQuercetin 槲皮素Quercetin-3-O-xyloglucoside 槲皮素-3-O-木糖葡萄糖甙Quercetin-3- galactoside 槲皮素-3-半乳糖甙,金丝桃甙,田基黄甙,海棠因Quercitrin 槲皮甙4-Quinazolone 4-喹唑酮[4(3H)-quinazolinone] 4(3H)-喹唑酮[2,4[1H,3H］-Quinazolinedione] 2，4（1H，3H）-喹唑二酮Quinic acid 喹啉酸Quinidine 喹啉丁Quinine 喹啉Quinsetrol 炔雌醚Rasthorin A 细锥香茶菜甲素Rabdocetsin B 细锥香茶菜乙素Rabdocetsin C 细锥香茶菜丙素Rabdocetsin D 细锥香茶菜丁素Rabdocetsin E 细锥香茶菜戊素Rabdoforrestin A 紫萼香茶菜甲素Rabdophyllin G 大叶庚Rabdophyllin H 大叶辛Rabdosin C 香茶菜素CReducing arteannuim 还原青蒿素Renifolin 肾叶驴蹄草甙Reserpine 利血平Resibufogenin 酯蟾毒配基Resveratrol 白藜芦醇Resveratrol-4’-O-β-D-（6’-O-galloyl）glucopyranosideResveratrol 3-O-β-D-glucoside2"-Rhamnosylicarisoside II2"-Rhamnosylikarisoside ARhamnoluteun 山奈酚,山奈素,山奈黄素,山奈黄酮醇,四氢基黄酮,崁非醇,猫眼草素I,白蕊草素III,2"-O-Rhamnosylscoparin 2"-O-鼠李糖扫帚黄酮Rhaponticin 土大黄甙(素)Rhapontin 土大黄甙(素)Rheic acidRhein 大黄酸RheosmineRhodininRhodioloside 红景天甙RhodiosinRhododendrin 白色杜鹃素Rhombinin(Anagyrine) 臭豆碱,安那吉碱,安纳基林,Rhynchophylline 钩藤碱Robigenin 山奈酚,山奈素,山奈黄素,山奈黄酮醇,四氢基黄酮,崁非醇,猫眼草素I,白蕊草素III, Rorifone 焊菜素Rosavin 肉桂醇甙,洛塞维,酪萨维Rosmarinic acid 迷迭香酸, 罗丹酚酸Rotenone 鱼藤酮Rotundinum 延胡索碱乙,罗通定,四氢巴马亭Rubescensin (A) 东凌草素Rutaecarpine 吴茱萸次碱Rutin 芦丁,芸香甙Sagittatoside ASagittatoside BSaikosaponin A 柴胡皂甙ASaikosaponin b1 柴胡皂甙b1 Saikosaponin b2 柴胡皂甙b2 Saikosaponin C 柴胡皂甙CSaikosaponin D 柴胡皂甙DSaikogenin a 柴胡皂甙元aSaikogenin d 柴胡皂甙元dSaikoside a 柴胡皂甙aSaikoside c 柴胡皂甙cSaikoside d 柴胡皂甙dSalicylic acid methyl esterSalicin 水杨甙,水杨素Salylic acid 水杨酸Salicylate ethyl 水杨酸乙酯Salicylate methyl 水杨酸甲酯;冬青油Salicylate Isomyl 水杨酸异戊酯Salicylate phenyl 水杨酸苯酯Salicylate eserine 水杨酸毒扁豆碱Salicylate sodium 水杨酸钠Salicylate ammonium 水杨酸铵Salicylaldehyde 水杨酸醛Salicylanlide 水杨酰苯胺Salicylamide 水杨酰胺Salidroside 红景天甙Salsolinol 去甲猪毛菜碱Salvianic acid 丹参酸甲Sandaracopimaric acid 山达海松酸Sanguinarine hydrochloride 盐酸血根碱Santonin 山道年Sarsasapogenin 菝契皂甙元,洋菝契皂甙元Sciadopitysin 金松双黄酮Schisantherin A 五味子内酯甲Schisandrin 五味子醇甲,五味子素,五味子醇A γ-Schisandrin γ-五味子素, 五味子素B,五味子乙素Schisandrin B γ-五味子素, 五味子素B,五味子乙素Schizandrin B γ-五味子素, 五味子素B,五味子乙素Schizandrin 五味子醇甲,五味子素,五味子醇A Schizandrol 五味子醇Schisadrol A 五味子醇甲,五味子素,五味子醇AScoparone 滨蒿内酯Scopolamine HBr 氢溴酸东莨菪碱Scopoletin 东莨菪素,东莨菪内酯Scopolin 东莨菪甙ScoulerineScphalotaxine 三尖杉新碱SculpolamineScutellarein 野黄芩素,高黄芩素,野黄芩黄素Scutellarin 灯盏花乙素,野黄芩甙,高黄芩甙Securinine 一叶秋碱Securinine HNO3 硝酸一叶秋碱Sennoside A 番泻甙ASennoside B 番泻甙BSepervirenoside ASepervirenoside BSesamin 芝麻脂素, 芝麻素SesamosideShanzhiside methyl esterShikimic acid 莽草酸Shikonin 左旋紫草素Shionone 紫菀酮Sibiricine 西伯利亚延胡索碱Silybin 水飞蓟宾Silydianin 异水飞蓟素Silymarin 水飞蓟素Sinapine bisulfae 硫酸芥子碱Sinoacutine 青风藤碱,华防己碱Sinomenine hydrochorolide 盐酸青藤碱Sipeimine 西贝素β-Sitosterol β-谷甾醇Sitosterol-3-O-β-D-glucopyranside Skimmianine 茵芋碱Smilagenin 菝葜皂甙元Solamargine 奥洲边茄碱Solanesol 茄尼醇Solanocupsin 毛叶冬珊瑚甙Solasonin 奥洲茄碱Sophocarpidine 苦参碱Sophocarpine 槐果碱Sophoridine 槐定碱Sophorine 金雀花碱,野靛碱,金雀儿碱,金莲花碱Soyasapogenol A 大豆甾醇A,大豆皂甙元A Soyasapogenol B 大豆甾醇B,大豆皂甙元BSoyasapogenol C 大豆甾醇C,大豆皂甙元CSoyasapogenol D 大豆甾醇D,大豆皂甙元DSoyasapogenol E 大豆甾醇E,大豆皂甙元ESoyasaponin I 大豆皂甙ISoyasaponin 大豆皂甙Sparteine (CAS:6160-12-9) 鹰爪豆碱,无叶豆碱Spegatrine 斯配加春α-Spinasterol α-波菜甾醇Squamotatin BStachydrine hydrichloride 盐酸水苏碱Stachyose 水苏糖Stephanine 千金藤碱Steviobioside 甜菊醇B甙Steviol 甜菊醇Steviol methylester 甜菊醇甲酯Stevioside 甜菊甙,甜菊糖Stigmasterol 豆甾醇StrctosidineStrychnine 士的宁,番木鳖碱StwephanineSulfate of polysaccharide 多糖硫酸酯Super-Houttuyninum 高鱼腥草素Sweroside 当药苦甙,獐牙菜甙Swertiamain 獐牙菜苦甙Swertianol 当药醇Swertianolin 当药醇甙Sylvatesminsynephrine 辛弗林Syrinngic acid 丁香酸Syringin 紫丁香甙,祖师麻丙素,救必应乙素,救必应甙甲,五加甙BTabernaemontanine HBrTalatisamine 塔拉萨敏,塔拉乌头胺Tannic acid 丹宁酸Tanshinone I 丹参酮ITanshinone II A 丹参酮IIATanshinone II B 丹参酮IIBTaraxasterol 蒲公英甾醇Taraxerol 蒲公英赛醇Taraxerol acetate 蒲公英赛醇乙酸酯Taraxerone 蒲公英甾酮, BC-01Taurine 牛磺酸Taurocholic acid sodium salt 牛磺胆酸,甘牛胆酸钠Taurocholic acid (Sodium) 牛磺胆酸钠Tauroursodesoxycholic acid 牛磺熊去氧胆酸Taxol 紫杉醇Tayettin 万寿菊甙Tenyposide 潜尼泊甙Terpine hydrate 水合萜二醇Terpinenol-4 松油醇-4n-Tetradecane 正-十四烷(+)Tetrahydropalmatine 延胡索碱乙,四氢巴马亭,四氢巴马汀,延胡索乙素, 颅痛定L-Tetrahydropalmatine 左旋四氢巴马亭,左旋四氢巴马汀,左旋延胡索乙素,Tetrodotoxin (TTX) 河豚毒素2,3,5.4’-Tetra-hydroxystilbene-2-o-β-D-glucosi de 四羟基氐甙5,8,3’5’-tetrahydroxyflavanone3’,4’,5,7-Tetrahydroxyflavone-3-β-rytinoside 3’,4’,5,7-四羟基黄酮-3-β-芸香甙Tetrandrine 粉防己碱,粉防己甲素Tetrandrine 苦味酸盐粉防己碱,粉防己甲素Thalidasine 唐松草新碱Theaflavin 茶黄素Theaflavin -3-G 茶黄素单没食子酸酯Theaflavin -3’-G 茶黄素单没食子酸酯Theaflavin -3,3’-DG 茶黄素双没食子酸酯Theobromine 可可碱Teophyline 茶碱Thermopsine 黄华碱,野决明碱Trans-podophyllic acidThevetin A 黄夹甙AThevetin B 黄夹甙BThymol 百里酚Tibolone 替勃龙Timosaponin A3 知母皂甙A3Toddaberine 飞龙掌血内酯Toddaline 盐酸白屈菜红碱P-Toluic acid 对甲苯甲酸Toosendanin (Azedarachin) 川楝素,苦楝素Trans-communic acid 顺式璎柏酸Trans-podophyllic acidTremulacine 特里杨甙Tremulodin 2”-苯甲酰水杨甙α-Trepineol α-松油醇1-Triacontanol 正三十烷醇TrichodesmineTrichodesanthin 天花粉蛋白Tridecanone-2 十三烷酮-23,3’,6-trimethoxy-4’,5-dihydroxyflavone 大青黄酮甙元TripchlororideTripdiolide 雷公藤乙素Triptodiolide 雷公藤内酯二醇Tripterine 雷公藤红素TripterofordinTripterolideTriptofordin ATriptofordin BTriptofordin C1Triptofordin C2Triptofordin ETriptofordin F-1Triptofordin F-2Triptofordin F-3Triptofordin F-4Triptofordin D-1Triptofordin D-2Triptolide 雷公藤甲素,雷公藤内酯醇TriptolidenolTriptonide 雷公藤内酯酮Triptonolide 雷酚酮内酯Triptonoterpene 雷酚萜,雷酚萜甲醚Triptonoterpene methyl ether TriptonoterpenolTriptophenolide 雷酚内酯,山海棠素Triptophenolide methyl ether Triptotriterpenic acid A 雷公藤三萜酸A Triptotriterpenic acid B 雷公藤三萜酸B Triptotriterpenic acid C 雷公藤三萜酸C Triptriolide 雷酚内酯醇Tryptantrin 青黛酮TubercurineTubeimuside I 土贝母甙甲Tumulosic acid 土莫酸Ulexine 金雀花碱,野靛碱,金雀儿碱,金莲花碱Umbelliferone 伞形花内酯Undecanine-2 十一烷酮-2 Ursodesoxycholic acid 熊去氧胆酸Ursolic acid 熊果酸,乌苏酸,乌索酸Usnic acid (Sodium) 松罗酸钠UvarigraninUvarigranol BUvarigranol B 6-cinnamateUvarigranol B 6-isonicotinic ester Uvarigranol CUvarigranol C 2-cinnamateUvarigranol DUvarigranol EVasicinol 鸭嘴花粉碱Valerenic acid 缬草烯酸Vanillic acid 香草酸Vanillin 香兰素Verbascoside 毛蕊花甙Verproside 毛蕊花甙Verticillatine 维替新拉亭Verticinone 浙贝乙素Vicine 蚕豆甙Vilmorrianine A 黄草乌碱甲Vilmorrianine B 黄草乌碱乙Vilmorrianine C 黄草乌碱丙Vinblastine sulphate 硫酸长春碱Vincaleukolastine 长春碱Vincristine sulphateVincristineVitexin 牡荆素VomifoliolWcisiensin A 锥西香茶菜甲素WilfodineWilfordineWilforgineWilforidineWilforine 雷公藤次碱Wilforlide 雷公藤内酯甲Wilforlide A 雷公藤内酯甲WilformineWilfornideWilfornineWilforonide 雷藤素WilfortrineWilforzineWiofolide A 雷公藤内酯甲Wiofolide B 雷公藤内酯乙Wogonin 汉黄芩素Wuweizichun A 五味子醇甲, 五味子醇A Wuweizisu A 脱氧五味子素,五味子甲素,五味子素AWuweizisu B γ-五味子素, 五味子素B,五味子乙素Wuweizisu C 五味子丙素,五味子醇乙Xanthochymol 大叶藤黄醇XanthyletinXylitol 木糖醇D(+)Xylose D(+)木糖D(+)Xylulose D(+)木酮糖(怕热+4℃) Yenhusomidine 延户沙米定Yohimbin Hydrochloride 盐酸育亨宾Yunaconitine 滇乌碱Yunaconitine HCL 盐酸滇乌碱Zeylenol6-Dehydrozeylenyl 2-isonicotinic ester Zeylenl 2,6-diisonicotinic ester Zn—MT 锌金属硫蛋白。