对峙间隔法诱导培养对放线菌抑菌活性的影响

《红掌拮抗内生菌Y-54的分离、鉴定及生防作用研究》一、引言随着现代生物技术的不断发展，植物内生菌的研究逐渐成为植物保护和农业可持续发展的重要方向。

其中，红掌作为一种常见的观赏植物，其内生菌的研究具有重要价值。

本文旨在研究红掌拮抗内生菌Y-54的分离、鉴定及其在生物防治方面的作用，以期为植物病害的生物防治提供新的思路和方法。

二、材料与方法1. 材料（1）植物材料：红掌叶片。

（2）培养基：LB培养基、PDA培养基等。

2. 方法（1）内生菌的分离：采用组织分离法，从红掌叶片中分离出内生菌。

（2）内生菌的鉴定：通过形态观察、生理生化试验及分子生物学手段，对分离出的内生菌进行鉴定。

（3）生防作用研究：采用室内盆栽试验和田间试验，研究内生菌Y-54对植物病害的防治效果。

三、结果与分析1. 内生菌的分离与鉴定通过组织分离法，成功从红掌叶片中分离出内生菌Y-54。

在显微镜下观察，该菌株呈杆状，革兰氏阳性，具有较好的生长特性。

通过形态观察、生理生化试验及分子生物学手段，鉴定该菌株为一种放线菌。

2. 生防作用研究（1）室内盆栽试验：将内生菌Y-54接种到植物根部，观察其对植物生长及病害防治的效果。

结果表明，Y-54能够显著促进植物生长，提高植物的抗病能力，有效防治多种病害。

（2）田间试验：将内生菌Y-54应用于田间，观察其对实际生产中植物病害的防治效果。

结果表明，Y-54在田间环境下同样表现出良好的生防作用，能够显著降低植物病害的发生率，提高农作物的产量和品质。

四、讨论本研究成功分离出红掌内生菌Y-54，并对其进行了鉴定和生防作用研究。

结果表明，Y-54具有良好的生物防治潜力，能够促进植物生长，提高植物的抗病能力，有效防治多种病害。

这为植物病害的生物防治提供了新的思路和方法。

在今后的研究中，可以进一步探讨Y-54的生物活性物质及其作用机制，以及其在不同植物、不同环境条件下的应用效果。

同时，还可以研究如何提高内生菌的产量和质量，以便更好地应用于实际生产中。

文章编号:1674-148X (2009)02-0143-04拮抗胡萝卜软腐欧文氏杆菌的放线菌的分离和筛选收稿日期:2008-10-21作者简介:李雅华(1967-),女,吉林伊通人,高级实验师,主要从事微生物资源研究。

李雅华,咸洪泉,李树文,樊连梅,高彩霞(青岛农业大学生命科学学院,山东青岛266109)摘要:采用平板稀释法进行了土壤中放线菌的分离,以胡萝卜软腐欧文氏杆菌(E r w i n ia caro tovora var .caro tovora)为拮抗对象,筛选拮抗放线菌。

根据抑菌圈的大小,初步筛选出F 10、F4、F5、F 11等有较强的拮抗作用的12株放线菌。

分别对这12个菌株进行发酵,根据发酵液和菌丝破碎稀释液的拮抗活性复筛。

复筛结果表明,12个菌株中,发酵液的拮抗活性F11最强,F1、F9次之;菌丝体破碎稀释液的拮抗活性F12最强,F3、F11、F 1、F 10次之。

不同菌株产生的拮抗物质在细胞内外的分布不同。

关键词:放线菌;胡萝卜软腐欧文氏杆菌;拮抗;筛选中图分类号:S482.2+92文献标识码:AIsolati ng and Screen i ng of Antagonistic Acti no m yces toE rwonia carot ovora var .CarotovoraLI Y a hua ,X I A N H ong quan ,LI Shu wen ,FAN Lian m e,i GAO Ca i x ia(College ofL ife S ci en ce ,QAU,Q i ngdao 266109,Ch i n a)Abst ract :The acti n o m yces against E r w onia carotovora var .Carotovora w ere iso lated fr o m soil by the m ethod o f plate d il u tion.A ccordi n g to the size of i n h i b iting circ le ,12stra i n s w ith stronger antagon is m,such as F10,F4,F5,F11and so on ,w ere obtained preli m inaril y .The 12stra i n s w ere f u rther screened by an tagon istic acti v ity o f t h e ir fer m entation br o t h and the dilution li q u i d of frag m entized m yce li a .The experi m ental resu lts ind icated that the acti v ity of fer m entation broth of F11was the strongest and better than F1and F9,and the acti v ity of the dil u ti o n li q u i d of F12fragm entized m ycelia w as the strongest and better than F3,F11,F1and F10.The d i s tribution of antagonis tic substance produced by different stra i n w as different i n ce ll and fer m enta ti o n br o th .K ey w ords :acti n o m yces ;E r w onia caro tovora var .C aro tovora;antagonis m;screening 胡萝卜软腐欧文氏杆菌(E r w in ia carotovora var .caro tovora ),是植物细菌性软腐病的主要病原菌。

水稻纹枯病拮抗菌的筛选、鉴定及抑菌活性测定彭迪;朱哲远;李祖任;王立峰;刘洋;柏连阳【摘要】为获得对水稻纹枯病有生防效果的拮抗细菌,从野外水稻田采集的水稻根际土壤样品中分离得到生防细菌菌株5株,以水稻纹枯病菌为靶标菌株,采用划线平板对峙法筛选出细菌菌株B-2对病原菌有较强的拮抗作用,采用纸片扩散法测定表明B-2对水稻纹枯病菌菌丝生长有抑制作用,结合16S rDNA序列分析,B-2鉴定为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus).抑菌试验结果表明,B-2对水稻纹枯病菌的抑菌活性为85.33％,能够明显抑制病原菌的生长.该研究结果对水稻病害的生物防控、绿色防控提供了科学依据.%To obtain antagonistic bacteria for biocontrol of rice sheath blight, five bacterial strains were isolated from the samples taken from different paddies and plants. The strain B-2 with strong antagonistic activities and growth inhibition to Rhizoctonia solani were selected by using the underlined plate confrontation method and Kirby-Bauer method. In combination with 16S rDNA sequence analysis, B-2 was identified as Bacillus pumilus. The results showed that the strain B-2 antagonistic bacteria had great effect to pathogenic bacteria, with the efficacy having 85％ in laboratory. The results of this study provide a scientific evidence for the prevention and control of rice diseases.【期刊名称】《湖南农业科学》【年(卷),期】2017(000)012【总页数】3页(P88-90)【关键词】水稻纹枯病;拮抗细菌;生物防治【作者】彭迪;朱哲远;李祖任;王立峰;刘洋;柏连阳【作者单位】湖南省农业生物技术研究所,湖南长沙 410125;湖南省农业生物技术研究所,湖南长沙 410125;湖南农业大学植物保护学院,湖南长沙 410128;湖南省农业生物技术研究所,湖南长沙 410125;湖南农业大学植物保护学院,湖南长沙410128;湖南省农业生物技术研究所,湖南长沙 410125;湖南省水稻研究所,湖南长沙 410125;湖南省农业生物技术研究所,湖南长沙 410125;湖南农业大学植物保护学院,湖南长沙 410128【正文语种】中文【中图分类】S482.7水稻纹枯病由立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）侵染水稻所形成，世界各产稻国家均有分布，亚洲稻区危害最为严重，水稻感染后品质出现明显下降，严重时导致绝收[1-2]。

1株柑橘炭疽病生防放线菌对几种植物病原真菌的抑制作用吴思梦;王文君;刘冰;蒋军喜【摘要】前期试验获得1株对柑橘炭疽病有较好防治效果的放线菌ML27,为了解该菌株对其他植物病害的生防潜力,本研究采用平板对峙法和孢子萌发试验探索其对几种植物病原真菌的抑制作用.平板对峙试验表明,放线菌ML27对除红叶石楠炭疽病菌外的11种植物病原真菌菌丝生长均有抑制作用,其中对山茶花轮斑病菌的抑菌率最高,达到70％以上;显微镜观察发现,受抑制的菌丝变粗、发生断裂、顶端膨大;孢子萌发试验发现,不同浓度的ML27发酵滤液对测定的4种病原真菌的孢子萌发均有抑制效果,其中ML27发酵滤液稀释10倍时对碧玉炭疽病菌孢子萌发抑制率可达100％.试验结果可为生防菌株ML27的开发利用提供理论依据.【期刊名称】《生物灾害科学》【年(卷),期】2016(039)002【总页数】6页(P84-89)【关键词】生防放线菌;抑菌作用;发酵滤液;孢子萌发【作者】吴思梦;王文君;刘冰;蒋军喜【作者单位】江西农业大学农学院,江西南昌330045;江西农业大学农学院,江西南昌330045;江西农业大学农学院,江西南昌330045;江西农业大学农学院,江西南昌330045【正文语种】中文【中图分类】S436.661.1+4;S476吴思梦，王文君，刘冰，等. 1 株柑橘炭疽病生防放线菌对几种植物病原真菌的抑制作用［J］. 生物灾害科学， 2016， 39（2）: 84-89.放线菌广泛存在于自然界中，种类繁多、代谢功能各异，是一类具有广泛实际用途和巨大经济价值的微生物资源［1］。

近年来，利用放线菌产生的抗生素所制备的新农药已逐渐成为无公害农药的主体，在一定程度上解决了化学农药带来的 3R 问题，农用抗生素放线菌的筛选和应用也已成为农业微生物领域的研究重点［2］。

在前期试验中，笔者筛选得到了一株对柑橘炭疽病具有生防作用的放线菌——ML27［3-4］。

为进一步了解该菌株的生防潜力，本研究采用皿内对峙法和孢子萌发试验，研究了其对猕猴桃炭疽病菌等 12 种植物病害病原真菌菌丝生长的抑制作用以及对柚子炭疽病菌等 4 种病原真菌孢子萌发的抑制效果，以期为ML27在植物病害防治上的利用提供理论和试验基础。

2.1.2.3拮抗菌的初蹄(异步抬抗实验)以甜瓜枯萎病菌为指示菌,将分离到的放线菌、细菌以及真菌菌株点接至已经在PDA培养基培养3 d的病原菌平板四周,点接处距离病原菌中心2 cm,同12甜瓜枯萎病病原拮抗菌的蹄选及利用响应面法优化发酵条件一平板上只点接一种分离菌;继续培养4 d,观察是否出现抑菌带,将出现抑菌带的分离菌作为初蹄菌。

2.1.2.4拮抗菌的复蹄平板对峙实验(同步措抗实验)以甜瓜枯萎病菌为指示菌,将初蹄得到产生抑菌带的菌株,用打孔器打取5 mm (<2 )菌饼接种于距离病原菌中心2 cm的四周,同一平板上只接一种初蹄菌;培养4d后测抑菌圈半径[79]、拮抗菌半径,计算拮抗指数[8^。

抑菌圈半径=拮抗菌菌饼中心至甜瓜枯萎病病菌菌丝边缘的距离措抗指数=(抑菌圈半径-拮抗菌半径)/措抗菌半径继代培养实验将蹄选的拮抗效果较好的菌种进行继代培养,逐代进行平板对峙实验,观测其措抗指数的变化,从而确定菌种的遗传稳定性。

发芽率实验将蹄选的措抗效果较好的菌株转接至PDB培养基中摇床振荡培养24h,即得措抗菌菌悬液;挑取饱满的南海蜜甜瓜种子,用10%H202对种子进行表面消毒5 min后用无菌水清洗3-4次,再将种子浸泡于拮抗菌菌悬液中2 h,同时以未加入措抗菌的PDB做对照,每处理30粒甜瓜种子,三次重复;浸泡完毕后,将甜瓜种子置于灭菌培养皿中的湿润无菌滤纸上,种子上加盖一层湿纱布,30 °C催芽36h,统计种子的发芽率。

拮抗菌间平板对時实验同“平板对峙实验(同步拮抗实验)”。

苦瓜活性物质提取分离与抑菌作用研究1 .2 . 2 中草药提取液对病原真菌抑制作用的测定( 生长速率法[8- 9]) 参照吴新安[10]等人的方法, 分别制成含药10.0 mg/mL 的带药培养基, 用直径5 mm 的打孔器在培养好的菌落外缘切下带菌培养基柱, 即菌饼,将菌饼带菌丝的一面接种到培养皿中央。

以纯PDA培养基平板作空白对照(CK), 含化学药剂扑海因0 . 5 mg/ mL 的培养基平板作负对照(CK- ), 将各处理置于28 ℃恒温箱中培养。

放线菌G30菌株发酵液抗菌谱及稳定性的研究摘要研究土壤放线菌G30次生代谢产物的抗菌谱及其发酵液的稳定性，采用抑制菌丝生长速率法、管碟法测定发酵液的生物活性，在不同条件下测定发酵液的稳定性。

结果表明：在对12种供试病原真菌的抑制效果中，6种菌丝生长的抑制率达到80%以上；在连续传代10代过程中，4 ℃及常温保存条件下，G30菌株的培养特征和抑菌活性基本没有变化；发酵液在60~100 ℃的温度梯度下没有丧失活性，在强酸（pH值2）、强碱（pH值12）条件下也都比较稳定。

G30菌株的代谢产物具有广谱抗菌活性和强稳定性，具有一定的开发价值。

AbstractAntimicrobial spectrum and stability of the fermentation extracts produced by actinomycete strain G30 were studied，by means of mycelium growth rate and cup-plate method，the fungicidal activity of bioassay was studied，the stability of the fermentation extracts in different condition was measured. The results showed that six kinds of pathogens with an inhibitory rate more than 80% in twelve kinds of pathogens；The cultural characteristics and bacteriostatic activity of strain G30 were not altered by ten serial subcultures or modifying the preserved temperature in 4 ℃or normal temperature；The fermentation liquid didn′t lose activity in high temperature（60～100 ℃），it was also been steady under the condition of strong acid （pH 2）and strong base（pH 12）. Metabolic products of actinomycete strain G30 had broad-spectrum antibacterial actirity and strong stability. The actinomycete strain G30 was worthy of develop.Key wordsactinomycete；strain G30；fermentation liquid；antimicrobial spectrum；stability农用抗生素是能够用来杀虫、灭菌、除草以及调节植物生长等的微生物活体及其代谢产物。

2.1.2.3拮抗菌的初蹄(异步抬抗实验)以甜瓜枯萎病菌为指示菌,将分离到的放线菌、细菌以及真菌菌株点接至已经在PDA培养基培养3 d的病原菌平板四周,点接处距离病原菌中心2 cm,同12甜瓜枯萎病病原拮抗菌的蹄选及利用响应面法优化发酵条件一平板上只点接一种分离菌;继续培养4 d,观察是否出现抑菌带,将出现抑菌带的分离菌作为初蹄菌。

2.1.2.4拮抗菌的复蹄平板对峙实验(同步措抗实验)以甜瓜枯萎病菌为指示菌,将初蹄得到产生抑菌带的菌株,用打孔器打取5 mm (<2 )菌饼接种于距离病原菌中心2 cm的四周,同一平板上只接一种初蹄菌;培养4d后测抑菌圈半径[79]、拮抗菌半径, 计算拮抗指数[8^。

抑菌圈半径=拮抗菌菌饼中心至甜瓜枯萎病病菌菌丝边缘的距离措抗指数=(抑菌圈半径-拮抗菌半径)/措抗菌半径继代培养实验将蹄选的拮抗效果较好的菌种进行继代培养,逐代进行平板对峙实验,观测其措抗指数的变化,从而确定菌种的遗传稳定性。

发芽率实验将蹄选的措抗效果较好的菌株转接至PDB培养基中摇床振荡培养24h,即得措抗菌菌悬液;挑取饱满的南海蜜甜瓜种子,用10%H202对种子进行表面消毒5 min后用无菌水清洗3-4次,再将种子浸泡于拮抗菌菌悬液中2 h,同时以未加入措抗菌的PDB做对照,每处理30粒甜瓜种子,三次重复;浸泡完毕后,将甜瓜种子置于灭菌培养皿中的湿润无菌滤纸上,种子上加盖一层湿纱布,30 °C催芽36h,统计种子的发芽率。

拮抗菌间平板对時实验同“平板对峙实验(同步拮抗实验)”。

苦瓜活性物质提取分离与抑菌作用研究1 .2 . 2 中草药提取液对病原真菌抑制作用的测定( 生长速率法[8- 9]) 参照吴新安[10]等人的方法, 分别制成含药10.0 mg/mL 的带药培养基, 用直径5 mm 的打孔器在培养好的菌落外缘切下带菌培养基柱, 即菌饼,将菌饼带菌丝的一面接种到培养皿中央。

以纯PDA培养基平板作空白对照(CK), 含化学药剂扑海因0 . 5 mg/ mL 的培养基平板作负对照(CK- ), 将各处理置于28 ℃恒温箱中培养。

一、实验目的1. 了解对峙培养法的基本原理和操作步骤。

2. 通过对峙培养法观察拮抗菌与供试菌的相互作用，了解拮抗菌的抗菌活性。

二、实验原理对峙培养法是一种检测微生物之间相互作用的实验方法。

该方法通过将拮抗菌和供试菌分别接种在固体培养基上，形成对峙区域，观察两者之间的相互作用，从而判断拮抗菌的抗菌活性。

三、实验材料1. 供试菌：大肠杆菌（Escherichia coli）2. 拮抗菌：金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）3. 培养基：PDA培养基4. 实验仪器：无菌操作台、微量注射器、打孔器、冰箱、培养箱等四、实验步骤1. 准备培养基：将PDA培养基倒入无菌培养皿中，待凝固后备用。

2. 制备药片：将拮抗菌溶解于有机试剂（如甲醇、丙酮）中，制成一定浓度的药液。

用微量注射器将药液滴加在直径8毫米的滤纸圆片上，制成具有一定剂量的药片。

如药量不够，待药液干燥后再滴加，重复此过程，直至药片达到所需剂量。

3. 制备菌块：将供试菌进行前培养，待菌液达到适宜浓度后，用打孔器制成直径5毫米的菌块。

4. 接种：将药片置于PDA平板一侧，将菌块置于平板另一侧，使两者形成对峙区域。

5. 培养：将接种好的平板放入冰箱内，存放30分钟，使药剂充分扩散。

6. 观察与记录：将平板放入培养箱中，25℃培养48～72小时。

观察拮抗菌与供试菌的相互作用，记录抑菌带的形成情况。

五、实验结果与分析1. 实验结果：经过48小时的培养，观察到拮抗菌与供试菌形成明显的抑菌带，说明拮抗菌对供试菌具有显著的抗菌活性。

2. 结果分析：对峙培养法通过观察拮抗菌与供试菌的相互作用，可以直观地判断拮抗菌的抗菌活性。

在本实验中，金黄色葡萄球菌对大肠杆菌具有显著的抑制作用，表明金黄色葡萄球菌可以作为潜在的拮抗菌应用于实际生产。

六、实验总结1. 对峙培养法是一种简单、有效的检测微生物之间相互作用的方法。

2. 本实验结果表明，金黄色葡萄球菌对大肠杆菌具有显著的抗菌活性，可以作为潜在的拮抗菌应用于实际生产。

烟草青枯菌拮抗放线菌和细菌的田间试验陆铮铮;蒋选利【摘要】从健康烟草根围土壤中分离、筛选得到对烟草青枯病菌拮抗效果较好的放线菌和细菌.经鉴定两株拮抗放线菌均属链霉菌属(Streptomyces),分别是绿色类群橄榄绿链霉菌(S.olivaceoviridis)、粉红孢类群玫瑰暗黄链霉菌(S.roseofulvus);拮抗细菌分别为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、球形赖氨酸芽孢杆菌(ysinibacillus sphaericu).在贵州省麻江县烟田进行田间试验,3次平均相对防效从大到小依次为粉红孢类群玫瑰暗黄链霉菌(63.65％)、球形赖氨酸芽孢杆菌(60.03％)、蜡样芽孢杆菌(43.85％)、绿色类群橄榄绿链霉菌(41.76％)、40％硫酸链霉素(17.11％).【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2015(054)001【总页数】3页(P87-89)【关键词】烟草青枯病;放线菌;细菌;田间试验【作者】陆铮铮;蒋选利【作者单位】遵义师范学院生命科学学院,贵州遵义563002;贵州大学农学院/贵州省山地农业病虫害综合防治重点实验室,贵阳550025【正文语种】中文【中图分类】S435.72由青枯劳尔氏菌（Ralstonia solanacearum E.F.Smith）引起的烟草青枯病，又称烟瘟、“半边疯”，素有植物“癌症”之称［1］。

该病菌可以侵染50多个科的200 多种植物［2］，传播速度快，存活时间长［3］，造成的危害严重，给许多农作物带来了巨大的伤害。

目前对烟草青枯病的防治尚未有理想的药剂，且抗病品种的应用也常受到自然条件的限制和抗性丧失等问题的困扰［4］。

Cook 等［5］和 Chef［6］通过向土壤施加拮抗微生物来防治土传病害，并取得了一定的防治效果。

研究者认为生物防治在未来农业生产中具有重要地位。

前期研究分离了烟草根围土壤中的微生物，通过平板对峙法筛选出了2株拮抗放线菌（平均抑菌圈直径分别为 43.20mm、54.66mm）和 2 株拮抗细菌（平均抑菌圈直径分别为 39.98mm、48.88mm）。

真菌拮抗细菌筛选方法的改进作者：魏冬梅，阿力木江·阿布都拉，申慧，王咏星来源：《新疆农垦科技》 2017年第1期摘要：通过对传统真菌的拮抗细菌的对峙培养筛选方法进行研究改进，克服在传统拮抗菌的筛选过程中所面临的一些问题，结合载玻片培养的载玻片筛选法，使真菌与细菌的作用距离更小，拮抗作用的观察更为直观，并易于量化设计，此法提高了真菌拮抗菌筛选的效率和准确率。

关键词：真菌；拮抗细菌：筛选：载玻片培养法拮抗菌的筛选，在开发利用微生物的生物防治作用中是最基础的，因此提高筛选效率和准确性十分重要。

在筛选真菌的拮抗菌过程中，普遍采用对峙培养法[1]，观察平板培养基中细菌和真菌对峙培养时，是按真菌菌落的大小来判断细菌拮抗性的有无。

该方法有操作方便的优点，但无法避免一些实际问题。

如对峙培养法筛选拮抗菌时不能有效的控制待选菌的生长量，因此无法判断其是营养竞争抑制还是其代谢的物质产生拮抗作用：在接种真菌时一般是用打孔器取长有真菌的培养基接种，这样真菌在平板上的菌龄不一样，即有的是菌落的中心部分，菌龄大，边缘部分菌龄小，他们有不同的生活力，因此在对峙培养中可能会出现假阳性现象：在对峙培养时平板的厚度和真菌菌种琼脂块与培养基的接触情况也将影响真菌菌落的生长情况：在筛选过程中我们很难在显微水平上观察到其拮抗效果。

针对以上不足，我们设计了一种新的实验方法进行真菌的拮抗细菌筛选——载玻片筛选法。

1 材料与方法1.1 实验材料脑心浸出培养基、水霉菌(Sa prolegnia．Spp)、从河鲈肌肉和粘液中分离得到的细菌。

收稿日期：20，I 6 -12 -2 9+基金项目：鱼类水霉病病原生物接抗菌的筛选及其拮抗机理分析，项目编号：31160025。

+通讯作者：王咏星(1965-)，女，副教授，硕士，研究方向为水生生物学。

E．mail:wyxing65@。

1.2 实验方法1.2.1 培养皿准备在直径为9 cm的培养皿中铺上与其直径相当的滤纸片，放上三角棒和载玻片，然后经1x105 Pa灭菌20 min后向培养皿中加入3~5 mL20%的无菌甘油溶液。

拮抗性放线菌的筛选实验心得
对峙培养筛选拮抗性放线菌时因多次向平板中移入菌片，很容易受杂菌污染，所以无菌操作至关重要；滤器使用前一定要检查气密性，针筒活塞下压并能自动弹回恢复，则气密性良好；否则抗生素过滤除菌不完全会有杂菌污染；得到的所有菌株都要妥善保藏，以免关键时刻无法找到，影响实验进度；减压蒸馏提取抗生素时，控制旋转薄膜蒸发器温度在45-50℃之间，否则温度太高抗生素遇高温易降解；萃取时注意油相与水相是否分离完全，分液时将水相彻底排除干净；测定MIC时，滤纸片浸泡时间要一致，而且滤纸片的距离也要相当，否则测定值不准确。

每次实验课所需器材和药品。

菌种：放线菌制片：插片法培养，培养了4天的平板培养物10个，每皿插15片。

米酒酵母斜面培养物或平板培养物：2天，6支(皿)黑曲霉平板培养物：72h，6皿米根霉平板培养物：72h，6皿青霉平板培养物：48h，5皿。

培养条件对胸膜肺炎放线杆菌生长的影响赵萍;逯忠新;储岳峰;高鹏程;贺英;石琴【摘要】通过对胸膜肺炎放线杆菌在液体培养基中不同培养条件下(静止培养、摇床培养和发酵培养)的比较试验得出静止培养细菌最高浓度为1×109个/ml,所需时间为18 h;摇床培养细菌最高浓度为3.7×109个/ml,所需时间为13 h;发酵罐通氧气(20%)培养细菌最高浓度为4.5×109个/ml,所需时间为4 h;发酵罐不通氧气培养细菌最高浓度为2.0×109个/ml,所需时间为4 h.由此得出胸膜肺炎放线杆菌在液体培养基中随着培养条件的不同其菌液浓度以及完成对数期的时间也不同,发酵(通氧气)培养菌液浓度高于其它培养方式且所需时间最短,这一结果为胸膜肺炎放线杆菌抗原的大批量生产奠定了很好的基础.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2008(035)004【总页数】3页(P80-82)【关键词】培养条件;胸膜肺炎放线杆菌【作者】赵萍;逯忠新;储岳峰;高鹏程;贺英;石琴【作者单位】中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046【正文语种】中文【中图分类】农业科学· 8 0 ．疾病防治中国畜牧兽医2 0 0 8 年第 3 5 卷第 4 期培养条件对胸膜肺炎放线杆菌生长的影响赵萍，逯忠新，储岳峰，高鹏程，贺英，石琴（中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室，兰州 7 3 0 0 4 6）摘要：通过对胸膜肺炎放线杆菌在液体培养基中不同培养条件下（静止培养、摇床培养和发酵培养）的比较试验得出静止培养细菌最高浓度为1 ×109 个/ m l ，所需时间为 18 h ；摇床培养细菌最高浓度为3.7 × 1 09 个/ m l ，所需时间为 1 3 h ；发酵罐通氧气 (2 0 % ) 培养细菌最高浓度为 4.5 ×1 09 个/ m l ，所需时间为 4 h ；发酵罐不通氧气培养细菌最高浓度为2 ．O ×1 09 个/ m l ，所需时间为 4h 。

苹果腐烂病菌拮抗放线菌的分离与鉴定展丽然;张克诚;冉隆贤;石义萍【期刊名称】《河北林果研究》【年(卷),期】2008(23)2【摘要】采用常规方法对广东省中山市采集的土样进行分离,得到放线菌293株.以苹果腐烂病菌为指示菌,通过平板对峙法和管碟法对分离菌株进行筛选.对峙法获得有拮抗效果的放线菌61株,抑菌率在50%以上的有13株,其中Z-6的抑菌率达87.2%;进一步应用管碟法对上述作用明显的菌株进行复筛,抑菌圈直径大于20 mm 的菌株6株,其中Z-6菌株产生抑菌圈直径最大,为32.87咖.抑菌谱测定结果表明,该菌株对小麦全蚀病菌、番茄灰霉病菌和稻瘟病菌抑菌效果最强,抑制率在70%以上.离体枝条测定试验中,该菌株同样表现了一定的防治效果,抑制率达32.9%.最后,本试验还对Z-6的形态特征、培养特征及生理生化特性作了研究,初步鉴定为链霉菌属(Streptomyces)的金色类群(Aureus).【总页数】5页(P182-186)【作者】展丽然;张克诚;冉隆贤;石义萍【作者单位】河北农业大学,林学院,河北,保定,071001;中国农业科学院,植物保护研究所,北京,100094;河北农业大学,林学院,河北,保定,071001;中国农业科学院,植物保护研究所,北京,100094【正文语种】中文【中图分类】S476.8【相关文献】1.拮抗放线菌KLBMP06061的鉴定及其对苹果轮纹病菌的抑菌作用 [J], 周小琪;曹成亮;丁盼;薛羚伟;刘贵友;蒋继宏2.黄腐酸处理对苹果树腐烂病菌的抑制作用及对苹果树防御酶活性的影响 [J], 陈臻;侯宝宏;王卫雄;徐秉良3.苹果树腐烂病菌挥发性代谢产物对苹果树具有毒素活性 [J], 王世明4.苹果树腐烂病内生拮抗放线菌A-2的鉴定及其活性评价 [J], 张清明;王彩霞;王海艳;李保华;董向丽;李桂舫5.苹果轮纹病菌拮抗放线菌的筛选与鉴定 [J], 展丽然;张克诚;冉隆贤;石义萍;阿拉坦夫;王万群因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

放线菌对番茄灰霉病和早疫病的拮抗作用研究陈双臣;刘爱荣;郑继亮;贺超兴【期刊名称】《北方园艺》【年(卷),期】2008(000)009【摘要】在室内对峙培养的基础上,对接种放线菌F的盆栽番茄植株接种早疫病A1、灰霉病菌B1进行田间抗性鉴定.结果表明:F菌株对2种靶标真菌均有一定的抑制作用.接种F+A1、F+B1的番茄植株,病情指数要明显低于对照,差异极显著.接种放线茵表现为不同程度的发病症状,且生长势差.接种生防菌真菌F对番茄PPO、POD具有一定诱导作用,在"放线菌-病原菌"双菌体系中对番茄叶片MDA含量有明显的抑制作用,双茵处理的番茄叶片、茎MDA含量明显低于单接番茄病原菌处理.【总页数】3页(P171-173)【作者】陈双臣;刘爱荣;郑继亮;贺超兴【作者单位】河南科技大学,林学院,洛阳,471003;河南科技大学,林学院,洛阳,471003;河南科技大学,林学院,洛阳,471003;中国农业科学院,蔬菜花卉研究所,北京,100081【正文语种】中文【中图分类】S436.412.1+3【相关文献】1.拮抗番茄早疫病原菌的放线菌WL07发酵产物理化性质的研究 [J], 王艳红;曹宁;于海威;葛文中;戴涛2.拟康氏木霉对蔬菜病原真菌的拮抗作用及对番茄灰霉病的防效的初步研究 [J], 郭敏;柳春燕;陈靠山3.2种中药提取物对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抑制活性研究 [J], 毕亚玲;王渡;黄保宏;张文同;张轶辉4.两种中药提取物对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抑制活性研究 [J], 毕亚玲;王波;黄保宏;张文同;张轶辉5.2株番茄早疫病拮抗菌的分离筛选与拮抗作用研究 [J], 杨蓉;杨文琦;张峥;詹发强;侯敏;侯新强;包慧芳;王宁;龙宣杞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。