江苏省涟水县第一中学高中生物 1.1.1培养基的配制与无菌操作和接种技术练习 苏教版选修1

第一章无菌操作技术实践第一节微生物的培养和应用第1课时培养基的配制与无菌操作和接种技术(时间：30分钟满分：50分)考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难微生物培养基的配制 2 6 8无菌操作和接种技术1、4、5综合考查3、7一、选择题(共5小题，每小题4分，共20分)1．细菌培养基常在121 ℃压力锅中灭菌。

如果只是在100 ℃温度下将细菌培养基灭菌，下列生物仍会存活的是()。

A．大肠杆菌B．一种青霉菌C．枯草芽孢杆菌D．沙门氏菌解析芽孢是为了抵御外界不良环境而形成的一种休眠体，100 ℃的温度不能将其杀死。

答案 C2．下列物质中，不能用作酵母菌培养基中碳源的是()。

A．含碳有机物B．蛋白胨C．含碳无机物D．花生粉饼等天然物质解析酵母菌是异养型生物，只能利用有机物中的碳。

答案 C3．三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。

培养36 h后，计算菌落数，结果如表所示。

下列选项错误的是()。

A.该实验采用的是固体培养基B．该实验可采用涂抹平板法接种C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类解析培养基中均加入了琼脂，故为固体培养基；微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法或稀释涂布平板法；Ⅰ组和Ⅲ组存在两个变量，不能说明大肠杆菌的生长是否需要生长因子；Ⅱ组和Ⅲ组对照，自变量是葡萄糖的有无，说明大肠杆菌的生长需要糖类。

答案 C4．下列有关平板划线操作的叙述，不正确的是()。

A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种C．在第二次划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液D．划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者解析接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种；从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端；划线结束仍需灼烧接种环，是避免细菌污染环境和感染操作者。

1.应用选择培养基的主要原理是( )A．使所需要的微生物大量增殖B．显现某微生物特征，以区别其他微生物C．抑制不需要的微生物的生长D．适宜野生型微生物的生长解析：选C。

选择培养基是在培养基中加入某一化学物质或改变某一理化性质，使某一微生物正常生长，而其他微生物则被杀灭或抑制，从而选出所需要的微生物。

2.(2012·盐城高二检测)产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是( )A．一个细菌、液体培养基B．许多细菌、液体培养基C．一个细菌、固体培养基D．许多细菌、固体培养基解析：选C。

本题考查“菌落”的形成和有关培养基的知识。

菌落是一个或几个细菌的子细胞群体，在固体培养基上有一定的形态，肉眼可见，而液体培养基不具备该条件。

做本题时，还应注意题干条件“细菌的最初数目”。

3.下列关于土壤取样的叙述错误的是( )A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌C．先铲去表层土3 cm左右，再取样D．应在火焰旁称取土壤解析：选B。

微生物的培养要注意无菌操作，土壤取样用的小铁铲和信封在使用前需灭菌，后续稀释等操作均需在火焰旁进行。

4.将0.1 mL 101、102、103倍稀释的土壤悬液分别接种在固体平板上，得到的平均菌落数为2760、585和46，则细菌总数(个/mL)为( )A．2.76×105B．5.86×105C．4.6×105D．4.4×105解析：选C。

注意菌落计数法计算的是不同稀释度的平均菌落数。

首先选择平均菌落数在30～300之间的，只有一个稀释倍数的平均菌落数符合此范围，所以细菌总数为：46÷(0.1)×103(个/mL)，即4.6×105个/mL。

5.(2012·徐州高二检测)培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是( )①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤D．③④②①⑥⑤解析：选A。

2022-2023学年江苏省淮安市涟水县一中高二5月月考生物试题1.下列有关种群及种群特征的叙述中，不正确的是（）A．五岛湖公园的湖水中所有鲫鱼构成一个种群B．种群密度是种群最基本的数量特征，某种群的个体数量越多，其种群密度就越高C．出生率和死亡率、迁入率和迁出率是决定种群数量变化的主要因素D．年龄结构、性别比例都可用于预测种群数量变化2.使用化学农药、采用生物防治的方法都可防治农作物害虫。

下列有关叙述中，不正确的是（）A．使用化学农药治理害虫，农药会污染水体、大气和土壤B．使用化学农药治理害虫，会使害虫的抗药性增强，并杀死害虫的天敌C．采用生物防治，可降低农业的生产成本，提高经济效益D．可利用生物之间的捕食、寄生、互利共生等种间关系，进行生物防治3.下列是关于生物群落、及其结构与群落演替的叙述，不正确的是（）A．自然生态系统中，生物群落通常由各种动物、植物、微生物构成B．群落结构有垂直结构和水平结构两大类型C．在火山岩上、冰川泥上发生初生演替，火灾后森林发生次生演替D．人类活动会改变群落演替的方向和速度4.下列是关于生态位的叙述，错误的是（）A．生态位是指生态系统中一个种群在空间上所占据的位置及其与相关种群之间的功能关系B．群落结构越复杂，生态位多样性越大，生物利用环境资源的能力就越强C．研究某种动物的生态位，通常要研究它的栖息地、食物、天敌以及与其他物种的关系等D．研究某种植物的生态位，通常要研究它在研究区域内的出现频率、种群密度、株高等特征等5.传统美食的制作体现了生物发酵技术，下列相关叙述正确的是（）A．酸奶和泡菜制作中均需要及时通氧，保证乳酸菌的有氧呼吸B．通过传统发酵技术可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白，用作动物饲料C．果酒、果醋制作所利用的菌种均能够进行有氧呼吸D．为降低杂菌污染，发酵前需要对器具、原料等进行灭菌6.下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是（）A．应根据微生物代谢类型选择合适的培养基并控制好培养基的pHB．待培养基冷却至室温后，在酒精灯火焰附近倒平板C．使用过的培养基应进行灭菌，不应直接丢弃D．实验操作时应避免已灭菌的材料用具与周围物品接触7.某研究性学习小组拟培育一种名贵花卉的脱毒苗，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→生芽、生根→移栽”。

培养基制备与无菌操作培养基制备与无菌操作是微生物学实验中非常关键的一环，它可以确保实验的结果准确、可靠，并防止实验中的污染。

在培养基制备过程中，无菌操作是至关重要的，它可以避免外源性微生物的污染，保证培养基中只有我们所需要的微生物生长。

培养基是供养微生物生长和繁殖的营养物质的混合物。

制备培养基的关键是确保培养基的成分准确、浓度合适，并且不含污染物。

以下是一个常用的培养基制备步骤：1. 准备所需成分：根据所要培养的微生物的特性和需求，选择相应的培养基制备配方。

准备所需的成分，如蛋白胨、葡萄糖、胆盐、琼脂等。

确保所用的成分都是干燥、无污染的。

2. 称量和混合：按照配方要求，将所需成分按比例称量并混合。

注意在称量过程中要使用无菌操作的称量器具，并避免成分的二次污染。

混合时可使用无菌的玻璃棒或磁力搅拌器进行均匀混合，确保各成分充分溶解。

3. pH调节：根据培养基配方要求，调节溶液的pH值。

可以使用pH计进行准确的测量，并使用酸或碱溶液进行调节。

在调节pH值时同样要进行无菌操作，避免外源性微生物的污染。

4. 煮沸杀菌：将混合好的培养基溶液倒入培养瓶中，并盖上无菌的塞子或锡纸。

将培养瓶放入高压锅中，进行煮沸杀菌。

煮沸时间一般为15-20分钟，确保培养基中的微生物全部被杀灭。

注意在煮沸杀菌过程中要保持锅内压力，并避免培养瓶的破裂。

5. 冷却和贮存：将煮沸好的培养基冷却到室温或适宜的温度，并进行无菌操作倒入无菌培养皿或管中。

确保容器表面无菌，避免外源性微生物的污染。

之后可以密封、贴标签并储存于适当的环境中，以备后续实验使用。

无菌操作是培养基制备过程中不可或缺的一部分，它可以避免外界微生物的污染，确保培养基中只有所需的微生物。

以下是一些常用的无菌操作步骤：1. 消毒环境：在无菌操作开始前，首先需要进行空气和工作区域的消毒。

可以使用紫外线灯进行空气消毒，使用75%乙醇或其他消毒液擦拭工作区域表面。

2. 穿戴无菌服装：进行无菌操作时，需要穿戴无菌手套、无菌操作衣和帽子。

2023-2024学年苏教版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计20小题每题3分共计60分）1.将1mL土壤样液稀释100倍在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1mL稀释液经适当培养后 3个平板上的菌落数分别为56、57和58 下列叙述正确的是（）A. 可得出土壤样液中活菌数为\ 5.8times 10^7个/LB. 此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目高C. 一般选择菌落数在\ 的30~300平板进行计数D. 显微镜直接计数法统计的都是稀释液中活菌数【答案】C【解析】解 A.将1mL样品稀释100倍在3个平板上分别接入0.1mL稀释液经适当培养后 3个平板上的菌落数分别为56、58和57, 据此可得出每升样品中的活菌数为（56+58+57）/3÷0.1×1000×100=5.7X 10^7个 A错误B.由于两个或多个细菌形成一个菌落所以统计的菌落数往往比实际的活菌数目低 B错误C.一般选择菌落数在30~300的平板进行计数 C正确D.显微镜直接计数法统计的都是稀释液中所有个体的数目包括死菌 D错误故选 C2.防止杂菌入侵获得纯净的培养物是研究和应用微生物的前提下列操作与之无关的是（）A. 对培养基进行高压蒸汽灭菌处理B. 接种操作必须在火焰旁进行C. 第二次及以后每次划线接种前都必须灼烧接种环D. 培养的整个过程都必须保持无菌环境【答案】C【解析】解 A.对培养基进行高压蒸汽灭菌处理可以防止杂菌污染 A不符合题意B.为了防止杂菌的入侵划线操作要在酒精灯火焰旁进行 B不符合题意C.每次划线前都需要灼烧接种环以防止杂菌污染第二次及以后的划线要从上一次划线的末端划线 C不符合题意D.培养的整个过程都必须保持无菌环境 D不符合题意故选 C3.菌落的特征包括（）①菌落的形态②菌落的结构③菌落的大小④菌落的颜色⑤菌落的隆起程度⑥菌落的数量．A. ①③④⑤B. ①②④⑥C. ①③⑤⑥D. ①④⑤⑥【答案】A【解析】解不同种类的细菌形成的菌落不同菌落特征包括菌落的大小、形态、颜色及菌落的隆起程度菌落数量不是菌落特征．故选 A．4.青霉素一般只对革兰氏阳性菌有作用利用滤纸条法可测定青霉素的抑菌情况方法如下将浸有青霉素溶液的滤纸条贴在土豆汁葡萄糖琼脂培养基平板上垂直于滤纸条划线接种供试菌液抑菌情况如图下列分析错误的是（）A. 青霉素是由青霉菌产生的次级代谢产物可分泌到培养基中B. 滤纸条周围已被抑制的区域不会再出现菌落C. 青霉素对大肠杆菌几乎不起作用推测大肠杆菌可能不属于革兰氏阳性菌D. 相对于枯草芽孢杆菌青霉素对金黄色葡萄球菌的抑制作用更明显【答案】B【解析】解 A.青霉素是由青霉菌产生的次级代谢产物可分泌到培养基中 A正确B.青霉素一般只对革兰氏阳性菌有作用滤纸条周围已被抑制的区域可能会出现非革兰氏阳性菌等的菌落 B错误C.根据图中结果可知青霉素对大肠杆菌几乎不起作用由此可推测大肠杆菌可能不属于革兰氏阳性菌 C正确D.根据图中结果可知枯草芽孢杆菌的菌落范围大于金黄色葡萄球菌说明相对于枯草芽孢杆菌青霉素对金黄色葡萄球菌的抑制作用更明显 D正确故选 B5.如图是谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径．下列对这一图解的叙述中不正确的是（）A. 当谷氨酸过量时谷氨酸脱氢酶的活性会下降B. 这种调节是快速、精细的C. 谷氨酸脱氢酶的合成受遗传物质和诱导物的共同控制D. 如能把谷氨酸及时排出细胞细胞内的谷氨酸合成量会增加【答案】C【解析】解 A、由图可知当谷氨酸过量时会抑制谷氨酸脱氢酶导致谷氨酸脱氢酶的活性下降 A正确B、酶的活性的调节是快速、精细的 B正确C 、谷氨酸脱氢酶是一种组成酶它的合成仅受遗传物质控制 C错误D、如能把谷氨酸及时排出细胞就会解除其对谷氨酸脱氢酶的抑制使细胞内的谷氨酸合成量增加 D正确．故选 C．6.泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化的正确曲线的是（）A.B.C.D.【答案】C【解析】泡菜制作过程中亚硝酸盐是先增加然后逐渐减低稳定在较低水平故选C7.实践是动手和动脑的过程也是解决实际问题的过程有关生物技术实践的叙述正确的是（）A. 需灭菌的试管等玻璃器皿可用牛皮纸包好放高压蒸汽灭菌箱灭菌B. 倒平板后需要持续间歇晃动以保证固体培养基的表面平整C. 倒平板时应将打开的皿盖放到一边以免培养基溅到皿盖上D. 在加热熔化琼脂过程中要不断搅拌以防止琼脂糊底而导致烧杯破裂【答案】D【解析】解 A.需灭菌的试管等玻璃器皿可用牛皮纸包好放干热灭菌箱灭菌 A错误B.倒平板不需要晃动 B错误C.倒平板时用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙右手将锥形瓶中的培养基（约10~20mL）倒入培养皿左手立即盖上培养皿的皿盖不能打开皿盖 C错误D.加入琼脂后需要熔化此过程中要不断用玻棒搅拌防止琼脂糊底而导致烧杯破裂 D正确故选 D8.某种物质X（一种含有C、H、O、N的有机物）难以降解会对环境造成污染只有某些细菌能降解X 研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的细菌菌株实验过程中需要甲、乙两种培养基甲的组分为无机盐、水和X 乙的组分为无机盐、水、X和Y 下列相关叙述中错误的是（）A. 甲、乙培养基均属于选择培养基乙培养基组分中的Y物质是琼脂B. 若要筛选高效降解X的细菌菌株甲、乙培养基中X是唯一的碳源C. 步骤⑤的筛选过程中各培养瓶中的X溶液要有一定的浓度梯度D. 步骤⑤的筛选过程中若培养基中的X浓度过高某菌株对X的降解量可能下降【答案】C【解析】解 A.甲、乙培养基均以X为唯一碳源和氮源属于选择培养基其中乙培养基为固体培养基因此其组分中的Y物质是琼脂 A正确B.若要筛选高效降解X的细菌菌株甲、乙培养基中X是唯一的碳源和氮源 B正确C.步骤⑤的筛选过程中各培养瓶中的X溶液的浓度要相同 C错误D.步骤⑤的筛选过程中若培养基中的X浓度过高时可能会导致细菌细胞失水过多而失活因此对X的降解量可能下降 D正确故选 C9.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（）A. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入伊红-美蓝试剂C. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹III试剂D. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂【答案】A【解析】解 A、以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂如果有尿素分解菌可以呈红色 A正确B、伊红-美蓝试剂可以用来鉴别大肠杆菌 B错误C 、苏丹III试剂可以用来检测脂肪 C错误D、双缩脲试剂可以用来检测蛋白质 D错误．故选 A．10.下列关于菌落的叙述中正确的是（）A. 菌落特征是鉴定细菌种类的重要依据B. 球菌菌落比杆菌菌落大边缘不整齐C. 每个菌落由多种细菌组成相当于生物群落D. 菌落在一定液体培养基才能形成相当于种群【答案】A【解析】A、不同的微生物菌落具有不同的菌落特征是鉴定细菌种类的重要依据 A正确B、不同的微生物菌落具有不同的特征球菌菌落与杆菌菌落相比大小和边缘性状都不相同无鞭毛的球菌菌落较小较薄边缘整齐 B错误C、每个菌落只能由一种微生物组成相当于生物种群 C错误D、菌落只能在固体培养基才能形成相当于种群 D错误11.下列有关纤维素分解菌的选择培养与鉴定的叙述错误的是（）A. 鉴定纤维素分解菌时需要使用固体培养基B. 对纤维素分解菌进行选择培养应该用固体培养基C. 用刚果红染色时可以在长出菌落的培养基中加入刚果红D. 用刚果红染色时可以在倒平板时加入刚果红【答案】B【解析】解 A.纤维素分解菌鉴定时需将样品涂布于含刚果红的固体培养基上 A正确B.对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基其中的纤维素是唯一的碳源只有纤维素分解菌可以很好地生存其他微生物不能生存同时振荡培养可以保证充分供氧利于纤维素分解菌的生长因而可以起到对纤维素分解菌的富集作用获得大量的菌体 B错误CD.在用刚果红染色时既可以先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应也可以在倒平板时就加入刚果红纤维素被纤维素分解菌释放的酶分解后培养基上会出现透明圈 C、D正确故选 B12.在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时甲组实验用氮源只含尿素的培养基乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基其他成分都相同在相同条件下操作、培养与观察则乙组实验属于（）A. 空白对照B. 自身对照C. 相互对照D. 条件对照【答案】D【解析】本实验甲组为实验组乙组为对照组给实验组某种处理给对照组另一条件的处理为条件对照故选D13.植物细胞工程包括植物组织培养、植物体细胞杂交等技术具有广泛的应用前景和实用价值下列对这些操作或应用描述错误的是（）A. 可用PEG诱导植物细胞融合再生出细胞壁是融合成功的标志B. 利用植物组织培养技术可大量获得人参皂甙干粉且已投入规模化生产C. 植物培养基中常用的植物生长调节剂一般可以分为生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类D. 获取植物原生质体时需在蔗糖浓度高于细胞液浓度的缓冲液中进行以使细胞发生质壁分离便于观察【答案】D【解析】解 A.植物细胞（或原生质体）融合可用PEG进行诱导融合成功的标志是再生出细胞壁 A正确B.用植物组织培养技术生产人参皂甙干粉已投入规模化生产 B正确C.植物生长调节剂在植物组织培养中具有极其重要的作用根据其功能特点可分为生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类 C正确D.获取植物原生质体时除使用纤维素酶和果胶酶外还要在蔗糖浓度与细胞液浓度相当的缓冲液中进行以免细胞过度吸水或失水此时原生质体已无细胞壁无法观察到质壁分离 D错误故选 D14.下表中是某种微生物的培养基配方下列叙述错误的是（）A. 该培养基的碳源是葡萄糖氮源是\ KNO_3B. 该培养基可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌C. 该培养基属于固体培养基可用于微生物的分离D. 该培养基可用来筛选抗青霉素的微生物【答案】C【解析】解 A.由表知该培养基的碳源是葡萄糖氮源是 KNO_3 A正确B.该培养基可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌 B正确C.该培养基不含有琼脂因此不属于固体培养基 C错误D.该培养基含有青霉素因此可用来筛选抗青霉素的微生物 D正确故选 C15.平板划线法和稀释涂布平板法是最常用的两种微生物接种方法其他条件相同且适宜时使用这两种接种方法接种同种微生物下列有关叙述正确的是（）A. 使用成分相同的液体培养基B. 对接种工具的灭菌操作相同C. 都能进行菌种的纯化和计数D. 得到的菌落的特征不相同【答案】B【解析】解 A.平板划线法和稀释涂布平板法都只能用于固体培养基上接种 A错误B.平板划线法和稀释涂布平板法都要对接种用具进行灭菌且灭菌操作相同 B正确CD.平板划线法和稀释涂布平板法均可以分离菌种最终都会在培养基的表面形成单个菌落但平板划线法不需要考虑浓度不能用于微生物的计数 C、D错误故选 B16.土壤中的细菌能分解尿素是因为它们能合成（）A. 尿素酶B. 脲酶C. 蛋白酶D. 细菌酶【答案】B【解析】解土壤中的细菌能分解尿素是因为它们能合成一种脲酶将尿素分解．故选 B．17.下列关于纤维素酶和纤维素分解菌的叙述正确的是（）A. 纤维素酶是一种复合酶能将纤维素最终分解为纤维二糖B. 将滤纸埋在土壤中从腐烂的滤纸上可筛选出纤维素分解菌C. 用刚果红染色法筛选目的菌时必须在倒平板时就加入刚果红D. 增加纤维素分解菌浓度的选择培养基中只能含纤维素一种碳源【答案】B【解析】解 A.纤维素酶是一种复合酶一般认为其至少包括3种成分即 C_1酶、 C_x酶和葡萄糖苷酶前两种酶使纤维素分解成纤维二糖第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖 A 错误B.将滤纸埋在土壤中从腐烂的滤纸上可筛选出纤维素分解菌 B正确C.在用刚果红染色时可以先培养微生物再加入刚果红也可以在倒平板时加入 C错误D.纤维素分解菌的选择培养基不一定选择纤维素作为唯一碳源可以选择富含纤维素的物质如滤纸等 D错误故选 B18.能够测定样品中活菌数目的方法是（）A. 重量法B. 直接计数法C. 稀释涂布平板法D. 平板划线法【答案】C【解析】解利用稀释涂布平板法能够不影响生活的情况下将细菌个体从固体培养基上分离出来并可以繁殖形成菌落可根据菌落数测定出测定样品活菌数故稀释涂布平板法可用于测定样品活菌数．故选 C．19.如图表示某同学设计的“胡萝卜的组织培养”实验流程有关叙述正确的是（）A. 切取的组织块中必须要带有形成层细胞否则不会成功B. 诱导产生的愈伤组织通过细胞分裂过程最终形成试管苗C. 在愈伤组织中加入细胞融合的诱导剂可获得染色体加倍的细胞D. 获得试管苗时培养基通常应含生长素和细胞分裂素类物质【答案】D【解析】解 A.切取的组织中要带有形成层原因是形成层容易诱导形成愈伤组织但是不带形成层细胞也能成功 A错误B.在新的培养基上愈伤组织通过细胞的再分化过程（包括细胞分裂和细胞分化）才最终形成试管苗 B错误C.植物细胞有细胞壁在愈伤组织中加入细胞融合的诱导剂不能获得染色体加倍的细胞C错误D.获得试管苗时培养基通常应含生长素和细胞分裂素类物质且不同时期二者的比例不同 D正确故选 D20.乙草胺 \left( C_14H_20C_1NO_2\right)是一种广泛应用的除草剂能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长我国科学工作者从土壤中分离获得能有效降解乙草胺的菌株为利用乙草胺进行生物修复提供了微生物资源下列有关叙述错误的是（）A. 从使用乙草胺的土壤取样使用稀释涂布平板法或平板划线法进行分离B. 配制以乙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养可提高降解菌的浓度C. 提供适宜的温度将培养基的pH调至酸性有利于降解菌的生长繁殖D. 在分离纯化菌种后需要借助生物化学的方法对分离的菌种做进一步的鉴定【答案】C【解析】解 A.从使用乙草胺的土壤取样使用稀释涂布平板法或平板划线法进行分离 A 正确B.配制以乙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养可提高降解菌的浓度 B正确C.培养霉菌时需要将培养基的pH调至酸性培养细菌时需要将培养基的pH调至中性或微碱性 C错误D.在分离纯化菌种后需要借助生物化学的方法对分离的菌种做进一步的鉴定 D正确故选 C二、解答题（本大题共计4小题每题10分共计40分）21.（1）在筛选过程中应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基土从功能上讲该培养基属于________培养基21.（2）纯化菌种时为了得到单菌落常采用的接种方法有两种即________和________ 21.（3）为了筛选出高效菌株可比较单菌落周围分解圈的大小分解圈大说明该菌株的降解能力________21.（4）通常情况下在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________ 无菌技术要求试验操作应在酒精灯________附近进行以避免周围环境中微生物的污染【答案】（1）原油, 选择【解析】解（1）欲筛选出能降解原油的菌株培养基中应只含有原油而无其它碳源不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存这类培养基属于选择培养基【答案】（2）平板划线法, 稀释涂布平板法【解析】（2）分离纯化菌种时需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞从而能在培养基表面形成单个的菌落以便纯化菌种【答案】（3）强【解析】（3）降解原油能力越强的菌株在菌落周围形成的分解圈越大【答案】（4）干热灭菌, 高压蒸汽灭菌, 火焰【解析】（4）实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌（如接种环）、干热灭菌（如培养皿）、高压蒸汽灭菌（如培养基）等无菌操作要求在整个实验过程中操作都在酒精灯火焰附近进行以避免周围微生物的污染22.（1）酒精发酵阶段需添加酵母菌在操作过程中发酵罐先通气后密闭通气的作用是__________________________22.（2）醋酸发酵阶段独流老醋采用独特的分层固体发酵法发酵30天工艺如下①发酵过程中定期取样测定醋酸杆菌密度变化与颠倒前相比 B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是______________②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因发酵过程中发酵缸中__________层醋醅有利于乳酸菌繁殖积累乳酸③为检测发酵过程中乳酸菌的含量取不同稀释度的样品各0.1mL涂布到固体培养基上在适宜条件下培养一段时间统计得到 10^6、 10^7、 10^8三个稀释度的培养基上的平均菌落数依次为317个、125个、16个据此估算每毫升样品中的乳酸菌数约为___________个上述统计的菌落数往往比活菌的实际数目_________ 原因是_________________________________________【答案】（1）能提高酵母菌的数量有利于密闭时获得更多的酒精产物【解析】解（1）酵母菌是兼性厌氧型生物既能进行有氧呼吸又能够进行无氧呼吸在酒精发酵过程中先通气使酵母菌在有氧环境下大量增殖有利于密闭时获得更多的酒精产物【答案】（2）①先快速增长后趋于稳定, ②颠倒前的B层和颠倒后的A（或不翻动或下）, \ 1.25×10^10, 低（或少）, 当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落【解析】（2）①由图可知颠倒后 B层先快速增长后趋于稳定②乳酸菌的呼吸方式为无氧呼吸颠倒前的B层和颠倒后的A层处于无氧环境有利于乳酸产生由于统计得到10^6、 10^7、 10^8三个稀释度的培养基上的平均菌落数依次为317个、125个、16个符合30~300条件的只有125 则每毫升样品中的乳酸菌数约为 1.25×10^10个因为当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落所以上述统计的菌落数往往比活菌的实际数目低23.（1）要从土壤中分离目标菌最关键的实验操作步骤是用以尿素为唯一氮源的培养基进行选择培养这样做的理由是________ 根据培养基的成分判断该同学不能分离出土壤中分解尿素的细菌原因是________23.（2）该培养基中添加葡萄糖的原因是________ 接种尿素分解菌后的培养基需要倒置培养可以防止________ 防止造成污染若要验证该培养基具有选择作用需要设置________作为对照当________时即可说明该培养基具有选择作用23.（3）鉴别培养基中是否存在尿素分解菌时可在培养基中加入酚红指示剂如果有尿素分解菌存在培养基的pH会________ 该菌落的周围会出现________色23.（4）该同学采用稀释涂布平板法检测样液中细菌含量将1mL样液稀释100倍在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液经适当培养后 3个平板上的菌落数分别为39、38和37 据此可得出每升样液中的活菌数为________23.（5）该同学还做了不同稀释倍数的实验且实验操作都正确规范但通过菌落计数计算后发现稀释倍数低的组计算结果往往比稀释倍数高的组计算结果略低可能的原因是________【答案】（1）不能合成脲酶的微生物无法分解尿素获得氮生长受到抑制, 培养基含蛋白胨尿素不是唯一氮源（培养基含蛋白胨蛋白胨中含有氮元素）【解析】解（1）要从土壤中分离目标菌最关键的实验操作步骤是用以尿素为唯一氮源的培养基进行选择培养因为不能合成脲酶的微生物无法分解尿素获得氮生长受到抑制据表分析表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源所以不能分离尿素分解菌【答案】（2）尿素分解菌为异养生物葡萄糖可为其提供碳源, 培养皿盖上的水珠落入培养基, 接种相同样品的牛肉膏蛋白胨培养基, 牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落明显多于该培养基上的菌落【解析】（2）尿素分解菌为异养生物葡萄糖可为其提供碳源所以该培养基中要添加葡萄糖接种尿素分解菌后的培养基需要倒置培养可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基防止造成污染为验证该培养基具有选择作用需要设置接种相同样品的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照在相同条件下培养牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落明显多于该培养基上的菌落即可说明该培养基具有选择作用【答案】（3）升高, 红【解析】（3）鉴别尿素分解菌时可在培养基中加入酚红指示剂尿素分解菌代谢会产生氨使pH升高菌落周围会出现红色【答案】（4）\ 3.8times 10^7【解析】（4）微生物培养的关键是无菌配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底由题意知1mL水样中的菌落数是（39+38+37）÷3÷0.1×100= 3.8×10^4个则每升水样中的活菌数为3.8× 10^4× 10^3=3.8×10^7【答案】（5）稀释倍数低的细菌液浓度更大更易出现两个或多个细胞连在一起形成一个菌落导致菌落计数偏低【解析】（5）稀释倍数低的细菌液浓度更大更易出现两个或多个细胞连在一起形成一个菌落导致稀释倍数低的组计算结果往往比稀释倍数高的组计算结果略低24.（1）培养基中加入的化合物A是________ 本实验将样品稀释涂布到鉴别培养基之前要进行选择培养目的是________________________________________24.（2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物向培养基中加入________溶液等培养基上长出菌落后能产生纤维素酶的菌落周围会出现________24.（3）为在培养基表面形成单个菌落若将平板分为5个区域进行划线理论上需要灼烧接种环________次若用稀释涂布平板法进行接种在涂布平板时滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是________________________________________________24.（4）用三种菌株对秸秆进行处理并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定（结果如图）可以得出的结论是 ________________（写出两点）【答案】（1）纤维素, 增加能产纤维素酶的微生物的浓度【解析】解（1）由题干信息分析可知该实验是为了分离筛选降解纤维素能力强的微生物故培养基中加入的化合物A是纤维素本实验将样品稀释涂布到鉴别培养基之前要进行选择培养目的是增加能产纤维素酶的微生物的浓度【答案】（2）刚果红, 透明圈【解析】（2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物在培养基中加入刚果红可与培养基中的纤维素形成红色复合物当纤维素被分解后红色复合物不能形成培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈从而可筛选纤维素分解菌【答案】（3）6, 培养基表面的菌液会出现积液导致菌体堆积影响分离效果【解析】（3）为在培养基表面形成单个菌落若将平板分为5个区域进行划线理论上需要灼烧接种环6次在每次接种前和最后一次接种后都需要进行灼烧若用稀释涂布平板法进行接种在涂布平板时滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是培养基表面的菌液会出现积液导致菌体堆积影响分离效果【答案】（4）三种菌株对半纤维素的降解作用最强与第5天结果相比第10天秸秆各组分中纤维素的降解率变化最大【解析】（4）据图分析可知三种菌株对半纤维素的降解能力最强与第5天结果相比第10天秸秆各组分中纤维素的降解率变化最大。

生物第I卷（选择题）一、选择题1．在微生物的培养中下列说法不正确的是A. 培养基、手、接种针要分别用高压蒸汽、火焰灼烧、酒精进行无菌处理B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数估计值C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度D. 纤维素分解菌产生的纤维素酶是一种复合酶，可把纤维素分解成葡萄糖2．体重近似、发育正常的甲、乙、丙、丁四只雄性小狗，丁狗不作处理，甲、乙、丙狗分别做不同的手术处理。

几个月后查得各自血液中三种激素的含量如下表，则下列叙述错误的是（）A．甲狗可能出现的症状有行动呆笨而迟缓，精神萎靡，食欲不振，身体发育停止B．乙狗可能出现的症状有生长停滞C．丙狗可能出现的症状有性情变得温顺D．在相同条件下饲养一段时间后，其个体大小变化为：甲、丁狗个体小，基本处于术前状态，丙、乙狗不断长大。

4．实验中学的科技活动小组的同学，在考察学校周围水体污染情况时发现有两种截然不同的现象：一种是有机型污染，水体变黑发臭；另一种是无机型污染，水体一般变绿。

前者和后者分别生活着的生物主要是异养厌氧型生物；光能自养型生物 B.光能自养型生物；异养厌氧型生物C．异养需氧型生物；化能自养型生物 D.化能自养型生物；异养需氧型生物5．下面有关基因的叙述中，正确的是（）A．基因是DNA的基本组成单位B．细胞中的基因全部位于细胞核内C．一个DNA分子往往含有许多基因D．每条染色体上含有的基因数目相同6．如图依次为丙氨酸、丝氨酸和天冬氨酸的结构式。

由2个丙氨酸、3个丝氨酸和3个天冬氨酸脱水缩合所形成的一条多肽中，含有的氨基、羧基和肽键的数目是A．1、4、8 B．1、4、7 C．1、1、8 D．2、1、77．豌豆高茎对矮茎为显性，现将A、B、C、D、E、F、G七棵植株进行交配实验，所得结果如下表。

从理论上说，子代高茎豌豆植株中高茎纯合体所占的比例为（）A．8．下图为电子显微镜视野中观察到的某细胞的一部分。

【关键字】技术分子生物学技术练习题（含解析苏教版选修一）(时间：30分钟满分：50分)难度及题号考查知识点及角度基础中档稍难PCR技术的原理2、4PCR技术的过程1、3 5PCR技术的应用 6 7 8一、选择题(共5小题，每小题4分，共20分)1．下列有关PCR技术的叙述，不正确的是( )。

A．PCR技术经过变性、退火、延伸3个阶段B．PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等C．PCR技术需在体内进行D．PCR技术利用碱基互补配对的原则解析PCR一般要经历30多次循环，每次循环可以分为变性、退火和延伸三步。

PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等。

PCR技术是在体外进行的。

答案C2．PCR技术是现代分子生物学实验工作的基本方法之一，区别于细胞内DNA复制，它利用的原理是( )。

A．DNA的半保留复制B．碱基互补配对C．转录和翻译D．DNA热变性原理解析在80～100 ℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解旋，双链分开，这个过程称为变性。

当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链。

PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚和结合。

答案D3．标准的PCR过程一般分为变性、退火、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是( )。

A．、、B．、、C．、、D．、、解析当温度上升到(90～96 ℃)以上时，双链DNA解聚为单链，称之为变性；当温度下降到(40～60 ℃)左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；当温度上升到(70～75 ℃)时，溶液中的四种脱氧核苷酸在Taq聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，称为延伸。

答案A4．变性作用是指核酸双螺旋结构被破坏，双链解开，但共价键并未断裂。

引起变性的因素很多，升高温度、过酸、过碱、纯水以及加入变性剂等都能造成核酸变性。

PCR的反应过程中，引起变性的因素是( )。

A．pH过高B．pH过低C．升高温度D．加入酒精解析各选项的条件均能导致DNA分子变性，但在PCR反应中，变性后还要进行退火和延伸等过程，过酸、过碱、酒精等能够导致反应过程中的酶变性失活，使DNA扩增不能进行，因此，在PCR反应中，选用升高温度使DNA变性。

2022-2023学年江苏省淮安市涟水县一中高一下学期第一次月考生物试题1.下列人体结构或细胞中，不存在同源染色体的是（）A．一个四分体B．次级卵母细胞C．受精卵D．初级卵母细胞2.下项中属于孟德尔一对相对性状遗传实验中的测交实验的是A．Dd×Dd B．Dd×dd C．dd×dd D．DD×dd3.一杂合子（Dd）植株自交时，若含有隐性基因的花粉不能成活，则自交后代的基因型有A．0种B．1种C．2种D．3种4.下列所举性状不属于相对性状的是（）A．水稻的早熟和晚熟B．豌豆的紫花和红花C．小麦的抗锈病和易染锈病D．绵羊的长毛和细毛5.孟德尔关于豌豆的一对相对性状的杂交实验中，叙述错误的是（）A．杂交过程中须在雄蕊未成熟前除去母本的雌蕊B．F 2中杂合子与纯合子遗传因子组成不同，但表现型可能相同C．统计的样本数量要足够大D．正交、反交的结果相同6.自由组合定律中的“自由组合”是指（）A．带有不同遗传因子的雌雄配子间的组合B．决定同一性状的成对的遗传因子的组合C．两亲本间的组合D．决定不同性状的遗传因子组合7.小麦的抗病(A)对不抗病(a)是显性。

两株抗病小麦杂交，后代中有一株不抗病，其余未知。

这个杂交组合可能的遗传因子组成是（）A．AA×Aa B．AA×AA C．Aa×Aa D．Aa×aa8.果蝇体细胞中有4对染色体。

有关果蝇有性生殖过程的叙述，错误的是（）A．减数分裂过程中，染色体复制两次，细胞分裂两次B．减数分裂过程中，同源染色体的联会发生在减数分裂ⅠC．减数分裂完成后，精细胞中染色体的数量是4条D．减数分裂和受精作用保证了果蝇前后代染色体数目恒定9.玉米的紫粒和黄粒是一对相对形状。

同一品系X的黄粒玉米自交，后代全部是黄粒玉米；若接受另一品系Y紫粒玉米的花粉，后代既有黄粒的也有紫粒的。

由此推测可知（）A．紫粒是显性性状B．黄粒是显性性状C．品系X是杂种D．品系Y是纯种10.A(a)和B(b)分别是豌豆控制两对相对性状的遗传因子。