丁酸梭菌微生态制剂

丁酸梭菌的特性和功效丁酸梭菌的特性和功效赵长昆1，齐树亭2（河北工业大学化工学院，天津，300130 ）（河北工业大学海水利用中心，天津，300130）摘要：本文叙述了丁酸酸菌的特性、功能。

首先，介绍了丁酸梭菌的发现及形态，并且对其生理特性进行了描述。

然后，讲述丁酸梭菌的功效，重点陈述了它在肠道中的作用。

最后是丁酸梭菌应用的理论意义和实践需求，以及它诱人的产业化前景和市场竞争力。

关键词：丁酸梭菌；芽孢；益生菌；微生态学The characteristics and effectiveness ofclostridium butyricumZHAO changkun，QI shuting（Institute Of Chemical HeBei University Of Technology，TianJin，300130）（Seawater Utilization Center Of HeBei University Of Technology，TianJin，300130）Abstract：In this paper，the characteristics and effectiveness are reviewed．First，the discovery and morphology of clostridium butyricum is introducted，and also its physiological characteristics is described． Then，the effectiveness of clostridium butyricum is telled，and the function when it is in intestinal is importantly stated． The last part includes the theoretical significance and the practice requirements of clostridium butyricum，application，and the tempting industrial prospect and market competitiveness of it ．Keywords：Clostridium butyricum；bacillus；probiotics；Micro-ecology1丁酸梭菌的发现和特性1．1发现丁酸梭菌（Clostridium butyricum）又名丁酸梭菌，是梭状芽孢菌属中的一个种。

摘要 / Abstract[目的]研究丁酸梭菌的营养条件并优化发酵工艺，为与丁酸梭菌培养发酵相关的实验室研究及规模化生产工艺优化提供依据。

[方法]通过单因素试验，比较8 种常见廉价碳氮源对丁酸梭菌增菌的影响，对高密度发酵培养基和培养条件进行优化。

[结果]丁酸梭菌MY-Z 发酵最佳营养组分为：葡萄糖30.0g/L、酵母粉5.0g/L、鱼粉30.0g/L 或肽粉30.0g/L、K2HPO4 1.05g/L、MgSO4·7H2O 1.21g/L、NaCl 0.3g/L、CaCO3 1.5g/L、MnSO4·H2O 0.012 g/L、促生长因子 0.2 g/L；最佳发酵工艺为：37 ℃恒温培养30～36 h，发酵过程中恒定pH 为6.5，并在发酵10 h 左右进行总量为5%的连续变量补料。

丁酸梭菌MY-Z 在此发酵工艺下，发酵32 h 左右，芽孢数可达2.28×109CFU/mL。

[结论]通过优化发酵工艺可有效提高发酵液菌数，从而降低生产成本，对丁酸梭菌的产业化推广与应用具有重要意义。

研究背景丁酸梭状芽孢杆菌（Clostridium butyricum），又名丁酸菌、宫入菌、酪酸菌，在自然界中多分布在肠道、酒窖、奶酪中。

1933 年，由日本千叶医科大学宫入近治博士首次发现。

丁酸梭菌属于严格厌氧的革兰氏阳性内生芽孢杆菌，细胞直径（0.6～1.2）μm×（3.0～7.0）μm；在梭菌增菌培养基（RCM）平板上和高层琼脂柱内菌落呈奶白色，边缘不整齐；显微视野中菌体呈杆状或梭状，多数单个，少数呈短链，部分菌株在对数生长初期菌体会呈现长丝状。

近几年来，丁酸梭菌作为微生态制剂被广泛应用于食品、医药、饲料与养殖等领域。

2009 年7月，原农业部批准了丁酸梭菌为新饲料添加剂。

丁酸梭菌作为微生态制剂饲料添加剂，具有较强的抗生素耐受性，对氨苄西林、强力霉素、甲硝唑等抗生素均不敏感，相对于乳酸菌、枯草芽孢杆菌等常规菌剂，与抗生素联用时受限度较小。

饲用微生态制剂丁酸梭菌的研究与应用进展易中华江西农业大学动物科技学院收稿日期：2011 - 06 - 21丁酸梭菌又名酪酸菌，在自然界中主要存在于奶酪、天然酸奶、人与动物粪便及土壤中。

丁酸梭菌作为微生态制剂的研究是由日本千叶医科大学宫入近治博士（1933）首先发现并报告的，又叫宫入菌。

丁酸梭菌具有耐热、耐酸及耐受多种抗生素等特点，是一种较理想的具有广泛开发前景的微生态制剂（黄俊等，2004）。

在畜禽饲料中添加饲用丁酸梭菌制剂，对于减少当前饲料中抗生素产品的滥用、减少药物在肉品中的残留、降低动物细菌的耐药性和保障动物健康有着重要的意义。

文章对丁酸梭菌的生物学特性与生物学功效、丁酸梭菌制剂的培养与发酵生产工艺、饲用丁酸梭菌制剂的实际应用效果、存在问题及发展前景等几方面的研究概况进行综述。

1 丁酸梭菌的生物学特性1.1 分类及形态学特性丁酸梭菌是一种厌氧的革兰阳性芽孢杆菌，呈直杆状或稍有弯曲，单个或成对，短链，偶见有丝状菌体，菌体灰白色，呈煎蛋样，中间隆起。

细菌直径为(0.6~1.2)×(3~7) μm，两端钝圆，中间部分轻度膨胀，周身鞭毛，具有运动性。

孢子卵圆，偏心或次端生。

革兰染色初培养的菌为阳性，后期培养可变为革兰阴性。

1.2 培养和生化特性丁酸梭菌在液体培养基中培养，培养初期试管上部呈轻微浑浊，产生大量的气体，后期沉淀较多。

平板划线培养31 ℃，24 h，可见直径 1.2~3 mm 菌落，正面圆形，边缘整齐，侧面低凸，表面湿润光滑，乳黄色，不透明，略有酸臭味。

最适生长温度25~37 ℃，最适pH 4~9.8。

丁酸梭菌细胞壁含DL-二氨基庚二酸，葡萄糖是唯一的细胞壁糖。

在琼脂平板上形成白色或奶油色的不规则圆形菌落，稍突，直径为1~3 mm。

丁酸梭菌不水解明胶，不消化血清蛋白，能够发酵葡萄糖、蔗糖、果糖和乳糖等糖类产酸，一个显著的特征是产生淀粉酶，水解淀粉但不水解纤维素。

水解淀粉和糖类的最终代谢产物为丁酸、乙酸和乳酸，还发现有少量的丙酸和甲酸，硝酸盐还原试验均为阴性。

丁酸梭菌——新微生物饲料添加剂丁酸梭菌是从健康人和动物肠道中分离出的一种厌氧的革兰氏阳性芽孢杆菌，因其能够产生芽孢的益生功能被广泛的研究。

丁酸梭菌作为新一代芽孢益生菌制剂，较非芽胞益生菌制剂具有耐热、耐酸和耐多种抗生素等生物学特性，能在动物肠道很好定植，对宿主产生各种健康作用。

如调节肠道微生态平衡、稳定胃肠道功能、产生益生物质、提高机体免疫及促进动物生长等，具有更好的应用发展前景。

丁酸梭君轻轻的告诉你丁酸梭菌（Clostridium butyricum），又名宫入菌、酪酸梭菌，细菌学分类属于梭菌属（Clostridium），是一种厌氧的革兰氏阳性芽孢杆菌，培养后期细菌的革兰氏染色呈阴性。

丁酸梭菌是人和动物肠道的正常菌群，也广泛的存在于土壤、奶酪和天然酸奶中。

菌体呈直杆状或稍有弯曲，单个或成对，灰白色，细菌直径为（0.5-1.7）×（2.4-7.6）μm，两端钝圆，周身鞭毛，具运动性；芽孢偏心或次端生（内生），呈圆形或椭圆形，无孢外壁和附属丝。

在琼脂平板上形成白色或奶油色的不规则圆形菌落，稍突，表面湿润光滑，不透明，略有酸臭味。

丁酸梭菌具有抵抗外界相对恶劣环境的理化性质。

经80℃、30 min 和90℃、10 min 热处理不会失活，最适生长温度为36℃，最高和最低起始生长温度为44℃和16℃；pH 1.0 时仍能存活，其最适起始生长pH 为7.2，最高和最低起始生长pH 为10.6 和4.6 ；最适起始氧化还原电位为-21 mV［3］。

在体内丁酸梭菌能耐受胃液、胆汁酸和消化液的作用，在室温下具良好的储存性与稳定性；丁酸梭菌只对新生霉素、万古霉素和四环素等少数抗生素敏感，对其他多种抗生素具有很强的耐药性，具有良好的应用前景。

感到很雀跃有木有！！！辣么，丁酸梭菌用啥子用了？1 调节肠道微生态平衡丁酸梭菌具有防止病原菌及腐败菌在肠道内的异常增殖和促进肠道有益菌群增殖、发育的双重作用，从而纠正肠道菌群紊乱，减少肠毒素的产生。

产抑菌蛋白的丁酸梭菌作为饲料益生菌制剂具有很大的应用潜力饲用抗生素在促进畜禽生长、不断提高饲料转化效率、减少粮食损耗、提高动物产品产量等五方面具有显著六项的效果。

有机肥随着抗生素在饲料中的长期广泛使用，它的弊端正日益凸现，如导致动物胃肠道菌群失调，产生细菌耐药性和动物产品药物等。

微生态制剂被认为是抗生素的潜在替代物之一，已被广泛关注。

丁酸梭菌是从弯果阳动物肠道分离出来的一种严格厌氧的革兰氏和性芽孢杆菌，具有产丁酸、产酶、微量元素等益生物质等特性。

近年来，对丁酸梭菌的研究主要集中在生物医学和生物化工方面，在家禽饲料工业上研究相对较少。

相比于非芽孢杆菌，丁酸梭菌具有较强的抗逆性，并能促进动物栽种、调节动物肠道微生态平衡、提高机体免疫力，在畜牧生产中所具有广阔的应用前景。

本研究旨在筛选出对动物常见致病菌具有广谱抑菌活性的产抑菌蛋白的丁酸梭菌菌株，对其进行鉴定，并生物学在体外研究其抗逆性和益生特性，为其在动物生产应用提供理论支撑。

1材料与设备1.1材料与试剂仔猪盲肠内容物10份，取自3个猪场；K88)、金黄色葡萄球菌ATCC25923(S.aureusATCC25923)；梭菌增值培养基(RCM培养基)、梭菌选择性培养基(TSN培养基)、LB培养基，国产分析纯；细菌生化微量反应管、药敏纸片；细菌DNA提取试剂盒；猪胆盐，胰蛋白酶、蛋白酶K、过氧化氢酶，人工胃液、人工肠液根据中国药典进行配制；蛋白酶测定试剂盒、淀粉酶测定试剂盒、脂肪酶测定试剂盒。

1.2实验方法1.2.1分离培养方法采用厌氧培养箱来进行的液体培养、分离和稀释平板计数。

取盲肠内容物10g加到90mLPBS中，放人80℃水浴10min以杀死非芽孢菌，放入RCM培养基，于37℃厌氧培养36h；将样品四组稀释到10-3、10-5、10-7，涂布于TSN培养基，37℃厌氧培养48h；采用影印平板法分离菌种，选取严格厌氧生长的菌株，进行镜检；根据丁酸梭菌的培养出来特性、菌落形态和显微形态等特征，挑选符合特性的菌株进行生理生化鉴定和16SrDNA序列分析。

丁酸梭菌的应用及对食品安全的影响谢丽静;王伟华;王海宽;张仁文;王伟【摘要】丁酸梭菌不仅能够调节畜禽肠道微生态平衡,提高免疫力,产生益生物质,而且能够促进有益菌群繁殖.作为一种新型的饲料添加剂,它具有绿色、无污染、无药物残留等优点,能够减少动物性食品的抗生素残留,对常见致病菌具有拮抗作用,可以作为抗生素的优选替代品.丁酸梭菌的应用对食品安全具有重要的意义,文章对丁酸梭菌的应用及其对食品安全的影响进行综述,为其进一步应用提供科学依据.%Clostridium butyricum not only can regulate the intestinal micro-ecological balance,improve immunity,produce beneficiad substances,but also can promote the growth of beneficial bacteria.As a new feed additive,it is green,non-polluting,no residue,which not only can reduce the antibiotic residues of animal food,but also can antagonize the conmon pathogens.It will be the preferred alternative to antibiotics,which have important impact on food safety.The application of Clostridium butyicum and its effect on food safety were reviewed to provid reference for its further development.【期刊名称】《中国食物与营养》【年(卷),期】2017(023)007【总页数】5页(P5-9)【关键词】丁酸梭菌;应用;食品安全;替代抗生素【作者】谢丽静;王伟华;王海宽;张仁文;王伟【作者单位】新疆塔里木大学生命科学学院,新疆阿拉尔843300;新疆塔里木大学生命科学学院,新疆阿拉尔843300;天津科技大学生物工程学院/工业发酵微生物教育部重点实验室,天津300457;湖北绿雪生物科技有限公司,湖北咸宁437000;天津科技大学经济与管理学院,天津300222【正文语种】中文目前，随着食品安全问题的日渐凸显，食品安全越来越受到人们的重视，而传统畜牧业、水产养殖中大量添加的抗生素、金属类添加剂等对人们饮用水及食品安全带来了巨大的威胁，因此抗生素及一些金属类饲料添加剂的应用受到了严重的限制，抗生素替代品逐渐受到人们的追捧，并开始在畜牧业、水产养殖方面倍大量的应用，其在提高生产性能、减低生产成本，以及食品安全方面的效果凸显出来。