土壤有效硼的测定(姜黄素比色法)

有效硼、硫、硅分析步骤简介一、有效硼——姜黄素比色法⑴称 2mm 土样10.00g 100ml 聚四氟乙烯烧杯 加20.00mL 称重 小火煮沸 冷却加2滴称重用H 2O 补足干过滤H 2O 5min MgSO 4 与煮沸前重量相同⑶同时做空白和标线。

二、有效硫——硫酸钡比浊法⑴称2mm 土样10.00g100mL 塑料瓶 加50.00mL20-25℃、180r/min 、振荡1h干过滤磷酸盐-乙酸浸提剂 ⑶同时做空白和标线。

三、有效硅——硅钼蓝比浊法⑴称2mm 土样5.00g 100mL 塑料瓶 加50.00mL25-30℃、180r/min 、振荡2h干过滤0.025mol/L 柠檬酸⑶同时做空白和标线。

⑵取 1.00mL 滤液30ml 聚四氟乙烯坩埚 加4.00mL 55±3℃蒸发至干呈玫瑰红时 冷却加20.00ml95% 立即在550nm 、1cm 比色皿-----比色测量姜黄素-草酸烘焙乙醇⑵取25.00mL 滤液100mL 三角瓶 加4滴 煮沸15min 左右 (剩滤液5-10mL) 加1mL冷却25mL 容量瓶 加2mL 定容 加1.0g搅拌1min5-30min 、440nm 、3cm比色皿-----比浊测量H 2O 2BaCl 2 ⑵取1.00-5.00mL 滤液 20mLH 2O 50ml 容量瓶 加5mL0.6mol/L 35℃保温15min 加5mL50g/L 摇匀放置5min 加5mL50g/L 草酸定容20min 后、700nm 、1cm 比色皿-----比浊测量稀释 H 2SO 4 钼酸铵 加5mL15g/L。

土壤中有效硫、硼的测定土壤中的有效硫和有效硼均以阴离子的形式存在，所以在测定过程中，为了提高分析效率，可采用Ca(H2PO4)2一次性浸提的方法。

一、浸提剂与浸提过程（一）浸提剂的配制称取20.2g Ca(H2PO4)2.H2O放入1000ml烧杯中，加约800ml水，加入10 ml 浓HCl使之溶解，再加入0.5g已溶的Superfloc 127(用聚丙烯酰胺代替)，然后再加入10 ml 0.0141 mol/lAgNO3，以防止微生物生长。

最后定容至10l，注：硝酸银是适量的，如有一些氯化银沉淀出来无碍。

0.0141 mol/lAgNO3: 0.2395g AgNO3溶于100ml水中。

（二）浸提过程用量土器量取5 g土样，置于样品杯中，用浸提剂加液器加入25 ml浸提剂，在震荡机上10min，过滤。

该滤液用于测定土壤有效硫和有效硼。

二、土壤有效硫的测定（一）方法原理溶液中硫含量的测定采用比浊法，其基本原理为：经提取进行溶液中的硫基本上以SO42-的形式存在，在酸性介质中，SO42-和Ba2+作用生成溶解度很小的BaSO4白色沉淀，当沉淀量较小时，形成的BaSO4白色沉淀以极细的颗粒悬浮在溶液中，当一定波长的光通过溶液时，沉淀颗粒会对光有一种阻碍作用，即会使通过的光量减少，沉淀颗粒越多，对光的阻碍作用越大，光的衰减量与沉淀颗粒的数量呈正比，通过检测光的衰减量，可间接计算出溶液中SO42-的含量。

由于BaSO4沉淀的颗粒大小与沉淀时的温度、酸度、BaCl2的局部浓度、静止时间长短等条件有关，所以测试样品的条件应尽可能一致，以减小误差。

（二）试剂配制1．混合酸溶液在500 ml水中加入130 ml浓HNO3，400 ml冰醋酸，10g已溶解的聚乙烯吡咯烷酮(PVP-K30)，最后加 6 ml1000mg/lSO42--S（如工作曲线或土壤样品中S的含量低，浓度低时标准曲线不成直线，故加入等量S溶液，使S浓度提高），定容至2 l。

土壤有效硼的测定A 、甲亚胺－H 比色法1 方法提要土壤中有效硼采用沸水提取，提取液用EDTA 消除铁、铝离子的干扰，用高锰酸钾消褪有机质的颜色后，以甲亚胺－H 比色法测定提取液中的硼量。

2 适用范围本方法适用于各类土壤中有效硼含量的测定。

3 主要仪器设备3.1 分光光度计；3.2 石英三角烧瓶，250mL ；3.3 石英回流冷凝装置。

4 试剂4.1高锰酸钾溶液[c (51KMnO 4)=0.2mol ·L -1]：称取31.62g 高锰酸钾溶于水中，稀释至1L ； 4.2 硫酸溶液[c (21H 2SO 4)=3mol ·L -1]：量取168mL 浓硫酸缓缓加入到盛有约800mL 水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后，稀释至1L ；4.3 酸性高锰酸钾溶液：0.2mol ·L -1高锰酸钾溶液与3 mol ·L -1硫酸等体积混合，当天现配；4.4 抗坏血酸溶液（100g ·L -1）：称取10g 抗坏血酸溶于水中，稀释至100mL ，当天现配；4.5 甲亚胺溶液：称取0.90g 甲亚胺和2.00g 抗坏血酸溶解于微热的60mL 水中，稀释至100mL ，必要时过滤，用时现配；4.6 pH5.6～5.8缓冲液：称取250g 乙酸铵和10.0gEDTA 二钠盐溶于250mL 水中，冷却后用水稀释至500mL ，再加入80mL 1：4硫酸溶液，摇匀（用酸度计检查pH 值）；4.7 混合显色剂：量取份3份体积上述甲亚胺溶液和2份体积pH5.6～5.8缓冲液混合；4.8 硼标准贮备溶液[ρ（B ）＝100μg ·mL -1]：称取预先在浓硫酸干燥器内至少干燥24h 的硼酸（H 3BO 3，优级纯）0.5719g 于400mL 烧杯中，加200mL 无硼水溶解，移入1L 容量瓶中定容，贮于塑料瓶中。

4.9 硼标准系列溶液：吸取50.00mL 硼标准贮备溶液于500mL 容量瓶中，用无硼水定容，即为10μg ·mL -1硼标准溶液，贮于塑料瓶中。

第一章样品的采集和制备模拟试题一、填空题1、一个代表性土壤样品的可靠性与（）、（）、（）等有关。

2、土壤样品采集的原则（）、（）。

3、植物组织样品取样时间通常以上午8—10时为宜，因为这时植物的（）已趋活跃，地下部根系（）与地上部正趋于上升的（）接近动态平衡。

此时植物组织中的养料贮量最能反映（）与（）的相对关系，因此最具有营养诊断的意义。

4、新鲜植物样品的干燥过程通常分两步完成，第一步是先将样品在（）℃下高温干燥（）分钟，目的是（），第二步是在（）℃下干燥，目的是（）。

5、混合样品采集的原则（）。

二、简答题1、采集植物组织样品应该考虑哪些问题？新鲜样品为什么要立即进行干燥？2、植物组织样品采来之后进行洗涤时应注意什么？3、混合样品采集的原则两点要求是什么？4、干燥样品应怎样保存？第二章土壤有机质测定模拟试题一、填空题1、用重铬酸钾容量法（外加热法）测定土壤有机质时所选用的指示剂是（），用标准硫酸亚铁溶液滴定剩余的重铬酸钾时，由（）色经（）色到（）色为滴定终点。

2、土壤有机质的测定方法有（）、（）、（）（）。

1、简述外加热重铬酸钾容量法测定土壤有机质的工作原理和注意事项？2、重铬酸钾容量法——稀释热法的测定原理是什么？3、重铬酸钾容量法的加热方式有哪些？第三章土壤氮、磷、钾测定模拟试题一、填空题1、土壤中氮素的存在形态有（）、（）。

2、测定土壤全氮量的方法主要可分为（）和（）两类。

3、土壤全P的测定分为（）和（）两步。

4、土壤全钾测定样品的分解方法有（）、（）、（）。

5、土壤速效钾测定常用的浸提剂是（）。

二、简答题1、土壤全氮测定――半微量开氏法中，样品消煮的测定条件有哪些？2、钼兰比色法的测定条件什么？3、火焰光度计的构造有哪些？第四章土壤阳离子交换性能分析模拟试题一、填空题1、影响土壤pH测定的因子（）、（）、（）2、影响阳离子交换量大小的因素）、（）、（）。

4、pH是（）的负对数1、土壤阳离子交换的方法？2、土壤阳离子交换时怎样选择交换剂？3、影响阳离子交换量（CEC）大小的因素有哪些？第五章土壤水溶性盐的测定模拟试题一、填空题1、土壤总盐量的测定有哪两种方法（）、（）。

科学研究和生产实践证明微量元素为有机体正常生命活动所必需，在有机体的生活中起着重要作用。

土壤和植物中的微量元素都很低，而且这些微量元素在植物体中的缺乏量、适量及致毒量范围很窄，因此微量元素的分析测定工作较常量元素要求加倍严格。

1 土壤有效硼的测定(姜黄素比色法)方式原理土样经滚水浸提5分钟，浸出液中的硼用姜黄素比色法测定。

姜黄素是由姜中提取的黄色色素，以酮型和稀醇型存在，姜黄素不溶于水，但能溶于甲醇、酒精、丙酮和冰醋酸中而呈黄色，在酸性介质中与B结合成玫瑰红色的络合物，即玫瑰花青苷。

它是两个姜黄素分子和一个B原子络合而成，检出B的灵敏度是所有比色测定硼的试剂中最高的(摩尔吸收系数ε550=1.80×105)最大吸收峰在550nm处。

在比色测定B时应严格控制显色条件，以保证玫瑰花青苷的形成。

玫瑰花青苷溶液在0.0014—0.06mg/LB的浓度范围内符合Beer定律。

溶于酒精后，在室温下1—2小时内稳定。

主要仪器石英(或其他无硼玻璃)；三角瓶(250或300ml)和容量瓶(100ml,1000ml)；回流装置；离心机；瓷蒸发皿(Φ7.5cm)；恒温水浴；分光光度计；电子天平(1/100)。

试剂(1)95%酒精(二级)；(2)无水酒精(二级)；(3)姜黄素—草酸溶液：称取0.04g姜黄素和5g草酸，溶于无水酒精(二级)中，加入4.2ml6mol/LHCl,移入100ml石英容量瓶中，用酒精定容。

贮存在阴凉的地方。

姜黄素容易分解，最好当天配制。

如放在冰箱中，有效期可延长至3—4天。

(4)B标准系列溶液：称取0.5716gH3BO3(一级)溶于水，在石英容量瓶中定容成1升。

此为100mg/LB标准溶液，再稀释10倍成为10mg/LB标准贮备溶液。

吸取10mg/LB溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,用水定容至50ml,成为0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mg/LB的标准系列溶液，贮存在塑料试剂瓶中。

微量元素的测定(沸水浸提一姜黄色法)1、选择的依据土壤中的硼可区分成水溶性硼、酸溶性硼和难溶性硼。

全硼含量一般不宜用来判断土壤对植物供硼的能力。

土壤有效性般用水溶性硼表示，水溶性硼指沸水能溶解的硼，是对植物有效的。

土壤有效硼硼用沸水浸出后，常用比色法测定。

比色测定硼的显色剂很多，以姜黄素应用得最为广泛。

姜黄素与硼的显色在水溶液蒸干过程中进行；而四羟基蒽醌、胭脂红酸、1,1′-二蒽醌亚胺等试剂则只能在浓HSO4中显色，试剂溶液的配制、贮存和比色操作都十分不便，对玻璃器皿也有较高的要求。

姜黄素法避免了这些缺点，灵敏度也较高，适用于土壤和植物中硼的测定。

2、主要仪器三角瓶（250ml）、容量瓶(100ml)，离心机、瓷蒸发皿、水浴锅、分光光度计。

3、试剂（1）95%酒精（2）无水乙醇（3）姜黄素-草酸溶液：0.04g姜黄素和5g草酸溶于无水酒精，加入4.2ml 6NHCL,移入100ml容量瓶。

在冰箱可存3-4天。

（4）硼标准系列溶液：0.5716g硼酸溶于水，在容量瓶中定容至1L.次为100ppm硼标准溶液。

再稀释10倍成10ppm B标准贮备溶液。

分别吸取B溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml,用水定容50ml,成为0.2、0.4、0.6、0.8和1.0ppm B的标准系列溶液，贮存在塑料试剂瓶中。

（5）1NCaCl2溶液7.4g CaCl.2H2O溶于100ml水中。

4、操作步骤(1)待测液制备称取风干士壤(通过1mm尼龙筛)10.00g到250ml 或300ml的石英三角瓶中，加20.01无硼水。

放在电热板上小火煮沸5分钟（加漏斗），立即停火，稍冷却后取下三角瓶，冷却后倒入离心管，加2滴1N CaCl2溶液以加速澄清，离心分离出清夜。

(2)测定吸取1.00清液(含硼不超过1ug)，放在瓷蒸发皿中，加入4ml姜黄素溶液。

在55±3℃水浴上蒸发至干，并且继续在水浴上烘干15分钟出去残存的水分。