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1.目的描述 Waters 高效液相色谱仪标准操作规程。
2.适用范围化验室3.责任者化验员应严格遵照该操作规程 , QC 主管负责监督本规程的实施。
4.定义HPLC High Performance Liquid Chromatography , 高效液相色谱仪。
5.安全注意事项5.1有机溶媒有害健康，各溶剂瓶口应封严。
5.2注意检查废液桶中废液应避光，防止废液桶满外溢。
6.规程6.1.Waters HPLC的组成：贮液器输液泵自动进样器分离柱 (柱温箱 )紫外检测器控制及数据处理系统 (Millennium 32化学工作站 )。
6.2. HPLC系统的打开及关闭顺序6.2.1打开顺序•对于分体式：请按泵、进样器、柱温箱、检测器的顺序打开开关，待各部分分别显示初始化完毕后，最后打开M i l l e nn i um32化学工作站。
泵与色谱工作站的连接：对于 510 泵，因为此泵与色谱工作站是单向联系，如要使泵在 Remote 状态下由工作站控制，首先要在泵的键盘上按 Menu 键，待显示屏切换至 Mode 状态下，其状态是Loca ，按 Edit/Enter 键，在 Local 的L 前有闪动的光标显示，按键，Local 转换成Rem，再按Edit/Enter 键，此命令已输入进去, 最后按Stop/Run 键，使泵处于Run 状态这时泵和工作站的连接即告成功。
泵的任何动作都可由工作站来控制。
还应注意这一步工作在每次开机时都要进行。
对于 Alliance 2690 系统：先打开 Alliance 2690 主机、检测器电源开关，待初始化完毕后，再进入 Millennium 32化学工作站。
对于流动相的要求：对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂；对于所用到的固体试剂应采用分析纯试剂；对于水，应采用经纯水机处理过的超纯水；流动相在使用前一定要经 0.45m 的滤膜（滤膜分为水相膜与有机相膜，确保使用正确的滤膜，参见附表 ) 过滤、超声真空脱气方可使用，严禁含盐的流动相未经过滤直接使用。
Waters HPLC2695液相色谱仪操作规程1目的规范Waters HPLC2695液相色谱仪操作程序，正确使用仪器，保证检验工作顺利进行。
2 适用范围适用于Waters HPLC2695液相色谱仪的使用操作。
3 职责3.1 操作人员按照本规程操作仪器，并做使用登记；3.2 保管人员对仪器进行定期维护，保养；3.3 科室负责人负责仪器的全面管理工作。
4 技术参数4.1 温度范围：0-65℃；4.2 流动相数量：1-4；4.3 流量范围：0.000和0.010-10.000mL/min；4.4 最大运行压力：34.5Mpa；4.5 梯度范围：0-100%；增量：0.1%；4.6 样品盘：5*24个，进样量：“0.1-100μL；进样精度：<0.5%；4.7 进样次数：1-99次/瓶；4.8 灵敏度范围：0.0001-4.0000AUFS；5操作程序5.1将泵清洗管路和洗针管路分别放入溶剂（水、甲醇、乙腈、盐溶液）5.2打开路由器，计算机电源，待系统完全开启完毕后，打开2695主机和检测器电源。
5.3接通2695分离单元后，仪器开始自检，待屏幕上方标题区出现“Idle”时，仪器进入待命状态。
5.4按“Menu/Status”键，显示菜单画面，按“Diag”键，选择Prime SealWash 清洗柱塞杆约1min，再选择“Prime SealWash”，清洗针头1-2次。
5.5灌柱：按“Menu/Status”键，显示菜单画面，再按“Direct Function”键，选择“Wet Prime”(湿灌柱）键来灌注，排除实验所需流路中气体。
5.6打开计算机“Empower”软件，点配置系统运行项目的编辑。
5.7在运行样品界面进行样品方法的编辑，包括流量、流速、柱温等参数，若需要2998PDA检测器，还应在2D通道中填写所需要的波长，规定四个（A,B,C,D)流动相管路分别通入水、甲醇、乙腈、盐溶液。
WATERS 2695-2487 HPLC 仪器操作简明流程WATERS 2695-2487 HPLC 仪器操作简明流程1、2487检测器开、关机及使用：打开电源仪器自检1-2min 预热5min 稳定约30min 设定通道、波长模式、波长（也可在工作站上设置）回零（Auto Zero）分析检测实验完毕关掉电源开关即退出。
2、2695分离单元使用操作：1) 开机自检打开电源开关，仪器开始自检（4-5min），待屏幕上方出现“Idle”字样表示自检成功。
2) 脱气（Degas）按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status（1）”界面，移动光标至“Degasser Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。
3) 设定柱温（可选项）在“Status（1）”界面，移动光标至“Col Htr Set”，输入目标温按Enter即可。
（可在工作站方法中设置）4) Prime Seal Wash（清洗柱塞杆）按“Menu/Status”键回到“Menu”界面，按下排功能键“Diag”，然后再按下排功能键“Prime Seal Wsh”，“Start”，冲洗1~2min后，“HALT”，“CLOSE”。
5) Wet Prime在“Status（1）”界面中“Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%”，按液晶屏幕右下角“Direct Function”键，移动光标选择“2 Wet Prime”，“OK”，流速及时间可使用默认值，也可自行设定（如：5ml/min，3min），“OK”即可。
将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。
6) Purge Injector（注射器排气泡及清洗）进入“Direct Function”界面后，选择“3 Purge Injector”，“OK”，默认数值为6，“OK”。
7) Prime Needle Wash（清洗注射针）进入“Diagnostics”界面，按下排功能键之“Prime Ndl Wsh”，“Start”，默认30秒钟，“Close”，即可返回“Diagnostics”界面。
Water 2695 高效液相色谱仪操作规程1目的用于规范检验人员正确操作使用Waters 2695 高效液相色谱仪。
2 适用范围适用于使用Waters 2695高效液相色谱仪检测分析的操作管理。
3 职责使用Waters 2695高效液相色谱仪进行检验的检验员应对本规程负责，相关项目经理负责监督该操作规程的正确执行。
4仪器组成及原理4.1仪器组成本仪器由Waters 2695 高效液相色谱仪、检测器(2996型二极管阵列检测器、2487紫外检测器、2489紫外检测器、474型荧光检测器)、Empower色谱作站组成。
2695 分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机，可容纳120 个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘，液晶显示器，键盘用户界面等组成。
4.2高效液相色谱法是将具一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶液，经色谱柱进行分离，检测器检测分离后的不同组分，数据处理装置记录色谱图或进行数据处理。
5.仪器的操作5.1仪器的准备5.1.1 检查流动相（使用前应首先脱气）、在线清洗溶液（10%甲醇-水溶液seal wash）、进样针清洗溶液（90%甲醇-水溶液injector wash）是否足够。
5.1.2 检查色谱柱的使用是否正确（方向是泵出来进检测器的方向，正常的话是色谱柱上所标示的箭头向上；一般情况下不能将色谱柱反过来用，除非柱子确实无法使用可考虑反方向使用）、连接是否有误，有无漏液，废液瓶的容量是否足够。
5.2开机、自检与仪器预备5.2.1依次开启不间断稳压电源、开启2695 分离单元电源和计算机电源；仪器开始自检（约5～6min），待仪器操作面板上出现“Idle”字样表示自检成功，仪器进入待命状态。
5.2.2按动仪器面板右下方“Menu/Status”键进入操作状态，按动“Direct Function” 功能键，若仪器是首次使用或溶剂的管路充满空气时，先选择Dry Prime，按动OK，对管路进行排空；此时开启仪器下方purge阀，用专用注射器手工抽出管路内部的空气。
watersarc高效液相色谱仪说明书摘要：1.引言2.watersarc 高效液相色谱仪概述3.色谱仪的部件和特性4.色谱仪的操作流程5.色谱仪的维护和保养6.结论正文：【引言】高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种分离和分析样品的方法，被广泛应用于化学、生物、环境等领域。
watersarc 高效液相色谱仪是Waters 公司推出的一款高性能液相色谱仪，具有卓越的性能和可靠性。
【watersarc 高效液相色谱仪概述】watersarc 高效液相色谱仪采用先进的设计理念和技术，具有高灵敏度、高分辨率、高效率等特点。
该仪器主要由输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成，可以满足各种分析需求。
【色谱仪的部件和特性】1.输液系统：输液系统包括高压泵、进样器和流动相。
高压泵提供稳定的流速，进样器可以精确控制样品的进样量，流动相则帮助样品在色谱柱中进行分离。
2.分离系统：分离系统是色谱仪的核心部分，主要包括色谱柱和填料。
色谱柱根据样品的特性选择合适的填料，以实现样品的有效分离。
3.检测系统：检测系统用于检测经过色谱柱分离后的样品。
常用的检测器有紫外检测器、荧光检测器和质谱检测器等，根据样品的特性选择合适的检测器。
4.数据处理系统：数据处理系统负责收集、处理和分析检测到的数据，可以提供实时的数据和结果。
【色谱仪的操作流程】1.准备样品：将待分析的样品进行处理，使其符合进样要求。
2.安装色谱柱：根据样品的特性选择合适的色谱柱，并正确安装在色谱仪上。
3.配置流动相：根据色谱柱的特性和样品的性质，选择合适的流动相，并进行配置。
4.启动高压泵：启动高压泵，使流动相在色谱仪中循环。
5.进样：将样品加入进样器，通过进样器将样品送入色谱柱。
6.检测：开启检测器，检测经过色谱柱分离后的样品。
7.数据处理：使用数据处理系统对检测到的数据进行处理和分析。
转载：《分析测试百科网》Waters 600型高效液相色谱仪操作规程一．开机前准备1．根据需要选择合适色谱柱。
2．在容器中放入已过滤脱气好的流动相，把吸滤过滤头放入容器中。
二．开机1．打开所需仪器的电源开关，打开氦气阀门。
2．等各仪器自检通过后，开微机进入Windows NT，双击millog.exe，进入millennium 32工作站。
三．编辑仪器方法1．选择所需Project，run sample上击右键，选择所需仪器，联机。
2．点击instrument method 的edit，设置好各仪器参数。
3．保存所编缉的方法。
四．样品分析与采集1．点击set up，建立方法。
2．等待色谱柱、系统平衡，基线稳定后，设置好样品信息，点击Start，即开始样分析与数据采集。
五．报告输出1．在millennium 32界面点击Brown Project。
2．选择所需Project，选择所要处理的数据文件。
3．选择所要选用的报告格式，输出报告。
六．关机1．冲洗色谱柱，排出流路中可能有的缓冲液，并用双蒸水冲洗泵的柱塞杆。
2．泵停止，关闭氦气阀门。
3．退出工作站，关闭仪器电源。
4. 在记录本上记录使用情况。
注意事项：1. 所有的溶剂均选用HPLC级试剂。
2. 水相流动相需经常更换，防止长菌变质；如果流动相有缓冲盐，必须用5%甲醇或5%乙腈过渡冲洗。
3. 样品均用0.45um的滤膜过滤后才可进样。
4. 色谱柱用合适的溶剂保存，若为C18柱推荐用甲醇保存。
一、问：用HPLC液相色谱仪进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决?答：关于漂移问题：1、温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡关于快速变化问题1、流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。
WATERS 制备 HPLC仪器操作规程1. 操作功能画面说明:1.1 Set up --- 设定Pump 硬件系统配置.1.2 Direct --- 等度(Isocratic)操作设定.FLOW RATE : 流动相流速设定(范围随着硬件规格而定). COMPOSITION : 流动相调配比例(A+B+C+D=100%). CURRENT : 目前状态比例.New : 变更状态比例.SPARGE : 氦气法脱气装置流量(0-100). TEMPERATURE : 设定色谱柱加热装置温度(室温-90℃). PRESSURE : 显示系统压力值.SWITCH : 外接装置之控制开关.STOP Flow : 停止Pump 流速.1.3 Operate Method --- 执行梯度(GRADIENT)功能操作.1.4 Program Method --- 编辑梯度表(Gradient Table).1.5 Program Table --- 编辑事件表(Event Table).2. 基本操作说明 (ISOCRATIC):2.1 打开氦气钢瓶，设定输出压力为50-90psi(使用In-line 脱气机者，请忽略此步骤).2.2 将溶剂输送塑料管置入溶剂瓶内液面下(请注意输送塑料管之代号)，打开电源开关至ON(1)的位置，出现如下之开机画面:2.3 按一下“Set Up”功能键，即进入Pump Setup 画面.2.4 移动光标设定欲使用溶剂瓶A,B,C 或D 的氦气法脱气装置开关，使其为“ENABLE”.(按“1”,Enter ENABLE 打开 ; 按“0”,Enter DISABLE 关闭)2.5 如果有使用色谱柱加热装置，设定上限温度数值(应低于溶剂沸点).2.6 设定系统压力上限数值为4000psi.2.7 按一下”Direct”功能键，即进入ISOCRATIC 画面.2.8 设定氦气法脱气装置(SPARGE)流量为100，此时可见到溶剂瓶内有气体吹出之状态，维持约30 分钟后，可降低至” 30 ”以节省氦气.2.9 将Pump 中间之参比阀(Reference Valve)扳手往右扳开，设定Pump 流速1.0mL/min ，Enter，启动Pump 流速.2.10 选择欲使用之某一个溶剂，并设定其Current 比例为100%，然后将10mL 注射针筒转进溶剂抽取阀门(Inlet Manifold Valve)上方之洞口,再将阀门向左旋转至“DRAW”之位置，抽出溶剂约10mL 两次，并检视溶剂输送塑料管内确实已完全无气泡存在，抽取完毕后将阀门回转至“RUN”之位置,再将注射针筒转开拔出。
