40％叶菌唑·戊唑醇水乳剂的高效液相色谱分析方法研究

戊菌唑原药的高效液相色谱分析
张艳林;黄金明
【期刊名称】《贵州农业科学》
【年(卷),期】2009(037)008
【摘要】为寻求操作简便、快速地测定戊菌唑中有效成分含量,建立了高效液相色谱法测定戊菌唑含量的定量分析方法.采用SB-C18 HPLC色谱柱,以甲醇/水(80∶20)为流动相,检测测波选择230nm.结果表明:方法的标准偏差为0.24,变异系数为1.36%,相关系数r=0.9998,平均回收率为99.7%.本方法检验实际样品中戊菌唑的含量,结果重现性好.
【总页数】2页(P127-128)
【作者】张艳林;黄金明
【作者单位】广东警官学院,广东,广州,510440;广东警官学院,广东,广州,510440【正文语种】中文
【中图分类】S482.2+99
【相关文献】
1.氟唑菌酰胺原药的高效液相色谱分析方法 [J], 万宇;张晓波;王军;蒋闳
2.氟唑环菌胺原药高效液相色谱分析方法研究 [J], 董文凯;韩金涛;王胜翔;柴洪伟;解银萍;张强;李旭坤
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4.氟唑菌苯胺原药高效液相色谱分析方法研究 [J], 董文凯;吴进龙;姜宜飞;黄伟;武
鹏
5.叶菌唑原药高效液相色谱分析方法研究 [J], 陈根良;夏俊;刘春杰;叶珊;秦龙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法检测饲料中三唑类杀菌剂残留赵春娟;高文惠【摘要】本实验建立了同时分离检测饲料样品中腈菌唑、戊唑醇、联苯三唑醇、烯唑醇4种三唑类杀菌剂残留的高效液相色谱法.使用C18色谱柱,以甲醇-水(85∶15,V/V)溶液为流动相,紫外检测波长为210 nm,外标法定量.结果表明,该方法在9 min内实现了4种三唑类杀菌剂的基线分离,4种杀菌剂的平均回收率为83.4％～ 101.2％,相对标准偏差(RSDs)＜ 3.00％(n=5).【期刊名称】《中国饲料》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】3页(P24-25,34)【关键词】饲料;三唑类杀菌剂;残留;高效液相色谱法【作者】赵春娟;高文惠【作者单位】河北科技大学生物科学与工程学院,河北石家庄050018;河北省发酵工程技术研究中心,河北石家庄,050018;河北科技大学生物科学与工程学院,河北石家庄050018;河北省发酵工程技术研究中心,河北石家庄,050018【正文语种】中文【中图分类】S816.17三唑杀菌剂是一种杀真菌剂，是指含有1，2，4-三唑环的化合物，因具有抗菌作用及调节植物生长作用，被广泛应用于水果、蔬菜、谷粮等病虫害的防治。

随着三唑类农药的广泛应用，其在食品、饲料和环境中的残留问题也逐渐引起人们的重视。

目前，三唑类杀菌剂残留的检测一般采用色谱法，如液相色谱法（张敏等，2012）、液质联用检测技术（Li等，2012）、气质联用检测技术（Silva等，2013），但同时检测饲料中4种或4种以上三唑类杀菌剂残留的研究还鲜见报道。

本实验采用高效液相色谱法同时分离检测饲料样品中腈菌唑、戊唑醇、联苯三唑醇、烯唑醇4种三唑类杀菌剂残留，以期实现快速、高效的分离分析效果。

1 材料与方法1.1 仪器与试剂 LC-20A高效液相色谱仪（日本岛津公司）、KH5200型超声波清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司）、LD5-2A低速离心机（北京雷勃尔离心机有限公司）、FA2204分析天平（上海菁海仪器有限公司）。

苹果斑点落叶病又称早期落叶病,是苹果上的重要病害之一,病原属于半知菌亚门、链格孢属的链格孢苹果专化型(Alernaria alternata f .sp.mali )[1],全国各地的苹果产区普遍发生。

防治的药剂[2-3]种类较多,效果参差不齐,对40%嘧菌酯·戊唑醇悬浮剂进行室内毒力测定,防治效果显著,为了验证室内防效,选用了40%嘧菌酯·戊唑醇悬浮剂3000倍、4000倍、5000倍液以及多抗霉素1500倍液作对照药剂进行田间药效试验[4-6],以期为生产上应用提供科学依据。

1材料与方法1.1试验概况试验田设在中国农业大学烟台研究院苹果园内。

供试品种为红富士,十三年生。

行株距3.6m×2.8m ,果园管理良好。

供试药剂40%嘧菌酯·戊唑醇悬浮剂(青岛泰生生物科技有限公司);10%多抗霉素可湿性粉剂(生产企业:日本科研制药株式会社,分装企业:中农住商天津农用化学品有限公司)。

1.2试验设计根据室内试验结果,选用40%嘧菌酯·戊唑醇悬浮剂3000倍、4000倍、5000倍液在田间红富士苹果上进行药效试验,设10%多抗霉素可湿性粉剂1500倍液为对照药剂,喷洒等量清水为空白对照(CK ),共5个处理,4次重复,共20个小区,每小区2株树,随机区组排列。

1.3试验方法按试验设计的药剂浓度配量好药液,用手动背负式喷雾器喷洒植株,均匀施药。

分别于2014年6月12日、6月22日、7月4日、7月17日连续4次用药,每株用药液3.0kg 左右。

1.4调查内容与方法施药前进行基数调查,4次用药2周后进行药效调查。

每小区2株树均调查,每株树分东、西、南、北、中5个方位,每个方位分上、中、下固定3个枝条,每个枝条固定10个叶片,记载每株每个叶片的发病程度,并按照病害分级标准计算病情指数,作为施药前的调查基数,连续用药4次2周后,田间进行药效调查,计算防效,并用邓肯氏新复极差(DMRT )法对试验数据进行方差分析,比较药效[7]。

40%戊唑多菌灵SC的高效液相色谱分析方法张保华【摘要】采用高效液相色谱法测定40%戊唑·多菌灵SC，使用C18色谱柱，以V(乙腈)∶V(水)＝80∶20为流动相，在柱温45℃、波长277 nm、流速1.0mL/min的色谱条件下进行分析。

戊唑醇和多菌灵的标准偏差分别为0.084和0.075，相对标准偏差分别为0.28%和0.73%，线性相关系数分别为0.9993和0.9995，平均回收率分别为99.36%和99.96%，方法达到了分析的要求。

%An analysis method of tebuconazole+carbendazim 40%SC was developed by HPLC with C18 column at 45℃ and UV detector at 277 nm. The mobile phase was acetonitrile+water (volume ratio of 80︰20), and the flow rate was 1.0 mL/min. The results showed that the standard deviations of tebuconazole and carbendazim were 0.084 and 0.075, the relative standard deviations were 0.28% and 0.73%, the linear correlation coefficients were 0.999 3 and 0.999 5, the average recoveries were 99.36%and 99.96%, respectively. The method met the requirements of analysis.【期刊名称】《现代农药》【年(卷),期】2014(000)004【总页数】3页(P19-21)【关键词】戊唑醇;多菌灵;高效液相色谱;分析【作者】张保华【作者单位】青岛农业大学化学与药学院，山东青岛 266109【正文语种】中文【中图分类】TQ450.7戊唑醇 [(RS)-1-对氯苯基-4,4-二甲基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基甲基)戊-3-醇，tebuconazole]为三唑类杀菌剂，高效、广谱，具有内吸活性，对白粉菌属、柄锈菌属、核腔菌属和壳针孢菌属引起的白粉病、黑穗病、纹枯病、全蚀病、云纹病、锈病、菌核病、叶斑病、斑点落叶病、灰霉病等病害都有很好的效果[1]。

戊唑醇水溶液的光谱特征研究王乐新;陈丹萍;高天祎【摘要】利用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、同步及三维荧光光谱等技术研究了戊唑醇水溶液的光谱特性。

结果表明，戊唑醇在紫外可见区域有三处特征吸收峰，峰值分别为221，326，566 nm，并在三个峰值处拟合出了戊唑醇的浓度值与吸光度之间的关系图，得出在特征波长326 nm处两者的线性关系最佳；在不同激发波长下，戊唑醇共有两个荧光区域，在345~380 nm范围内，最大荧光峰值为366 nm，激发波长为225 nm，在580~640 nm范围内，最大荧光峰值为604 nm，激发波长为470 nm；同步荧光光谱的形状、带宽和峰值强度与波长差的选择有关，随着波长差的增加，戊唑醇的荧光强度明显下降且出现红移，在波长差为40 nm时，荧光峰由一处变为两处。

%Use UV-visible absorption spectrum,fluorescence spectra,synchronization and three dimensional fluorescence spectra technique to study the spectral characteristics of tebuconazole aqueous solution.The results show that,in the UV visible region of tebuconazole has three characteristic absorption peaks,peak values are 221, 326,566 nm.The relationship between the concentration and absorbance of tebuconazole in the three peaks was fitted,the linear relationship is the best in the characteristic wavelength 326 nm.Under different excitation wavelength,the tebuconazole has two fluorescent region.In the range of 345~380 nm,the fluorescence peak value of the maximum is 366 nm and the excitation wavelength is 225 nm.In the range of 580~640 nm,the fluorescence peak value of the maximum is 604 nm and the excitation wavelength is 470 nm.The shape,bandwidth and peakintensity of synchronous fluorescence spectra are related to the selection of wavelength difference.With the increase of the wavelength difference,the fluorescence intensity of tebuconazole decreased obviously and red shift.When the wavelength difference of 40 nm,the fluorescence peaks are changed to two.【期刊名称】《高师理科学刊》【年(卷),期】2015(000)011【总页数】5页(P40-43,46)【关键词】戊唑醇;吸收光谱;三维荧光光谱;同步荧光光谱【作者】王乐新;陈丹萍;高天祎【作者单位】黑龙江八一农垦大学理学院，黑龙江大庆 163319;黑龙江八一农垦大学信息技术学院，黑龙江大庆 163319;黑龙江八一农垦大学信息技术学院，黑龙江大庆 163319【正文语种】中文【中图分类】O433同步荧光光谱、三维荧光光谱是两种新的荧光分析技术[1]，同步荧光光谱技术与常用的荧光光谱技术的区别是它同时扫描激发和发射两个单色器波长，具有简化谱图，提高选择性及灵敏度高等优点，最重要的是它还可以减少光散射干扰．常用于多组分物质的测定或者一种组分在常规测试条件下受到较大干扰时的测定，大大改善了荧光光谱分析方法的不足．三维荧光光谱技术有效地解决了传统荧光发射（或激发）光谱不能完整地描述物质荧光特征的问题．三维荧光光谱是荧光强度与激发波长和发射波长变化的关系，是用曲面来表征的，它能够完整地描述物质的荧光特征，提高对有效信息的确认和提取[2]，在光谱指纹技术、光化学反应监测器、多组分混合物的定性和定量分析以及在生物医学等方面应用比较多．如今，它在医学、生物科学及食品农药残留等领域应用比较广泛[3-4]．戊唑醇化学名：（RS）-1-（4-氯苯基）-4，4-二甲基-3-（1H-1，2，4三唑-1-基甲基）戊-3-醇；分子式：C16H22CIN3O；分子量：307.8；结构式见图1．该品为无色晶体，熔点：102.4 ℃，蒸气压：0.013 3 MPa（20 ℃），溶解度（20 ℃）：水32 mg/L，甲苯50～100 g/L．其为低毒、高效、广谱和内吸性三唑类杀菌农药，能有效防治多种锈病、网斑病、根腐病、黑穗病及种传轮斑病等禾谷类作物及早稻纹枯病等[5]．它可以在植物组织内部转移，杀死植物表面和内部的病菌，不仅具有杀菌活性，还可以促进作物生长，是一种值得大力推广的杀菌剂[6]．目前，戊唑醇是三唑类杀菌剂中销售量最高的一种产品，已有多家原药生产厂，原药最高含量达到98%以上，市场前景十分广阔．本文采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱及三维荧光光谱等多种光谱分析方法对戊唑醇进行研究，从而分析不同光谱技术所得到戊唑醇的光谱特性．1.1 仪器与试剂UV-VIS DB-20R紫外-可见分光光度计（澳大利亚GBC科学仪器公司），扫描速度400 nm/min，采样间隔0.5 nm，狭缝宽1 nm；RF-5301PC荧光光度计（日本岛津公司），采样间隔1.0 nm，激发和发射缝宽5 nm，进行快速扫描．6%戊唑醇悬浮种衣剂（北农（海利）涿州种衣剂有限公司）；实验室自制蒸馏水．1.2 实验方法（1）将蒸馏水与戊唑醇农药配制成质量浓度为 0.003%的戊唑醇标准水溶液，密封放置，静止一段时间以备用．（2）取戊唑醇标准水溶液的上层清液进行稀释，分别得到质量浓度为0.000 12%，0.000 17%，0.000 22%，0.000 27%，0.00032%，0.000 37%，0.000 41%和0.000 46%戊唑醇水溶液．（3）利用UV-VIS DB-20R紫外-可见分光光度计，测定200～700 nm波长范围内的戊唑醇水溶液．（4）在220～310nm和320～470 nm波长激发下采用RF-5301PC荧光光度计检测戊唑醇的荧光光谱；利用Matlab软件对每次改变激发波长时所对应戊唑醇荧光发射光谱的数据绘制戊唑醇的三维荧光光谱．（5）在不同波长差下（10，20，30，40，50，60 nm），采用RF-5301PC荧光光度计检测戊唑醇的同步荧光光谱．2.1 戊唑醇的紫外-可见吸收光谱戊唑醇的吸收光谱见图2．由图2可见，在200～700nm范围内可以观察到戊唑醇有三处特征峰和三处峰肩，特征峰值分别为221，326，566 nm，峰肩分别在260～300，390～450，515～535 nm波长范围内．根据图1的分子结构分析得出，戊唑醇的分子里具有共轭体系和生色团，所以在紫外可见区域内有较强的吸收；又因为含有-OH，-X等杂原子团，使发生n-σ*的价电子跃迁，所以在紫外区200 nm附近和波长250～700 nm之间有吸收峰．为进一步研究吸光强度与戊唑醇含量之间的相关性，给出在221，326，566 nm处戊唑醇的质量浓度值与所对应的吸光强度的数据（见表1）．采用Matlab软件对表1中的数据进行拟合，分别得到三个特征波长处戊唑醇的质量浓度值与吸光度的关系模型，拟合结果见图3．以戊唑醇的质量浓度作自变量CON，以特征波长所对应的吸光度为Abs，得到的线性回归方程见表2．根据线性拟合回归方程、相关系数和拟合误差得出，在戊唑醇的三个特征波长处，戊唑醇的质量浓度与吸光度都呈线性关系，并且拟合效果很好．由表2中的相关系数和拟合误差得出，在特征波长221，566 nm处，相关系数在0.997 5以上，拟合误差在2.434 e-10以下；在特征波长326 nm处，相关系数为0.9990，拟合误差为9.694 e-11．由此得出，在特征波长326 nm处，戊唑醇的质量浓度值与所对应的吸光强度的线性拟合效果最佳．2.2 戊唑醇的荧光光谱和三维荧光光谱根据实验方法测定戊唑醇的荧光光谱，220～310 nm和320～470 nm波长激发戊唑醇的荧光光谱见图4和图5．由图4和图5可见，戊唑醇有两个明显的荧光区域，分别在345～380 nm和580～640 nm波长范围内．在激发波长220～310 nm范围内，随着激发波长的增加，荧光强度逐渐减弱，在225 nm激发时，荧光强度最大，其峰值波长位于366 nm处，在激发波长310 nm处，荧光峰值发生了 5 nm（366～361 nm）蓝移．在320～470 nm激发波长下，随着激发波长的增加，荧光强度也随之增加，在470 nm处激发时，荧光强度最大，其峰值波长位于604 nm处．戊唑醇在激发波长470 nm所对应的最大荧光峰值604 nm处的激发光谱见图6．由图6可见，在230～650 nm范围内有一个明显的区域可以激发出荧光峰值为604 nm的荧光光谱，在302 nm处的峰为倍频峰．在320～510 nm波长范围内的最大荧光峰值位置为470 nm，验证了激发波长为470 nm时，戊唑醇有最大荧光特征峰．戊唑醇的三维荧光光谱见图7．图7a曲面可以得到戊唑醇的最大荧光强度所对应的激发波长和发射波长的位置，同时还能观察到荧光强度与激发波长和发射波长变化的关系．图7a曲面图与图7b等高线图（又称指纹图）是相对应的，Peak1附近的驼峰形状的宽峰是荧光峰，两侧逐渐升高的山脊形状的峰是瑞利散射峰，分别与图7b中类似指纹形状的线和一条笔直的纹线相对应，Peak1处的最大荧光峰值与指纹图中中心的位置相对应．从图7中可以明显看到，戊唑醇的主要荧光区域在λex\λem=220～310 nm\340～390 nm处，最佳激发波长为225 nm，峰值位置为366 nm，随着激发波长的增加，对应的荧光强度逐渐减弱．通过以上研究结果得出，戊唑醇有荧光是因为它含有共轭双键或苯环（杂环）结构，分子结构中存在共轭的π→π*跃迁，而π→π*的荧光效率高，系间跨越过程的速率常数小，所以产生荧光．荧光光谱检测出戊唑醇有两个荧光区域，一个在345～380 nm范围内，最大荧光峰值为366 nm，激发波长为225 nm；另一个在580～640 nm范围内，最大荧光峰值为604 nm，激发波长为470 nm；给出了戊唑醇在580～640 nm范围内的最大荧光峰值604 nm处的激发光谱，验证了戊唑醇的最佳激发波长．三维荧光光谱可以直观和完整地描述戊唑醇的荧光特征，同时也验证了在 220～310 nm波长激发下戊唑醇荧光光谱检测所得到的结果．数据表明，荧光光谱和三维荧光光谱的结合使用不仅可以获得更多戊唑醇的光谱信息，而且还可以相互验证，提高戊唑醇定性分析的准确性．2.3 戊唑醇的同步荧光光谱不同波长差下戊唑醇的同步荧光光谱见图8．根据图8进行分析，可以得到戊唑醇在不同波长差下的同步荧光光谱特征为：（1）随着波长差Δλ的不同，得到的荧光强度和峰值有显著差别，在Δλ=10 nm时，荧光峰值在602 nm处，有三处肩峰，分别在610～625 nm，627～640 nm，642～667 nm范围内；在Δλ=20 nm时，荧光峰值在607nm处；在Δλ=30 nm时，荧光峰值在615 nm处，有一处肩峰在592～608 nm范围内；在Δλ=40 nm时，分别在604和626 nm处有荧光峰；在Δλ=50 nm时，分别在604和633 nm处有荧光峰；在Δλ=60nm时，分别在605 nm和647 nm处有荧光峰．其中在Δλ=40 nm时，戊唑醇的荧光峰由一处变为两处，随着波长差的增加，第一处的荧光峰值与第二处荧光峰值的距离逐渐变大，并且第二处荧光强度逐渐小于第一处荧光强度．（2）波长差从10 nm增大到60 nm时，荧光强度逐渐下降，峰值位置从602 nm到607，615，626，633，647 nm，分别发生了5，13，24，31，45 nm红移．根据荧光产生机制，推测发生红移现象是因为戊唑醇中含有较宽基态振动能级的荧光团，使得被激发的电子由激发态的最低振动能级向该振动能级带中的其它振动能级跃迁时的几率相近所导致．由此可见，波长差的选择与同步荧光光谱的形状、带宽和信号强度有关．波长差不同，所得到戊唑醇的同步荧光光谱就会有差别．产生这种现象的原因是由戊唑醇复杂的分子结构引起的．这些同步荧光光谱的变化特征可以对戊唑醇定性分析提供有价值的信息．戊唑醇在紫外-可见区域内具有较强的吸收，并且在戊唑醇的三个特征波长处，分别对戊唑醇的质量浓度值与吸光强度做线性拟合，得出在特征波长326 nm处，相关系数为0.999 0，拟合误差为9.694 e-11，拟合效果最佳．荧光光谱检测戊唑醇得出，戊唑醇共有两个荧光区域，分别在345～380 nm和580～640 nm波长范围内，最大荧光峰值分别为366 nm和604 nm，对应的激发波长分别为225 nm和470 nm．同步荧光光谱测定戊唑醇得出，不同波长差下，戊唑醇的同步荧光光谱的形状、带宽和信号强度都不相同，在波长差为40 nm时，戊唑醇的荧光峰变为两处，并且随着波长差的增加，第二处的峰值强度逐渐小于第一处的峰值强度．三维荧光光谱验证戊唑醇荧光光谱检测的准确度，此方法具有良好的应用前景．以上研究结果表明，不同光谱分析方法测定戊唑醇所得到的光谱特征各不相同，多种光谱分析方法的应用不仅可以相互验证，而且提供了戊唑醇更多的光谱信息．【相关文献】[1] 许金钩，王尊本．荧光分析法[M]．3版．北京：科学出版社，2006：1-65[2] 盖云，鲍成满，叶树明．化学计量学方法在三维荧光光谱分析中的应用[J]．光谱学与光谱分析，2011，31（7）：1828-1833[3] Stedom C A，Markager S．Resolving the variability in dissolved organic matter fluorescence in a temperate estuary and its catchment using PARAFAC analysis[J]．Limnol Oceanogor，2005，50：686-697[4] Cory R M，Mcknight D M．Fluorescence spectroscopy reveals ubiquitous presence of oxidized and reduced quinines in dissolved organic matter[J]．Environ Sci Technol，2005，39：8142-8149[5] 黄新辉，张发亮，马淑惠，等．新型杀菌剂戊唑醇的合成工艺[J]．安徽农业科学，2007，35（1）：144-192[6] 李洪，周游，李伟声．戊唑醇在黄瓜和土壤中的检测方法及其残留动态研究[J]．西南农业学报，2014，27（3）：1159。