精浆的生化检验技术ppt课件共79页

与凝固酶相关
增加：影响精子液化、活力、穿透力。 下降：先天性无精囊腺、精子浓度低或无精子
方法：PH试带或酸度计，1小时内完成
PH 7.2—7.8
<7.0伴少精症:输精管阻塞、先天性精囊缺如等 >7.8 ：急性前列腺炎、精囊炎、附睾炎
• 化学检查
精浆的果糖
方法：间苯二酚比色法、吲哚显色法 意义：先天性精囊腺缺如、精囊炎、精囊阻塞、射精阻塞时果糖减少。
精子存活率：取1滴液化后的精液于载玻片上，加染色液混匀，放置片刻，计算高 倍镜下100个精子中不着色精子的百分率。≥75%
精子活动率：取1滴液化后的精液于载玻片上，加盖片放置片刻后，高倍镜下至少
观察100个精子，计算有活动能力的精子占全部精子的百分率。
≥70% 精子活动力：取1滴液化后的精液于载玻片上，加盖片放置片刻后，高倍镜下至少
精液的常规检测
精液检查的意义 精液的组成 精液的检查方法 精液告单的解读
精液检查的意义
• 评估男性生育功能,提供不育症诊断和观察疗效的依据 • 辅助诊断男性生殖系统疾病 • 输精管结扎技术 • 计划生育科研 • 法医学鉴定 • 体外受精 • 婚前检查
精液的组成
精液
精子 ( 5% ) : 产于睾丸，熟于附睾
VAP平均路径速度 : 精子头沿其空间平均轨迹移动的时间平均速度。 ALH精子头侧摆幅度 : 精子头沿其空间平均轨迹侧摆的幅度。最大值or平均值表示 MAD平均移动角度 : 精子头沿其曲线轨迹瞬间转折角度的时间平均绝对值。 BCF鞭打频率(Hz) : 精子曲线轨迹越过其平均路径轨迹的时间平均速率。 WOB摆动性 : 精子头沿其实际轨迹的空间平均路径摆动的尺度。VAP/VCL。 LIN直线性 : 曲线轨迹的直线性。VSL/VCL。 STR前向性 : 空间平均路径的直线性。VSL/VAP。

无精子症
精液中未发现精子，可能导致 不孕不育。
弱精子症
精子活动力低下，可能影响受 孕和胚胎质量。
畸形精子症
畸形精子率高于96%，可能 与遗传因素、环境污染、不良
生活习惯等有关。
精液常规检测结果的判断与建议
01
02
03
04
根据检测结果，判断是否存在 异常指标，并分析可能的原因
。
对于异常指标，建议进行进一 步检查，如遗传学检查、内分
02
在试管婴儿等辅助生殖技术中， 精液常规检测结果可以为医生提 供参考，选择最优质的精子用于 受精，提高成功率。
不孕不育症的诊断与治疗
精液常规检测是男性不孕不育症诊断 的重要手段之一，通过对精液的各项 指标进行评估，可以判断男性生育能 力是否正常。
对于存在生育障碍的男性，医生可以 根据精液常规检测结果制定相应的治 疗方案，如药物治疗、生活方式调整 等，帮助患者恢复生育能力。
精液的常规检测课 件
目录
• 精液常规检测简介 • 精液的采集和处理 • 精液常规检测指标 • 精液常规检测结果解读 • 精液常规检测的临床意义 • 精液常规检测的未来发展
01
CATALOGUE
精液常规检测简介
精液常规检测的目的
01
02
03
评估男性生育能力
通过精液常规检测可以了 解精子的数量、活动力和 形态，从而评估男性生育 能力。
采集时需保持阴茎和 手部的清洁，避免感 染。
精液的处理和保存
精液应放置在37℃的恒温环境 中，等待液化。
液化后的精液需进行密度和活 力的检查，以确定是否适合进 行后续处理。
精液的保存温度为-18℃或更低 ，可保存数年至数十年不等。

医源性因素不育 全身性疾病因素不育
先天性因素不育 继发性睾丸损伤不育 精索静脉曲张不育 附属性腺感染不育
内分泌因素不育
特发性少精症/隐匿精子症
特发性弱精子症
不全
特发性畸形精子症 特发性无精子症
梗阻性无精子症
四、精浆生化分析方法及临床意义
❖ 精液分析:精子得数量、活力和形态(少精、弱精、 畸形精子、无精子、液化不良)
❖果糖可为精子得运动提供能量。 精囊腺功能紊乱 时, 精液总量减少, 精浆果糖含量降低, 进而引起 精子活力不足, 导致不育。
❖ 先天性精囊缺如患者果糖测定为阴性;精囊炎时, 果糖含量降低。不完全射精或射精过频,果糖含量 亦降低。
❖ 精浆果糖与α-葡糖苷酶结合可用于鉴别单纯性输 精管阻塞所致得无精症(果糖含量正常)和输精管、 精囊发育不良引起得无精症。
❖ 精液检查就是诊断男性不育最基础和最重要得检查项目
❖
正常精液标准(WHO 第五版)
❖ ————————————————————————————————
体积
≥2、0ml
PH
≥7、2
精子密度
≥15×106/ml
精子总数
≥40 ×106/一次射精
活力
前向运动精子≥32%
精子形态
严格标准下正常形态得精子≥4%
75、1％
三、男性不育得诊断
(一)、病史 ❖ 要全面了解家族史、婚育史、性生活史和其她对生
育可能造成影响得因素,还要简要了解女方病史。 (二)、体格检查 ❖ 体型及第二性征 ❖ 生殖器官得检查 ❖ 其她检查:直肠指诊、神经反射
非常重要！许多不育患者可通过病 史和体检大体判断其生育能力
(三)、精液检查
❖③精液液化后应立即离心将精子和精浆分离, 否 则会影响精浆果糖检测结果。

离心分离
将精液进行离心分离，以 去除其中的杂质和死精子 。
精液的显微镜检查
精子计数
通过显微镜观察，计算每毫升精 液中的精子数量，以评估生育能
力。
精子形态检查
观察精子的形态是否正常，是否存 在畸形精子等问题。
精子活动力评估
观察精子的活动力，判断其是否能 够正常游动。
精液的生化检查
精浆生化检查
检测精浆中的酸性磷酸酶、柠檬酸等生化指标，以评估附睾、前列腺等器官的 功能。
选择在禁欲2-7天后进行 ，以获得更准确的检查结 果。
采集方法
通过手淫或性交后将精液 收集在干燥、清洁的容器 中。
注意事项
避免在采集过程中混入尿 液、前列腺液等其他物质 。
标本处理
液化处理
精液在排出后需要经过一 段时间的液化过程，才能 进行显微镜检查。
分装与标记
将精液分装在适量的离心 管中，并标记好患者信息 、采集时间等。
生殖激素检测
检测血清中的生殖激素水平，如睾酮、卵泡刺激素等，以评估下丘脑-垂体-性 腺轴的功能。
03
精液检查结果的分析和解读
正常精液的特点和标准
01
02
03
04
精液量
正常精液量为2-6ml，呈灰白 色或乳白色。
精子密度
正常精子密度为每毫升6002000万个。
精子活动力
正常精子活动力为50%以上 ，呈直线运动或曲线运动。
误差控制
第一季度
第二季度
第三季度
第四季度
标准化操作
精液检查应遵循国际标 准，确保操作规范、准 确。实验室应定期进行 质量控制，确保仪器设 备准确、可靠。
样本标识
每个样本应进行唯一标 识，避免混淆。同时， 样本的采集、处理、检 测等环节都应做好记录

32
标本1实际浓度
结果报告
标本最终检测结果以“精浆中性α- 葡糖苷酶
总活性”方式报告，即总活性=标本浓度
(U/L)×一次射精的精液体积 (ml)=mU/ 一次射 精
正常参考值
≥20 mU /一次射精（WHO）
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试验中注意事项
• 严格控制禁欲时间和样本离心速度 • 操作时加样要准确，混匀充分
ENTER NUMBER OF STANDARD REPLICATES: 01
CONCN. OF STD1: 0
CONCN. OF STD2: 4.46
CONCN. OF STD3: 8.92 CONCN. OF STD4: 17.84
CONCN. OF STD5: 35.68
按“平滑曲线”方式拟合标准曲线
空白孔单孔，所有检测孔吸光度均为之相减。
30
各检测孔在微孔板上的位置排列方式如下：
1 A B C 2 B S1 S2 3 R1 R1B R2 R5 R5B R6 4 …… …… …… ……
D
E F G H
S3
S4 S5 Q QB
R2B
R3 R3B R4 R4B
R6B
R7 R7B R8 R8B
……
…… …… …… ……
Centrifugation at 2 000 r/min for 10 minutes Centrifugation at 3 500 r/min for 15 minutes
25
20 15
10
5 0 1 5 9 例数
39
49
13
17
21
25
29
33
37
41
45
•

精液的常规检查
检查精液的总量
以评估精液的产生是否正常。
检查精液的黏度
以了解精液是否容易液化。
检查精液的酸碱度
以评估精液的酸碱平衡是否正常。
检查精液中的白细胞数量
以评估是否存在炎症或感染。
精液的其他实验操作
精液的分离和纯化：以去除精液中的杂质和有害物质 。
精子的形态学检查：以了解精子的形态是否正常。
症等问题。
精子形态
正常精子形态应为头部、中部 和尾部均无明显异常。若精子 形态异常过多，可能存在精索 静脉曲张、免疫因素等问题。
影响精液检查结果的因素
取样方法
取样前应禁欲2-7天，取样时 需将精液排入干净容器中，避 免使用避孕套等对间
精液检查时间应尽量在同一天的 不同时间段进行，以减少误差。
精液生物标志物的检测
未来精液检查将不仅仅局限于精液常规参数的检测，还将开 发出更多的生物标志物检测方法，以评估男性生殖系统的健 康状况。
精液检查在生殖医学中的前景
辅助生殖技术
精液检查在辅助生殖技术中具有重要的应用价值，可为不孕不育夫妇提供更 为准确的诊断依据，为治疗提供更有针对性的方案。
男性生殖健康筛查
精子的密度和活动力检测：以评估精子的数量和质量 。
精液的生物化学分析：以评估精液中的营养物质和酶 类是否正常。
05
精液检查的结果分析
精液检查结果的解读
精液量
正常精液量约为2-6ml，若精液 量过少则可能存在精囊炎、前
列腺炎等问题。
精子密度和活动力
正常精子密度为每毫升6000万1.5亿个，活动力应达到50%以 上。若精子密度过低或活动力 不足，可能存在少精症、弱精
将检查结果与正常值进行比较，对受检者的 精液质量进行综合评估，并将检查结果告知 受检者。

45
前列腺液检查
广州医学第二附属医院检验科 黄 海 樱
46
第一节
标本采集与处理
*第二节 前列腺液理学检验
*第三节 前列腺液显微镜检验
第四节 前列腺液检验的质量控制
Байду номын сангаас
47
48
前列腺生理功能 ： 1.维持精浆适当的PH
2.参与精子能量代谢
3.抑制细菌生长
4.使精液液化
49
电解质：钠、钾、钙、镁、锌等
19
【检测原理】 1.显微镜检验 2.连续摄影法 3.精液质量分析仪测定
【方法学评价】
20
精子活动力检测的方法学评价
方法 显微镜检验 评价 操作简便，但主观性较强，且 受许多因素影响 需要高精度的实验设备，因此不 便于开展普及 简单、快捷、易操作、可重复性 好，是一种理想的检验精液质量 的方法
21
精子滴虫55几种病理情况下前列腺液改变卵磷脂小体rbcwbc颗粒细胞正常粘稠均匀分布乳白色满视野轻度前无明显下降前列腺脓脓血下降脓肿消失前列腺血性下降56第四节前列腺液检验的质量控制一标本的采集和运送二显微镜检验质量控制57阴道分泌物检查广州医学第二附属医院检验科58第一节标本采集与处理第二节阴道分泌物理学检验第三节阴道分泌物病原生物学检验第四节阴道分泌物检验的质量控制59阴道分泌物vaginaldischarge
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(二)分析中的质量控制 1.液化时间 2.精子活动率及活动力检验 3.精子计数及形态检验 4.化学及免疫学检验 5.计算机辅助精液分析和精液质量分析仪 6.室内质量控制 7.室间质量控制
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(三)分析后质量控制 1.由质控人员审核检验结果后，方可出报告。 2.结果报告单规范化，并向临床医生提供必要的 讲解和宣传。 3. 精液检验结果变化范围大，有时不能仅凭一次 的检验结果就做出诊断。

进一步分析
直肠B超检查
直肠B超显示:未见精囊输精管 精囊输精管缺如或发育不良
谢谢
吲哚法
果糖与吲哚在强酸、加热环境中生成有 色复合物，在470nm波长处有最大吸收 峰，其吸光度大小与果糖含量成正比。 需要浓盐酸。 1000g离心10min。 去蛋白需放置15min，再离心20min。 操作过程中需要50℃水浴和冰水冷却。 反应过程理论需时70min。 再分光度计比色，手工检测。 吲哚法，易受其他糖类成分干扰
深圳市博锐德生物科技有限公司 产品介绍
精浆果糖定量检测（酶法）
检测原理
实验原理 （酶法）:
果糖 ——————→果糖-6-磷酸盐 果糖-6-磷酸盐——————→葡萄糖-6-磷酸盐 葡萄糖-6-磷酸盐 + NAD+ 葡萄糖-6-磷酸 ——————→ + NADH
Байду номын сангаас
临床意义

精浆果糖是精囊分泌功能评价指标
问题：进一步分析需选择何种精液检测项目?
分析
可选择的检测项目: 1.精浆果糖
2.精浆中性α-葡糖苷酶
3.精浆弹性蛋白酶（感染性检测）
检测结果
精液量: 1.2ml, 不凝固, pH6.8, (离心后)未发现精子。
精浆果糖: 0（≥13µmol/1次);
精浆中性α-葡糖苷酶: 53.2mU/1次射精(≥20mU/1次); 精浆弹性蛋白酶:130ng/ml(<600ng/ml). 问题: 如何确定该病人无精子症病因？
原理
试剂 标本准备
操作步骤 结果
实验所需设备及要求

酶标仪波长340nm，（或博锐德公司的生殖医学全自动、半自 动生化免疫分析仪） 高速离心机（有离心力显示）

精浆弹性蛋白酶可用作细菌性前列腺炎诊断与疗效监测新指标。
进一步分析（二）
假设检测结果如下
精浆酸性磷酸酶:489.1U/1次射精(≥200U/1次);
(≥2.4µmol/1次);
精浆锌:4.73µmol/ 1次射精
次);
精浆柠檬酸: 68.5µmol/ 1次射精(≥52µmol/1
精浆弹性蛋白酶:2083ng/ml(<600ng/ml)
道附属性腺感染，并可能因此影响精液质量； 白细胞数量＜1×106/ml也不能排除附性腺感染的可能性。
与弹性蛋白酶对比
检测方法 过氧化物酶染色
弹性蛋白酶
被检测物质
分泌POX的 中性粒细胞
优点
简单 快速
不足 检测效能低
检测粒细胞 抗炎效应物
准确 易批量检
无明显不足
两者之间的关联
精液白细胞过氧化物酶是男性生殖道感染初筛指标，精浆弹性 蛋白酶是生殖腺炎感染，前列腺分泌功能未实质受损。
进一步分析（三）
假设检测结果如下:
精浆酸性磷酸酶:157.1U/1次射精(≥200U/1次);
(≥2.4µmol/1次);
精浆锌:4.73µmol/ 1次射精
精浆柠檬酸: 43.1µmol/ 1次射精 (≥52µmol/1次);
精浆弹性蛋白酶:435ng/ml(<600ng/ml)
三者之间的关系
精浆锌、精浆柠檬酸、精浆酸性磷酸酶，是WHO推荐的评价前 列腺分泌功能的指标。三者并非平行关系，任何一项指标降 低均预示前列腺分泌功能受到实质性损伤；3项指标均正常表 示前列腺分泌功能未受到实质性破坏。
二、鉴别诊断细菌性/非细菌性前列腺炎
精浆弹性蛋白酶（欧洲泌尿外科学会推荐） 精液白细胞过氧化物酶

2.染色法：复杂、费时，准确可靠，重复性好，
为WHO推荐方法。
精子形态判断标准
正常形态：似蝌蚪状，分头、体、尾 ①头部正面呈卵圆形，侧面呈扁平梨形， 头部长4.0～5.5μm，宽2.5～3.0μm ②体部轮廓直而规则，与头部纵轴成一直线，长5-7 μm ，宽 1 μm ③尾部细长，外观规则而不卷曲，长50-60 μm
涂片检查
精液液化后充分混匀制成压滴片，筛检有无 精子及精子能否运动。 未查到精子，尚须制备浓缩标本离心法复检。 仍查不到精子，则可判定为无精子症； 仅见少量精子，则称为精子缺乏； 查到的精子全部不运动，则可能为死精子症，但 须经体外活体染色检查方能确定。
精子活动率检查
测定方法: 1.湿片法： 混匀高倍镜观察 2.精子体外染色法：精液+染液推片计数(不着色)
[参考值] 正常人成熟精细胞＞99%。 【临床意义】在病理情况下，当曲细精管的生精功能受到损害时，精
液中可出现较多的病理性幼稚细胞，这些细胞表现为形态、大小以及核
的形态大小都不规则，应予以鉴别。
其他细胞成分
正常精液中存在极少量的红细胞、白细胞和上皮细胞。 [参考值] 正常精子中红细胞、白细胞和上皮细胞＜５／ HP。 【临床意义】极少量的细胞成分来自于精囊和前列腺。红细 胞增多见于血精症、睾丸炎、瘤、前列腺癌等。白细胞若＞ ５／HP个，即为异常，大量出现见于生殖道炎症，将会影响 精子的质量和功能。精液中查到癌细胞，对生殖系统恶性肿 瘤的诊断提供重要依据。
。
精液分析的意义
6、法医鉴定
1、寻找男性不 育的原因
2、观察输精管 结扎术后的效果
5、筛选优质精 子
4、计划生育和 科研
3、作为男性生 殖系统疾病诊断

监测治疗效果
对于一些生殖系统疾病的 治疗，如前列腺炎、精囊 炎等，精液检查可以帮助 医生监测治疗效果。
精液检查的基本流程
收集精液
患者需要在医院提供的容 器中收集精液，通常需要 在性行为后3-7天进行。
实验室分析
收集的精液会被送往实验 室进行进一步的分析，包 括精子数量、活动力和形 态等方面的评估。
正常精子呈蝌蚪状，头、体、尾三部 分完整。畸形精子则形态各异，会影 响生育。
精子数量
正常每毫升精液中含有6千万至1亿个 精子。精子数量减少会影响生育。
ห้องสมุดไป่ตู้
精子活动力和存活率的评估
精子活动力
精子活动力一般分为A、B、C、D四级。A级（3级）表示精子快速直线前向运动，直线运动；B级（2级）表示精 子缓慢或呆滞向前运动，缓慢运动；c级（1级）表示精子非向前运动，原地运动；D级（0级）表示精子不能运 动，不运动。正常时，A级精子≥25%；A级与B级精子之和≥50%。
06
CATALOGUE
精液检查医学案例分享
案例一：少精子症的诊断和治疗
总结词
少精子症是男性不育的常见原因，精液检查可发现精 子数量减少，活力下降。治疗方法包括药物治疗、改 变生活方式和手术治疗等。
详细描述
少精子症是指单位体积精液中精子数量低于正常参考值 。该病例中，患者因不育就诊，精液检查发现精子数量 明显减少，活力下降。通过进一步检查，医生诊断为少 精子症。医生建议患者采取以下治疗方法：药物治疗， 如使用生长激素、抗氧化剂等；改变生活方式，如戒烟 、戒酒，改善作息时间等；手术治疗，如精索静脉高位 结扎术等。经过治疗，患者精子数量和活力得到明显改 善，成功受孕。
05
CATALOGUE

组别
n
精浆
51
(2 000 r/min for 10 minutes)
精浆
51
(3 500 r/min for 15 minutes)
α-葡萄糖苷酶 (U/ml）
50.31±18.94
47.09±17.92*
两组结果比较*: P = 0、001
• 不同速度离心后的精浆中精子密度的比较 精 液 经 2 000 r/min 离 心 10 min 后 , 84、 31%(43/51)的精浆含有精子,平均精子密度 为 (2、43±3、95)×106/ml , 而 经 3 500 r/min离心15 min后,23、53%(12/51)的精浆 含 有 精 子 , 平 均 精 子 密 度 为 ( 0、22±0、 87)×106/ml,结果见图1。
二、精浆中性α-葡萄糖甘酶测定(酶法)
检测目的
主要是附睾分泌功能的指标,较左旋肉毒碱和 甘油磷酸胆碱对附睾更敏感、更特异 先天性副睾发育不良明显降低、急慢性副睾 炎降低 正常见于单纯输精管阻塞无精症
原理
α-葡 糖
P-硝基酚吡喃葡糖苷 (底物) 苷酶对硝基酚
加酸
(产物)
Na2C淡O黄3 色物质,在405nm波长有最
精浆的生化检验技术
一 、精浆的来源及作用 二、 精浆α-葡萄糖苷酶测定 三、 精浆果糖测定 四、 精子顶体酶的测定 五、 其他生化项目测定

一 、 精浆的来源及作用 男性生殖系统的结构 外生殖器 —阴囊＋阴茎
内生殖器 —生殖腺(睾丸)、输送管道(附睾、输 精管、射精管和尿道)和附属腺体(精 囊、前列腺、尿道球腺)
4.76
36.63±1.75
4.78
5
10