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肿瘤治疗中化疗结合NK-T＋NK细胞交替疗法的应用1.NK-T＋NK细胞交替疗法NK-T与NK两种细胞均对肿瘤细胞有强力的杀伤效果，是肿瘤免疫治疗中的主力军，但侧重不同，各有优势，同时因个体差异，在免疫治疗中需要考虑人体对不同免疫细胞的敏感度不同，往往单一的NK或NK-T细胞疗法难以预估效果。
将两种细胞疗法结合起来进行交替治疗，可以产生1+1＞2的效果，最大化地发挥细胞免疫治疗抗肿瘤的优势，达到对肿瘤细胞全面预防、杀伤和防转移的效果。
1.作用机理NK细胞是人体抵抗癌细胞和病毒感染细胞的第一道防线，除了具有强大的杀伤功能外，还具有很强的免疫调节功能，与机体其他多种免疫细胞相互作用，调节机体的免疫状态和免疫功能。
另外NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早，在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。
NK细胞治疗适用于肿瘤发展早期和大量瘤负荷减低后及由于肿瘤病人免疫力降低合并其它感染的病人，对经淋巴途径的转移灶有更好效果。
NK-T细胞可以在肿瘤发展各个阶段使用，对控制经血液途径的转移性微病灶有良好效果。
NK-T细胞的作用机理主要分泌IL-2，IL-6,IFN-γ等多种抗肿瘤的细胞因子，另外NK-T细胞还可能促进宿主体内T细胞增殖活化，原始的CD3✚/CD56✚T细胞输注体内后，在宿主机体状态或肿瘤抗原刺激下转变成具有杀瘤活性的细胞毒性T细胞，发挥抗肿瘤作用。
NK-T与NK细胞的结合治疗，可以在细胞免疫和体液免疫两方面调节机体免疫系统，对体内的肿瘤细胞以及其他病变细胞能够高效、全面的发挥杀伤效应，并且能很好的预防肿瘤细胞以及其他病变细胞的发生和转移。
1.适应征近年的临床研究显示，NK-T细胞在临床治疗的早、中、晚期恶性实体瘤病例和白血病中均有较好的疗效，NK-T细胞生物免疫治疗适用于：病人在手术切除原发肿瘤后加NK-T细胞。
化疗放疗期间结合NK-T细胞免疫支持治疗，不仅能有效杀灭残留癌细胞，而且可以提高放化疗病人的自体免疫力，起到支持治疗的目的。
自然杀伤( NK) 细胞是先天性免疫系统的重要组成部分,是机体抗御感染和防止细胞恶性转化的重要免疫调节细胞。
与T 淋巴细胞不同, NK 细胞无需肿瘤特异性抗原识别便可以直接杀伤肿瘤细胞, 是肿瘤免疫治疗的重要效应细胞[1]。
人类NK细胞约占全血淋巴细胞的10 %～15 %。
目前研究认为NK 细胞特异性表达CD56, 而缺乏T 细胞抗原CD3。
NK 细胞具有以下功能:( 1) 对病毒感染细胞、白血病细胞及其他肿瘤细胞产生直接细胞毒活性;( 2) 分泌多种免疫调节细胞因子( 如:IFN- γ, TNF- α, GM- CSF) ;( 3) 通过细胞膜FcγRⅢ( CD16)与抗体Fc 段结合从而介导抗体依赖的细胞毒( ADCC) 作用NK 细胞临床应用进展2.1 体内扩增、激活NK 细胞目前NK 细胞的免疫治疗主要是利用细胞因子体内扩增、激活NK 细胞和体外产生LAK、CIK 细胞杀伤自体肿瘤细胞。
从早期的大剂量IL- 2 治疗的严重毒副作用到随后的长期小剂量联合间断中剂量IL- 2 治疗证实在HIV 感染及恶性肿瘤患者中可以较好耐受。
但这种治疗方法只是增强骨髓祖细胞向NK细胞分化及依赖IL- 2 延迟NK 细胞的凋亡, 而并非外周血成熟NK 细胞的增生[14, 15]。
因此联合应用IL- 2 和其他细胞因子( 如IL- 12, IL- 15, KL, FL) 可能达到更好的体内和体外扩增NK 细胞的效果[16, 17]。
但是由自体肿瘤细胞上表达的MHC- Ⅰ类分子所介导的抑制性信号仍然是成功治疗的最大限制。
2.2 体内阻滞抑制性受体在自体和HLA 相合的干细胞移植中, 白血病细胞表达MHC- Ⅰ类分子与NK 细胞的抑制性受体结合从而抑制NK 细胞对自体白血病细胞的杀伤。
Koh 等[18]最近利用急性白血病小鼠模型证实在体内阻滞NK 细胞抑制性受体的可行性。
给B6鼠接种C1498( H2d) 鼠的白血病细胞, 利用5E6F( ab') 2 抗Ly49C 和Ⅰ抗体治疗可以避免B6 鼠死于白血病, 治疗中未发现明显的毒副反应及对造血的破坏。
nk细胞的作用与功效
NK细胞（自然杀伤细胞）是一类特殊的淋巴细胞，具有天然
杀伤作用，主要存在于外周血、淋巴组织和器官中。
和其他淋巴细胞不同，NK细胞不需要特异性抗原识别和活化，但在身
体免疫防御中发挥重要作用。
NK细胞的主要作用是识别并杀伤癌细胞和病毒感染的细胞，
也参与免疫调节和免疫耐受过程。
当体内某些细胞发生异常变化（如癌变）或被病毒感染时，这些细胞的表达型蛋白会发生变化，通过调节受体的活化信号，NK细胞能够识别和杀伤这
些异常细胞，起到抑制肿瘤和控制病毒感染的作用。
此外，NK细胞还能分泌多种细胞因子，如干扰素、肿瘤坏死
因子等，可以直接抑制肿瘤细胞的增殖，并激活其他免疫细胞的杀伤能力。
NK细胞对病毒感染的控制也非常重要，通过抗
病毒蛋白的活化及其产生的细胞因子，可以增强机体抵御病毒侵袭的能力。
此外，一些研究还发现，NK细胞可能在固体器官移植排斥、
自身免疫疾病、孕产妇免疫调节等方面起到重要作用。
NK细
胞通过与其他免疫细胞相互作用，参与对外界刺激的免疫反应，维持机体内外环境的稳定。
总之，NK细胞作为一类免疫细胞，具有广泛的抗肿瘤和抗病
毒感染能力，可以识别和杀伤异常细胞，并通过细胞因子的分泌调节免疫反应。
通过进一步研究和应用，NK细胞可能在抗
肿瘤治疗、病毒感染控制、器官移植等免疫相关领域发挥更大的作用。
综述NK细胞的生物学及在肿瘤治疗中的作用自然杀伤细胞（natural killer cell，NK细胞）是一种骨髓衍化的淋巴细胞，由于在形态上胞浆丰富，胞质内含有大型嗜天青颗粒，故又称为大颗粒淋巴细胞（large granular lymphocyte，LGL）[1,2]。
1971年Cudkowizc 和Bennett首次描述了这类细胞的功能，他们发现经放射线照射的小鼠接受母体来源的骨髓细胞移植后发生了排斥反应[3,4]。
传统理论认为，移植抗原是共显性遗传的，例如，亲代抗原在第一代杂种共表达，子代能够耐受亲代的主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex，MHC）[3]。
然而，Cudkowizc 和Bennett发现H-2基因杂合体的第一代杂种鼠经放射线照射后能够排斥亲代H-2基因纯合体小鼠的骨髓细胞。
这种现象被称为“杂交抵抗”。
后来发现介导这种现象的细胞是一种淋巴样细胞，对放射线不敏感，能在体外直接杀伤肿瘤细胞，且无MHC限制性[1,5-7]。
随后就将这类细胞命名为NK细胞。
与T、B细胞免疫激活过程不同，NK细胞的免疫反应是迅速的，意味着其可在感染最初阶段清除病原体。
事实上，众多研究已表明，NK细胞可以清除胞内菌和寄生虫感染，在控制一些病毒感染的过程中也起重要作用[8-11]。
尽管一些体内外试验表明，NK细胞具有抗肿瘤活性，但是其确切机制还不完全清楚[12-14]。
1. NK细胞的生物学特征NK细胞占外周血淋巴细胞的10-15％，也存在于脾脏、骨髓及其它组织，包括肝脏、腹腔、胎盘[1]。
NK细胞在肿瘤和病毒感染中发挥很重要的免疫监视作用，构成机体免疫系统第一道防线。
与免疫系统其它细胞（尤其是T细胞）不同，NK细胞不能被抗原重复刺激致敏而且没有长期的抗原记忆功能。
NK细胞缺乏特异性的细胞表面分子标志，许多标志认为是NK相对特异性的，比如小鼠NK细胞表面的NK1.1、DX-5、ASGM1，人类NK细胞表面的CD56，CD16[1,15-18]。
NK细胞对肿瘤细胞的免疫杀伤机制自体免疫系统是人体对抗外部病原体和癌细胞的第一道防线，其中天然杀伤细胞（NK细胞）是非常重要的一种免疫细胞。
NK细胞不需要预先识别抗原，反应速度快，能够杀伤患有病毒感染、肿瘤扩散等的靶细胞。
本篇文章将详细阐述NK细胞的免疫杀伤机制和其对肿瘤细胞的作用。
一、NK细胞的定义和发现NK细胞是自体免疫系统中的一种重要的细胞成分，它最初于20世纪60年代由美国John Herberman等人发现。
NK细胞是一类核糖体在成熟期中表达LGL（大颗粒性淋巴细胞）的细胞，学名叫做自然杀伤细胞，也称为大颗粒淋巴细胞。
二、NK细胞免疫杀伤机制NK细胞能够杀灭抗原非特异性靶细胞，其机制主要是通过下列途径：1、NK细胞靶细胞的识别NK细胞可以识别缺乏一定量的自身MHC I分子表达的肿瘤细胞或病毒感染细胞，而正常细胞表达丰富的MHC I分子则会被NK细胞免疫监视。
MHC I分子在细胞表面的表达量越多，细胞就越难被NK细胞杀伤。
2、鉴别杀伤NK细胞在检测到缺乏MHC I表达的靶细胞后可通过一些特定的引发凋亡途径，如分泌高浓度的穿孔素和金属蛋白酶等，使靶细胞抗原失活和死亡。
3、分泌细胞因子NK细胞能够分泌多种细胞因子，如干扰素(IFN)γ、肿瘤坏死因子(TNF)α等等，这些细胞因子不仅能增强NK细胞的活性，也能抗肿瘤免疫反应。
三、NK细胞在肿瘤免疫治疗中的应用NK细胞的免疫杀伤作用对于肿瘤的治疗非常重要，目前NK细胞在肿瘤免疫治疗方面的应用主要有以下几种：1、NK细胞的转化治疗以NK细胞为基础的肿瘤治疗是通过NK细胞的分离、扩增和改造等方式实现，能够依靠NK细胞的异质性作用杀死癌细胞。
2、NK细胞激活治疗针对免疫缺陷和抗肿瘤反应不足的个体，可通过刺激NK细胞活动来提高免疫力和肿瘤治疗效果。
如各种T细胞、白介素、转化生长因子等可以激活NK细胞。
3、NK细胞天然杀伤治疗NK细胞天然杀伤治疗是指直接使用自身NK细胞杀死癌细胞的治疗方式。
NK细胞如何识别和杀伤肿瘤细胞2019版高中生物学选择性必修一提到了癌症的免疫疗法：近年来，如何维持肿瘤微环境中的免疫细胞活性始终是肿瘤免疫治疗领域热点问题。
随着研究的深入，自然杀伤细胞在肿瘤免疫治疗中的作用正在被逐步阐明。
NK细胞在固有免疫应答和适应性免疫应答中都发挥关键作用，具有多种细胞毒作用机制，并能够通过产生细胞因子调节免疫反应。
那么， NK细胞是如何与肿瘤细胞进行战斗的？NK免疫细胞简介NK细胞全名“自然杀伤细胞”（Natural Killer cells），是免疫系统中的一类特殊细胞。
与其他免疫细胞不同，可选择性地溶解细胞，而无需事先活化，它们天生就能进行杀伤作用。
NK细胞最早于20世纪70年代被发现，得名于其自然杀伤（Natural Killing）能力。
NK细胞属于天然淋巴细胞（ILC），天然淋巴细胞作为天然免疫系统的一部分，其主要功能是监测和清除异常细胞，包括病毒感染细胞、突变细胞和癌细胞等。
NK 细胞在抵抗感染、控制肿瘤的发展和维持免疫平衡中扮演着重要角色。
NK细胞的识别和杀伤机制NK细胞可谓是免疫系统的杀手锏，它们可以通过多种方式来识别和攻击异常细胞，其中最为重要的特点是不需要识别特定抗原，而是通过识别细胞表面的一系列标志来判断目标细胞的状态。
它们具有多种方式来识别并摧毁异常细胞。
(一)识别机制“身份核验”——缺失MHC-I：我们都知道，正常细胞表面都会展示MHC-I分子，以防止免疫系统攻击。
然而，癌细胞有时会偷偷摸摸地减少或丢失MHC-I的表达，试图躲过免疫监测。
不过，机智的NK细胞可不会被蒙蔽，它们正是通过识别缺乏MHC-I的细胞，锁定并攻击癌细胞。
“一键激活”——激活受体和抑制受体：NK细胞表面有许多激活受体和抑制受体。
当它们与目标细胞接触时，激活受体可能会被激活，而抑制受体则可能被抑制。
这种平衡决定了NK细胞是否对目标细胞发起杀伤行动。
癌细胞通常表现较差，从而使得NK细胞更容易发挥杀伤作用。
自然杀伤细胞在肿瘤免疫治疗中的应用近年来，肿瘤免疫治疗成为了癌症领域的一项重要突破。
其中，自然杀伤细胞（NK细胞）作为人体天然免疫系统中的一员，具有广泛的抗肿瘤活性和较低的毒副作用，因此受到了广泛关注。
本文将讨论自然杀伤细胞在肿瘤免疫治疗中的应用。
一、NK细胞概述自然杀伤细胞是一类淋巴细胞，是人体天然免疫系统的重要组成部分。
与其他免疫细胞不同，NK细胞能够摧毁被感染和异常变化的细胞，而无需前期敏感化过程。
这使得其对于控制并清除癌变或感染性细胞具有特殊优势。
二、NK细胞在肿瘤治疗中的作用机制1.直接杀伤肿瘤细胞：NK细胞通过释放黏附素和穿孔素进入肿瘤细胞，从而诱导细胞凋亡和溶解。
2.分泌细胞因子：NK细胞能够产生多种细胞因子，如干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α等，这些因子能够直接杀伤肿瘤细胞，同时也激活其他免疫细胞参与抗肿瘤反应。
3.调节免疫应答：NK细胞通过与其他免疫细胞相互作用，调节免疫应答的平衡。
例如，在肿瘤微环境中，NK细胞可以促进树突状细胞的抗原递呈和T细胞的激活。
三、NK细胞在肿瘤免疫治疗中的应用1.单一使用：将扩增或活化的NK细胞直接注入患者体内进行治疗。
此方法已经在临床试验中显示出一定效果，并且安全性良好。
但是单一使用无法满足长期稳定抑制肿瘤生长的需求。
2.NK细胞与其他免疫治疗联合应用：将NK细胞与其他免疫治疗方法，如抗PD-1抗体、CAR-T细胞联合应用。
研究显示，该联合应用可以提高治疗效果，增加患者对肿瘤的免疫反应。
四、改善NK细胞治疗效果的策略1.选择合适的供体：选择匹配度高且鉴定完整的供体对于NK细胞移植非常重要。
2.增强NK细胞的存活和扩增能力：通过基因工程等手段，提高NK细胞在体内的存活和扩增能力。
3.改善肿瘤微环境：通过在肿瘤治疗中针对肿瘤微环境进行调控，降低其对NK细胞杀伤作用的阻碍。
五、挑战与展望尽管自然杀伤细胞在肿瘤免疫治疗中显示出巨大潜力，但是仍面临一些挑战。
其中包括生产成本高、技术难度大以及长期稳定性等问题。
CAR-NK细胞治疗的应用与挑战CAR-NK细胞疗法（Chimeric Antigen Receptor Natural Killer cells，CAR-NK）是一种新兴的免疫细胞治疗方法，结合了自然杀伤细胞（Natural Killer，NK）与嵌合抗原受体（Chimeric Antigen Receptor，CAR）技术。
它的出现为癌症及其他疾病的治疗提供了全新的希望。
本文将对CAR-NK的发展、原理、应用、挑战和未来展望进行综述。
1.CAR-NK的发展历程CAR-NK细胞疗法的发展历程可以追溯到对NK细胞在免疫治疗中潜力的早期认识。
自然杀伤细胞（NK细胞）是一类淋巴细胞，具有非特异性杀伤肿瘤细胞和感染细胞的能力，而且不依赖于前期免疫记忆的形成。
由于这些特性，NK细胞成为研究者关注的焦点，希望能够利用它们作为治疗癌症等疾病的手段。
早期的研究表明，NK细胞在控制和清除肿瘤细胞方面起着重要作用。
然而，单独利用自然的NK细胞治疗肿瘤面临着一些限制，包括其在体内生存时间短、活性不稳定以及抗肿瘤效果有限等问题。
为了克服这些限制，研究者们开始探索如何通过基因工程技术来增强NK 细胞的活性和特异性。
随着CAR-T细胞疗法的成功应用，人们开始考虑将CAR技术应用于NK细胞上，从而产生了CAR-NK细胞疗法的概念。
最初的尝试是将CAR基因导入到NK细胞中，使其获得对特定抗原的识别和杀伤能力。
这一理念的提出引发了一系列的研究和实验，旨在探索CAR-NK细胞在肿瘤治疗中的潜力。
随着技术的不断进步和对CAR-NK细胞生物学特性的深入了解，研究者们逐渐克服了许多技术障碍，如CAR设计的优化、细胞扩增和制备技术的改进以及提高CAR-NK细胞活性和持久性等方面。
这些努力逐渐使CAR-NK细胞疗法走向了临床应用阶段。
目前，CAR-NK细胞疗法已经进入了临床试验阶段，并取得了一些初步的成功。
尽管仍然面临着一些挑战，如CAR-NK细胞的制备和扩增技术的进一步改进、细胞存活和持久性的提高以及治疗效果的优化等，但人们对其未来的发展充满了信心。
免疫细胞在肿瘤治疗中的作用与应用肿瘤是一种常见的疾病，其发生和发展不仅与基因突变、环境因素、生活方式等因素有关，还与人体免疫系统的失调密切相关。
随着生物技术的发展，免疫治疗成为一种新的肿瘤治疗手段。
本文将讨论免疫细胞在肿瘤治疗中的作用与应用。
免疫细胞是指能够识别并攻击病原体及异常细胞的细胞，包括巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞等。
它们的最终目标是清除病原体或异常细胞，保护机体免受感染和肿瘤的侵袭。
然而，在肿瘤治疗过程中，肿瘤细胞会通过多种机制来抑制免疫系统的反应，从而逃避免疫系统的攻击。
因此，建立一种有效的免疫治疗策略，重点是增强免疫系统的作用，使免疫系统能够对肿瘤产生强烈的反应。
一、T细胞在肿瘤治疗中的应用T细胞是一类非常重要的免疫细胞，能够通过接触肿瘤细胞并释放细胞毒素杀死肿瘤细胞，从而起到防治肿瘤的作用。
T细胞治疗是一种广泛应用于临床的免疫治疗方法。
通过运用基因工程技术，在体外培养并扩增大量的T细胞，并对其进行基因改造，从而增强其识别和杀伤肿瘤细胞的能力。
经过体外扩增的T细胞被称为CAR-T细胞。
CAR-T细胞治疗是一种革命性的癌症治疗方法，能够显著提高肿瘤的治愈率和生存率。
二、巨噬细胞在肿瘤治疗中的作用巨噬细胞是免疫系统中的主要成分之一，是肿瘤微环境中最主要的细胞类型之一。
巨噬细胞通过吞噬、消化与抗原处理等方式参与肿瘤微环境的调节，在防治肿瘤过程中发挥着非常重要的作用。
研究表明，肿瘤微环境中的巨噬细胞与肿瘤细胞相互作用，会形成一种“免疫逃逸”状态，这导致肿瘤细胞逃避了免疫系统的监视和清除。
因此，通过干预巨噬细胞的活动，可以增强免疫系统对肿瘤的攻击能力。
将某些化学物质注入肿瘤治疗区域，可以激活巨噬细胞的活性。
这些成分的作用包括诱导肿瘤细胞死亡、减少肿瘤细胞数量、抑制细胞的增殖、激活肿瘤细胞自毁等。
三、NK细胞在肿瘤治疗中的作用NK细胞是一类重要的免疫细胞，在防治肿瘤过程中发挥着非常重要的作用。
2 NK 细胞治疗策略
临床上采用的NK 细胞治疗方案有: IL-2 激活NK 细胞杀伤肿瘤、单克隆抗体介导NK 细胞杀伤肿瘤、自体和异体NK 细胞过继治疗杀伤肿瘤．NK 细胞的治疗效果与NK 细胞的数量和杀伤功能直接相关，用上述治疗方案扩增激活的NK 细胞普遍存在数量低和杀伤功能弱的问题．
2. 1 IL-2 激活NK 细胞杀伤肿瘤
IL-2 是第1 个被批准用来治疗肿瘤的细胞因子，早在1992 年，IL-2 已经获得了美国FDA 的批准，用于治疗转移性肾细胞癌( RCC)［16］．体内和体外的实验表明，IL-2 能增加NK 细胞的数量，提高被肿瘤细胞抑制的NK 细胞的杀伤能力．Gottlieb等［17］发现，IL-2 可以激活NK 细胞来杀伤多发性骨髓瘤( multiple myeloma) 细胞系和来自多发性骨髓瘤病人的肿瘤细胞［18］．IL-2 能显著增加患者对肿瘤治疗的反应率．治疗过程中，患者外周血中NK细胞数量的上升与否是衡量治疗效果的风向标［19］．例如，IL-2 在神经母细胞瘤的肿瘤临床治疗中有效果．在化疗和骨髓移植后进行IL-2 治疗的7 个病人中只有 1 人复发，而复发者正是IL-2 治疗后NK 细胞数量没有明显改变的病人［19］．虽然IL-2 治疗对某些病例安全有效，但在其它类型肿瘤的研究中，注射低剂量IL-2 的临床效果不显著．例如，在淋巴瘤、乳腺癌和高龄AML 中．低剂量IL-2 治疗对上述肿瘤效果不佳，这与直接注射低剂量IL-2 只能扩增杀伤力不强的CD56brightNK 细胞亚群有关．同时，IL-2 还能扩增在膜上表达IL-2 受体的Treg 细胞，而Treg 细胞能够显著抑制NK 细胞的杀伤作用［20］．
2. 2 单克隆抗体介导NK 细胞杀伤肿瘤
单克隆抗体对肿瘤有极好的辅助治疗效果．NK 细胞不具备识别肿瘤抗原的功能，而需要借助抗体的介导才能结合杀伤肿瘤细胞( antibodydependent cell mediated cytotoxicity，ADCC) ．目前的研究表明，所有单克隆抗体的ADCC 作用均需通过NK 细胞介导［21，22］．ch14．18 是抗GD2 的单克隆抗体，GD2 在神经母细胞瘤细胞表面有极高的表达．在临床Ⅲ期实验中发现，ch14．18 与IL2 以及GM-CSF 联合使用，能显著增强神经母细胞瘤标准化疗的效果．ch14. 18 联合IL2 和GM-CSF 的使用，使神经母细胞瘤患者的治愈率从2 年无病率的46 ±5%提高到66 ±5%［23］．Rituximab 是抗CD20 的单克隆抗体，单独使用或与化疗结合使用对非霍奇金淋巴瘤有较好的治疗作用［24］．对于使用Rituximab 后复发的非霍奇金淋巴瘤患者，自体LAK 细胞移植能改变患者对Rituximab 的耐药性．Rituximab 也可以用来治疗慢性淋巴细胞白血病、瓦尔登斯特巨球蛋白血症、免疫或特发性血小板减少性紫癜［25］．单克隆抗体在介导NK 细胞结合杀伤肿瘤细胞的过程中扮演中介作用，杀伤肿瘤细胞仍需依赖NK 细胞．由于肿瘤患者NK 细胞受到了一定的损伤，因此，如何增加肿瘤患者体内CD56dimNK 细胞亚群的数量和提高NK 细胞的杀伤能力是亟需解决的问题．
2. 3 肿瘤的自体NK 细胞过继治疗
在体外和动物实验中，体外激活的NK 细胞对来自患者自体的肿瘤细胞具有杀伤能力．自体免疫治疗对于患者通常十分安全，对某些肿瘤也取得了一定的疗效．研究显示，将在体外扩增并激活13 ～21 d 的自体NK 细胞回输至患者体内，提高了转移性肾癌患者的缓解率［25］．体外扩增并激活的自体NK 细胞结合IFN-b 干扰素回输到脑胶质瘤患者体内的临床实验显示，这些扩增的细胞对患者很安全，并有一定的治疗效果［26］．在乳腺癌和淋巴瘤的自体NK 细胞治疗中，将体外培养14 ～18 d 的LAK 细胞回输给病人．据报道，该LAK 细胞治疗患者耐受性良好，患者体内CD56bright NK 细胞显著增加．然而，与对照组相比，患者存活率和肿瘤复发率并没有明显改善［27］．在临床Ⅰ期11 例肺癌和肠癌患者的自体NK 细胞治疗中，患者对用Hsp70 处理的NK细胞耐受良好，但是，治疗
中仅有1 例患者病情缓解稳定［28］．肿瘤患者的NK 细胞与健康人相比，其类型发生明显改变．已有的数据表明，短期培养的LAK 细胞不能够转变NK 细胞亚群及其功能［29］．因此，有必要开发出新的激活NK 细胞杀伤功能的方法．
2. 4 肿瘤的异体NK 细胞过继治疗
鉴于肿瘤患者NK 细胞自体移植面临的困难，对肿瘤患者进行NK 细胞异体移植是免疫治疗的另一种方式．与干细胞移植不同，NK 细胞的异体移植不要求供者的 6 个KIR 配体与患者的配体完全匹配．体外实验证实，NK 细胞对KIR 不完全匹配的肿瘤细胞的杀伤能力较完全匹配肿瘤细胞的杀伤能力强
［30］．Miller 等31］在2005 年报道了半相合NK 细胞实验．在这项临床Ⅰ期试验中，43 名晚期肿瘤患者接受了半相合的外周血淋巴细胞．这些外周血淋巴细胞在输入患者体内之前，在加入1 000 U/mLIL-2 的X-VIVO 15 培养液中隔夜培养．43 名患者对输入的细胞完全耐受，没有明显的异体排斥．19例急性髓系白血病( acute myeloid leukemia，AML) 患者中有5 例获得完全缓解．Koehl 等［32］将半相合NK 细胞输入2 例急性淋巴细胞白血病( acutelymphoblastic leukemia，ALL) 患者和1 例AML 患者
体内，未见任何副作用及排斥反应．Passweg 等［33］用半相合NK 细胞治疗 4 例AML 和1 例慢性粒细胞白血病( chronic myelogenous leukemia，CML) 病人耐受性良好，无排斥反应．在Shi 等［34］临床Ⅰ期研究中，10 例多发性骨髓瘤患者接受了半相合NK 细
胞治疗．患者耐受性良好，没有异体移植排斥反应迹象，50% 病人的症状获得完全缓解
2.5 异体NK细胞过继免疫在治疗血液肿瘤中的应用
同种异体NK细胞过继免疫治疗的应用是建立在供受者HLA-I不相合的基础上，通过同种异体反应起到杀伤肿瘤的作用。
同种异体反应的积极效应是Ruggeri等在haplo—HSCT中首次报道的。
通过对去T淋巴细胞haplo—HSCT中NK细胞的作用分析得知：①异体半相合NK细胞可以增加抗肿瘤作用；②异体半相合NK细胞可以阻断移植物抗宿主病(graftversus host disease，GVHD)的发展；③异体半相合NK细胞可以促进移植物的植入¨11。
为异体半相合NK细胞的过继免疫治疗的发提供了有利条件。
初期试验及后续的I期和Ⅱ期临床试验都证实了高危白血病患者对NK细胞的免疫治疗是敏感的¨2’13。
Miller等在为了确定异体NK细胞输注的安全性及NK细胞在体内扩增情况的试验中发现供受者HLA—I不相合的缓解率高。
为了确定在接受免疫抑制治疗的儿童AML患者中同种异体半相合NK细胞输注的安全性、敏感性，Rubnitz等H4 o对10例未移植的低、中危组AML患者进行异体半相合NK细胞输注联合IL-Z治疗，结果没发现任何不良反应，也没有发生GVHD，在964 d的中位随访期后，所有患者都处于缓解状态，2年无事件生存率达100％。
Curti 等¨纠对13例中位年龄在62岁的AML患者进行NK细胞输注联合IL．2治疗，同样没有发生任何不良反应(包括GVHD)，5例活动期患者中有1例出现短暂性CR；2例分子学缓解患者的缓解期分别持续到4个月和9个月；6例形态学完全缓解的患者，其中有3例患者分别有32、34和24个月的无瘤生存期。
这些试验都证实了异体半相合NK细胞对AML肿瘤细胞的杀伤作用。
2..1补充给转移癌患者输入IL-2 激活的NK 细胞或输入在体外经过扩增的自身或供者来源的粘附NK 细胞，可以达到治疗肿瘤的目的[11]。
人体的肿瘤细胞和病毒感染细胞的
细胞溶解是通过NK 细胞介导自然细胞毒作用抗体依赖的细胞毒作用以及阳性和阴性细胞溶解信号控制作用的[12，13]。
其中阴性信号（抑制）的转导是被一些类Ig 受体（KIRs）、ILT2/LIR 和C-lectin 域包含受体CD94/NKG2A 完成的。
在肿瘤患者体内缺乏外来刺激的情况下，抗肿瘤免疫反应很少能发挥作用，因此许多方法都是通过激活肿瘤患者免疫细胞来发挥作用。
通过细胞因子、基因修饰、KIR 封闭抗体激活NK细胞，是目前常用方法。
研究表明肿瘤靶细胞表达Rae21 基因或H-60 基因可激发NK 细胞的杀伤活性和IFN-γ分泌，而且可触发巨噬细胞分泌NO 和产生TNF-α[14]。
体内研究发现Rae-1 或H-60 转染的肿瘤细胞由于能有效激活NK 细胞及CD8+T 细胞，几乎不能成瘤，而且能诱发继发保护效应[15]。
重要的是，表达MIC 蛋白的肿瘤细胞即使有MHCⅠ类分子表达也可被NK 细胞杀伤。
这些结果为疫苗制备提供了新的思路和方法。
Dudley ME 等[16]实验显示，被采用转移的NK 细胞在体内产生了扩张，就像T 细胞的免疫治疗一样，NK 细胞对肿瘤细胞产生了免疫治疗作用。
另有最近报道阐述了NK 细胞工程学的巨大潜能。
NK 细胞对抑制急性淋巴白血病细胞上的CD19 受体和活化性受体的表达表现出了强大的细胞毒作用17]。
