2018届高三一轮总复习高中生物选修1习题：专题2微生物的培养与应用课时作业5

选修1专题2微生物的培养与应用复习（练）1. 若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起，采用下列哪组培养基可将它们分离( )A. 加食盐的培养基和蛋白胨培养基B. 伊红一美蓝培养基和无氮培养基C. 加青霉素的培养基和液体培养基D. 斜面培养基和液体培养基【答案】B【解析】用伊红一美蓝培养基培养大肠杆菌时，大肠杆菌的菌落呈现黑色；圆褐固氮菌具有固氮能力，可以在无氮培养基中生长繁殖；因此若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起，可采用伊红一美蓝培养基和无氮培养基将它们分离，B正确，ACD错误。

2. 下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是( )A. 能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因B. 此培养基是天然鉴别培养基C. 此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准D. 此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中【答案】D【解析】据表分析：此表表示鉴定大肠杆菌的合成培养基。

微生物的培养基的营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐，有的还会有生长因子等。

由于青霉素抑制细菌的生长繁殖的作用，所以该培养基一般不适合培养大肠杆菌。

能在此培养基上生长的大肠杆菌，抗青霉素的抗性基因一般位于大肠杆菌的质粒上，A错误；此培养基中含牛肉膏，属于天然成分，所以属于天然培养基，B错误；此培养基只能用来检测自来水中大肠杆菌含量是否符合饮用水标准，C错误；大肠杆菌常作为基因工程的工程菌，此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中，D正确。

3.关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是（）A．在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养C．检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功D．检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点（带）【答案】A【解析】先加硫酸形成酸性环境，再加重铬酸钾溶液检测酒精，A错。

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第十二单元第二讲微生物的培养与应用1．据报道，从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标,“细菌门"事件引起公众的普遍关注。

葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂,在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环.请回答下列问题。

（1）某兴趣小组欲检测某果汁类食品中是否含有葡萄球菌，请帮他们完善下列实验步骤。

①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节pH，分装到锥形瓶后进行________，在无菌状态下加入卵黄液（100 mL 10％灭菌NaCl 溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀后立即倒平板。

②接种：取待检果汁2.5 mL加入22.5 mL灭菌生理盐水中,制成接种样液。

实验组：将接种样液用________法接种在含卵黄的固体培养基上。

对照组：将________接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为空白对照.将上述接种后的培养皿同时放在36 ℃的恒温箱中培养48 h。

③观察：观察培养基表面________________________________.(2)培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供________。

葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶液，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液可以将它分离出来，此培养基属于________培养基。

课时分层训练(三十七)(建议用时：45分钟)A组基础达标)1.(2017·广西四市高三联考)如图是某细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。

回答下列问题。

(1)在________(填图中编号)区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是________个细菌。

据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是________(用编号表示)。

(2)下表是某微生物培养基成分。

编号成分含量编号成分含量①粉状硫10 g ②(NH4)2SO40.4 g ③K2HPO4 4 g ④MgSO49.25 g ⑤FeSO40.5 g ⑥CaCl20.5 g ⑦H2O 100 mL ———②若要鉴别纤维素分解菌，可用________法，若要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入________。

【解析】 (1)从图中可知，②号区域出现了单个菌落；1个菌落最初是由1个细菌形成；根据线条数量可判断，划线的顺序依次是①→③→②。

(2)自生固氮菌是异养生物，能自身固氮而获得氮源，但自身无法获得碳源，因而培养基中应添加碳源去掉氮源。

鉴别纤维素分解菌可用刚果红染色法，要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入酚红指示剂。

【答案】 (1)② 1 ①→③→② (2)①碳源氮源②刚果红染色酚红指示剂2．(2017·汕头市二模)我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。

某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲，伊红美蓝培养基配方如图乙。

回答下列相关问题：(1)图甲中滤膜的孔径应____________(填“大于”或“小于”)大肠杆菌。

受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？___________________。

(2)配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入____________(一种营养成分)，以及____________。

伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于____________培养基。

第2讲微生物的培养与应用考点一| 微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

(2)营养构成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。

此外还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。

(3)①种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。

②下表为某微生物培养基的成分该培养基中可以为微生物提供碳源的是葡萄糖，加入了琼脂。

2．无菌技术(1)关键：防止外来杂菌的入侵。

(2)不同对象的无菌操作方法(连线)：【答案】①—b—Ⅰ②—b—Ⅱ③、④—a ⑤—a—Ⅲ、Ⅳ⑥—b3．大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基―→―→―→―→(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。

②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。

③接种方法：下图甲可表示用平板划线法接种获得的平板；下图乙可表示用稀释涂布平板法接种获得的平板。

④纯化原理：上图甲菌体的分散是通过一系列的连续划线操作实现的；上图乙菌体的分散是通过一系列的梯度稀释和涂布平板操作实现的。

4．菌种的保存方法(1)对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。

(2)对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。

1．培养基(1)培养基的成分(1)平板划线法：平板划线法中细胞的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的划线和移动过程中。

在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成纯种的单个菌落。

(如下图)几种划线方法示意图(2)稀释涂布平板法：10倍系列稀释操作。

①将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌，并按101～106的顺序编号。

②进行梯度稀释时，从菌液开始，每次从前一试管中取1 mL 溶液注入到下一试管中混匀。

③进行涂布平板操作。

视角 1 考查微生物的纯化培养1．(2017·陕西师范附中模拟)工厂废水的妥善处理是减轻现代化工业水污染的重要举措。

选修一第2讲微生物的培养与应用知能达标训练真题演练1．(2018·高考海南卷)关于微生物的叙述，错误的是A．T2噬菌体由蛋白质和RNA组成B．蓝藻无叶绿体，但能进行光合作用C．通过诱变育种可获得青霉素高产菌株D．赤霉菌分泌的赤霉素可促进植物生长解析T2噬菌体由蛋白质外壳和DNA组成；蓝藻无叶绿体，但含有叶绿素和藻蓝素，可进行光合作用；一般情况下，青霉菌进行无性生殖，通过诱变育种可获得青霉素高产菌株；赤霉素可促进细胞伸长，从而显著地促进植物生长。

答案 A2．(2018·高考海南卷)野生型大肠杆菌能在基本培养基上生长，用射线照射野生型大肠杆菌得到一突变株，该突变株在基本培养基上培养时必须添加氨基酸甲后才能生长。

对这一实验结果的解释，不合理的是A．野生型大肠杆菌可以合成氨基酸甲B．野生型大肠杆菌代谢可能不需要氨基酸甲C．该突变株可能无法产生氨基酸甲合成所需的酶D．该突变株中合成氨基酸甲所需酶的功能可能丧失解析野生型大肠杆菌在基本培养基上能生长，突变型大肠杆菌在基本培养基上不能生长，必须添加氨基酸甲后才能生长，说明野生型大肠杆菌能利用基本培养基的成分合成氨基酸甲，突变型大肠杆菌不能合成氨基酸甲，可能是缺少合成氨基酸甲所需要的酶，或者该酶的功能丧失。

答案 B3．(2018·山东理综)生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。

科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用____________、____________方法从油料作物中提取。

(2)筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供________，培养基灭菌采用的最适方法是________法。

(3)测定培养液中微生物数量，可选用________法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______________，以确定其应用价值；为除低生物柴油生产成本，可利用________技术使脂肪酶能够重复使用。

微生物的培养与应用一、选择题1．下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是( )A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C．分离出土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的唯一氮源答案：A 解析：微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法；分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度，因为不同的微生物在土壤中的含量不同；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的唯一氮源。

2．某学者欲从被石油污染过的土壤中分离出能分解石油的细菌，并从中筛选出分解石油能力较强的菌株，基本操作过程为采集菌种→选择培养→纯种分离→性能测定。

下列叙述错误的是( )A．应选用以石油为唯一碳源的选择培养基B．可通过多次选择培养的方式来达到分离和纯化目的菌的目的C．单菌落周围分解圈小的菌株的降解能力强D．接种后需将平板倒置且需一个未接种的培养基作对照答案：C 解析：C选项，降解石油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈越大。

3．下列有关微生物培养的叙述中，不正确的是( )A．获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染B．单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法C．培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌D．倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落答案：C 解析：培养基都需要灭菌，但要根据实际情况选择灭菌的方法，如果培养基的营养物质在高温条件下易分解，则不能使用高压蒸汽灭菌法。

4．用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验，下列相关叙述错误的是( )A．对照组培养基用量的大小与实验组必须绝对相同B．对照培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物C．对照组和实验组的培养基要置于相同条件下培养D．确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的实验组平板进行计数答案：A 解析：在该实验中，对照组培养基用量和实验组要基本一致，并不要求绝对相同，实验中也很难达到绝对相同。

课时分层作业三十八微生物的培养与应用(30分钟100分)1.(8分)(2018·唐山模拟)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。

某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。

分析回答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上。

从功能上讲，该培养基属于________培养基。

(2)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。

(3)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________等。

无菌技术要求实验操作应在酒精灯______________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

【解析】(1)欲筛选出能高效降解原油的菌株，培养基中应只含有原油而无其他碳源，这样不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存，这类培养基属于选择培养基。

(2)降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈越大。

(3)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。

无菌技术要求整个实验过程都在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

答案：(1)原油选择(2)强(3)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰2.(10分)营养缺陷型菌株的诱导和筛选能培育优良的发酵菌种。

如图是赖氨酸依赖营养缺陷型菌株的诱导与筛选过程示意图，过程③是在过程②培养的基础上往培养基中添加了某种物质继续培养。

据图分析回答：(1)图中紫外线处理可使野生型菌株中出现营养缺陷菌株，从变异的角度分析，这种变异属于________。

(2)从营养物质的成分角度分析，过程②所用培养基的特点是__________。

从物理状态的角度分析，该培养基为________培养基。

(3)过程③往培养基中添加的某种物质是______________。

图中菌落较________(填“大”或“小”)的菌株即为赖氨酸依赖营养缺陷型菌株，原因是__________________________________________________________________。

生物高考总复习选修一：【专题2：微生物的培养与应用】精编综合练习题1、[选修一：生物技术实践专题]聚对苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料类水瓶的重要原料,科学家发现了以PET为碳源和能量来源的细菌，该发现对PET类材料的回收利用、环境治理意义重大。

请回答下列问题：（1）实验小组欲从土壤中获取PET降解菌,需将土壤样品置于________为唯一碳源的培养基中进行选择培养，其目的是。

（2）该实验小组选取PET浓度为800mg·L-1的富集液进行系列稀释，分别取10-3、10-4和10-5倍数的稀释液0.1 mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，各平板的菌落数分别为（286、298、297)，(35、32、31),(36、7、2),不适合用于计数的为________倍数的稀释液,用另外两组稀释倍数的稀释液进行计数得到的细菌数不一致的原因可能是。

（3）倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是。

在倒平板的过程中，如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，则这个平板不能用来培养大肠杆菌，原因是。

用平板划线法纯化PET降解菌的过程中，在第二次及其后的划线操作时,须从上一次划线的末端开始划线，原因是。

（4）在保藏PET降解菌菌种时，可采取的方法进行长期保存。

【答案】（1）PET 增加PET降解菌的浓度，以确保能分离得到目的菌（2）10-5稀释倍数为10-3时，更多的菌落连在一起最终形成单菌落，导致结果小于稀释倍数为10-4组的结果（3）灭菌，防止微生物污染空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生使细菌数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落（4）甘油管藏【解析】试题分析：熟记并理解微生物的实验室培养、微生物的分离与鉴定等相关基础知识、形成清晰的知识网络。

在此基础上从题意中提取信息并进行作答。

(1) 欲从土壤中获取PET降解菌,需将土壤样品置于以PET为唯一碳源的培养基中进行选择培养，其目的是增加PET降解菌的浓度，以确保能分离得到目的菌。

第2讲微生物的培养和应用一、单项选择题（每小题给出的四个选项中只有一个符合题目要求)1．下列关于统计菌落数目方法的叙述，错误的是（C）A．采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的菌落数B．当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值作为统计结果[解析]当两个或多个活菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。

一般选择菌落数在30~300的平板计数，密度过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性.至少涂布3个平板,作为重复组，取其平均值计数能增强实验的说服力和准确性。

2．下列是从土壤中筛选纤维素分解菌的实验步骤，正确的是（C）①土壤取样②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中③吸取0。

1 mL进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A．①→②→③→④ B.①→③→②→④C．①→②→④→③ D.①→④→②→③[解析］在分离土壤中某细菌时，应先选取土样（10 g),然后加无菌水获得土壤浸出液，并进行不同倍数稀释，最后将稀释液涂布到培养基表面进行培养，并分离和计数.3．（2019·甘肃武威十八中高三月考)关于培养基的配制说法不正确的是（B）A．在配制培养乳酸杆菌的培养基时，需加入维生素B．微生物的适应性强，配制培养基时可以不考虑pHC．虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐D．配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例[解析］培养基除需要满足碳源、氮源、水和无机盐几种营养物质外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，如培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，A 正确；B错误；虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐，C正确;不同微生物的生长对各种营养物质的需求不同，配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例，D正确.4．（2020·北京高三期末)下列有关微生物培养的叙述正确的是(D）A．通常使用液体培养基分离获得细菌单菌落B．若培养基需要调节pH,应该在灭菌后进行C．用显微镜直接计数固体培养基中微生物数量D．倒置平板可防止培养基被滴落的冷凝水污染[解析］常用固体或半固体培养基分离获得细菌单菌落，液体培养基无法分离，A错误；若培养基需要调节pH，应该在灭菌前进行,B错误；显微镜直接计数法是测定培养液中微生物数量的方法，固体培养基上用稀释涂布法直接计数单个菌落数，C错误；平板倒置是避免冷凝的液体掉到培养基上，污染培养基，D正确.5．(2018·上海高三）下表是培养某种细菌的培养基。