液相色谱常见问题及处理方法
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高效液相色谱仪常见故障及解决方法一、泵故障1. 故障现象:泵无法正常启动或启动后无法正常停止。
解决方法:检查泵头是否有污物堵塞,清除污物;检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好,如有松动,重新插紧。
2. 故障现象:泵的流量不稳定或无法调节。
解决方法:检查泵头是否有污物堵塞,清除污物;检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好,如有松动,重新插紧;检查泵头与柱塞之间的密封圈是否损坏,如损坏,更换密封圈。
二、流动相跑空1. 故障现象:流动相液位下降至最低液位以下,导致无法正常进样。
解决方法:检查流动相的储液瓶是否已空,如已空,重新更换储液瓶;检查流动相的流速设置是否正确,如不正确,重新设置流速;检查管路是否有泄漏点,如存在泄漏点,修复泄漏点。
2. 故障现象:流动相液位迅速下降,导致无法正常进样。
解决方法:检查废液瓶是否已满,如已满,倾倒废液;检查管路是否有堵塞或弯折,如有,更换管路或调整管路布局。
三、峰面积重复性差1. 故障现象:同一色谱条件下,每次运行同一色谱图时,峰面积重复性差。
解决方法:检查进样阀的切换次数是否过多,如过多,减少切换次数;检查进样针的清洗是否彻底,如不彻底,加强清洗;检查样品前处理的稳定性是否可靠,如不可靠,重新进行样品前处理。
2. 故障现象:不同色谱条件下,每次运行同一色谱图时,峰面积重复性差。
解决方法:检查流动相的组成是否恒定,如不恒定,重新配制流动相;检查色谱柱的稳定性是否可靠,如不可靠,更换色谱柱;检查检测器的波长是否准确,如不准确,重新调整波长。
四、峰丢失1. 故障现象:在色谱图中看不到预期的峰。
解决方法:检查进样针是否堵塞或断裂,如堵塞或断裂,更换进样针;检查进样阀的切换次数是否过多,如过多,减少切换次数;检查样品前处理是否可靠,如不可靠,重新进行样品前处理。
2. 故障现象:在流动相中添加了某种物质后,出现了预期之外的峰。
解决方法:检查流动相中添加的物质是否稳定,如不稳定,重新配制流动相;检查检测器的灵敏度是否足够高,如不够高,调整灵敏度;检查色谱柱的类型是否正确,如不正确,更换色谱柱。
高效液相色谱常见故障及解决方案1.压力过高或过低-压力过高可能是由于柱堵塞或流动阻力增加所致。
解决方案包括更换柱、清洗柱或检查管路是否存在问题。
-压力过低可能是由于泵的磁力搅拌器不工作或进样器封堵所致。
解决方案包括检查泵的磁力搅拌器是否工作正常,清洗进样器。
2.峰形不对称-峰形不对称可能是由于进样量不均匀或柱温度过高所致。
解决方案包括确保进样量均匀和降低柱温度。
3.峰尾或前肩-峰尾可能是由于柱温度过高、流速过快或流动相pH值不合适所致。
解决方案包括降低柱温度、减慢流速或调整pH值。
-前肩可能是由于流动相中存在杂质或柱堵塞所致。
解决方案包括更换流动相或清洗柱。
4.杂峰或基线噪声-杂峰可能是由于样品纯度不高、固定相老化或试剂污染所致。
解决方案包括提高样品纯度、更换固定相或检查试剂是否污染。
-基线噪声可能是由于进样器密封不良、流动相气泡或电噪声所致。
解决方案包括检查进样器密封情况、减少流动相中的气泡或检查电子设备是否存在干扰。
5.柱寿命短-柱寿命短可能是由于样品预处理不彻底、柱收尾不当或流动相pH值不合适所致。
解决方案包括增加样品预处理步骤、正确收尾柱或选择合适的流动相pH值。
6.流量不稳定-流量不稳定可能是由于柱堵塞、进样器密封不良或流动相流速波动所致。
解决方案包括清洗柱、检查进样器密封情况或调整流动相流速稳定性。
7.进样量偏差-进样量偏差可能是由于进样器封堵、进样器针头磨损或进样器流速不稳定所致。
解决方案包括清洗进样器、更换进样器针头或调整进样器流速稳定性。
8.柱温度不稳定-柱温度不稳定可能是由于温控系统故障或环境温度变化所致。
解决方案包括检查温控系统是否工作正常或采取措施保持恒定环境温度。
这些是HPLC常见故障及其解决方案的例子。
在实际操作中,操作人员应该根据具体情况诊断和解决故障,并遵循相关的操作规程和安全操作指南。
液相色谱仪常见故障分析及解决要点液相色谱仪作为一种常用的分析仪器,经常会遇到一些故障。
以下是液相色谱仪常见故障的分析及解决要点:1.噪声增加:可能原因:进样器泄漏、柱床固定不良、柱床老化、流体系统不稳定等。
解决方法:检查进样器和柱床的连接,更换柱床,检查流体系统并重新校准。
2.峰形畸变:可能原因:柱床老化、进样器问题、流体系统堵塞等。
解决方法:更换柱床、清洗进样器、检查流体系统并进行维护。
3.基线漂移:可能原因:溶剂质量不纯、流体系统不稳定、进样器问题等。
解决方法:更换纯净溶剂、检查流体系统并重新校准、清洗进样器。
4.压力异常:可能原因:流体系统堵塞、泵的柱床老化、柱床压力限制等。
解决方法:清洗流体系统、更换柱床、检查柱床的压力限制。
5.进样器问题:可能原因:进样器泄漏、进样器柱床老化、进样器阀门不灵活等。
解决方法:检查进样器的连接,更换进样器柱床,润滑进样器阀门。
6.柱温控制问题:可能原因:柱温控制器故障、柱床老化、温度传感器问题等。
解决方法:更换柱温控制器、更换柱床、校准温度传感器。
7.柱床老化:可能原因:使用时间过长、样品残留、溶剂残留等。
解决方法:更换柱床、进行柱床维护、清洗柱床。
8.溶剂选择错误:可能原因:溶剂质量不纯、溶剂选择不适合分析物等。
解决方法:更换纯净溶剂、重新选择合适的溶剂。
9.柱床堵塞:可能原因:样品残留、溶剂残留、柱床老化等。
解决方法:清洗柱床、更换柱床、进行柱床维护。
10.柱床压力限制:可能原因:柱床老化、流量设置不合理等。
解决方法:更换柱床、重新设置流量。
在解决液相色谱仪常见故障时,需要注意以下要点:确定故障现象,并记录下来,有助于分析和解决问题。
了解仪器的正常工作原理,对比故障现象,定位故障的可能原因。
逐一排除故障可能原因,一步一步进行检查和测试,从最简单的可能原因开始排除。
如果无法解决故障,及时向仪器供应商或相关专家咨询,并提供详细的故障描述和测试结果。
定期进行仪器的维护和保养,包括清洗柱床、更换柱床、校准流量和温度等。
液相色谱图谱常见问题及解决办法液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。
其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而有些问题必须通过修改操作程序来解决。
本文汇总了一些关于液相色谱图谱问题的解决办法,这些办法也许能更有效的帮你解决问题。
一、峰拖尾原因和解决方法1、筛板阻塞a、反冲色谱柱b、更换进口筛板c、更换色谱柱2、色谱柱塌陷填充色谱柱3、干扰峰a、使用更长的色谱柱b、改变流动相或更换色谱柱4、流动相PH选择错误调整PH值。
对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰5、样品与填料表面的溶化点发生反应a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂b、更改色谱柱二、峰前延原因和解决方法1、柱温低升高柱温2、样品溶剂选择不恰当使用流动相作为样品溶剂3、样品过载降低样品含量4、色谱柱损坏更换色谱柱三、峰分叉原因和解决方法1、保护柱或分析柱污染取下保护柱再进行分析。
如果必要更换保护柱。
如果分析柱阻塞,拆下来清洗。
如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的再生措施。
如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。
2、样品溶剂不溶于流动相改变样品溶剂。
如果可能采取流动相作为样品溶剂。
四、峰变形原因和解决方法1、样品过载减少样品载量五、早出的峰变形原因和解决方法1、样品溶剂选择不恰当a、减少进样体积b、运用低极性样品溶剂六、早出峰拖尾程度大于晚出峰原因和解决方法1、柱外效应a、调整系统连接(使用更短、内径更小的管路)b、使用小体积的流通池七、K’增加时,脱尾更严重原因和解决方法1、二级保留效应,反相模式a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)c、加入盐或缓冲剂(或离子化样品)d、更换一支柱子2、二级保留效应,正相模式a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)c、加入水(或多官能团化合物)d、试用另一种方法3、二级保留效应,离子对加入三乙胺(或碱性样品)八、酸性或碱性化合物的峰拖尾原因和解决方法1、缓冲不合适a、使用浓度50-100mM的缓冲液b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液九、额外的峰原因和解决方法1、样品中有其他组份2、前一次进样的洗脱峰a、增加运行时间或梯度斜率b、提高流速3、空位或鬼峰a、检查流动相是否纯净b、使用流动相作为样品溶剂c、减少进样体积十、保留时间波动原因和解决方法1、温控不当调好柱温2、流动相组分变化防止变化(蒸发、反应等)3、色谱柱没有平衡在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱十一、保留时间不断变化原因和解决方法1、流速变化重新设定流速2、泵中有气泡从泵中除去气泡3、流动相选择不恰当a、更换合适的流动相b、选择合适的混合流动相十二、基线漂移原因和解决方法1、柱温波动控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器2、流动相不均匀。
液相色谱仪常见问题及处理方法嘿,咱今儿就来唠唠这液相色谱仪!这玩意儿在实验室里那可是个大宝贝呢,但它有时候也会闹点小脾气,出现些常见问题。
比如说啊,压力异常!这就好比人头疼一样,得找找原因呀。
是不是管路堵啦?那咱就得像疏通河道似的,把那些堵塞的地方给清理干净。
或者是色谱柱出问题啦?那可得好好检查检查。
这压力异常就像是车子跑着跑着突然没劲儿了,得赶紧找到症结所在,不然实验可没法好好进行啦!还有啊,基线不稳!这就好像心电图乱跳一样,让人心里没底呀。
是不是流动相有问题呢?咱得看看是不是过期啦,或者里面有啥杂质。
又或者是仪器本身不稳定?那可得好好调试调试。
基线不稳就像是走在崎岖的路上,摇摇晃晃的,得把路给铺平咯。
再说说峰形异常吧!这就好像人的脸长得歪七扭八的,多难看呀。
是不是进样有问题呀?样品没处理好,或者进样量不合适。
这就像是做饭,盐放多了放少了味道都不对。
或者是色谱柱不合适?那就得换换柱子试试。
峰形异常可不能马虎,这关系到实验结果的准确性呢!那遇到这些问题咋处理呢?别急,咱慢慢说。
对于压力异常,先从简单的开始排查呀,看看管路,清理清理。
要是还不行,再看看色谱柱,实在不行,还可以请教请教专业人士嘛。
就像人生病了,先自己吃点药试试,不行就赶紧去看医生。
基线不稳呢,那就得仔细检查流动相啦,确保它的纯净。
仪器也得维护好,该擦擦该保养的不能偷懒。
这就像爱护自己的宝贝车子,定期保养才能跑得顺畅呀。
峰形异常的话,进样可得小心啦,处理好样品,控制好进样量。
柱子不合适就换,不能将就。
这就好比穿衣服,不合身就得换,不能硬穿呀。
咱用这液相色谱仪呀,就得像对待好朋友一样,熟悉它的脾气,了解它的习性。
平时多爱护,出了问题也别慌张,冷静处理。
你想想,要是你对它好,它能不好好给你工作吗?这可是相互的呀!咱做实验不就是为了得出准确的结果嘛,这仪器就是咱的得力助手,可得伺候好咯!所以呀,遇到问题别怕,办法总比困难多,咱只要用心,肯定能让这液相色谱仪乖乖听话,为咱的实验助力!。
液相色谱柱的常见问题与解决方法及解决方案液相色谱柱在使用过程中常见的问题有柱压上升、峰拖尾变宽、分别效果下降等。
一般情况下这些都是色谱柱使用时间过长引起的正常现象,只需对色谱柱进行清洗与再生便可解决。
但是假如柱压蓦地上升,则需要检查色谱柱是否显现问题。
可能的原因有以下几点:1.柱头的过滤筛板被污染解决方法:卸下柱头螺丝,将过滤筛板取下,放置在30%左右的稀硝酸中,然后用超声波清洗10分钟。
再将过滤筛板放入超纯水,超声清洗约10分钟,之后将过滤筛板重新装回色谱柱。
2.填料被污染解决方法:①卸下柱头螺丝,将前端被污染的填料用专用小匙挖出,然后重新填入相同的填料。
②选择合适的流动相,按色谱柱使用的方向冲洗,冲洗量须大于色谱柱体积的20倍,将污染物溶解并冲杰出谱柱,然后,依照色谱柱标明的箭头方向使用。
3.缓冲盐溶液碰到纯有机相析出盐结晶,堵塞色谱柱解决方法:先用冲洗色谱柱,将盐晶体溶解并冲杰出谱柱,然后换高浓度甲醇水溶液或其他有机溶剂作为流动相。
4.流动相的PH值偏差过大,造成固定相溶解或结构被破坏解决方法:此时很难将色谱柱修复通常需要直接更换色谱柱。
高效液相色谱仪常见问题及解决方法高效液相色谱仪作为一种高精密仪器,假如在使用过程中不依照正确操作的话,就简单导致一些问题。
其中常见的有柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。
一、液相色谱仪压力过低压力过低的现象一般是由于系统泄漏,处理方法:找寻各个接口处,特别是色谱柱两端的接口,把泄漏的地方旋紧即可。
当然还有一个原因就是泵里进了空气,但此时表现的往往是压力不稳,忽高忽低,更严重一点会导致泵无法吸上液体。
处理方法:打开Purge阀,用3~5ml/min的流速冲洗,假如不行,则要用专用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。
二、液相色谱仪柱压问题柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要紧密注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分别效果及保留时间等紧密相关。
所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。
液相色谱仪常见故障的处理方法液相色谱仪是一种常用的分析仪器,广泛应用于制药、化工、环境等领域。
然而,液相色谱仪在运行中难免会遇到故障,这些故障如果不及时处理,将会影响分析结果的准确性和可靠性。
下面就介绍一些液相色谱仪常见故障的处理方法。
一、泵系统故障1.1 压力稳定性差当液相色谱仪中的某一个压力降较大时,其稳定性会变差。
此时可以尝试根据实际情况适当调整流速或空气泡数量,并检查泵的活塞是否顺畅,是否需要更换。
1.2 漏气在进行某些特殊的分析时,需要使用无气泡溶剂,如果出现漏气,可能会使得分离柱床压缩,导致分离效应减弱。
此时需要及时检查泵的密封性,并根据实际情况更换密封圈或换泵头。
二、检测器故障2.1 检测器响应不稳定液相色谱仪的检测器响应不稳定可能会影响分析结果的准确性和可靠性。
一些常见的影响因素包括:灯丝寿命、流量计的稳定性、载气的纯度等。
针对这些因素,可以通过更换灯丝、清洁流量计和更换或加入更纯的载气来解决。
2.2 信号噪声过大如果检测器的信号噪声过大,可能会干扰峰的分析,导致分析结果不准确。
这时可以尝试调整检测器的增益、检测器和信号放大器的设置,或者更换检测器的灯丝和各种电子元器件。
三、自动取样器故障3.1 管道堵塞当自动取样器采样管道出现堵塞时,会使得样品无法正常进入分析系统,从而导致分析结果的不准确。
此时可以尝试使用针筒或吸头进行清洗,注意不要损坏管道,或者更换采样针头。
3.2 移液量不准确液相色谱仪的自动取样器需要能够准确地移液,否则可能会影响分析结果的可重复性。
一些常见的影响因素包括:采样针头的污染、吸头容量的错误等。
这时可以尝试更换采样针头,或者重新校正吸头容量。
四、其他故障4.1 通道阻塞当液相色谱仪中的通道出现阻塞时,会使得分离效应不理想,从而影响分析结果。
此时可以尝试使用清洗溶液进行清洗,或者更换分析柱。
4.2 控制系统故障液相色谱仪的控制系统故障可能会影响仪器的正常运行。
对于这种情况,可以尝试重启控制系统,检查控制系统的电源和通信线路。
高效液相色谱法一.仪器的维护与常见问题处理若液相出现规律性基线波动,长时间不平稳可能原因是什么?快速解决方法:一般为仪器系统出现气泡,最好使用纯甲醇长时间冲洗系统(不少于3小时,特殊情况要12小时左右)柱压逐渐升高可能原因是什么?快速判断①色谱柱出现堵塞②针座堵塞③进样针出现堵塞④系统管路中有未冲洗干净的盐⑤滤芯脏了解决方法①色谱柱出现堵塞:一种是将堵塞了色谱柱的位置拆卸,取出里面的筛网用水或甲醇超解(不建议采用,除非没有其他方法)另一种是将堵塞一头色谱柱链接在仪器上另一头不要链接,先用10%甲醇根据色谱柱柱压调节流速冲洗一小时左右,然后换成纯甲醇再以此方法继续冲洗,根据其柱压随时调整流速。
②针座堵塞与进样针出现堵塞:情况不严重则将它们拆卸后用水超解几分钟就可以了,若堵塞严重只有更换新的(堵塞不代表不能用,若无明显的质量损坏如:变形,滑口,开裂等,后续修好后还能做备件使用)③系统管路中有未冲洗干净的盐:用水或10%异丙醇对系统冲洗,冲洗后柱压正常,则可正常使用。
(注意不建议对系统反冲洗,会造成管路中的残留盐类物质重新回到系统中造成二次堵塞。
)④滤芯脏了:更换滤芯若出现保留时间飘移可能原因是什么?快速判断原因:①流动相混合不均匀②柱温不稳③压力不稳④密封圈松动⑤对于是四元泵的液相,其比例阀区域有堵塞情况(流动相是按比例配置,若比例阀区域堵塞,进样第一针时,可能有一个阀只进入25%另一个阀则是75%,进样第二针时则会变成一个阀进入20%,另一个阀80%)快速解决方法:①流动相重新配置,并按要求混匀②保证环境温度与仪器设定温度相差不大并稳定③系统冲洗平衡后方能实验④更换或调整密封圈⑤将出现堵塞区域的设备进行超声清洗。
1.气相检验化学残留:对照品重复性必须符合要求,但供试品重复性不做要求(上海海尼是对照品重复性必须符合要求,但配置两个供试品,各进一针不计算重复性。
目前海陵是对照品与供试品都要计算重复性)液相进样针无法正常采集?解决方法:一般为仪器机械故障,若进样器显示信号一直为红色,可能是进样针损坏或机械臂故障。
液相色谱常见问题及处理方法HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法1.样品量不足,解决办法为增加样品量2.样品未从柱子中流出。
可根据样品的化学性质改变流动相或柱子3.样品与检测器不匹配。
根据样品化学性质调整波长或改换检测器4.检测器衰减太多。
调整衰减即可。
5.检测器时间常数太大。
解决办法为降低时间参数6.检测器池窗污染。
解决办法为清洗池窗。
7.检测池中有气泡。
解决办法为排气。
8.记录仪测压范围不当。
调整电压范围即可。
9.流动相流量不合适。
调整流速即可。
10.检测器与记录仪超出校正曲线。
解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。
为什么HPLC柱柱压过高柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。
其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因。
1.拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;2.把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查;3.将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动池)。
这时,如果柱压仍不下降,再检查;4.更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。
若柱压还高,请与厂商联系。
一般情况下,在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题,SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。
液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?1.筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。
2.存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化漂移现象1.温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定2.流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3.柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡快速变化现象1. 流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定2.泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。
3.流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合HPLC 仪器问题1、我的HPLC泵压明显的偏高,请问可能的原因?答:流速设定过高;流动相或进样中有机械杂质,造成保护柱、柱前筛板或在线过滤器阻塞;流动相粘度过大;柱温过低;缓冲盐结晶;压力传感器故障。
2、基线不稳,上下波动或漂移的原因是什么,如何解决?答:a.流动相有溶解气体;用超声波脱气15-30分钟或用充氦气脱气b.单向阀堵塞;取下单向阀,用超声波在纯水中超20分钟左右,去处堵塞物c.泵密封损坏,造成压力波动;更换泵密封d.系统存在漏液点;确定漏液位置并维修f.柱后产生气泡;流通池出液口加负压调整器g.检测器没有设定在最大吸收波长处;将波长调整至最大吸收波长处h.柱平衡慢,特别是流动相发生变化时;用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
3、接头处为何经常漏液,如何处理?答:接头没有拧紧;拧松后再紧,手紧接头以手劲为限,不要使用工具,不锈钢接头先用手拧紧,再用专用扳手紧1/4-1/2圈,注意接头中的管路一定要通到底,否则会留下死体积。
接头被污染或磨损;建议更换接头。
接头不匹配,建议使用同一品牌的配件。
4、进样阀漏液是如何造成的?答:a.转子密封损坏;更换转子密封b.定量环阻塞;清洗或更换定量环c.进样口密封松动;调整松紧度d.进样针头尺寸不合适,一般是过短;使用恰当的进样针(注意针头形状)e.废液管中产生虹吸;清空废液管谱图问题1、问:造成峰拖尾的原因是什么,如何消除?答:a.筛板阻塞;反冲色谱柱、更换进口筛板b.色谱柱塌陷;填充色谱柱c.有干扰物质的存在;使用更长的色谱柱、改变流动相或更换色谱柱e.流动相PH值不合适;调整PH值,对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰f.样品与填料表面的溶化点发生反应;加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂或更改色谱柱2、问:造成峰分叉的原因是什么,如何消除?答:保护柱或分析柱污染;取下保护柱再进行分析。
如果必要更换保护柱。
如果分析柱阻塞,拆下来清洗。
如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的再生措施。
如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。
样品溶剂不溶于流动相;改变样品溶剂,如果可能采取流动相作为样品溶剂。
3、问:K''值增加时,拖尾更严重,这是为什么?答:反相模式,二级保留效应;a.加入三乙胺(或碱性样品)b.加入乙酸(或酸性样品)c.加入盐或缓冲剂(或离子化样品)d.更换一支柱子4、问:保留时间的波动有几种可能的原因?答:温控不当;调节好柱温。
流动相组分变化;防止流动相蒸发、反应等,做梯度时尤其要注意流动相混合的均匀。
色谱柱没有平衡;在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。
液相色谱常用符号与术语表ACN 乙腈 AcetonitrileAUFS 满量程的吸光度单位Absorbance units, full scaleAs 峰不对称因子B 二元流动相中的强溶剂;例如:反相HPLC的甲醇/水混合液中的甲醇BSA 牛血清白蛋白(一种蛋白质)Bovine serum albuminCAF 咖啡因(中性溶质) CaffeineCRF 色谱响应因子Chromatographic response function;色谱图总分离度的定量指标dc 色谱柱内径(cm)DMOA 二甲基辛胺 DimethyloctylamineDNB 2,4-二硝基甲酰(基)2,4-Dinitrobenzoyldp 色谱柱填料的粒度(cm)DRYLAB 液相资源公司(LC Resources INC.)的计算机模拟软件。
DRYLAB I用于等度预测,DRYLAB G用于梯度预测F 流动相的流速(ml/min)FC-113 1,1,2-三氟-1,2,2-三氯乙烷GPC 凝胶渗透色谱法 Gel-permeation chromatographyHA 酸性溶质,能电离出A-Hex 己烷 Hexanehr 二相邻谱带之间的谷高HV A 高香草酸 Homovanillic acidh1,h2 相邻谱峰1和谱峰2的峰高IEC 离子交换色谱法 Ion-exchange chromatographyIP 离子对 Ion-pairIPC 离子对色谱法 Ion-pair chromatographyJ 色谱峰强度参数K’ 所给谱峰的容量因子,k’=(tR-t0)/t0=tR’/t0,tR=t0(1+k’)k 梯度洗脱过程中,某溶质的k’的平均值或有效值kw 以水做流动相k’的外推值k1,k2 相邻谱峰1和谱峰2的容量因子L 色谱柱长度(cm)Lc 检测器流动池光路的长度(cm)M 溶质的分子量MC 二氯甲烷 Methylene chlorideMDST 混合设计统计技术Mixture-design statistical technique;一种优化流动相的软件MeOH 甲醇 MethanolMTBE 甲基叔丁醚 Methyl-t-butyl etherMW 溶质的分子量N 色谱柱塔板数NAPA N-乙酰普鲁卡因胺 N-Acetylprocainamide(碱性溶质)N0 检测器的基线噪音ODS 十八烷基硅烷 OctadecylsilylP 色谱柱的压力降[通常以巴(bar)表示,也用psi;另外,也用作柱极性参数PA 普鲁卡因胺 Procainamide(碱性物质)PAH 聚芳香烃 Polyaromatic HydrocarbonPESOS 优化流动相的计算机软件(美国Perkin-Elmer产品)pKa 溶质酸性常数的负对数;当pH=pKa时,溶质中有一半是电离的Rk 保留值范围,Rk=(最末谱峰k’)/(最初谱峰k’)RRM 相对分离度图(通常N=10000)Rs 相邻二谱峰的分离度S 当流动相中的%B改变时,测量溶质保留值的变化速率的参数SAL 水杨酸 Salicylic AcidSEC 尺寸排阻色谱法 Size-exclusion chromatographyS/N 信噪比Signal to noise ratiot 分离时间(min)(样品进样时t=0)tp 梯度系统的滞后时间(min)TBA 四丁基铵离子 Tetrabutylammonium ionTEA 三乙胺 TriethylamineTHF 四氢呋喃 Tetrahydrofurantk 在用于校正等度洗脱溶剂强度的流动相离开梯度混合器时,梯度洗脱的时间TLC 薄层色谱法 Thin-layer chromatographyTMA 四甲基铵 Tetramethylammonium(盐)TMS 三甲基硅烷 Trimethylsilylt0 色谱柱的死时间(min)tR 溶质的保留时间(min)tG 梯度时间(min),即梯度开始至结束的时间t1,t2 相邻谱峰1和谱峰2的保留时间(min)ti 色谱图中第一峰的保留时间(min)tf 色谱图中最末峰的保留时间(min)△-titg tfUV 紫外光Vm 色谱柱的死体积(mL),Vm=t0FVMA 香草扁桃酸 Vanillymandelic acidwm 化合物的进样量w1,w2 相邻谱峰1和谱峰2于半峰高处(W1/2)的宽度(min)W1,W2 相邻谱峰1和谱峰2的基线宽度(min)W1/2 半峰高处的谱带宽度xd,xe,xn 溶剂选择参数,分别用于测定溶剂的酸度、碱度和偶极性的程度? 分离因子,?=k2/k1△梯度洗脱期间流动相成分的变化??o 溶剂强度参数? 化合物的克分子吸收系数? 流动相的粘度(Pa•s)? 流动相中强溶剂的体积份数%B 二元流动相中强溶剂的体积百分比(%v)液相色谱法简介气相色谱不能由色谱图直接给出未知物的定性结果,而必须由已知标准作对照定性。
当无纯物质对照时,定性鉴定就很困难,这时需借助质谱、红外和化学法等配合。
另外大多数金属盐类和热稳定性差的物质还不能分析。
此缺点可高效液相色谱法来克服。
在经典液相色谱的基础上,引入了气相色谱的理论与技术,在70年代初建立了高效液相色谱分析法(以HPLC表示)。
在常压下操作的液相色谱,分离一个样品往往长达几小时至几十小时,因此工作效率很低。
人们曾对这种经典液相色谱法试用了柱前加压或柱后减压的办法来提高流速,以缩短分离时间,但是结果失败了。
根据液相色谱理论,因为随着载液(流动相)流速的提高,板高则增大,所以柱效会显着降低。
随着生产技术的提高,人们制成了细小(<10?m)而高效的填充物,从而使柱效大大提高。