常用10种培养基的配置和质控标准
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摘要:1、营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养1、营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤) 100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。
用途:1.一般棉拭子均接种此培养基。
2.尿液,脓液3.分离细菌标本用。
3、基础培养基(肉膏汤BB)成份:蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。
用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。
2 作普通琼脂斜面。
4、血液培养基(大管肉汤培养基)成份:1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0.493/100毫升] 49.3% 1毫升4 枸椽酸钠0.3g制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。
用途:作血,骨髓培养用。
5、肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)成份:蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25(22)克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0.5%美兰溶液20毫升制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。
培养基的配方培养基是一个特殊的化学组合物,它提供了生命体的生长和繁殖所需的营养物和环境。
培养基的配方需要考虑生长物种的生态和代谢需求,因此在制备不同类型的培养基时,需要考虑多个因素,例如酸碱度、离子浓度、碳源和氮源等。
以下是一些常见的培养基及其配方:1. Luria-Bertani(LB)培养基常用于大肠杆菌等细菌的生长。
- 水:1升- 蛋白胨:10克- 酵母浸出物:5克- 氯化钠:10克2. 玉米粉蔗糖琼脂培养基(MSA)用于分离和鉴定溶血性金黄色葡萄球菌。
- 水:1升- 葡萄糖:1克- 蛋白胨:2.5克- 氯化钠:5克- 琼脂:13.5克- 鲜红色表面指示剂:0.025克3. 营养琼脂培养基用于多种细菌和真菌的生长。
- 水:1升- 蛋白胨:5克- 酵母浸出物:1克- 葡萄糖:10克- 氯化钠:5克- 磷酸二氢钾:2.5克- 琼脂:15克4. 大肠杆菌液体培养基(LB Broth)与LB培养基类似,但用于液体培养。
- 水:1升- 酵母浸出物:5克- 氯化钠:10克5. 洁净液体培养基(tryptic soy broth)普遍用于微生物学实验。
- 水:1升- 蛋白胨酶胨水解物:17克- 大豆胨酸盐:3克- 氯化钠:5克- 氯化钾:2.5克- 磷酸氢二钠:2.5克- 琼脂:3克以上是一些常见的培养基配方。
每种培养基的配方都有特定的应用和优点,为微生物学研究和应用提供了广泛的选择。
当然,在不同实验条件下,可能需要微调培养基的成分和比例,以获得最佳的生长和生物学特性。
常用培养基配制方法:(1)基础盐培养基(MSM):(NH4)2SO42.0g,MgSO4·7H2O0.2g,CaCl2·2H2O 0.01g,FeSO4·7H2O0.001g,Na2HPO4·12H2O1.5g,KH2PO41.5g,蒸馏水1000 mL。
(2)LB培养基:蛋白胨10g,酵母提取物5g,氯化钠5g,蒸馏水1000 mL,pH7.5。
(3)高氏合成1号培养基:硝酸钾1g,磷酸氢二钾0.5g,硫酸镁0.5g,氯化钠0.5g,硫酸亚铁0.01g,可溶性淀粉20g,蒸馏水1000mL。
(4)查彼氏培养基:硝酸钠2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,蒸馏水1000mL。
(5)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20 g,蒸馏水1000mL。
将无病马铃薯洗净去皮切碎,加蒸馏水1000mL,煮沸0.5 h,纱布过滤,滤液加蒸馏水补足1000mL,再加入葡萄糖,然后分装三角瓶灭菌备用。
(6)铵察氏琼脂培养基:氯化铵2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000 mL。
(7)克氏合成1号琼脂培养基:磷酸氢二钾1g,碳酸镁0.3g,氯化钠0.2 g,硝酸钾1g,硫酸亚铁0.01g,碳酸钙0.5g,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(8)葡萄糖天门冬素琼脂培养基:葡萄糖10g,天门冬素0.5g,磷酸氢二钾0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(9)葡萄糖酵母膏琼脂培养基:葡萄糖10g,酵母膏10g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(10)瓦氏肉汁琼脂培养基:蛋白胨5g,葡萄糖10g,牛肉膏10g,氯化钠5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(11)淀粉琼脂培养基:可溶性淀粉10g,碳酸镁1g,磷酸氢二钾0.3g,氯化钠0.5g,硝酸钠1g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
.常用培养基的制备(1)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和马铃薯蔗糖琼脂(PSA)培养基培养真菌最常用的培养基,成分如下:去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15-20g 水1000 ml配制方法:将马铃薯洗净去皮,称取200 g,切成小块(不必大小)放入锅中,加水1000ml,煮沸半小时,稍冷后用双层纱布过滤,在滤液中加蔗糖20g,加水补足到1000ml。
配成的培养基一般呈酸性,用于培养真菌,可以不必调pH。
如配制固体培养基,在加蔗糖前先加15-20g 琼胶加热熔化,最后加入蔗糖,混匀并加水补是至1000ml,趁热分装在试管或三角瓶中。
标准试管(15×150mm)分装量如下:一般用作斜面培养的每试管装培养基3-5ml,用作平面培养的每试管约10ml,加棉花塞后灭菌。
培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性(pH7.0左右)。
(2)牛肉汁蛋白胨培养基(NA)是培养细菌最常用的培养基,又称营养琼脂或肉汤培养基。
成分如下:酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖(或葡萄糖)l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法:称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用,在其余水中加入琼脂,加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀,然后加水补足到1000 ml,用NaOH或HCL调整至pH7.0,趁热分装,加棉花塞后灭菌。
(3)玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片,洗净后剪成1㎝2左右的小块,放在250ml的三角瓶中,盛放量一般为三角瓶的1/3,然后加少量的水以保持湿润,加棉花塞后灭菌。
天然培养基一般不必调整pH。
(4)查氏(Czapek)培养基查氏培养基是一种组合培养基,其成分如下:NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5gFeSO4 0.01g 蔗糖30g水1000ml(5)灭菌水的配制蒸馏水(或自来水)经过灭菌处理即成灭菌水,是实验室用量最大的必备品之一,常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种,包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。
下面以常用的LB培养基和M9培养基为例,介绍它们的配制方法。
1. LB培养基(Luria-Bertani agar)LB培养基是一种通用培养基,适用于许多不同类型的细菌。
它由三种主要成分组成:蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下:-蛋白胨:10克-酵母提取物:5克-NaCl:10克-精制水:1000毫升步骤如下:1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水,搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中,并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子,盖上盖子,并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌,或者将瓶子放入高压灭菌器中,将压力调至15磅(每平方英寸)。
2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基,常用于细菌的生长和培养。
它的配方相对简单,由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下:-Na2HPO4:6克-KH2PO4:3克-NaCl:0.5克-NH4Cl:1克-葡萄糖:0.4克-维生素B1:0.1克-精制水:1000毫升步骤如下:1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水,搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1,搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中,并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子,盖上盖子,并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌,或者将瓶子放入高压灭菌器中,将压力调至15磅(每平方英寸)。
以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。
当然,实验室中还有很多其他种类的培养基,它们的配制方法也各有不同,需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。
在培养基配制过程中,应当注意严格按照配方比例配制,保持清洁卫生,避免污染,并注意高压灭菌的操作安全。
培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。
其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。
以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法:1. LB培养基(Luria-Bertani)LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基,其配方包括:- 1% 蛋白胨(tryptone): 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉(yeast extract): 提供维生素和生长因子-1%NaCl(氯化钠):调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入1.5%的琼脂。
2. YPD培养基(Yeast extract-Peptone-Dextrose)YPD培养基常用于酵母菌的培养,其配方包括:- 1% 酵母提取物(yeast extract): 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨(peptone): 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖(dextrose): 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入2%的琼脂。
3. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基,其配方包括:-10%胎牛血清(FBS):提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液(Penicillin-Streptomycin Solution): 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺(L-Glutamine): 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中,调整pH值至7.4,混合均匀即可。
实验室常用培养基配方1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是最为常用的一种培养基,用于微生物的一般培养、分离和鉴定,其配方如下:-水:1000mL-肉浸膏或胨:三到五克-水解酪蛋白:五克-氯化钠:五克-琼脂:十五克2. 培养基ONE(BHI Agar)培养基ONE用于灭菌后的微生物收集、保存和复苏,配方如下:-砂糖:十五克-胨:二十克-水:1000mL-酵母膏:二十克-酵母蛋白胨:十克-溶血素:十克-十%NaCl:五百毫升-甘油:百毫升3. 霍乱弧菌选择性琼脂培养基(TCBS Agar)TCBS Agar用于霍乱弧菌的分离和检测,配方如下:-水:1000mL-TCBS粉:一百克4. MacConkey琼脂培养基(MacConkey Agar)MacConkey琼脂培养基是一种选择性琼脂培养基,用于大肠杆菌的分离和检测,配方如下:-水:1000mL-肉浸膏:十七克-水解酪蛋白:十五克-氯化钠:五克-紫蘑菇素:六十毫克-琼脂:十五克5. Sabouraud琼脂培养基(Sabouraud Agar)Sabouraud琼脂培养基用于真菌的分离和培养-水:1000mL-葡萄糖:四十克-琼脂:十五克-氯化钠:五克-氯已二维硫酸钾:二十克这些仅仅是一些常见的培养基配方,实验室常根据不同微生物的要求而有所调整。
此外,还有许多特殊的培养基用于特殊微生物的培养和分离,如MRS培养基用于乳酸菌、EC培养基用于大肠杆菌O157:H7等。
在使用培养基时,需要注意权威的文献和生产厂家的指导。
培养基质量控制背景介绍:培养基是微生物学研究中常用的一种实验材料,它提供了微生物生长所需的营养物质和环境条件。
为了保证实验结果的准确性和可重复性,培养基的质量控制至关重要。
本文将详细介绍培养基质量控制的标准格式文本。
一、培养基配方1. 培养基名称:XXX培养基2. 组成成分:- 碳源:葡萄糖(20g/L)- 氮源:酵母提取物(10g/L)- 矿物质:氯化钠(5g/L)、磷酸二氢钾(2g/L)、硫酸镁(0.5g/L)- pH调节剂:琼脂糖(15g/L)- 其他添加剂:抗生素(如青霉素、链霉素等,按需添加)二、培养基制备方法1. 称取所需质量的各组分,加入适量的蒸馏水中。
2. 用磁力搅拌器搅拌溶解,直至所有组分溶解均匀。
3. 调节pH值至目标值(如pH 7.0),可使用盐酸或氢氧化钠溶液进行调节。
4. 加入琼脂糖,再次搅拌均匀。
5. 将培养基分装到适量的培养瓶或试管中。
6. 对培养瓶或试管进行高压灭菌处理,以确保培养基的无菌状态。
三、培养基质量控制1. pH值检测:- 使用pH计或试纸对培养基的pH值进行测量。
- 目标pH值为7.0,允许误差范围为±0.2。
- 如发现pH值偏离目标范围,应重新调整并重新测量。
2. 溶解度检测:- 将培养基样品加入适量的蒸馏水中,并充分搅拌溶解。
- 观察培养基是否完全溶解,如有残渣或沉淀,则说明溶解度不符合要求。
3. 灭菌效果检测:- 取一部分培养基样品,进行高压灭菌处理。
- 将灭菌后的培养基样品培养于适宜的微生物菌种上,观察是否有任何细菌或真菌的生长。
- 如有生长,说明灭菌效果不符合要求,需要重新进行灭菌处理。
4. 营养成分检测:- 使用相应的化学分析方法,对培养基中的营养成分进行定量分析。
- 比较分析结果与配方中的预期值,判断培养基中各成分的含量是否符合要求。
5. 质量控制记录:- 对每一批次制备的培养基进行记录,包括配方、制备过程、检测结果等。
- 如发现质量问题,及时进行整改,并记录整改措施和效果。
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同,因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是一种通用的培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基(Nutrient Broth)营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,高压灭菌,分装,即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基(MacConkey Agar)大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基,用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为:蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基(Sabouraud Dextrose Agar)Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为:脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基(Vogel-Johnson Agar)VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属(如克雷伯菌)的培养基。
其配方为:葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸,冷却至55-60°C,加入胆盐酯高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
小结:常用10种培养基的配置和质控标准(1)基础肉汤成分和配制方法:蛋白胨10gNaCl5g牛肉膏5g酵母膏3gDW1LpH~15磅30min高压灭菌,倾注无菌试管备用。
每次新配制时做质控阳性质控:ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种基础肉汤中,35℃温箱24h肉汤混浊。
无菌试验:<100管抽检5%,>100管随机抽取10管未接种的基础肉汤35℃温箱24h培养,无细菌生长。
平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做用途:供培养对营养要求不高的细菌增菌用;作其他选择培养基的基础液。
储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。
培养基:2-8℃保存一个月(2)普通营养琼脂成分和配制方法:基础肉汤100ml琼脂2g15磅30min高压灭菌,倾注平板备用。
注:可购买国内生产的瓶装营养琼脂粉,按上面的说明配制。
质量控制:质控频度每次新配制时做质控质控方法阳性质控:ATCC 25923金黄色葡萄球菌或ATCC25922大肠埃希菌接种营养琼脂上,35℃温箱24h细菌生长良好。
无菌试验:<100块抽检5%,>100块随机抽取10管未接种的营养琼脂35℃温箱24h培养,无细菌生长。
平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做用途:供培养对营养要求不高的细菌。
作无糖基础培养基。
加血成血平板。
加血加热75℃以上,再加上生长添加剂就成巧克力平板。
储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。
培养基:2-8℃保存半个月(3)葡萄糖肉汤成分和配制方法:蛋白胨10g朊胨10gNaCl5g牛肉膏5g酵母粉3g葡萄糖4g枸橼酸钠3g硫酸镁3gDW1LpH~%酚红5ml15磅30min高压灭菌,备用质量控制:质控频度每次新配制时做质控质控方法阳性质控:ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种葡萄糖肉汤中,35℃温箱24h肉汤混浊。
无菌试验:<100管抽检5%,>100管随机抽取10管未接种的葡萄糖肉汤35℃温箱24h培养,无细菌生长。
平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做用途:供培养对营养要求不高的细菌增菌用。
6 储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。
培养基:2-8℃保存一个月(4)血液琼脂平板成分和配制方法:(法国生物梅里埃成品培养基)4g琼脂基础+100mL蒸馏水高压灭菌(15磅、121℃)20min冷却至50℃加入5%-10%无菌羊(兔)血倾注于无菌平皿内(φ9mm)每一个平皿分装13~15ml。
质量控制:质控频度每次新配制时做质控质控方法阳性质控:ATCC 6303肺炎链球菌(或质控菌株)和ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂,35℃温箱24h细菌生长良好。
ATCC 6303肺炎链球菌为α溶血。
ATCC 25923金黄色葡萄球菌为β溶血。
无菌试验:<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的血液琼脂35℃温箱24h培养,无细菌生长。
平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做用途:供分离培养营养要求较高的细菌。
储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。
培养基:2-8℃保存半个月注意事项:制备血平板时,温度必须适宜,琼脂应冷至50℃左右,如温度过高,可使血液变色不易观察溶血,温度过低,琼脂凝固与血液不易混合。
使用的血液以羊血,兔血为好,不宜使用人血,因人血中有抗体、补体不利细菌生长。
羊血对链球菌、葡萄球菌的溶血比较满意,但可抑制脑膜炎奈瑟氏菌与嗜血杆菌的生长。
(5)血液琼脂平板(国产)普通营养琼脂粉 3.8克+100ml蒸馏水10%葡萄糖血液6~10ml冷却至50℃加入5%-10%无菌羊(兔)血倾注于无菌平皿内(φ9mm)每一个平皿分装13~15ml。
质控方法阳性质控:ATCC 6303肺炎链球菌(或质控菌株)和ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂,35℃温箱24h细菌生长良好。
ATCC 6303肺炎链球菌为α溶血。
ATCC 25923金黄色葡萄球菌为β溶血。
无菌试验:<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的血液琼脂35℃温箱24h培养,无细菌生长。
平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做用途:供分离培养营养要求较高的细菌。
储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。
培养基:2-8℃保存半个月注意事项:制备血平板时,温度必须适宜,琼脂应冷至50℃左右,如温度过高,可使血液变色不易观察溶血,温度过低,琼脂凝固与血液不易混合。
使用的血液以羊血,兔血为好,不宜使用人血,因人血中有抗体、补体不利细菌生长。
羊血对链球菌、葡萄球菌的溶血比较满意,但可抑制脑膜炎奈瑟氏菌与嗜血杆菌的生长。
(6)巧克力平板成分和配制方法:基础肉汤100ml琼脂粉 1.5g无菌脱纤维兔血10ml方法:高压灭菌后,冷至80—85℃加入兔血,混匀置85℃水浴10—15min,使血液由鲜红色变为巧克力色。
取出,当冷至50℃时倾注平板,经无菌试验后,保存冰箱中备用。
质控方法阳性质控:ATCC10211流感嗜血杆菌或ATCC49619淋病奈瑟菌,35℃,5%CO2温箱24-48h,细菌生长良好。
无菌试验:<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的巧克力平板35℃5%CO2温箱24-48h培养,无细菌生长。
平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做用途:分离培养脑膜炎奈瑟氏菌,嗜血杆菌。
淋病奈瑟氏菌的分离培养。
储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。
培养基:2-8℃保存半个月(7)双糖培养基基础液胰蛋白胨10gNaCl5g牛肉膏5gDW1LpH%酚红液6ml制备:(1)基础液500ml葡萄糖1g琼脂 2.5g(2)基础液500ml乳糖5g琼脂7.5g制法:10磅20min高压灭菌高,先将葡萄糖倒入无菌试管内1/3处凝固后,再将乳糖加入2/3处,置成斜面。
质量控制:质控频度每次新配制时做质控质控方法阳性质控:将福氏痢疾杆菌(卫生部临床检验中心质控菌株)接种于双糖培养基中,生长良好,上层为红色/下层为无色。
阴性质控:将ATCC27853接种于双糖培养基中,35℃温箱24-48h培养生长良好,上层下层均为红色。
无菌试验:<100管抽检5%,>100管随机抽取10管未接种的双糖培养基35℃温箱24-48h培养,无细菌生长。
平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做。
用途:用于分离培养肠道致病菌。
储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。
培养基:2-8℃保存半个月(8)MH培养基成分和配制方法:可使用国产(北京奥博星生物技术有限公司)或法国生物梅里埃成品培养基配制:3.8g M-H琼脂基础+100mL蒸馏水高压灭菌(15磅、121℃)20min冷却至50℃倾倒平皿,厚度4mm质量控制:质控频度每次新配制时做质控质控方法阳性质控:ATCC25923、ATCC25922接种于MH培养基上,35℃温箱24-48h培养,细菌生长良好。
无菌试验:<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的MH培养基35℃温箱24-48h培养,无细菌生长。
平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做。
用途:用于非苛养菌的KB法药敏试验用。
储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。
培养基:2-8℃保存半个月(9)沙保弱培养基成分:蛋白胨10克,琼脂20克,麦芽糖40克,水1000毫升。
方法:于1000ml水中加入上述成分,加热煮沸,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,趁热调PH到,定量分装于烧瓶内(每瓶100ml),高压灭菌,倾注于无菌平皿内(φ9mm)每一个平皿分装13—15ml。
待凝固后,于37℃培养18—24h,如无细菌生长,置冰箱中备用。
质控频度每次新配制时做质控质控方法阳性质控:ATCC90028接种于沙保罗平板上,35℃温箱24-48h培养生长良好。
无菌试验:<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的沙保罗培养基35℃温箱24-48h培养,无细菌生长。
平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做。
用途:真菌的分离培养用。
储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。
培养基:2-8℃保存半个月(10)念珠菌显色培养基成分:由琼脂、蛋白胨、色素、氯霉素等组成配制方法:准确称取科玛嘉念珠菌显色琼脂粉47.7克,加蒸馏水1000毫升,并在玻璃容器壁上标记液面刻度,边搅拌边加热到完全溶解,不要用蒸锅消毒,冷却到45℃后,用氨水矫正PH至,摇匀,将其倾注入一次性无菌培养皿中制成平板,使平板深度为3mm左右。
质控频度每次新配制时做质控质控方法阳性质控:ATCC90028接种于念珠菌显色培养基上,35℃温箱24-48h培养生长良好,菌落为翠绿色。
无菌试验:<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的沙保罗培养基35℃温箱24-48h培养,无细菌生长。
平行试验:质控时,要求新旧批号的培养基同时做。
用途:念珠菌的常规鉴定用。
储存干粉:室温保存,由于容易受潮,所以开瓶后务必将盖拧紧。
培养基:2-8℃保存半个月基础质控标准1分离培养基质控细菌生化实验质控。