(完整版)基因工程的基本工具练习题及答案

第3章第1节重组DNA技术的基本工具A级必备知识基础练1.下列有关基因工程的叙述,正确的是()A.基因工程是细胞水平上的生物工程B.基因工程能定向改造生物的性状C.基因工程的产物对生物都有利D.基因工程引起的变异属于基因突变2.[2023吉林长春高二月考]科学家把兔子血红蛋白基因导入大肠杆菌细胞中,在大肠杆菌细胞中合成了兔子的血红蛋白。

下列关于这一先进技术的理论依据不正确的是()A.所有生物共用一套遗传密码B.基因能控制蛋白质的合成C.兔子血红蛋白基因与大肠杆菌的DNA都是由四种脱氧核苷酸构成,都遵循相同的碱基互补配对原则D.兔子与大肠杆菌有共同的原始祖先3.在基因工程操作过程中,DNA连接酶的作用是()A.将任意两个DNA片段连接起来B.将具有相同黏性末端的DNA片段连接起来,包括DNA片段和碱基对之间的氢键C.连接具有相同黏性末端或平末端的DNA片段,即形成磷酸二酯键D.只连接具有相同黏性末端的DNA片段碱基对之间的氢键4.下图表示限制酶切割某DNA分子的过程,从图中可知,该限制酶能识别的碱基序列及切割位点是()A.5'-CTTAAG-3',切点在C和T之间B.5'-CTTAAG-3',切点在G和A之间C.5'-GAATTC-3',切点在G和A之间D.5'-CTTAAC-3',切点在C和T之间5.下图表示三种酶分别作用于DNA分子的不同部位,①②③这三种酶依次是()A.DNA连接酶、限制酶、解旋酶B.限制酶、解旋酶、DNA连接酶C.解旋酶、限制酶、DNA连接酶D.限制酶、DNA连接酶、解旋酶6.[2023吉林省实验中学高二期中]下列关于基因工程的说法,正确的有()①基因工程是在DNA分子水平进行设计和施工的②重组DNA技术所用的工具包括限制酶、DNA连接酶、载体③限制酶主要是从真核生物中分离纯化出来的④E.coli DNA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端⑤DNA连接酶都是从原核生物中分离得到的⑥载体质粒可采用抗生素抗性基因作为筛选的标记基因⑦质粒是基因工程中唯一用作运载目的基因的载体⑧基因工程的原理为基因重组A.3项B.4项C.5项D.6项7.作为基因的运输工具——载体,必须具备的条件之一及理由正确的是()A.能够在受体细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因B.其有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达C.具有某些标记基因,以使目的基因能够与其结合D.对受体细胞无伤害,以便于重组DNA的鉴定和选择8.[2023广东潮州高二期中]下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述,正确的是()A.限制酶将DNA双链切割成两条单链B.同种限制酶既可以切割含目的基因的DNA片段又可以切割质粒,因此不具有专一性C.序列5'-CTAG↓-3'和3'-G↓GATCC-5'被限制酶切出的黏性末端相同D.E.coli DNA连接酶能催化平末端和黏性末端的连接9.[2023黑龙江齐齐哈尔高二月考]下列关于如图所示黏性末端的说法,错误的是()A.DNA连接酶能催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键B.甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的C.切割甲的限制酶也能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子D.甲、乙黏性末端可形成重组DNA分子10.下表关于DNA粗提取与鉴定实验的表述,不正确的是()11.图1和图2分别表示限制酶Eco R Ⅰ和SmaⅠ的作用示意图。

DNA重组技术的基本工具(建议用时：40分钟)1．下列关于限制酶的说法，正确的是( )A．限制酶广泛存在于各种生物中，其化学本质是蛋白质B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D．限制酶均特异性地识别由6个核苷酸组成的序列B解析限制酶主要存在于微生物中，A项错误；限制酶具有专一性，即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，B项正确；限制酶切割DNA后会形成黏性末端或平末端，C项错误；限制酶均能特异性地识别核苷酸序列，但识别序列的长度不一定是6个核苷酸，D项错误。

2．下列关于基因工程操作过程中所使用的工具，叙述正确的是( )A．限制酶的作用是识别并切割DNA片段中的任意序列B．DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端C．利用质粒在宿主细胞内对目的基因进行大量扩增的过程可以称为克隆D．含有目的基因的重组DNA分子成功导入受体细胞后，会使受体细胞发生基因突变C解析限制酶的作用是特异性识别和切割DNA分子，A项错误；DNA连接酶可以连接双链DNA片段互补的黏性末端或平末端，B项错误；在生物学上，克隆是指选择性地复制出一段DNA序列(分子克隆)、细胞(细胞克隆)或个体(个体克隆)，C项正确；基因工程的原理是基因重组，D项错误。

3．下列有关基因工程的叙述，正确的是( )A．DNA连接酶的作用是使互补的黏性末端之间发生碱基A与T、C与G之间的连接B．基因工程中最常使用的载体是大肠杆菌C．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞并可促进目的基因的表达D．基因工程造成的变异，实质上相当于人为的基因重组，但却产生了定向变异D解析DNA连接酶连接的是磷酸二酯键，而不是A与T、C与G之间的氢键，A项错误；基因工程中最常使用的载体是质粒，B项错误；载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞，但不能促进目的基因的表达，C项错误；基因工程能按照人们的意愿定向改造生物的性状，其原理是基因重组，D项正确。

基因工程原理练习题及其答案一、填空题1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。

2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。

3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。

4．碱裂解提取溶液I中的葡萄糖的作用________________、_______________、______________________________。

5．同一质粒不同构型在电泳过程中迁移速率为。

6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。

7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。

8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。

9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。

10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。

11．EGTA是____________离子螯合剂。

12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。

13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。

14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。

2019版生物选择性必修3 课后集训第3章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具题组一基因工程的概念及诞生和发展1．下列叙述符合基因工程概念的是()A．在细胞内直接将目的基因与宿主细胞的遗传物质进行重组，赋予生物新的遗传特性B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的大肠杆菌菌株C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上2．下列有关基因工程诞生的说法，不正确的是()A．基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的B．工具酶和载体的发现使基因工程的实施成为可能C．遗传密码的破译为基因的分离和合成提供了理论依据D．基因工程必须在同物种间进行题组二限制酶和DNA连接酶3．根据下图判断，下列有关工具酶功能的叙述，错误的是()A．限制酶可以切断a处B．DNA聚合酶可以连接a处C．解旋酶可以使b处解开D．DNA连接酶可以连接c处4．下列有关如图所示的黏性末端的说法，错误的是()A．甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的B．甲、乙具有相同的黏性末端，可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能C．DNA连接酶的作用位点是b处D．切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段5．有关DNA重组技术的工具酶的叙述，正确的是()A．限制性内切核酸酶能切割烟草花叶病毒的核酸B ．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C ．所有DNA 连接酶都能连接黏性末端和平末端D ．DNA 连接酶和DNA 聚合酶均可用来拼接DNA 片段6．下列有关限制性内切核酸酶的叙述，正确的是( )A ．用限制酶切割一个DNA 分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个B ．限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA 中出现的概率就越大C ．限制性内切核酸酶的活性不受温度、pH 等条件的影响D ．只有用相同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒 题组三 基因进入受体细胞的载体7．下列关于基因工程操作工具——载体的叙述中，错误的是( )A ．质粒作为常见的载体，不仅存在于细菌中，某些病毒也具有B ．作为基因工程的载体，标记基因不可或缺C ．目的基因插入载体时，有特定的插入位点D ．构建重组DNA 分子时需DNA 连接酶和限制性内切核酸酶等8．限制酶Mun Ⅰ和限制酶Eco R Ⅰ的识别序列及切割位点分别是－CA ↓ A TTG －和－GA ↓ATTC －。

专题1 基因工程 1。

1 DNA重组技术的基本工具（练)1。

基因工程操作所使用的工具中，被称为基因“剪刀”的是（）A．限制酶 B．DNA连接酶C．DNA聚合酶 D．RNA聚合酶【答案】A2。

不属于质粒被选为基因运载体的理由是：( )A．能复制 B．有多个限制酶切点C．具有标记基因 D．它是环状DNA【答案】D【解析】作为运载体能在受体细胞中友好寄居且自主复制有多个限制酶切点，为了便于检测,常常选择具有标记基因的质粒，至于运载体是不是环状并不重要，所以选D。

3。

下列关于DNA连接酶的叙述,正确的是（）A．DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键B．DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖C．DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖D．同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端【答案】B【解析】解：A、DNA连接酶连接的是两个DNA片段之间的磷酸二酯键，A错误；BC、DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖，B正确,C错误；D、DNA连接酶不能切割DNA形成黏性末端,D错误．4.属于“分子缝合针”的是（ )①E·coliDNA连接酶②T4DNA连接酶③DNA聚合酶④解旋酶⑤RNA聚合酶A．①②③ B．①② C．①②⑤ D．②④【答案】B【解析】E•coli DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,①正确；T4DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，②正确；DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键，③错误; 解旋酶能使DNA双链解开，断裂的键是氢键，④错误；RNA聚合酶能催化转录过程，形成磷酸二酯键，合成的是mRNA，⑤错误.5。

限制酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，不同的限制酶可以对不同的核酸序列进行剪切.现用E、H、P三种不同的限制酶对一段大小6．2kb的线状DNA进行剪切后，用凝胶电泳分离各核酸片段，实验结果如图所示，这3种不同的限制酶在此DNA片段上相应切点的位置是（）【答案】D6.下图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是( ）A．DNA连接酶、限制性内切酶、解旋酶B．限制性内切酶、解旋酶、DNA连接酶C．解旋酶、限制性内切酶、DNA连接酶D．限制性内切酶、DNA连接酶、解旋酶【答案】C【解析】①处为氢键，是解旋酶的作用部位；②处为磷酸二酯键,是限制酶的作用部位;③处为两个DNA片段的缺口,是DNA连接酶的作用部位。

DNA重组技术的基本工具课后练习(1)1．反转录过程不涉及的酶是（）A．DNA聚合酶 B．逆转录酶 C．核糖核酸酶 D．RNA聚合酶2．将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。

下列叙述错误的是（）A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子3．下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A．通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理质粒的DNAB．DNA连接酶和载体是构建重组质粒必需的工具酶C．可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D．质粒是广泛存在于细菌细胞质中的一种颗粒状的细胞器4．要将目的基因与载体连接起来，在基因操作上应选用（）A．只需DNA连接酶 B．同一种限制酶和DNA连接酶C．只需限制酶 D．不同的限制酶与DNA连接酶5．质粒是基因工程中最常用的载体，它的主要特点是（）①能自主复制②不能自主复制③结构很小④是蛋白质⑤是环状RNA ⑥是环状DNA ⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦ B．①④⑥ C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦6．下列关于基因工程的有关叙述，正确的是( )A．限制性核酸内切酶的切口一定是GAATTC碱基序列的G和A之间B．一种限制性内切酶能识别几种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子C．质粒是一种常用运载体，是细胞染色体外或拟核外能自主复制的很小的环状DNA分子D．DNA连接酶可代替DNA聚合酶用于DNA的复制7．下列关于生物工程中常用的几种酶的叙述中，错误的是( )A．DNA连接酶可将目的基因与运载体黏性末端黏合，形成重组DNAB．限制酶能识别特定的核苷酸序列并打开碱基对间的氢键，用于提取目的基因C．纤维素酶、果胶酶可分解植物细胞壁，能用于植物体细胞杂交D．胰蛋白酶能使动物组织分散形成单个细胞，能用于动物细胞培养8．基因工程技术也称为DNA重组技术,其实施必须具备的四个必要条件是( )A．目的基因限制酶载体受体细胞B．重组DNA RNA聚合酶限制酶连接酶C．工具酶目的基因载体受体细胞D．模板DNA mRNA 质粒受体细胞9．下列有关将目的基因导入受体细胞的相关叙述，正确的是（）A．将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法B．植物的受体细胞只能是受精卵细胞C．基因枪法是将目的基因导入动物细胞中最为有效的方法D．将某种药用蛋白基因导入动物乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器10．不属于目的基因与运载体结合过程的是（）A．用一定限制酶切割质粒露出黏性末端B．用同种限制酶处理目的基因露出黏性末端C．将目的基因导入到受体细胞中进行扩增D．用DNA连接酶将目的基因和质粒连接参考答案：1．答案： D解析： RNA聚合酶是进行合成RNA的，其中的原料是DNA2．答案： C解析：每个限制性核酸内切酶识别位点处只能插入一个ada。

2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册第3章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具课程内容标准核心素养对接1.简述重组DNA技术所需的三种基本工具及其作用。

2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。

3.进行DNA的粗提取与鉴定。

1.科学思维——模拟重组DNA分子的操作过程，说出合成新DNA分子的基本原理。

2.科学探究——结合实验室条件，对DNA进行粗提取和鉴定。

知识点1基因工程及其诞生与发展1.基因工程的概念2.基因工程的诞生和发展(1)基因工程的诞生(2)基因工程的发展知识点2重组DNA技术的基本工具1.限制性内切核酸酶(简称限制酶)——“分子手术刀”是一类酶而不是一种酶对所连接的DNA片段两端的碱基序列没有专一性要求2.DNA连接酶——“分子缝合针”(1)作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键。

(2)种类3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”(1)常用载体——质粒①化学本质：质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。

②质粒作为载体所具备的条件及原因(2)其他载体：噬菌体、动植物病毒等。

(3)功能①相当于一种运输工具，将外源基因送入受体细胞。

②携带外源基因在受体细胞内大量复制。

(1)基因工程是人工操作导致的染色体变异，变异是不定向的(×)(2)S型细菌的DNA进入R型细菌并使R型细菌转化为S型细菌，发生了基因重组(√)(3)DNA连接酶可以连接目的基因与载体的氢键，形成重组DNA(×)(4)E.coli DNA连接酶既能连接黏性末端，又能连接平末端(×)(5)限制性内切核酸酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶(×)(6)新冠病毒(RNA病毒)可以作为基因工程的载体(×)教材P71图示拓展1.已知限制酶Eco RⅠ和SmaⅠ识别的碱基序列和酶切位点分别为和，分析回答下列问题：(1)在图中画出两种限制酶切割DNA后产生的末端。

基因工程试题及答案# 基因工程试题及答案## 一、选择题1. 基因工程中常用的工具酶是：A. 限制性内切酶B. DNA聚合酶C. 逆转录酶D. DNA连接酶2. 基因工程中，用于目的基因的克隆通常使用：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 转座子3. 下列哪项不是基因工程的应用领域？A. 农业改良B. 疾病治疗C. 能源开发D. 武器制造## 二、填空题1. 基因工程中，常用的宿主细胞包括________、________和________。

2. 基因枪法是一种________技术，可以将目的基因直接导入植物细胞。

## 三、简答题1. 简述基因工程的基本操作步骤。

2. 基因工程在医药领域的应用有哪些？## 四、论述题1. 论述基因工程对现代农业的影响及其潜在风险。

## 参考答案### 一、选择题1. 答案：A, D。

限制性内切酶和DNA连接酶是基因工程中用于切割和连接DNA片段的常用工具酶。

2. 答案：A。

质粒是基因工程中常用的载体，用于克隆和表达目的基因。

3. 答案：D。

基因工程的应用领域广泛，但武器制造不属于其应用范围。

### 二、填空题1. 答案：大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞。

这些是基因工程中常用的宿主细胞，用于表达外源基因。

2. 答案：基因转移。

基因枪法是一种基因转移技术，通过高速微粒子将DNA射入细胞内。

### 三、简答题1. 答案：基因工程的基本操作步骤包括：目的基因的获取、载体的选择与构建、目的基因与载体的连接、转化宿主细胞、筛选含有目的基因的细胞、目的基因的表达与检测。

2. 答案：基因工程在医药领域的应用包括：生产重组蛋白药物、基因治疗、疫苗开发、疾病诊断等。

### 四、论述题1. 答案：基因工程对现代农业的影响主要体现在作物改良、提高产量、增强抗病虫害能力等方面。

通过基因工程，可以培育出抗旱、抗盐碱、抗病的作物新品种，提高作物的适应性和产量。

然而，基因工程也存在潜在风险，如基因流可能导致非目标物种的基因改变，以及转基因作物对生态环境的影响等。

课时规范练52 基因工程的基本工具与操作程序必备知识基础练考点一重组DNA技术的基本工具1.(2023·广东汕头统考)“工欲善其事,必先利其器”,基因工程需用到多种工具。

下列关于基因工程的基本工具的说法,错误的是( )A.在构建基因表达载体时,通常用同种限制酶或能产生相同黏性末端的限制酶切割载体和含有目的基因的DNA片段B.E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶都能“缝合”黏性末端,恢复被限制酶切开的磷酸二酯键C.基因工程中真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行人工改造的D.基因工程中使用的载体还可以是各种病毒,如可以利用改造后的噬菌体将基因表达载体导入动物受精卵细胞2.下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述,正确的是( )A.用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口,有两个磷酸二酯键被断开B.限制酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的概率就越大C.序列—CATG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数不同D.T4 DNA连接酶和E.coli DNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接3.(2023·北京海淀模拟)科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜,培育出转基因抗病毒番木瓜,Ti质粒结构模式如图所示。

下列叙述正确的是( )A.农杆菌的T-DNA与番木瓜基因发生重组B.构建重组质粒需要限制酶和DNA聚合酶C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性D.转基因抗病番木瓜不具有卡那霉素抗性考点二基因工程的基本操作程序4.由于某目的基因酶切后的末端为平末端,载体E只有产生黏性末端的酶切位点,需借助中间载体P 将目的基因接入载体E。

据图分析,下列叙述正确的是( )A.通过PCR扩增获取目的基因是基因工程的核心工作B.为了便于该目的基因接入载体E,可用限制酶Eco RⅤ或SmaⅠ切割载体PC.载体P只能作为中间载体,是因为其没有表达该目的基因的启动子与终止子D.若受体细胞表现出抗性基因的相应性状,表明重组载体成功导入受体细胞5.(2023·福建龙岩模拟)为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量,研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因(Bapt)的超表达载体,并将其导入红豆杉细胞,具体流程如图。

基因工程练习题一、单项选择题1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中,一般需使用A。

同种限制酶 B.两种限制酶 C。

同种连接酶 D。

两种连接酶2．基因工程常用的受体有①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞A.①②③④B.①②③C.②③④ D。

①②④3．有关基因工程的叙述正确的是A。

限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成是在细胞内完成的C。

质粒都可作为载体 D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料4．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A。

细菌质粒 B.噬菌体 C。

动植物病毒 D.细菌核区的DNA5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。

在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是A。

人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞 D。

目的基因的检测表达6．不是基因工程方法生产的药物是A。

干扰素 B.白细胞介素 C.青霉素 D。

乙肝疫苗7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C。

限制酶和运载酶 D。

连接酶和运载酶8．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因 B。

决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制 D。

有一个或多个限制酶切点9．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。

在转基因技术中,这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测和选择D.使目的基因容易成功表达10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。

这里的基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B。

用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C。

合成β-球蛋白的DNAD。

合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段11．基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。

基因工程的基本工具及操作程序1某重点实验室课题研究组欲将一株野生杂草的抗病基因转给一双子叶农作物．该农作物含有高茎基因，植株过高容易倒伏，科学家欲通过基因工程操作抑制高茎基因的表达．基于上述目的科学家进行了基因工程的相关操作，结合所学知识分析下列问题：（1）课题研究组已经获得了抗性基因，欲体外大量扩增该目的基因需采用__ _技术，该技术的基本反应过程：目的基因受热变性后解链为单链，_ __与单链相应互补序列结合，然后在__ _的作用下进行延伸．（2）基因工程操作的核心是_ __，该过程用到的工具酶有__ _．本研究中，欲将目的基因转入受体细胞，常采用__ _法．答案：（1）PCR引物Taq酶（热稳定性DNA聚合酶）（2）基因表达载体的构建DNA连接酶和限制酶农杆菌转化3 RT-PCR是将RNA逆转录（过程Ⅰ）和cDNA的聚合酶链式扩增反应（过程Ⅱ）相结合的技术，具体过程如图1所示，图2为某兴趣小组设计的引物。

请分析回答下列问题：（1）过程Ⅰ主要涉及的酶是______。

进行过程Ⅱ的反应体系中常用的酶是______，二者都能催化______键的形成。

（2）过程Ⅰ和过程Ⅱ利用的原料______（填“相同”或“不同”或“不完全相同”）。

一般情况下，引物A和B的长度越长，G和C比例越高，则过程Ⅱ内循环步骤中的______（填“变性”或“退火”或“延伸”）温度设定就越高。

（3）该兴趣小组实验后发现几乎不能得到扩增产物，据图2分析其原因是__ ____。

改正后，过程Ⅱ中拟对m个单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要____ __个引物B。

（4）利用RT-PCR技术获取真核生物的目的基因通过转基因技术______（选填“可以”或“不可以”）在原核细胞中正确表达。

2答案：（1）逆转录酶Taq酶（耐高温的DNA聚合酶）磷酸二酯（2）相同退火（3）引物B自身会出现局部碱基互补配对（自身折叠）而失效m×（2n-1）（4）可以5 将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．请据图回答：（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在______酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在______作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的______序列，推测出响应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的______序列，再通过化学方法合成所需基因．（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有______、______、4种脱氧核糖核苷三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成．（3）由A和载体B拼接形成的C通常称为______．（4）在基因工程中，常用Ca2+处理D，其目的是___ ___．答案：（1）逆转录；DNA聚合酶；氨基酸；脱氧核苷酸；（2）引物；模板（A基因）；（3）基因表达载体；（4）使其成为感受态细胞，有利于吸收重组DNA分子；6 酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可生产食品和药品等．科学家将大麦细胞的LTP1基因植入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌种可产生LTP1蛋白，并酿出泡沫丰富的啤酒．基本的操作过程如下：（1）该技术定向改变了酵母菌的性状，这在可遗传变异的来源中属于_ __．（2）获取LTP1基因需要用到限制酶，此酶可以断开两个脱氧核苷酸间的___ （化学键）；然后用__ _技术扩增LTP1基因；为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内，所用的运载体是质粒，除此之外，还有__ _和动植物病毒也可作为基因工程中的运载体．（3）此操作中可以用分别含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选，则有C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是：在含有青霉素的培养基上_ __（能，不能）存活，在含有四环素的培养基上__ _（能，不能）存活．（4）C的组成部分中有一个叫做_ __，它是RNA聚合酶识别和结合部位．（5）除了看啤酒泡沫丰富与否外，还可以用__ _来检测LTP1基因在啤酒酵母菌中是否表达LTP1蛋白．答案：（1）基因重组（2）磷酸二酯键PCRλ噬菌体的衍生物（3）能不能（4）启动子（5）抗原-抗体杂交7 如图甲为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图．图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离，1Kb=1000个碱基对长度．请据图回答：（1）质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是_ __、__ _．（2）如果是两两重组，可能有___种长度的重组结果．（3）基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤．现运用_ __酶切质粒，完全酶切后进行电泳观察，若出现长度为1.1kb和__ _kb，或者_ __kb和_ __kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计）．（4）将筛选含有目的基因的重组质粒导入大肠杆菌的载体可以是__ _（多选）．A．质粒B．动物病毒C．噬菌体D．植物病毒（5）PvuⅠ能识别的序列和切点是-G↓GATCC-请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图．答案：（1）缺少标记基因复制原点被限制酶切割（2）3（3）EcoRⅠ5.6 3.1 3.6（4）A C（5）。

第2节基因工程的基本操作程序课时训练一、单项选择题：（每小题2分 13题3分，共40分）1、下列属于获取目的基因的方法的是①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取③从受体细胞中提取④利用PCR技术⑤利用DNA转录⑥人工合成A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④D．①②④⑥2、不属于目的基因与运载体结合过程的是A．用一定的限制酶切割质粒，露出黏性末端 B．用同种限制酶切割目的基因，露出黏性末端C．将切下的目的基因插入到质粒的切口处 D．将重组DNA引入到受体细胞中进行扩增3、分辨基因工程是否成功是通过A．提取目的基因 B．基因表达载体的构建C．目的基因导人受体细胞 D．目的基因的检测与鉴定4、基因工程的正确操作步骤是①构建基因表达载体②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求④取目的基因A．③②④① B．②④①③ C．④①②③ D．③④①②5、哪项不是基因表达载体的组成部分A．启动子 B．终止密码 C．标记基因 D．目的基因6、下列说法中正确的是A．基因表达载体一定有起始密码 B．标记基因也叫做抗生素基因C．显微注射技术是最为有效的一种将目的基因导入植物细胞的方法D．大肠杆菌是常用的微生物受体7、下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法A．基因枪法 B．显微注射法 C．农杆菌转化法 D．花粉管通道法8、基因工程中常用的受体细胞不包括A．人体细胞 B．动物细胞 C．植物细胞 D．微生物细胞9、基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞。

下列不属于这样做的原因的是A．结构简单，多为单细胞B．繁殖速度快C．遗传物质含量少D．性状稳定，变异少10、要检测目的基因是否成功的插入了受体DNA中，需要用基因探针，基因探针是指A．用于检测疾病的医疗器械 B．用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子 一球蛋白的DNA D．合成苯丙羟化酶的DNA片段C．合成11、下列有关基因工程技术的叙述，正确的是A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和基因进入受体细胞的载体B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞主要是因为细菌繁殖快、遗传物质少D．只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达12、基因工程中不会出现A．DNA连接酶将黏性末端的碱基连接起来 B．限制性内切酶可用于目的基因的获取C．目的基因必须有载体导入受体细胞 D．人工合成目的基因不用限制性核酸内切酶13、（二个选项）我国科学家运用基因工程技术将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。

基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过，赋予生物以，创造出。

基因工程是在上进行设计和施工的，又叫做。

（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——（1）来源：主要是从中分离纯化出来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种的核苷酸序列，并且使每一条链中部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有性。

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：和。

2.“分子缝合针”——(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于，只能将双链DNA片段互补的之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合，但连接平末端的之间的效率较。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——（1）载体具备的条件：①。

②。

③。

（2）最常用的载体是,它是一种裸露的、结构简单的、独立于，并具有的双链 DNA分子。

（3）其它载体：(二)基因工程的基本操作程序第一步：1.目的基因是指：。

2.原核基因采取获得，真核基因是。

人工合成目的基因的常用方法有_和_ 。

3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：（2）过程：第一步：加热至90～95℃；第二步：冷却到55～60℃，；第三步：加热至70～75℃，。

第二步：1.目的：使目的基因在受体细胞中，并且可以，使目的基因能够。

2.组成：＋＋＋（1）启动子：是一段有特殊结构的，位于基因的，是识别和结合的部位，能驱动基因，最终获得所需的。

（2）终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的。

（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中，从而将筛选出来。

常用的标记基因是。

第三步：1.转化的概念：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。

2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是，其次还有和等。

一、选择题1．(2024·泉州高三质检)像BclⅠ(－T↓GA TCA－)、BglⅡ(－A↓GATCT－)、MboⅠ(－↓GATC －)这样，识别序列不同，但能产生相同的黏性末端的一类限制酶被称为同尾酶。

如图表示目的基因及质粒上的酶切位点。

选用不同的限制酶对质粒和目的基因进行切割，并用DNA连接酶进行连接。

下列分析错误的是()选项切割质粒切割目的基因结果分析A BclⅠ和BglⅡBclⅠ和BglⅡ形成的重组质粒的碱基排列顺序不一定相同B BclⅠ和BglⅡMboⅠ切割后的质粒不可自我环化，切割后的目的基因可以自我环化C MboⅠBclⅠ和BglⅡ形成的重组质粒可被MboⅠ再次切开，但可能无法被BclⅠ和BglⅡ再次切开D MboⅠMboⅠ切割后的质粒可以自我环化，切割后的目的基因也可以自我环化2.(2023·新课标，6)某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。

限制酶的切割位点如图所示。

下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是()A．质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coli DNA连接酶连接B．质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接C．质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接D．质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coli DNA连接酶连接3．(2023·重庆，12)某小组通过PCR(假设引物长度为8个碱基短于实际长度)获得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切(下图)，再用所得片段成功构建了基因表达载体。

下列叙述错误的是()A．其中一个引物序列为5′－TGCGCAGT－3′B．步骤①所用的酶是SpeⅠ和CfoⅠC．用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了2个片段D．酶切片段和载体连接时，可使用E.coli DNA连接酶或T4 DNA连接酶4．(2024·镇江高三二模)转基因植物中标记基因的剔除可有效防止基因污染，剔除常用分离剔除法和重组剔除法。

高考生物专题复习《基因工程》【考点梳理.逐个击破】一、基因工程的操作工具1．限制性核酸内切酶(简称限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

(2)作用：识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

(3)结果：产生黏性末端或平末端。

2．DNA 连接酶3．载体(1)作用：携带外源DNA 片段进入受体细胞。

(2)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

(3)条件⎩⎪⎨⎪⎧能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因二、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取(1)目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以是具有调控作用的因子。

(2)获取方法⎩⎪⎨⎪⎧从基因文库中获取利用PCR 技术扩增通过化学方法人工合成2．基因表达载体的构建 (1)构建基因表达载体的目的①使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。

②使目的基因能够表达和发挥作用。

(2)基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子及标记基因等。

3．目的基因导入受体细胞微生物细胞感受态细胞法(Ca2＋处理法)4．目的基因的检测与鉴定检测目的检测方法判断标准目的基因是否插入转基因生物的DNA DNA分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否转录出了mRNA 分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否翻译出蛋白质抗原—抗体杂交技术是否出现杂交带个体水平的检测如抗虫、抗病的接种实验是否表现出相应的特性三、基因工程的应用及蛋白质工程1．基因工程的应用(1)动物基因工程：提高动物生长速度从而提高产品产量；改善畜产品品质；用转基因动物生产药物；用转基因动物作器官移植的供体等。

(2)植物基因工程：培育抗虫转基因植物(如抗虫棉)、抗病转基因植物(如转基因烟草)和抗逆转基因植物(如抗寒番茄)；利用转基因改良植物的品质(如新花色矮牵牛)。

2．基因诊断与基因治疗(1)基因诊断：又称为DNA诊断，是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体。

第三次生物练考题命题人：王娜选择题答案：一、选择题（ 每小题5分，共计70分）1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( ) A 、将目的基因从染色体上切割出来 B 、识别并切割特定的DNA 核苷酸序列 C 、将目的基因与运载体结合 D 、将目的基因导入受体细胞2、下列四条DNA 分子，彼此间具有粘性末端的一组是 （ ）① ②③④ A ．①② B ．②③ C ．③④ D ．②④3、基因工程是DNA 分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( ) A 、限制酶只用于切割获取目的基因 B 、载体与目的基因必须用同一种限制酶处理 C 、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA 连接酶 D 、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测4、下列有关基因工程的叙述，正确的是：（ ） A ．DNA 连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来 B ．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变 C ．目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外D ．常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等5、下列关于DNA 连接酶的叙述中，正确的是 （ ） A. DNA 连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键B. DNA 连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖C. DNA 连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖D. 同一种DNA 连接酶可以切出不同的黏性末端6、实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。

从大肠杆菌中提取的一种限制性内切酶EcorI ，能识别DNA 分子中的GAATTC 序列，切点在G 与A 之间。

这是应用了酶的 （ ）A.高效性B.专一性C.多样性D.催化活性受外界条件影响7、下列有关质粒的叙述，正确的是 （ ） A ．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B ．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA 分子 C ．质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制 D ．细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的8、右图所示为限制酶切割某DNA 分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是 A.CTTAAG ，切点在C 和T 之间B.CTTAAG ，切点在G 和A 之间C.GAATTC ，切点在G 和A 之间D.GAATTC ，切点在C 和T 之间9、关于右图DNA 分子片段的说法正确的是（ ） A ．限制性内切酶可作用于①部位，解旋酶作用于③部位 B ．②处的碱基缺失导致染色体结构的变异 C ．把此DNA 放在含15N 的培养液中复 制2代，子代中含15N 的DNA 占3/4D ．该DNA 的特异性表现在碱基种类和（A+T ）/（G+C ）的比例上10、基因治疗是指：（ ）A ．运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变而恢复正常B ．运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的T A G GC C A TT A C CG G T AA TT G C A TT 15N 14N……C．把健康的外源基因导人到有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的D．对有缺陷的基因进行修复，使其恢复正常，达到治疗疾病的目的11、与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是：（）A．反转录酶B．RNA聚合酶C．DNA连接酶D．解旋酶12、除下列哪一项外，转基因工程的运载体必须具备的条件是：（）A．能在宿主细胞中复制并保存B．具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接C．具有标记基因，便于进行筛选D．是环状形态的DNA分子13、苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞是否已表达，其检测方法是：（）A．是否有抗生素抗性 B．是否能检测到标记基因C．是否有相应的性状 D．是否能分离到目的基因14、如果科学家通过转基因工程，成功地把一名女性血友病患者的造血细胞进行改造，使其凝血功能恢复正常。