34
方法
➢ 30%红细胞悬液的配置(1)取患者的血液2ml, 枸橼酸钠抗凝, 混匀,2000转/分离心5分钟;(2)吸出血浆,沉淀的红细胞用8 倍体积的生理盐水洗涤三次,每次2000转/分离心5分钟;(3) 最后沉淀红细胞用生理盐水配成30%的红细胞悬液。
14
尿含铁血黄素试验(Rous试验)
➢ 原理:当血浆中血红蛋白超过肾阈值1.3g/L 时,则可通过肾小球滤过,经过肾小管时被肾小 管上皮细胞嗜取,分解为含铁血黄素沉积在上 皮细胞中,并随着上皮细胞脱落从尿中排出。 含铁血黄素是不稳定的铁蛋白聚合体,其中的 高铁离子与亚铁氰化钾作用,在酸性环境下产 生普鲁氏蓝色的亚铁氰化铁沉淀。尿沉渣肾小 管上皮细胞内外可见直径1~3um的兰色颗粒。
• 参考值:0.5~1.5 Hb/L
12
血清Hp检测的原理(火箭电泳法)
• 将稀释后的Hp抗血清与已融化的2%琼脂糖混匀, 制备凝胶板。在凝胶板上加入一定量的受检血 清(抗原),在电场作用下,定量的抗原在含 有定量抗体的琼脂凝胶中泳动,在一定的时间 内抗原抗体反应形成火箭样沉淀峰,此峰的高 度与抗原浓度成正比,测量峰的高度与标准样 品峰值通过直线回归方程式,计算出受检者血 清中Hp的含量。
9
注意事项
• 采血和分离血浆的过程中,应严格防止 发生体外溶血,以免造成假阳性。
• 一切器材,用前用盐酸浸泡24h,流水冲 洗后再用蒸馏水洗三次,以避免Hb污染 造成假阳性。
• 过氧化氢的浓度要准确,应新鲜配制。 • 当测定管的光密度超过0.6时,应将血浆
稀释后重新检测。
10
血清结合珠蛋白测定(measurement of haptoglobin) • 常用的方法有:
15
正常值和临床意义