(5)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体, 其DNA复制所需的原料来自__________________。
【解析】(1)由图可知,为了构建重组质粒不能用 BamHⅠ切割质粒,因为质粒被此酶切割后,两个抗性 基因都会被破坏。因此,可以使用BclⅠ和HindⅢ两种 酶切割质粒和目的基因,然后再用DNA连接酶将切割后 的质粒和目的基因连接成重组质粒。(2)由于形成的 重组质粒中氨苄青霉素抗性基因已经被破坏,因此要
考点二 基因工程的操的基因。
(2)人工合成目的基因。 ①化学合成法:已知核苷酸序列的较小基因,直接利用 DNA合成仪用化学方法合成,不需要模板。 ②反转录法:以RNA为模板,在反转录酶作用下人工合 成。
(3)PCR扩增目的基因:利用DNA复制的原理,在体外特 异性地复制某DNA片段以获得呈指数增加的目的基因。
筛选含有重组质粒的大肠杆菌可以在筛选平板培养基
中添加四环素。(3)由表可知,限制酶BamHⅠ和BclⅠ
切割产生的粘性末端相同,所以切割的序列可以进行
拼接,但粘性末端两侧的碱基序列不同,可能是
,也可能是
。因重组后的碱
基序列发生变化,两种酶都不能将其切开。(4)根据
BamHⅠ、BclⅠ和Sau3AⅠ的酶切位点,Sau3AⅠ在质 粒上有三个酶切位点,完全酶切可得到记为A、B、C的 三种片段,若部分位点被切开,可得到AB、AC、BC、 ABC四种片段,所以用Sau3AⅠ酶切图1质粒最多可能获 得7种大小不同的DNA片段。(5)某些噬菌体在基因工 程中经改造后可作为载体,利用受体细胞中的成分来 合成自身的DNA。
2.形成重组DNA分子:
3.将重组DNA分子导入受体细胞:
细胞种类 常用方法 操作过程
常用细胞