柴胡黄芩配伍不同提取部位对扑热息痛所致小鼠急性肝损伤的保护作用
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3 胡兵,董晓蕾,陈林囡,等,当归芍药散拮抗雷公藤对雌鼠生殖系统影响的实验研究.时珍国医国药,2000;11(9)∶775～7764 何加旰,陈小囡,沈康,等.补肾方对雷公藤致雌鼠生殖系统影响的保护作用.浙江中医杂志,2003;(7)∶313The study of the antagonism of R einforcing2shen Drug(补肾药)to the effect ofT riplerygium wilfordii on the reproductive system of female ratChen Xiaonan(Department of Histology and Embryology of Medical Basic of the Hangzhou Teachers College,Hangzhou 310018) Objective:To observe the antagonism of Chinese drug for reinforcing2Shen to the effect of Tripterygium wilfordii(TW)on the repro2 ductive system of female rat.Methods:Selecting30female rats those all possess normal oestrus cycle and then divided them into3groups randomly,the control group,the TW group and the mixed group,All of the rats was anatomized after90days feeding.R esults:Compared with the TW group,the mixed group was more integrity in the oestrus cycle,estrogen was increased,the weigt of female reproductive or2 gane was increased too,good growing follicle was observed.Conclusion:Reinforcing2shen drug would antagonize the toxicity of Triptery2 gium Wilfordii on the reproductive system of female rat.K ey w ords Reinforcing2Shen drug(补肾药);Tripterygium wilfordii;female reproductive orgnnes柴胡黄芩配伍不同提取部位对扑热息痛所致小鼠急性肝损伤的保护作用Ξ王宪龄,张丽萍,李连珍,宋 宁,刘 斌(河南中医学院,郑州 450008) 摘 要 目的:探索柴胡、黄芩配伍对扑热息痛所致小鼠肝损伤起保护作用的活性部位。
方法:用70%乙醇对原药材进行回流提取,然后依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇对柴胡、黄芩的醇浸膏进行萃取,用500mg/kg的扑热息痛(AP)灌胃造模,以血清丙氨酸氨基转移酶(AL T)、天冬氨酸转氨酶(AST)及肝匀浆中的谷胱甘肽(GSH)含量为指标,观察对肝损伤的保护作用。
结果:水及水饱和正丁醇部位对升高的AL T、AST含量有降低作用,对降低的GSH含量有升高作用,乙酸乙酯部位能显著升高肝匀浆GSH含量。
结论:柴胡黄芩配伍保肝作用的活性成分可能存在于水及水饱和正丁醇部位。
关键词 柴胡;黄芩;活性部位;保肝作用;扑热息痛 柴胡、黄芩配伍广泛用于病毒性肝炎、急性胆囊炎等肝胆疾病的治疗。
以前的实验结果表明,柴胡黄芩以1∶2的剂量比例配伍对扑热息痛所致的小鼠急性肝损伤有较好的保护作用[1],本实验在此基础上进一步对其不同提取部位进行研究。
1 材料与方法1.1 试验药物 北柴胡(Bupleurum chinense DC)购于河南省嵩山县药材公司。
黄芩(Scutellaria baicalensis G eorgi)购于山东莒县药材公司,以上药材经鉴定均为正品。
柴胡、黄芩分别粉碎,按1∶2比例称取混匀,10倍量70%乙醇连续回流提取1h,过滤,再加入8倍量70%乙醇连续回流提取1h,合并滤液,浓缩成浸膏,备用。
将浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和的正丁醇萃取,回收有机溶剂,低温烘干。
使用前,用5%吐温-80配成适宜浓度的溶液。
联苯双酯滴丸,浙江温岭制药厂,批号:0210122,取375mg联苯双酯滴丸研碎,加蒸馏水至30ml。
1.2 试剂 GSH、AST、AL T试剂均购自南京建成生物工程研究所,批号分别为20030504、20030428、20030328。
对乙酰氨基酚片,广州白云山制药股份有限公司,批号0208021,取2.5g扑热息痛研碎,用1%CMC2Na定容到100ml容量瓶中。
1.3 动物 昆明种小鼠体重19～21g,雌雄各半,购自河南省医学动物实验中心,豫医动管(证)字第410115号。
1.4 方法 取小鼠90只,随机分为9组,分别灌胃相应的药液(20ml/kg)或等体积的蒸馏水(含吐温-80),每天1次连续4天。
末次给药后2h,除空白组外,其余各组均灌胃给予扑热息痛500mg/kg,24h后脱颈椎处死小鼠。
摘除小鼠眼球取血,静置,3000转/分钟离心15分钟分离血清,冷藏(4℃)备用。
剖腹切取新鲜肝脏约0.1g,精密称定,剪碎后加入9倍生理盐水在冰浴中匀浆,匀浆液3000转/分钟,离心15分钟,上清液即为肝匀浆制品。
肝匀浆中总蛋(TP)含量双缩脲法测定,GSH测定按试剂盒说明。
血清AST、AL T用改良赖氏法按试剂盒说明测定。
01中药药理与临床2005;21(3)Ξ基金项目:河南省自然科学基金课题(编号994021900)2 结果2.1 柴胡黄芩不同提取部位对小鼠血清AL T和AST的影响 见表1。
表1 柴胡黄芩不同提取部位对小鼠血清AL T和AST的影响( x ±s,n=10)组别剂量(g/kg)AL T(U) AST(U) 空白对照49.52±11.783333.90±8.7933模型对照280.86±49.37177.46±40.38联苯双酯0.25154.63±30.6533101.93±33.0533石油醚部位18326.02±10.57132.75±53.18乙酸乙酯部位18299.21±42.63139.59±55.57正丁醇部位36289.45±28.99168.40±34.95正丁醇部位18200.38±78.7733110.97±53.2833水部位36276.97±53.61193.34±16.78水部位18223.19±61.743109.11±40.5033 与模型对照组比较3P<0.05,33P<0.01(下同) 表1结果表明,联苯双酯、正丁醇低剂量组和水低剂量组可使升高的AL T和AST显著降低。
2.2 柴胡黄芩不同提取部位对小鼠肝匀浆中TP和GSH的影响 见表2。
表2结果表明,联苯双酯、水低剂量、正丁醇低剂量和乙酸乙酯组均可使降低的GSH含量升高。
3 讨论 扑热息痛(AP)所致的小鼠急性肝损伤模型是一种中毒性肝炎、肝坏死模型[2]。
AP进入体内经肝细胞色素P2450代谢, 表2 柴胡黄芩不同提取部位对小鼠肝匀浆中TP和GSH含量的影响( x±s,n=10)组别剂量(g/kg)TP(g/L) GSH(mg/mg prot) 空白对照10.65±4.8046.63±9.0333模型对照10.67±3.3629.80±7.19联苯双酯0.2512.06±3.3339.86±5.7033石油醚部位1810.17±1.1536.11±3.67乙酸乙酯部位188.65±1.5740.78±5.8033正丁醇部位3614.71±4.3727.89±7.27正丁醇部位1810.41±2.6137.82±6.023水部位3612.64±2.7326.34±4.78水部位1811.55±6.0638.33±7.893绝大部分产物分别与硫酸和葡萄糖醛酸结合后从尿中排出体外,仅很少一部分AP代谢后生成毒性中间产物N2乙酰2对2苯醌亚胺(N2acetyl2p2benzoquine,NAPQ I)与肝内还原型谷胱甘肽(GSH)结合,以巯基复合物形式从尿中排出。
AP剂量过大时,生成的NAPQ I过多,使肝内GSH耗竭,NAPQ I便与肝细胞大分子如蛋白质共价结合,引起肝细胞坏死,细胞通透性增强,使转氨酶释放入血,造成转氨酶升高[3]。
本文结果显示,柴胡黄芩保肝作用的有效部位可能是水和正丁醇部分。
参考文献1 王宪龄.柴胡黄芩不同剂量比例配伍对扑热息痛所致小鼠急性肝损伤的保护作用.河南中医,2004;(8)∶152 汪晖,彭仁秀.对乙酰氨基酚肝损害作用机制.中国药理学报,1993; 14(增刊)∶41～443 时京珍,姜云珍,刘耕陶.乙酰胡椒乙胺对扑热息痛肝脏毒性的保护作用.药学学报,2002;35(4)∶241～244二○○五年中药药理学会廿周年庆典征文通知 经中药药理学会常务理事会研究确定于2005年11月召开中药药理学会廿周年庆典,为此,公开征集学术论文及学会相关纪念文物。
1 学术论文1.1 内容:①有关进一步发展我国中药药理学科的战略、方法及思路的研究论文;②中药药理学相关学术研究论文,含基础研究论文与开发研究论文;③重要研究成果或产品介绍。
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