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代谢组学(metabolomics) 代谢组学( )
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测序技术的进步, 测序技术的进步,大规模基因组测序成为 可能genomics 可能 表达序列标签EST, 微阵列 , 基因表达连 表达序列标签 , 微阵列, SAGE , 转 录 组 学 续 分 析 transcriptomics 生物体系中所有蛋白及其功能的蛋白组学 proteomics 研究代谢产物的变化和代谢途径的代谢组 学metabolomics
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代谢组学的内容和特点
局限性: 局限性:
不能将生物体所有的代谢产物全面涵盖, 不能将生物体所有的代谢产物全面涵盖,活 的生物体的内在生物学变化, 的生物体的内在生物学变化,大多实验仪器 存在动力学局限性, 存在动力学局限性,导致代谢物的化学复杂 性
技术难题: 技术难题:代谢组学中的主要技术难点 在于分析物浓度的动态范围 ?
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代谢组学的研究策略
A.代谢物靶标分析( A.代谢物靶标分析(Metabolite target 代谢物靶标分析 analysis) )
直接研究基因变化的初级影响, 直接研究基因变化的初级影响,可对专有的底物或 相应编码蛋白进行分析. 相应编码蛋白进行分析. 这个程序可以详细而精确的完成某个或某几个特定 组分的分析.容易被其他相似的混合物所干扰. 组分的分析.容易被其他相似的混合物所干扰. 为使分析准确, 为使分析准确,应用大量制备方法来清除样品中的 杂质,并用灵敏度高的分析方法对样品进行检测. 杂质,并用灵敏度高的分析方法对样品进行检测.
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Metabolomics:通过考察生物体系受刺激后 : 代谢产物的变化,或研究随时间变化, 代谢产物的变化,或研究随时间变化,生物体 系的代谢途径的一种技术. 系的代谢途径的一种技术.模式生物和植物 Metabonomics:生物体对病理生理刺激或基 病理生理刺激或基 :生物体对病理生理 因修饰产生的代谢物质的质和量的动态变化的 研究.评价,监测这种变化的过程. 研究.评价,监测这种变化的过程. 代谢组:一个细胞,组织或器官中, 代谢组:一个细胞,组织或器官中,所有代谢 组分的集合, 组分的集合,尤其指小分子物质 代谢组学:在新陈代谢的动态进程中, 代谢组学:在新陈代谢的动态进程中,系统研 究代谢产物的变化规律, 究代谢产物的变化规律,揭示机体生命活动代 谢本质的科学. 谢本质的科学.
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代谢组学的内容和特点
转录组学和蛋白组学的局限性: 转录组学和蛋白组学的局限性:
转录组学或蛋白组学上的变化不总能反映基 因变更时在生化层面的表现型的改变. 因变更时在生化层面的表现型的改变. 现代技术对于转录组学和蛋白组学中mRNA 现代技术对于转录组学和蛋白组学中 以及蛋白质的识别是通过已知数据库 蛋白质的识别是通过已知数据库进行序 以及蛋白质的识别是通过已知数据库进行序 列比对的来实现的, 列比对的来实现的,因此识别和对比过程是 间接的 间接的. 如果在缺乏某mRNA或蛋白质的数据信息时, 或蛋白质的数据信息时, 如果在缺乏某 或蛋白质的数据信息时 以上的两种组学就只能为人们提供少量的信 息.
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代谢产物的分析层次
Oliver Fiehn 将对生物体系的代谢产物分析分为 个层 将对生物体系的代谢产物分析分为4个层 次: 1)代谢物靶标分析(Metabolite target )代谢物靶标分析( analysis):某个或某几个特定组分的分析; ):某个或某几个特定组分的分析 ):某个或某几个特定组分的分析; 2)代谢轮廓分析(Metabolic profiling):少数预 ):少数预 )代谢轮廓分析( ): 设的一些代谢产物的定量分析,如某一类结构, 设的一些代谢产物的定量分析,如某一类结构,性质 相关的化合物或某一代谢途径的所有中间产物或多条 代谢途径的标志性组分; 代谢途径的标志性组分; 3)代谢组学(Metabolomics):限定条件下的特定 ):限定条件下的特定 )代谢组学( ): 生物样品中所有代谢组分的定性和定量; 生物样品中所有代谢组分的定性和定量; 4)代谢物指纹分析(Metabolic fingerprinting): )代谢物指纹分析( ): 不分离鉴定具体单一组分, 不分离鉴定具体单一组分,而是对样品进行快速分类 如表型的快速鉴定); (如表型的快速鉴定);
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代谢组学的发展历史
最早起源于代谢轮廓分析( ).早在二十世 最早起源于代谢轮廓分析(Metabolic profiling).早在二十世 代谢轮廓分析 ). 纪七十年代, 纪七十年代,Baylor药学院就已经提出并发表了代谢轮廓分析的 药学院就已经提出并发表了代谢轮廓分析的 理论. 理论. 1975年,Thompson 和Markey利用气相色谱和质谱在代谢轮 年 利用气相色谱和质谱在代谢轮 廓分析的定量方面取得了较大进展; 廓分析的定量方面取得了较大进展;二十世纪七十年代末期这种 方法得到了广泛认同;;八十年代早期应用HPLC和NMR来对代 ;;八十年代早期应用 方法得到了广泛认同;;八十年代早期应用 和 来对代 谢物进行分析. 谢物进行分析. 1986年,Joumal of Chromatography A出版了一期关于代谢 年 出版了一期关于代谢 轮廓分析的专辑. 轮廓分析的专辑. 随着基因组学的提出和迅速发展, 年提出了代谢 随着基因组学的提出和迅速发展,Oliver于1997年提出了代谢 于 年提出了 组学( 组学(metabolomics)的概念,之后很多植物化学家开展了这 )的概念, 方面的研究; 方面的研究; 1999年Jeremy K. Nicholson等人提出 等人提出metabonomics的概念. 的概念. 年 等人提出 的概念
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代谢组学的内容和特点
代谢组学的研究技术 核心技术是利用化学方法对不同状态下基 因表达的不同代谢产物进行比较
代谢物群矩阵clique-metabolite matrices 代谢物群矩阵 单一代谢物首先被鉴定出来 首先被鉴定出来, 单一代谢物首先被鉴定出来,然后在不同的代谢物 组中寻找相关性; 组中寻找相关性; 这些既独立又相关的代谢物被用来鉴定代谢途径 鉴定代谢途径, 这些既独立又相关的代谢物被用来鉴定代谢途径, 寻找在已经受到影响的情况下植物的代谢网络 代谢网络, 寻找在已经受到影响的情况下植物的代谢网络,而 这些网络途径则用来测定和研究更加广泛的生物学 反应和基因功能. 反应和基因功能.
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代谢组学的研究策略
代谢物指纹分析( 代谢物指纹分析(Metabolic fingerprinting): ): 物图谱有其特质性,类似样品的"指纹"一样; 物图谱有其特质性,类似样品的"指纹"一样; 对这种特质性进行区分,鉴定,被称为" 对这种特质性进行区分,鉴定,被称为"代谢 指纹分析" 帮助找出机体代谢的共性与个性. 指纹分析",帮助找出机体代谢的共性与个性. 代谢物指纹分析的目的在于根据其来源和生物 学相关性对样品进行快速分类. 学相关性对样品进行快速分类.在工业和临床 应用上, 应用上,它有时不能在一个样品中测定所有代 谢物,也不能分离鉴定具体单一组分, 谢物,也不能分离鉴定具体单一组分,但是对 于样品的快速分类是很合适的( 于样品的快速分类是很合适的(如表型的快速 鉴定). 鉴定).
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代谢组学的研究策略
代谢轮廓分析( profiling): 代谢轮廓分析(Metabolic profiling): 代谢轮廓分析是少数预设的一些代谢产物的识 别和定量分析,如某一类结构,性质相关的化 别和定量分析,如某一类结构, 合物(氨基酸,有机酸,顺二醇类) 合物(氨基酸,有机酸,顺二醇类)或某一代 谢途径的所有中间产物或多条代谢途径的标志 性组分.有时在代谢物分析中, 性组分.有时在代谢物分析中,不必分析生物 样本中的所有化合物, 样本中的所有化合物,只要分析所研究的特定 生化代谢途径即可.因此,在样品制备过程中 生化代谢途径即可.因此, 某一代谢途径的中间化合物时需要特别留意
中英联合实验室ຫໍສະໝຸດ 代谢组学的发展基因组的变化不一定能够得到表达, 基因组的变化不一定能够得到表达,从而并不 一定对系统产生影响; 一定对系统产生影响; 某些蛋白的浓度会由于外部条件的变化而升高, 某些蛋白的浓度会由于外部条件的变化而升高, 但由于这个蛋白可能不具备活性, 但由于这个蛋白可能不具备活性,从而也不对 系统产生影响; 系统产生影响; 由于基因或蛋白的功能补偿作用, 功能补偿作用 由于基因或蛋白的功能补偿作用,某个基因或 蛋白的缺失会由于其他基因或蛋白的存在而得 到补偿,最后反应的净结果为零; 到补偿,最后反应的净结果为零; 小分子的产生和代谢才是这一系列事件的最终 结果,它能够更准确的反映生物体系的状态 更准确的反映生物体系的状态. 结果,它能够更准确的反映生物体系的状态.
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代谢组学的发展
结构基因组学: 结构基因组学:研究生物系统的基因结 构组成, 构组成,即DNA的序列及其表达 . 的序列及其表达 蛋白组学: 蛋白组学:研究由生物系统表达的蛋白 质及由外部刺激引起的差异 . 代谢组学:研究生物体系(细胞, 代谢组学:研究生物体系(细胞,组织 或生物体) 或生物体)受外部刺激所产生的所有代 谢产物的变化, 谢产物的变化,是结构基因组学和蛋白 组学的延伸 .
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代谢组学的技术平台
红外线光谱技术( ) 红外线光谱技术(IR), 核磁共振技术( 核磁共振技术(NMR), ) 稀薄气液色谱技术( 稀薄气液色谱技术(TLC), ) 高效液相色谱技术( 高效液相色谱技术(HPLC), ) 高效毛细管电泳技术( 高效毛细管电泳技术(HPCE), ) 毛细管电泳与紫外线吸光率检测连用技术( 毛细管电泳与紫外线吸光率检测连用技术(CE/UV), ) 毛细管电泳与激光诱导荧光检测连用技术( 毛细管电泳与激光诱导荧光检测连用技术(CE/LIF), ) 毛细管电泳与质谱连用技术( 毛细管电泳与质谱连用技术(CE/MS), ) 气相色谱与质谱共用技术( 气相色谱与质谱共用技术(GC/MS), ) 液相色谱与质谱共用技术( 液相色谱与质谱共用技术(LC/MS), ) 液相色谱与质谱先后使用技术( 液相色谱与质谱先后使用技术(LC/MS/MS), ) 高效液相色谱与质谱和核磁共振技术功用( 高效液相色谱与质谱和核磁共振技术功用(LC/NMR/MS) )