流式细胞仪维护
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BD FACSCalibur流式细胞仪操作与维护程序目的:规范BDFACSCalibur流式细胞仪操作与维护程序,正确使用设备,保证实验顺利进行、操作人员人身安全和设备安全。
适用范围:本规程适用于BD FACSCalibur流式细胞仪的使用操作。
责任者:操作人员:负责按照本规程操作仪器设备,对仪器进行日常维护,并作使用记录。
保管人员:负责监管仪器操作是否符合规程,并对仪器进行定期维护、保养。
科室负责人:负责对仪器设备的综合管理。
内容:1.每日开机程序1.1在气压阀减压的状态下检查鞘液桶,确认:1.1.1鞘液充满状态,约3L1.1.2盖紧盖子1.1.3安上金属挡板1.1.4管路畅通,无扭曲1.2.检查废液桶,确认:1.2.1废液桶充满400ml漂白剂1.2.2管路畅通,无扭曲1.3打开流式细胞仪。
1.4打开电脑。
1.5气压阀置于加压位置,并排除管路中气泡。
1.6做Prime。
1.7等待机器预热5~10分钟后可开始试验。
2.每日关机程序2.1用3mlFACSCIean洗液加入样品管中上样,将样品支撑架置于旁位,以外套管吸入1ml。
2.2将样品支撑架置于中位,以HI RUN运行10分钟,使内管吸入约1ml。
2.3将样品管换成蒸馏水重复1-2步。
2.4放置盛有1ml蒸馏水的试管于样品支撑架上。
2.5选择Standby模式10分钟,将激光冷却后可关掉主机。
2.6退出所有应用软件,关闭电脑。
2.7将流式细胞仪的压力阀置于减压状态。
3.每月维护程序3.1将FACSClean洗液1~2L装入鞘液桶。
3.2旁路鞘液过滤器(过滤器上的快速接口从SANLINEFILTER端断开,将鞘液白色管路液路取下联到SANLINE FILTER 端口),以防伤害。
3.3将盛有3ml FACSClean 洗液的试管置于样品支架上,以HI RUN 30 分钟。
3.4将鞘液和样品换成蒸馏水重复步骤3,以HI RUN 60 分钟。
3.5将鞘液桶装满鞘液,恢复过滤器。
流式细胞仪校准安全操作及保养规程1. 背景流式细胞仪是一种现代化的实验仪器,广泛应用于生命科学、医学研究、诊断和治疗等领域。
流式细胞仪可以对单个细胞进行快速测量和分析,具有高灵敏度、高通量和高精度的优点。
在使用流式细胞仪时,正确的校准和安全操作,以及定期的保养是非常重要的。
2. 流式细胞仪的校准方法流式细胞仪的校准是保证实验结果准确的前提。
在进行校准之前,需要先准备好以下工具:•流式细胞仪校准珠•DI水•漂白液•消毒剂•塑料管•紫外线消毒灯2.1 流速校准1.将流式细胞仪开机,并将流式细胞仪校准珠装载到样品池中。
2.打开软件界面,进入流速校准模式。
3.将DI水装入塑料管,并连接到样品流路上。
4.开始采集数据,记录每个管道中的时间和事件数。
5.根据样品流速,计算出要达到特定事件数所需的时间,这就是实际流速。
6.通过调整样品流量控制器,将实际流速调整至设定值。
2.2 光学参数校准在进行光学参数校准之前,需要将流式细胞仪校准珠置于样品池中。
2.2.1 激发光的校准1.进入激发光校准模式,打开紫外线消毒灯。
2.将DI水装入塑料管中,并连接到样品流路上。
3.开始采集数据,记录激发光强度和事件数。
4.根据实际激发光强度,调整光源强度,使其达到设定值。
2.2.2 探测光的校准1.进入探测光校准模式,放置漂白液样品。
2.打开灯箱,选择合适的滤片和灵敏度,开始采集数据。
3.根据采集到的数据,调整探测器增益,使其达到合适的灵敏度。
2.3 粒子大小校准1.将流式细胞仪校准珠装载到样品池中。
2.进入粒子大小校准模式,开始采集数据。
3.根据采集到的数据,调整光学系统,将校准珠作为参考,确定粒子的大小。
3. 流式细胞仪的安全操作在操作流式细胞仪时,需要做好以下几点:1.先关掉紫外线消毒灯,并断开电源,然后进行操作。
2.对样品进行处理前,先进行消毒。
3.在进行样品注入时,应该进行过滤,并先进行细胞计数,控制加入的细胞数量。
4.遵守严格的操作规程,在操作流式细胞仪时,不要将手伸入仪器。
【流式细胞仪】流式细胞仪四个常见问题1.流式细胞仪日常使用规范流式细胞仪是一种对细胞进行自动分析和分选的装置,依据参数测量原理工作。
流式细胞仪紧要由流动室和液流系统、激光源和光学系统、光电管和检测系统、计算机和分析系统4部分构成,目前在生物医疗领域有广泛运用,紧要用于分析细胞表面标志、分析细胞受体、分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量、分析免疫细胞的功能。
由于流式细胞仪比较昂贵且精密,为了确保不由于使用不当就很简单使液流部位出问题。
1.一般来说,需要使用的所用溶液都应当进行过滤处理,此外样本在上机前也要过滤,这么做事为了避开设备长时间使用时显现沉淀物而堵塞喷嘴;2. 开机后检测样本前,要用prime机检查喷嘴的畅通情形;3. 每日关机前移开托臂,用3~4管10%次氯酸钠反复冲洗,不要让有堵塞的喷嘴带病运行,使用经过滤处理的H2O或PBS冲洗后才关机;4. 每天要倒空废液瓶内的废液,再注入少量的次氯酸钠或消佳净溶液,以防细菌生长;5. 鞘液瓶内的液体加至4/5容量并放置一夜,防止新加入的液体有气泡产生而影响检测结果。
2.巴玖讲解流式细胞仪的基本结构流式细胞计的基本结构流式细胞计紧要由四部分构成。
它们是:流动室和液流系统;激光源和光学系统;光电管和检测系统;计算机和分析系统。
(1)流动室和液流系统:流动室由样品管、鞘液管和喷嘴等构成,常用光学玻璃、石英等透亮、稳定的材料制作。
设计和制作均很精细,是液流系统的心脏。
样品管贮放样品,单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出;鞘液由鞘液管从四周流向喷孔,包围在样品外周后从喷嘴射出。
为了保证液流是稳液,一般限制液流速度10m/s。
由于鞘液的作用,被检测细胞被限制在液流的轴线上。
流动室上装有压电晶体,受到振荡信号可发生振动。
(2)激光源和光学系统:经特异荧光染色的细胞需要合适的光源照射激发才能发出荧光供收集检测。
常用的光源有弧光灯和激光;激光器又以氩离子激光器为普遍,也有配和氪离子激光器或染料激光器。
流式细胞仪论文:流式细胞仪的使用与维护摘要:介绍了流式细胞仪的结构、工作原理及软件的主要功能,在仪器的维护保养方面进行了详细地叙述。
结合笔者工作实际,介绍了用流式细胞仪对鸡外周血淋巴细胞亚群分析结果。
关键词:流式细胞仪;流动室;细胞分选系统;淋巴细胞use and maintenance of flow cytometrywang shujing, hao jianmin, bi jianjie, chang zhongle, cui yanshunshandong agricultural university, tai'an, 271018, chinaabstract: this article describes the structure of flow cytometry, how it works and the main functionality of the software, in the area of maintenance of the instrument are described in detail. in conjunction with our own actual work, the author analyzed the results by flow cytometric peripheral blood lymphocyte subsets in chicken.key words: flow cytometry; mobile office; cell sorting system; lymphocyteeasycyte mini guava流式细胞仪,适用于各种流式细胞学检测分析,如动物、昆虫、酵母、原代培养、转化细胞、悬浮和贴壁细胞以及荧光微球等。
采用固态蓝色或绿色激光,四色、三色或两色荧光检测,前向散射检测,可选配侧向散射;有自冲洗系统,保证流动通路畅通。