肝素酶RNAi对HepG2肝癌细胞生物学行为的影响

RNAi对肝癌细胞放射增敏的实验研究李高峰;王宏梅;陈龙华【摘要】目的探讨ATM基因表达沉默对肝癌细胞辐射增敏的影响.方法采用含ATM干扰片段的慢病毒感染HepG2细胞,将细胞制成单细胞悬液,给予不同剂量照射,照射后继续培养细胞,研究RNAi前后HepG2细胞照射后继续细胞集落形成率,利用Graphpad prism5.0软件拟和线性二次曲线模型和单击多靶模型,得出放射生物学参数.结果 HepG2细胞干扰前后D0值分别为:3.37±0.03、3.50±0.06,Dq值分别为1.73±0.02、1.21±0.03,α/β值分别0.72±0.11、3.52±0.30,D0、Dq、α/β值差异均有统计学意义.放射增敏比SER＝1.37.结论 RNAi ATM基因可以改变肝癌细胞的放射生物学参数,达到放射增敏的目的.ATM有望成为肝癌患者治疗的新靶点.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2010(039)012【总页数】3页(P1492-1493,1496)【关键词】ATM;肝癌;RNAi;放疗【作者】李高峰;王宏梅;陈龙华【作者单位】广西柳州市工人医院肿瘤科,545005;南方医科大学南方医院放疗科,广州,510515;南方医科大学南方医院放疗科,广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R735.7;R730.55原发性肝癌是中国常见的恶性肿瘤之一,具有发病率高、进展快、疗效差、死亡率高等特点,首选的治疗手段是手术,但大多数患者丧失了手术机会,放射治疗已成为肝癌非手术治疗的重要手段。

由于肝细胞的耐受量低于肝癌细胞的根治量,且放疗中存在的辐射抗拒,导致疗效不满意,为了能够降低辐射抗性而达到放疗增敏作用,作者以前的研究成功地对HepG2细胞的 ATM基因进行沉默,本研究对 ATM基因沉默的HepG2细胞进行放射,观察 RNA干扰(RNA interference,RNAi)前后HepG2细胞的生长情况及放射生物学参数,评价是否具有放射增敏作用。

CyclinD1干扰RNA对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的作用
肝癌是一种常见的恶性肿瘤，对人体健康造成了极大的威胁。

Cyclin D1是一种关键的细胞周期蛋白，在肝癌细胞增殖和生
长中起到了至关重要的作用。

因此，对Cyclin D1进行干扰RNA干预，对于抑制肝癌细胞的增殖和促进其凋亡具有重要
的意义。

HepG2是肝癌细胞中的一种较为典型的代表，具有高度的分
化度和恶性转移能力。

目前已经有研究发现，Cyclin D1的过
度表达与HepG2的增殖和生长密切相关。

因此，通过基因干
扰技术，针对Cyclin D1的表达进行干扰RNA处理，可以有
效地抑制HepG2细胞的增殖和促进其凋亡。

研究结果显示，Cyclin D1干扰RNA能够明显地抑制HepG2
细胞的增殖速率。

与对照组相比，实验组的细胞增殖速率显著降低。

进一步的实验发现，Cyclin D1干扰RNA能够增强HepG2细胞的凋亡。

通过流式细胞术和染色体DNA断裂分析，发现实验组细胞凋亡率较高，而对照组凋亡率较低。

从细胞周期的角度来看，Cyclin D1是一个重要的调节因子。

过度表达的Cyclin D1会导致细胞周期进入S期，并促进细胞
的增殖和生长。

因此，通过对Cyclin D1表达的干扰，可以使
细胞周期失控、增殖受限，并引发细胞凋亡，从而达到抑制肝癌细胞增殖的效果。

总的来说，Cyclin D1干扰RNA对肝癌细胞HepG2的增殖和
凋亡具有明显的作用，具有潜在的临床应用价值。

未来，进一步深入开展相关研究，将有望提高肝癌治疗的疗效和预后。

《ARID4B基因沉默对人肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响》篇一摘要：本文旨在研究ARID4B基因沉默对人肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响。

通过使用RNA干扰技术对ARID4B基因进行沉默处理，我们观察了基因沉默后HepG2细胞的生物学行为变化，并对其潜在的分子机制进行了初步探讨。

实验结果表明，ARID4B 基因沉默能够显著抑制HepG2细胞的增殖并诱导其凋亡，这为肝癌的治疗提供了新的思路和实验依据。

一、引言人肝癌是一种常见的恶性肿瘤，其发病机制复杂，涉及多种基因的异常表达和调控。

ARID4B基因作为一种重要的转录调控因子，在多种癌症中发挥重要作用。

近年来，越来越多的研究表明ARID4B基因与肝癌的发生、发展密切相关。

因此，研究ARID4B基因在肝癌细胞中的功能，对于揭示肝癌的发病机制及寻找新的治疗靶点具有重要意义。

二、材料与方法1. 细胞系与试剂实验选用人肝癌细胞系HepG2，并使用RNA干扰技术对ARID4B基因进行沉默处理。

实验中所用试剂均为分子生物学常用试剂，并经过严格的质量控制。

2. RNA干扰实验利用RNA干扰技术，设计并合成针对ARID4B基因的特异性小干扰RNA（siRNA），转染HepG2细胞，实现ARID4B基因的沉默。

3. 细胞增殖与凋亡检测通过细胞计数和流式细胞术等方法，检测ARID4B基因沉默后HepG2细胞的增殖与凋亡情况。

4. 数据分析实验数据采用统计学方法进行分析，使用GraphPad Prism软件进行绘图。

三、实验结果1. ARID4B基因沉默对HepG2细胞增殖的影响与对照组相比，ARID4B基因沉默后，HepG2细胞的增殖速度明显减慢，细胞数量显著减少。

这表明ARID4B基因的沉默能够抑制HepG2细胞的增殖。

2. ARID4B基因沉默对HepG2细胞凋亡的影响流式细胞术检测结果显示，ARID4B基因沉默后，HepG2细胞的凋亡率明显增加。

这表明ARID4B基因的沉默能够诱导HepG2细胞的凋亡。

临床医学范⽂3篇⾮临床医学专业临床医学论⽂1调整教学内容由于《临床医学概论》课程内容较多，包括诊断学、治疗学、临床流⾏病学、循证医学、内科学常见病、外科常见疾病、妇产科常见病、⼉科常见病、⽼年常见疾病等内容，教师备课需花费⼤量时间及精⼒；因此，⾼职院校应结合国家执业助理医师资质考试⼤纲调整教学内容。

课堂教学重点应侧重于“诊、内、外、⼉、妇”的理论及实训课的教学，部分执业助理医师考试涉及内容少或不考的教学内容以专题讲座形式讲授，如循证医学、流⾏病学等。

2调整教学⽅法《临床医学概论》教学以前均以传统的教学⽅法（LBL）为主，调整后根据不同科⽬内容采⽤不同教学⽅法，如内科学、⼉科学、妇产科学、外科学在“LBL”教学基础上增加了以“问题为中⼼”的教学⽅法（PBL）和以“病例”为引导的教学法———CBS教学法。

CBS⽅法不仅强调理论知识，⽽且更强调结合临床病例深⼊地掌握理论知识，使理论联系实际［2］。

PBL代替以往传统的以教师讲授为中⼼、学⽣被动听的封闭教学模式，变课堂教学以教师为中⼼、以学⽣为主体，在教学过程中以教师为主导，充分调动学⽣学习的主观能动性，使其发挥出最⼤潜能［3］。

部分涉及执业助理医师资质技能考试、操作性强的内容，如诊断学体格检查部分，应当改为“教—学—做”⼀体化的教学⽅式。

此⽅法不仅提⾼学⽣的技能操作能⼒，⽽且节省了上课学时，同时增强了学⽣学习的主动性、积极性与参与性；⽽对于难度较⼤的⼼肺腹部听诊部分内容则直接利⽤现代化仿真模拟听诊系统进⾏教学，以提⾼学⽣的感性认识⽔平。

为锻炼学⽣的理论联系实践能⼒，提⾼学⽣临床思维⽔平，本课程教学应当增加24学时的医院临床实践见习课。

3调整教学资料本院《临床医学概论》师资队伍由校内专任教师与校外兼职教师组成，校内教师以青年教师居多。

限于本课程教学的特殊性及师资的差距⼤，根据调整后的教学⼤纲，课题组成员进⾏深⼊探讨，通过专家访谈和问卷调查，制定统⼀的教学计划、教学进度、教案、讲稿、课件、教学重难点，最后形成“六统⼀”的教学光盘以便资源共享，并在2012⾼职⾮临床医学专业班实施教学。

人肝素酶RNA干扰对HepG2肝癌细胞生物学行为的影响的开题报告一、研究背景和意义：HepG2肝癌细胞是一种具有高度恶性和易转移的肝癌组织细胞，其发生率在全球范围内不断增长。

深入探究HepG2肝癌细胞的分子调控机制，寻找抑制肝癌发生和发展的新靶点，对于肝癌的预防和治疗有着重要意义。

人肝素酶是一种血管内皮细胞分泌的一种抗凝血酶，具有强的抗凝血作用。

研究表明，人肝素酶可以抑制肝癌细胞的生长、侵袭和转移，促进肿瘤细胞凋亡。

因此，研究人肝素酶在肝癌细胞中的生物学作用和调控机制，有助于了解肝癌发生发展的分子机制，为肝癌治疗提供新靶点。

RNA干扰技术是近年来广泛应用于基因调控研究的一种方法，能够靶向特定基因进行基因静默或沉默，从而破坏基因的表达和功能，探究基因的生物学作用和调控机制。

因此，利用RNA干扰技术沉默人肝素酶基因，研究其对HepG2肝癌细胞生物学行为的影响，将有助于深入探究人肝素酶在肝癌发生和发展中的分子调控机制，为肝癌预防和治疗提供新靶点和新策略。

二、研究内容和方法：本研究将利用RNA干扰技术沉默人肝素酶基因，建立相应的HepG2人肝素酶基因沉默模型，观察其对HepG2肝癌细胞生长、侵袭和转移等生物学行为的影响，以及其对相关分子信号通路的调控作用，并结合生物信息学手段进行分析，探究其分子调控机制和肝癌发生发展的关系。

具体步骤如下：1、设计人肝素酶RNA干扰序列，并合成相关siRNA片段；2、将siRNA片段转染至HepG2肝癌细胞中，进行人肝素酶基因的沉默；3、通过CCK8、MTT和流式细胞术等多种细胞实验方法，探究人肝素酶基因沉默对HepG2肝癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学行为的影响；4、利用Western blot和RT-PCR等技术手段，观察人肝素酶基因沉默对相关分子信号通路的影响，如PI3K/AKT信号通路、Wnt/β-catenin信号通路等；5、利用生物信息学手段，从基因组层面探究人肝素酶基因沉默对HepG2肝癌细胞分子调控机制的影响，如差异表达基因筛选、功能注释和信号通路富集分析等。

RNA干扰HIF-1α对肝癌细胞系HepG2生物学特性的影响摘要】目的缺氧诱导因子-1 α (HIF-1 α)是参与肿瘤细胞代谢的核心转录因子。

本研究旨在于评估RNAi下调HIF-1a对肝癌细胞系HepG2生物学特性的影响。

方法化学合成特异性HIF-1a siRNA，转染缺氧条件下培养的肝细胞肝癌细胞系HepG2，利用Westernblot技术检测转染后HIF-1a，血管生产因子，和基质金属蛋白酶2表达情况。

MTT分析及裸鼠皮下接种肿瘤细胞明确细胞增殖率。

结果乏氧条件培养，HIF-1α表达减少61.54%，VEGF表达减少64.71%；MMP-2表达减少53.33%。

HepG2 细胞增殖力下降50%，接种裸鼠肿瘤形成缓慢。

结论 HIF-1a SiRNA抑制HIF-1α表达，抑制肝癌细胞系生长。

其机制可能与下调血管生成因子和基质金属蛋白酶表达有关。

【关键词】缺氧诱导因子-1 α RNA干扰肝细胞肝癌【中图分类号】R73 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）15-0078-03前言肝细胞肝癌是危害人类健康的第五大恶性肿瘤，每年大约500,000新发病例，肿瘤致死率位居第三位[1-2]。

血管丰富是影响肝癌预后的主要原因，在肿瘤生长和转移过程起重要作用。

低氧是实体瘤微环境的基本特征之一，局部缺氧微环境使肿瘤细胞的一些基因和蛋白表达发生改变。

这些变化使肿瘤细胞在适应缺氧微环境的同时，也会增加肿瘤血管生成。

在这个过程中转录因子HlF-l起着中枢纽带的作用[3]。

缺氧诱导因子是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物及人体的一种转录因子[4,5]。

研究证实HIF—l在动物及人体许多肿瘤中大量表达，对肿瘤的生长、血管生成、转移、凋亡及耐药皆有影响。

HIF-1α与HIF-1β结合形成有转录活性的HIF-α，从而调节血管生成，肿瘤生长和凋亡等活动。

常氧情况下，HIF-1α维持低浓度状态。

缺氧状态下，更多的HIF-1α与HRE结合，刺激血管生成，在肿瘤细胞浸润、转移方面起重要作用。

siRNA干扰人肝癌细胞株HepG2生存素表达的实验研究的开题报告1. 研究背景人类肝脏肿瘤是全球最常见的恶性肿瘤之一，其中肝癌占据了很大的比例。

早期的治疗方法包括手术切除、放射治疗和化学治疗，但这些方法并不能完全控制肝癌的生长和扩散，因此，寻找更有效的治疗方法是非常必要的。

生存素是一种对细胞增殖、凋亡和生存等具有一定影响的蛋白质，其参与了细胞的功能过程。

在肝癌的发生和发展中，生存素的表达水平升高，另外，其是肝癌细胞分化的基本特征之一。

因此，抑制生存素的表达是一种可能的肝癌治疗方法。

siRNA是siRNA介导的RNA干扰技术的缩写，是一种基因沉默的技术，可用于抑制肝癌相关基因的表达，为研究肝癌的治疗提供了新的研究手段。

2. 研究目的本研究旨在使用siRNA干扰技术抑制HepG2细胞株中生存素的表达，以探究生存素对HepG2的生长和增殖的影响，并为肝癌的治疗提供新的研究思路。

3. 研究方法(1) 建立HepG2细胞株将HepG2细胞株接种在含有10% FBS的DMEM培养基中，维持在37℃的培养箱中，每三天一次更换培养基。

(2) siRNA干扰使用siRNA干扰技术对HepG2细胞株中的生存素进行抑制。

首先，根据生存素的序列设计3个目标siRNA，然后将它们转化为合成siRNA，并通过转染技术将siRNA导入细胞中。

对于转化为合成siRNA的序列，使用西方印迹法和实时定量PCR等技术进行检测。

(3) 细胞增殖实验采用MTT实验检测细胞增殖，通过比较HepG2细胞株中siRNA干扰前后的细胞增殖情况，来评估生存素的表达对肝癌细胞增殖的影响。

4. 预期结果本研究预计可以证明siRNA干扰覆盖生存素基因可以显著抑制HepG2细胞株的生存素表达水平，并导致肝癌细胞的增殖和生长下降。

这有望为发展有效的肝癌治疗方法提供新的研究思路。

RNAi技术在肝癌研究中的应用宋蕾;包青;张焕铃【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2016(028)003【摘要】肝癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁人类健康.肝癌的传统治疗方法效果差,目前缺乏有效的治疗手段,因此寻找新的更有效的肝癌治疗策略显得尤为迫切.近年来,随着分子生物学的深入研究,RNA干扰(RNAi)技术的应用为肝癌的治疗带来了新突破.RNAi技术特异性高、稳定性好、无免疫原性,在病毒感染、肝癌等疾病治疗上有广阔的应用前景,其在抑制肝癌细胞生长、增殖、侵袭转移、增强肝癌细胞凋亡和对药物的敏感性等方面有较好的表现.本文将对近年来RNAi技术在肝癌基因靶向治疗领域的应用研究作一综述.【总页数】4页(P236-238,242)【作者】宋蕾;包青;张焕铃【作者单位】河北医科大学实验动物学部,河北省实验动物重点实验室,河北石家庄050017;河北省兽药监察所,河北石家庄 050035;河北医科大学实验动物学部,河北省实验动物重点实验室,河北石家庄 050017【正文语种】中文【中图分类】R730.5【相关文献】1.V-ATPase分子结构与功能及其RNAi技术在害虫防治中的应用研究进展 [J], 刘希;周琳;高飞;刘向阳;赵特2.转基因RNAi技术在番茄研究中的应用 [J], 杨玛丽;赵统敏;余文贵;张保龙;陈天子;赵丽萍;王银磊3.RNAi技术及其在真菌基因功能研究中的应用 [J], 苏子敬;李巧玲;黄程;谢成建;杨星勇4.RNAi技术在转基因猪中的应用研究进展 [J], 邹娴;徐志谦;吴珍芳;李剑豪;蔡更元5.RNAi技术在昆虫防控研究中的应用和发展前景 [J], 李晨雨;裴新国;张伊杰;高聪芬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

肝再生增强因子RNAi对肝癌细胞株HepG2表达MHCI、DR、CD80、CD86的影响谢松丽;张云霞;孙航;刘杞【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2009(000)006【摘要】利用肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration, ALR)的siRNA 阻断人肝癌细胞株HepG2表达ALR,观察HepG2细胞MHCI、DR、CD80、CD86的表达是否受影响,以探讨ALR是否通过影响MHCI、DR、CD80、CD86表达参与肝癌细胞逃避机体的免疫监视.培养HepG2,分为未转染组、转染阳性SiRNA组、转染阴性SiRNA组、转染脂质体空质粒组; RT-PCR检测转染前后hALR mRNA的表达, RT-PCR、Western blot印迹法、流式细胞术(FCM)检测HepG2细胞表达MHCI、DR、CD80、CD86的水平.结果表明,转染阳性SiRNA 组hALR mRNA 的表达较转染阴性SiRNA组明显下降,转染阳性SiRNA组和转染阴性SiRNA组MHCI、DR、CD80、CD86的表达均无差异;脂质体转染组除CD80 mRNA外,MHCI、DR、CD86 mRNA表达均较未转染组增高;脂质体转染组MHCI、DR、CD80、CD86的表达水平均较未转染组有上升趋势.因此,阳性SiRNA具有显著和特异性抑制hALR表达的作用,阻断ALR的表达不影响HepG2细胞表达MHCI、DR、CD80、CD86,ALR不通过影响MHCI、DR、CD80、CD86的表达参与肝癌细胞逃避机体免疫监视.转染载体可能影响某些基因的表达.【总页数】5页(P122-126)【作者】谢松丽;张云霞;孙航;刘杞【作者单位】重庆医科大学附属第二医院肝病研究所,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院肝病研究所,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院肝病研究所,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院肝病研究所,重庆,400010【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.甲醛对人肝癌细胞株HepG2内质网应激相关Bip和CANX mRNA及蛋白表达水平的影响 [J], 张超;白剑英;王东新;闫丹丹;王盼;刘艳飞2.阻断肝再生增强因子的表达对人肝癌细胞株HepG2增殖的抑制作用 [J], 唐琳;孙航;张林;郭晖;张玲;刘杞3.SiRNA抑制肝癌细胞株HepG2中CD147基因表达对survivin表达的影响 [J], 陈志刚;周雄心4.苦参碱联合顺铂对人肝癌细胞株HepG2裸鼠移植瘤模型瘤体生长及caspase-3和Survivin表达的影响 [J], 鄂颖;尚德高;尤胜5.抗人肝再生增强因子单克隆抗体对人肝癌细胞株HepG2增殖活性的影响 [J], 唐琳;孙航;张林;郭晖;陈雪华;邓建川;刘杞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。