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Agilent 1200 LC[Agilent Chemstation B.04.02 Classic (中文)]现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、 目录二、 培训目的 (3)三、 培训准备 (3)1. 仪器准备 (3)2. 溶剂准备 (3)四、 方法建立 (3)1. 开机准备 (3)2. 数据采集方法编辑 (5)9 G1310A(单元泵) (5)9 G1312A，G1312B XL(二元泵)/G1311A(四元泵)： (7)9 G1313A(标准型自动进样器)，G1329A/B(自动控温自动进样器) (8)9 G1367B/C/D(高性能自动进样器) (9)9 G1328A(手动进样器) (11)9 G1316A,G1316B XL(柱温箱) (11)9 G1314A/B/D/E,G1314C XL(可变波长紫外检测器) (13)9 G1315B/D ,G1315C XL(二极管阵列检测器)/ G1365B/D ,G1365C XL(多波长紫外检测器) (15)9 G1362A(示差检测器) (17)9 G1321A(荧光检测器) (19)9 G4218A(蒸发光散射检测器) (23)3. 数据分析方法编辑 (25)9 谱图优化 (25)9 积分参数优化 (25)9 校正 (27)9 打印报告 (28)9 光谱 (29)4. 建立全新完整方法向导 (31)9 新建完整方法： (32)9 保存方法： (36)9 保存即时改变的方法 (36)9 调用方法： (36)5. 进样 (36)9 单针进样 (36)9 序列进样 (37)五、 关机 (37)1. 关闭检测器的灯 (41)2. 冲洗系统 (41)3. 封存色谱柱 (41)4. 关闭电脑 (41)5. 关闭模块 (41)六、 RRLC(快速液相)注意事项 (41)七、 Agilent 1200保养维护 (43)八、 Agilent 1200常见问题解决方法 (45)二、 培训目的9基本了解1200LC硬件操作。
仪器名称：Agilent-1200高效液相色谱仪自动主要组成：Agilent1200四元泵+UV检测器+自动进样器简单操作规程(一)、开机：1、启动计算机，进入Windows画面，Bootp Server程序自动运行。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“仪器1（2）联机”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入工作站画面。
4、把已超声脱气的流动相及水、甲醇等放入溶剂瓶中，打开Purge阀。
5、单击泵图标，出现参数设定菜单，单击设置参数选项，进入泵编辑画面。
6、设流速：5ml/min，单击“确定”。
7、单击泵图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中打开，单击“确定”，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。
8、单击泵图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中“停泵”，单击“确定”，关闭Purge阀。
9、单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，单击“确定”。
（二）数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“方法编辑” 项，如上图所示选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”，进入下一画面，依次设置以下参数：泵参数设定、自动进样器参数设定、柱温箱参数设定、VWD检测器参数设定等，单击“确定”进入下一画面。
2、单击“方法”菜单，选中“方法另存为”，输入一方法名单击“确定”。
3、从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项，输入操作者名称等信息。
4、单击“方法”菜单，选中“方法调用”，调入一方法，单击“确定”。
5、从“仪器控制”菜单选择“运行”。
6、从“序列”菜单，选中“序列编辑”，编辑完所需序列后，单击“确定”。
7、等仪器Ready，基线平稳，单击“开始”，进样。
(三)、关机:1、关机前，用 90%的水冲洗系统40分钟，然后用甲醇或乙腈冲洗系统40分钟，在冲洗时关闭检测器和柱温箱。
检测仪器验证报告Agile nt—1200 高效液相色谱仪浙江花园药业有限公司1 概述：高效液相色谱法（High Performance LiquidChromatography，HPLC）是一种现代液相色谱法，其基本方法是用高压输液泵将流动相泵入到装有填充剂的色谱柱，注入的供试品被流动相带入柱内进行分离后，各成分先后进入检测器，用记录仪或数据处理装置记录色谱图并进行数据处理，得到测定结果。
由于应用了各种特性的微粒填料和加压的液体流动相，本法具有分离性能高、分析速度快的特点。
1.1 设备的描述本公司所用的高效液相色谱仪是由在线脱泡机、四元泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器以及相关管路等组成，主要是针对本公司所有适用高效液相色谱法分析的各种产品而购入的，该设备现安装于QC三楼仪器室（三）。
设备名称：高效液相色谱仪型号：Agilent -1200生产厂商：USA Agilent Technologies1.2 设备档案1.3仪器备件1.4 维修服务1.5 设备选择标准依据来源与验证标准1.5.1 JJG70 5-2002液相色谱仪检定规程1.5.2《中国药典》2005年版1.5.3 Agilent-1200高效液相色谱仪操作和维护保养规程（SOP-QC-GY-032-00）2验证目的：为了确保Agilent-1200高效液相色谱仪的设计符合要求，为了确保使用该仪器的所检测数据真实可靠，为了确保该仪器的各项指标能达到该仪器所设计的性能指标。
3 参与验证的相关部门及其职责3.1验证小组3.1.1负责验证方案的审批；3.1.2负责验证数据及结果的审核；3.1.3负责验证报告的审核；3.1.4负责验证周期的确认；3.1.5负责发放验证证书；3.2工程部3.2.1负责设备的安装、调试，并做好相应的记录；3.2.2负责建立设备档案；3.2.3负责拟定验证周期；3.2.4负责收集预、安装确认的试验记录；3.3质量管理部3.3.1负责对验证参数要求进行确认；3.3.2负责根据检验结果出具检验报告单；3.3.3负责仪器、仪表的校验；3.3.4负责起草设备操作、清洁和维护保养等方面的标准操作规程；3.3.5负责设备日常的维护保养工作；4 验证内容4.1 四元泵4.1.1泵的耐压性将仪器各部分连接好，以100%甲醇为流动相，流量为1ml/min，按Agilent-1200高效液相色谱仪操作和维护保养规程启动仪器，压力平稳后保持10min，用滤纸检查各管路接口处应无湿迹，卸下色谱柱，堵住泵出口端（压力传感器以下），使压力达到最大允许值的90%，保持5min应不漏液；检查人/日期：复核人/日期：4.1.2泵流量设定值误差S S、流量稳定性误差S R启动仪器，按上表的要求设定流量，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集上表规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1）、（2）计算S S和S R，结果记录在下表中；注：S s =(— F m -F s )/F s ×100% 式（1） S R =(F max -F min )/ — F m ×100% 式（2） 式中：F m ——F m =(W 2-W 1)/(ρ•t )，流量实测值，ml/min ； W 2—— 容量瓶+流动相的质量，g ；W 1—— 容量瓶的质量，g ；ρ—— 试验温度下流动相的密度，g/mL ；t —— 收集流动相的时间，min ； — F m—— 同一组测量的算术平均值，mL/min ；F S —— 流量设定值，mL/min ；F max——同一组测量中流量最大值，mL/min ；F min ——同一组测量中流量最小值，ml/min 。
Agilent 1200 系列标准和制备自动进样器用户手册注意©安捷伦科技有限公司， 2008根据美国和国际版权法，未经安捷伦公司书面许可，本书内容不得以任何形式复制（包括电子存储修改或翻译）。
手册部件号G1329-97012版本11/08Germany印刷Agilent TechnologiesHewlett-Packard-Strasse 876337 Waldbronn仅供研究之用。
禁止在诊断过程中使用。
声明本书内容如有改变，恕不另行通知。
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技术许可本书对硬件和/或软件的介绍已获得特许，未经许可，不得使用或复制。
权力限制说明如果软件用于某一美国政府基本合同或次级合同，软件的使用将作为下列情况之一被许可：按照法案DFAR252.227-7014（1995年6月）确定的“商业计算机软件”；或者按照法案FAR 2.101 (a)确定的“商业条款”；或者按照法案FAR 52.227-19（1987年6月）确定的“限制计算机软件”；或者任何相当机构法规或合同条款。
软件的使用，复制或解密受安捷伦科技标准商业许可条款的管理，美国政府的非DOD部门和机构将获得不比法案FAR 52.227-19 (c) (1-2)（1987年6月）大的权利。
美国政府的用户将获得不比法案FAR 52.227-14 (c) (1-2)（1987年6月）或DFAR252.227-7015 (b) (2)（1995年11月）确定的限制权利大的权利，这一原则适用于任何技术数据。
安全警告小心提示表示危险。
提醒您在操作过程中注意，如果执行不当，将影响产品或丢失重要数据。
Agilent 1200 LC（中文版 B01.01）现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、培训目的：●基本了解1200LC硬件操作。
●掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
二、培训准备：1、仪器设备：Agilent 1200LC●G1310A :(单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。
● G1313A（标准型自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1314A（VWD检测器）。
● G1362A（示差检测器）。
●色谱柱: Eclipse XDB-C18 150 x 4.6 mm, 5um column P/N 993967-9022、溶剂准备：●色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇。
●二次蒸馏水基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“显示顶部工具栏”，“显示状态工具栏”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开冲洗阀。
7、点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面。
8 、设流速：5ml/min，点击“确定”。
9、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
10、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，关闭冲洗阀。
11、点击“泵”图标，点击“设置泵…选项”，设流速：1.0ml/min。
安捷伦1200仪器测定16种多环芳烃设置摘要：1.安捷伦1200 液相色谱仪简介2.多环芳烃的测定背景和意义3.安捷伦1200 仪器测定16 种多环芳烃的设置方法4.示差检测器的影响和基线冲平5.样品峰的影响和正常范围6.安捷伦1200 仪器测定16 种多环芳烃的优点正文：一、安捷伦1200 液相色谱仪简介安捷伦1200 系列快速高分离液相色谱系统，系统配置灵活，可以使用二元、三元和四元梯度高效液相色谱系统。
在分辨率、灵敏度和度不变的前提下，分析速度是常规高效液相色谱仪的20 倍、分辨率提高了60%。
二、多环芳烃的测定背景和意义多环芳烃是一类具有强烈致癌作用的有机化合物，广泛存在于土壤、水体和大气中。
因此，对多环芳烃的测定具有重要的环境保护和公共卫生意义。
三、安捷伦1200 仪器测定16 种多环芳烃的设置方法在测定16 种多环芳烃时，首先需要对安捷伦1200 液相色谱仪进行适当设置。
具体步骤如下：1.配置合适的色谱柱和移动相；2.设定梯度洗脱程序；3.设置波长范围和积分时间；4.校准仪器。
四、示差检测器的影响和基线冲平示差检测器是液相色谱仪的关键部件，其本身对手影响比较大。
在进行多环芳烃的测定时，需要等到基线冲平后再进样。
此外，样品峰的大小也会对基线产生影响，如果样品峰较高，基线在0 基线上下200 范围内都算正常。
五、样品峰的影响和正常范围样品峰的影响和基线冲平有关，当样品峰较高时，基线在0 基线上下200 范围内都算正常。
此外，样品的处理和进样方式也会对样品峰产生影响，需要根据实际情况进行优化。
六、安捷伦1200 仪器测定16 种多环芳烃的优点安捷伦1200 液相色谱仪在测定16 种多环芳烃时，具有以下优点：1.分析速度快，提高工作效率；2.分辨率高，确保测量准确性；3.灵敏度高，可检测低浓度样品；4.系统配置灵活，适用于不同测定需求。
Agilent 1200(四元泵)高效液相色谱仪的标准操作规程（美国安捷伦公司）一、准备工作1．更换纯净水，冲洗色谱柱的纯净水需每天更换，以免长菌。
各溶剂瓶需明确标明瓶内所装液体。
2．打开液相色谱仪柱温箱，按照色谱柱上标示的方向，连接试验所需色谱柱，连接色谱柱时切勿装反。
3．依次打开色谱仪各模块电源，待各模块自检完成后，双击“HPLC联机”图标，化学工作站自动与1200 LC通讯，进入工作站。
4．将要使用的各通道上的滤头放入已经0.45um滤膜过滤、脱气（约10分钟）的水相或流动相中，点击“Methood and Run Control”界面中的“启动”图标，操作界面被激活，由灰色变为绿色；同时调出检测样品所需的方法。
5．打开Purge阀，点击泵图标，在Setup pump选项中设置流速和比例来排气泡。
若使用A、B两通道，则应分别以5ml/min的流速、100%的比例各排液5min。
（脱气机的内腔体积一般为12ml，故排液时间要长，以便能保证各通道管路中充满检测样品所需的水相和有机相）purge结束后，将泵的流速调为0，旋紧purge阀（切勿在5ml/min流速时旋紧purge阀）。
将流速设为1ml/min，以10%的甲醇水（或乙腈水），冲洗色谱柱30min。
6．点击泵的图标，改变所需通道（已purge完）的比例，已达到检测样品所需的流动相条件，平衡色谱柱。
同时按各溶剂瓶中液体的真实体积，设定溶剂瓶体积。
二、数据采集1．点击左上角样品瓶图标，选择样品信息，更改文件保存路径、样品名称、样品位置等信息按要求填写，确认无误后点击确定。
2．点击自动进样器图标，选择设置进样器，设定进样体积。
选择进样方式，一般选择洗针进样方式，洗针瓶位置一般设为样品托盘的第91位，洗针液体一般为50%的甲醇水溶液。
3．点击检测器图标，更改自己所需的检测波长，参比波长（如无需参比波长请关闭），打开紫外灯。
如为DAD检测器时，光谱信息储存请选择全部，以便为图谱处理时提供所需依据。
Agilent 1200全新Agilent 1200 系列液相色谱系统和模块1. 1200 系列快速高分离液相色谱系统在安捷伦1200系列快速高分离LC 系统，与常规HPLC 相比，在没有牺牲分辨率、精密度和灵敏度的前提下，分析速度提高20倍，高分辨率提高60%。
安捷伦1200系列快速高分离液相系统可提供最快分析速度、最高分辨率，同时最大限度地保持系统低压力而设计的。
因此，它保留了常规HPLC 仪器和方法的耐用性和工作原理。
这种独特的设计使1200 RRLC成为了一种通用的液相分析流速范围适合的柱尺寸从1 到4.6-mm ID, 10 到300-mm 柱长，粒度1.5到10 µm∙比常规HPLC快20倍,并具有相同或更好的数据质量(分辨率、灵敏度、精密度)∙与HPLC相比高分辨率提高60%。
具有相同或更好的数据质量(分辨率、灵敏度、精密度)∙延迟体积可配置，适用于各种应用。
既可支持窄径柱又可支持标准柱- 适用于RRLC和HPLC ∙不影响现有HPLC方法的兼容性。
标准延迟体积配置600 - 800 µL，柱子最长300 mm∙最适合支持窄径柱上的LC/MS。
低延迟体积配置120 µL∙法规适应性，符合最严格的法规要求∙有范围广泛的70多种RRHT柱具有广泛的适用性∙从HPLC到RRLC能进行简便、快速而可靠的方法转移RRHT和HPLC柱具有相同的化学性质∙2000 个样品/天。
高通量配置, 通过交替柱再生ACR实现系统包括2台泵、2根色谱柱和一个用于交替柱切换的2Ps/10Pt阀∙RRLC/UFLC条件下的一般性能：如下：∙比标准液相色谱快20倍∙比标准液相色谱的分辨率增加60%∙保留时间精密度一般小于0.1% RSD∙峰面积精密度一般小于0.5% RSD∙可以对0.03% 水平的杂质进行定量∙蒽的LOD小于1 pg∙与常规液相色谱方法兼容2. 1200 系列二元液相色谱系统最佳的梯度和流量性能当您需要最高的梯度和低流量准确度和精密度时，安捷伦1200系列二元梯度系统的卓越性能是您的首选这是所有高通量和超快速应用的理想系统，适用于所有高通量，和快速应用∙流量范围从0.050 到5 mL/min，适用于微径柱、2.1和4.6 mm 柱∙为快速色谱优化了系统延迟体积∙为了提高方便性和灵活性，可以选择可编程溶剂选择阀，结合四种溶剂中的两种，使您能得到4种不同的二元组合，具有最大的灵活性∙早期维护反馈EMF 使您能长期不间断地监测仪器使用∙通过Instant Pilot 组件或安捷伦化学工作站或EZChrom 软件，可以容易地进行编程和控制∙直接从前面板快速更换维护部件∙通过自我诊断、内置日志和预编程的测试方法，快速判断问题∙早期维护反馈EMF 长期不间断地监测仪器使用和用户预设的限度，一旦超出限度，将提供反馈信息3. 1200 系列四元液相色谱系统--理想的多溶剂梯度系统安捷伦1200系列四元泵适用于方法开发、研究和各种需要连续而广泛地进行溶剂选择溶剂的应用，在选择溶剂和自动化方面具有最大的灵活性。
