肿瘤坏死因子α

人肿瘤坏死因子α（TNF-α）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T20 ng/L -400 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。

用纯化的人肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α（TNF-α），再与HRP标记的肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α（TNF-α）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

肿瘤坏死因子α及其抑制剂的研究进展肿瘤坏死因子（TNF）α是一种在多种生物效应中起作用的细胞因子，主要由单核细胞、巨噬细胞和胸腺依赖淋巴细胞产生，分为溶解型和膜结合型。

TNFα通过与其受体（TNFR）特异性结合引起一系列细胞因子改变，进而实现促细胞生长和程序性细胞死亡并促进牙周炎、种植体周围炎以及局限性肠炎和类风湿性关节炎等疾病发展的作用。

TNFα抑制剂分为大分子抑制剂和活性小分子抑制剂，种类繁多，作用机制复杂，已大量应用于临床治疗并取得了优异的疗效；而新型TNFα抑制剂TNFR1前配体结合序列复合物对于TNFα引起的程序性细胞死亡、关节炎破骨活动有明显的抑制作用，具有治疗TNFα参与的炎性疾病的潜能。

标签：肿瘤坏死因子；肿瘤坏死因子受体；抑制剂；作用机制[文献标志码]A在牙周炎和种植体周围炎等炎性疾病中，肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）α是释放最早并起枢纽作用的炎性因子，其下游的核因子（nuclear factor，NF）-κB会改变破骨细胞NF-κB受体活化因子配基和骨保护因子的表达，而RANKL与OPG间的比例变化可以参与破骨细胞的形成，导致骨的吸收。

TN Fα达到一定质量浓度时还可以直接抑制成骨细胞的增殖和分化。

TNFα不仅在种植体周围炎及其所引起的失败种植体周高表达，而且其表达水平与炎症和骨吸收的严重程度呈正相关。

在许多TNFα相关疾病的治疗过程中，TNFα抑制剂收到了明显的疗效；但是，随着有关TNFα的作用机制逐渐清晰，人们对TNFα抑制剂有着更高的期盼，希望其可以更精确地作用到疾病产生的核心步骤，更少的不良反应，又不影响TNFα在宿主防御中可能起到的有利的生物学功能。

1 TNFαTNFα是一种在多种生物效应中起作用的细胞因子，属于TNF超家族成员。

TNFα主要由单核细胞、巨噬细胞和胸腺依赖淋巴细胞（简称T细胞或T淋巴细胞）产生，其主要作用是促炎症反应发生发展和调节自身免疫，譬如炎性骨吸收、程序性细胞死亡和自身免疫疾病等。

人肿瘤坏死因子α（TNF-α）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，细胞上清及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。

用纯化的人肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α，再与HRP标记的肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的人肿瘤坏死因子α呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：450pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

心力衰竭中肿瘤坏死因子-α的作用机制及抗细胞因子治疗北京大学医学部基础医学院04级临床一班90401123 王茜婷90401124 王天昱90401125 王玮90401126 王玺90401127 王琰90401128 王燕磊[摘要]心力衰竭是常见的临床综合征，是多数原发性心血管疾病的严重或终末阶段。

近年来，越来越多的研究证实肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 等细胞因子在充血性心力衰竭的发展中起重要的作用。

其通过抑制心肌收缩力、促进心肌细胞凋亡及介导心肌重构等作用引发或加重心力衰竭。

鉴于目前对细胞因子生物效应的认识及其在心力衰竭中病理、生理发生机制的作用,抗细胞因子治疗心力衰竭已成为近年来研究治疗心力衰竭的热点。

本文将TNF-α在心力衰竭时对心脏的作用机制, 及抗细胞因子治疗心力衰竭的现状做一综述。

[关键词]心力衰竭发病机制细胞因子肿瘤坏死因子-α抗细胞因子治疗1.引言心力衰竭( heart failure, HF)是指由各种心脏疾病导致心功能不全的一种综合征,绝大多数情况下是指心肌收缩力下降使心排出量不能满足机体代谢需要,器官、组织灌流不足,同时出现体循环和(或)肺循环淤血表现。

心力衰竭为各种心脏疾病的终末期表现,是导致心脏病患者死亡重要原因。

心力衰竭发病机制复杂,神经体液机制、氧化应激和心肌细胞凋亡在心力衰竭中扮演不同角色。

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是由激活的单核/巨噬细胞分泌的一种具有多种生物活性的细胞因子，与受体结合能产生多种生物效应，如免疫刺激、调节机体的抗菌作用、蛋白激酶C 的激活和涉及多种炎症、细胞生长的基因表达的激活。

心肌细胞等多种非免疫细胞在某些应激状态下(如心力衰竭) 也具有产生TNF-α的能力。

心力衰竭时心肌细胞可能通过如下机制产生TNF -α：(1)心肌组织缺血、缺氧激活了心肌细胞和心肌局部单核/巨噬细胞,导致TNF - α的表达增加；(2)压力负荷刺激作用心脏时,心肌细胞表达TNF - α明显增加; (3)心力衰竭时交感-肾上腺系统及肾素-血管紧张素-醛固酮系统的激活可能直接影响细胞因子的表达。

肿瘤坏死因⼦基本简介肿瘤坏死因⼦（TNF）是⼀种由巨噬细胞对细菌感染或其他免疫源反应⾃然产⽣的细胞因⼦。

是由巨噬细胞分泌的⼀种⼩分⼦蛋⽩。

是⼀类能直接造成肿瘤细胞死亡的细胞因⼦。

肿瘤坏死因⼦与⼲扰素协同作⽤可杀死肿瘤细胞。

根据其来源和结构不同分为两种类型，即TNF－α和TNF－β。

前者主要由巨噬细胞产⽣，LPS是诱导其产⽣的较强刺激剂，T细胞和NK细胞在某些刺激因⼦（如PMA）作⽤下也可分泌TNF－α；后者主要由活化T细胞产⽣，T细胞在抗原、丝裂原等刺激下可产⽣⾼⽔平的TNF－β。

TNF－β原称淋巴毒素（1ymphotox－in，LT）。

肿瘤坏死因⼦TNF-α主要由单核－巨噬细胞分泌；TNF-β主要由活化的T淋巴细胞分泌，两者有相似致热性。

⼩剂量呈单峰热，⼤剂量呈双峰热；TNF在体内外均能刺激IL-1的产⽣。

不耐热，70℃30min失活。

1975年Carswell等发现接种BCG的⼩⿏注射LPS后，⾎清中含有⼀种能杀伤某些肿瘤细胞或使体内肿瘤组织发⽣⾎坏死的因⼦，称为肿瘤坏死因⼦。

1985年Shalaby把巨噬细胞产⽣的TNF 命名为TNF-α，把T淋巴细胞产⽣的淋巴毒素(lymphotoxin,LT)命名为TNF-β。

TNF-α⼜称恶质素。

基本信息药物类别：抗肿瘤药所属类别：⽣物反应调节剂药物名称：肿瘤坏死因⼦产⽣过程⼤量蛋⽩质本质的肿瘤坏死因⼦（1）TNF-α是⼀种单核因⼦，主要由单核细胞和巨噬细胞产⽣，LPS是较强的刺激剂。

IFN-γ、M-CSF、GM-CSF对单核细胞/巨噬细胞产⽣TNF-α有刺激作⽤，⽽PGE则有抑制作⽤。

前单核细胞系U937、前髓细胞系HL-60在PMA刺激下可产⽣较⾼⽔平的TNF-α。

T淋巴细胞、T细胞杂交瘤、T淋巴样细胞系以NK细胞等在PMA刺激下也可分泌TNF-α。

SAC、PMA、抗IgM可刺激正常B细胞产⽣TNF-α。

此外，中性粒细胞、LAK、星状细胞、内⽪细胞、平滑肌细胞亦可产⽣TNF-α。

肿瘤坏死因子正常参考范围全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：肿瘤坏死因子（TNF）是一种由免疫细胞产生的蛋白质，是机体的重要炎症介质之一。

TNF存在于体内的主要两个亚型为TNF-α和TNF-β，其中TNF-α是最为广泛研究的亚型。

TNF-α主要由巨噬细胞、淋巴细胞、树突细胞等免疫细胞分泌，以及一些非免疫细胞如肿瘤细胞、血管内皮细胞等也可产生TNF-α。

TNF-α的主要作用是发挥促炎效应，同时也具有调节免疫反应、调节细胞增殖凋亡等功能。

肿瘤坏死因子的异常水平与多种疾病的发生、发展密切相关。

TNF-α过高或过低的表达都可能导致机体的免疫应答紊乱，从而引起免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤等多种疾病的发生。

监测肿瘤坏死因子的水平是临床诊断和治疗重要的一环。

肿瘤坏死因子正常参考范围则是指肿瘤坏死因子在健康人群中的典型范围。

由于不同的实验室、不同的测量方法可能有所不同，因此肿瘤坏死因子的正常参考范围会存在一定的差异。

一般来说，正常人群中肿瘤坏死因子的水平较低，在健康成年人血清中，TNF-α的正常水平一般在2-20pg/mL之间。

在特定疾病状态下，肿瘤坏死因子的水平可能出现异常。

在炎症性疾病如类风湿关节炎、炎症性肠病等中，TNF-α的水平常常明显升高；而在某些感染性疾病、免疫相关性疾病、恶性肿瘤等中，TNF-α的水平也可能发生变化。

对于某些疾病的诊断和疗效监测，监测肿瘤坏死因子的水平具有一定的临床意义。

肿瘤坏死因子在体内的浓度受到多种因素的影响。

除了疾病状态外，情绪、环境、生活方式、饮食等也可能对肿瘤坏死因子的水平产生影响。

在进行肿瘤坏死因子水平检测时，需要综合考虑患者的临床情况和全面评估。

肿瘤坏死因子正常参考范围是指在一般健康人群中，肿瘤坏死因子的典型水平范围。

监测肿瘤坏死因子的水平对于一些炎症性疾病、感染性疾病、免疫相关性疾病的诊断和治疗具有一定的帮助。

了解肿瘤坏死因子的正常参考范围，在临床实践中也能为医生提供参考，有助于更准确地评估患者的健康状况和疾病状态。

肿瘤坏死因子—α在急性胰腺炎中的作用细胞因子在急性胰腺炎发病机制的作用日益被重视，其中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）作为急性胰腺炎发病过程中极其重要的因子及其在疾病中的作用也同样被重视。

TNF-α不仅通过对胰腺、肠道、肝脏等多器官的损伤，导致机体出现严重的炎症反应，还介导其他炎症因子的释放，加重对机体的损伤。

标签：急性胰腺炎；TNF-α急性胰腺炎（acute pancreatitis）是临床上的急腹症，其发病机制目前尚不明确。

自从1988年Rinderknecht提出了白细胞过度激活学说[1]后，细胞因子在急性胰腺炎发病机制中的作用逐渐被重视，肿瘤坏死因子-α（TNF-α）作为急性胰腺炎始动因子的作用已经得到证实[2]。

现就促炎性细胞因子TNF-α在急性胰腺炎中的作用综述如下。

1 肿瘤坏死因子1.1 TNF-α的产生1975 年Carswell等发现了能使荷瘤鼠肿瘤发生出血、坏死而对正常组织细胞无明显作用的肿瘤细胞毒因子，Old将其命名为肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor TNF）。

TNF主要分为由活化T细胞产生的TNF-β和活化的单核细胞产生的TNF-α。

在人体内，产生TNF-α的主要细胞是单核巨噬细胞。

Ramudo等的研究表明，胰腺相关性腹水时胰腺腺泡细胞中的TNF-α量增加，而非单核细胞或淋巴细胞，可见腺泡细胞是真正产生TNF-a的炎症细胞[3]。

1.2 TNF-α的调节正常人循环中的TNF-α水平为（10～80）pg/mL。

在人和动物，能诱导产生TNF-α物质为LPS，静脉输入LPS后2h，血清TNF-α达到高峰，4h内恢复到基线水平。

部分细胞因子也能诱导TNF-α，例如：IFN、IL-1、IL-2等。

糖皮质激素、IL-4、IL-6、IL-10、PAF受体拮抗剂和抗MHC-Ⅱ类分子抗体等均能在转录水平或转录后水平抑制TNF-α产生。

能抑制NF-κB活性的物质（N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽等）和能抑制氧化酶的物质均能抑制TNF-α产生。

肿瘤坏死因子-α的药理学和病理学研究肿瘤坏死因子-α是通过结合跨膜受体发挥多种生理作用的多效应细胞因子，本文着重介绍其调节炎性反应、细胞凋亡和促进改善脑缺血方面研究的最新进展。

[Abstract] Tumor necrosis factor (TNF) -α is a pleiotropic cytokine, which exerts its biological functions by interactions with one of two transmembrane receptors. The current progress of among which the most important regulatory functions, inflammatory response and cell apoptosis, improvement of cerebral ischemia are discussed in this review.[Key words] Tumor necrosis factor (TNF) -α; Inflammatory response; Cell apoptosis; Cerebral ischemia1962年，O’Malley第一次证实了内毒素间接影响了肿瘤出血性坏死，提出了内毒素具有“肿瘤坏死因子样”调节作用。

Carswell等人证实了TNF（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）具有甲胆蒽A（MethA）诱导纤维肿瘤出血性坏死相似的药理作用[1]。

之后开始了肿瘤坏死因子的广泛研究，其结构、作用机制、病理学和药理学作用得到了重点研究和证实。

1 TNF-α的结构及合成TNF-α基因是人类第6号染色体的复制基因，由4个外显子和3个内含子组成。

成熟TNF-α序列的80%以上在第四个外显子中编码。

在生理条件下，肺、肝、脾、胸腺及肾脏的组织均有TNF-α mRNA的表达；脂多糖刺激、细菌和病毒入侵等致炎因素均能快速诱导心脏、胰腺、输卵管及子宫等多脏器对TNF-α的合成表达[2]。