胚胎培养胚胎培养.
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胚胎培养一、胚胎培养的概念1.胚胎:植物在受精后,受精卵形成合子,随即进行第一次分裂,进而形成分生组织和幼胚,再发育成成熟胚。
2.胚胎培养:胚胎培养是植物组织培养的一个主要领域。
植物胚胎培养是指对植物的胚(种胚)及胚器官(如子房,胚珠)进行人工离体无菌培养,使其发育成幼苗的技术。
二、胚胎培养的种类以及方法1.胚培养⑴幼胚培养①定义:将子叶期以前的具胚结构的幼小胚从母体上分离出来,放在无菌的人工环境条件下使其进一步生长发育形成幼苗的技术。
②特点:幼胚培养完全是异养的,离体条件下培养要求培养基成分复杂,培养不易成功。
附:以下几种发育方式:a、胚性发育,此种方式不能萌发成苗b、早熟萌发,长成的苗十分瘦弱c、产生愈伤组织,再由愈伤组织分化形成胚或不定芽⑵成熟胚培养①特点:成熟胚培养是自养的,培养基需要简单。
②主要目的:a、研究胚发育过程的形态建成b、生长调节物质的作用c、胚与胚乳相互关系和营养要求③培养方法:将受精后成熟或未成熟种子或果实,用70%-75%酒精表面消毒几分钟;用0.1%升汞溶液或饱和漂白粉溶液消毒10min,无菌水反复冲洗;无菌操作台上,直接或在解剖镜下剥取胚接种在培养基上。
2、胚乳培养⑴定义:指将胚乳组织从母体上分离出来,通过离体培养,使其发育成完整植株的技术。
⑵胚乳是由两个单倍的极核和一个单倍的精子结合而成的3倍体组织。
由它可获得无子结实的3倍体植株,进而可将它加倍成6倍体植株。
不同胚乳发育类型及发育时期直接影响外植体取材时期以及胚乳细胞产生愈伤组织频率。
胚乳培养的后代,常发生细胞染色体数目变化,形成多倍体、非整倍体等。
⑶培养的方法:取授粉4-8d后的幼果,常规消毒;无菌条件下切开果实,取出种子,分离出胚乳;接种在培养基上(MS、White等培养基,附加2,4-D或NAA 0.5~2.0,BA0.1~1.0。
),在25-270C和黑暗条件或散光下培养想成愈伤组织;转到分化培养基(MS培养基附加0.5~3.0 mg/l的BA及少量的NAA。
第4章《胚胎培养》复习题参考答案一、填空:1、胚胎培养包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。
2、离体胚的培养分为二种类型:成熟胚培养和幼胚培养。
3、幼胚培养时,其发育过程有三种方式:胚性发育、早熟萌发、产生愈伤组织。
4、由胚乳培养得到的植株,除少数是三倍体外,多数是由各种倍性细胞组成的嵌合体。
5、胚珠培养分二类:受精胚乳的培养和未受精胚珠的培养。
受精胚珠培养的目的:一是用来打破种子的休眠,二是挽救胚的发育,以获得杂交种。
未受精胚珠培养的目的是获得单倍体植株。
6、子房培养分授粉子房培养和未授粉子房的培养。
前者培养的目的是挽救杂种胚,后者培养的目的是获得单倍体植株。
二、名词解释:1、胚胎培养(embryo culture):是指将植物的胚胎与母体分离,培养在人工的培养基上形成幼苗的过程,包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。
2、胚性发育(embryonal development):植物幼胚接种到培养基上以后,仍然按照在活体内的发育方式发育,最后形成成熟胚(有时甚至可能类似种子),然后再按种子萌发途径出苗形成完整植株,这种途径发育的幼胚一般一个幼胚将来就是一个植株。
3、早熟萌发(early mature sprouting): 幼胚接种后,离体胚不继续胚性生长,而是在培养基上迅速萌发成幼苗,通常称之为早熟萌发。
4、胚培养(embryo culture):是指将胚从种子、子房或胚珠中分离出来,在进行组织培养,使其生长发育形成幼苗的过程。
5、胚乳培养(endosperm culture):是指将胚乳从母体上分离出来,放在无菌的人工环境条件下,让其进一步生长发育,以至形成幼苗的过程。
6、胚珠培养(ovule culture):是指将胚珠从母体上分离出来,在无菌的人工环境条件下培养,使其生长发育形成幼苗的过程。
7、子房培养(ovary culture):是指将子房从母体上分离出来,在无菌的人工环境条件下培养,使其生长发育形成幼苗的过程。
动物胚胎培育技术的操作指南随着科学技术的不断发展,动物胚胎培育技术在畜牧业和生物医学领域扮演着重要的角色。
胚胎培育技术可以帮助我们研究生殖生物学、改良家畜品种,甚至是克隆动物。
在这篇文章中,我们将介绍动物胚胎培育技术的操作指南,以帮助读者更好地理解和掌握这一技术。
胚胎培育技术主要包括体外受精(IVF)和胚胎移植两个步骤。
在体外受精阶段,首先需要从母体动物中收集卵子和精子。
对于较大的动物,如牛、猪和马,可以通过超声波引导下的卵巢穿刺采集卵子。
对于较小的动物,如小鼠或小鸟,可以通过解剖手术或通过特殊仪器采集卵子。
精子可以通过自然排出或通过人工方式采集。
采集到卵子和精子后,需要进行体外受精。
首先,将卵子和精子放入含有适当培养液的离心管中。
然后,通过离心或通过特殊仪器的帮助,使卵子和精子接触,促进受精的发生。
接下来,将受精卵转移到培养皿中,并将其置于恒温灭菌的培养箱中。
培养皿中的培养液需要定期更换,以提供所需的营养物质和生长因子。
胚胎培养的下一步是胚胎移植。
胚胎移植是将成熟的胚胎植入到母体动物的子宫内,使其继续发育。
在进行胚胎移植前,需要将母体动物的子宫内膜准备好,以提供适宜的环境供胚胎着床。
这可以通过激素治疗或手术操作来实现。
在胚胎移植过程中,需要将培养的胚胎转移到母体动物的子宫内。
这可以通过经阴道插管或腹腔手术来完成。
移植后,需要密切观察胚胎在母体内的发育情况。
一些胚胎可能无法成功着床或在早期发展阶段产生问题,这是正常现象。
但一旦胚胎着床成功并进一步发育,将会带来新生仔动物。
动物胚胎培育技术的操作需要具备一定的专业知识和技能。
操作时,需要注意保持手术场所的清洁和无菌,以避免感染。
培养液的配制和保存也需要严格按照制定的方案进行。
此外,在胚胎移植过程中,要小心处理胚胎,以防止对其造成损伤。
动物胚胎培育技术的应用十分广泛。
不仅可以帮助畜牧业提高品种质量和数量,还可以为生物医学领域提供重要的研究工具和资源。
第1篇一、实验目的1. 掌握胚胎培养的基本原理和操作步骤。
2. 学习在体外条件下模拟胚胎发育过程,观察胚胎的形态变化和生长情况。
3. 探讨不同培养条件对胚胎发育的影响。
二、实验原理胚胎培养是指将受精卵或早期胚胎置于体外的人工培养系统中,模拟体内环境,使其继续发育和生长。
通过胚胎培养,可以研究胚胎发育的规律,筛选优良胚胎,以及进行胚胎基因编辑等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 受精卵或早期胚胎- 培养基:DMEM/F12、KSR、Hams F12- 胎牛血清(FBS)- 促性腺激素(如hCG)- 透明质酸酶- 胚胎培养皿- 显微镜- CO2培养箱- 移液器- 计时器2. 实验仪器:- 超净工作台- 恒温箱- 高压灭菌器- 电子天平四、实验步骤1. 准备培养基:- 将DMEM/F12、KSR、Hams F12培养基按照说明书比例配制,并加入胎牛血清(FBS)。
- 将培养基在无菌条件下过滤除菌,并分装于培养皿中,备用。
2. 胚胎处理:- 将受精卵或早期胚胎置于超净工作台中,用消毒后的移液器吸取一定量的透明质酸酶,轻轻涂抹在胚胎表面。
- 适当放置一段时间,使透明质酸酶作用于胚胎表面,使其分散成单个细胞。
3. 胚胎培养:- 将处理后的胚胎放入装有培养基的培养皿中,放入CO2培养箱中培养。
- 每天观察胚胎的生长情况,记录胚胎的形态变化和细胞分裂情况。
4. 不同培养条件实验:- 将胚胎分别置于不同浓度的胎牛血清(FBS)培养基中培养,观察胚胎的生长情况。
- 将胚胎置于不同温度、pH值、氧气浓度等条件下培养,观察胚胎的生长情况。
5. 结果记录与分析:- 记录不同培养条件下胚胎的形态变化、细胞分裂情况以及生长速度。
- 对实验结果进行统计分析,探讨不同培养条件对胚胎发育的影响。
五、实验结果1. 正常培养条件下:- 胚胎在正常培养条件下能够正常发育,细胞分裂速度较快,形态变化明显。
2. 不同胎牛血清(FBS)浓度条件下:- 随着胎牛血清(FBS)浓度的增加,胚胎的生长速度和细胞分裂速度逐渐加快。
第二章胚胎培养金晓丽12第一节胚培养第二节胚珠和子房培养第三节胚乳培养第一节胚培养含义:采用人工的方法将胚及具胚的器官(例如子房、胚珠等)分Array离出来,在离体无菌条件下,发育成幼苗的技术。
培养对象:胚胎发生过程中的不同发育时期的胚和具胚的器官。
如:成熟胚、幼胚、胚珠培养、子房培养。
34一、胚培养的意义克服远缘杂交不亲和性和杂种不育性,获得种间或属杂种:种间和属间杂交中,受精作用能正常完成,胚也能进行早期的发育,但由于胚乳发育不良,杂种胚最终将会夭折,因而不能形成有发芽能力的种子。
研究合子胚的胚胎发育:离体培养的胚胎发育主要与三个因素有关:接种时胚体的大小、培养基的成分、接种前在胚珠中停留的长短。
如果接种的是球形胚,就会形成很多不正常胚,因为胚越小,对培养基的成分越敏感;如果接种的是心形或心形期以后的胚,胚的发育与体内发育相似。
克服种子休眠,提早结实:植物休眠影响育种和繁育工作胚培养常常可以克服这一类种子发育上的障碍,促进胚的生长发育。
通过胚的离体培养,可使休眠期缩短。
56获得单倍体植株:栽培大麦与球茎大麦进行杂交,部分染色体被淘汰,剩余为大麦单倍体。
由于只有大麦染色体的单倍体胚生长相当缓慢,且受精后2~5天胚乳逐渐解体,自然条件下难于获得大麦单倍体。
为此,必须把幼胚剥离出来培养。
缩短育种周期,提高育种效率:蔷薇属植物的栽培品种常需1年才能开花。
从离体培养胚获得的幼苗只需2~3个月即可开花,而利用这种花作父本,1年内可产生2个世代,大大地提高育种进程。
7稀有植物的繁殖:果实成熟初期,胚尚未发育成熟,种子不能萌发,利用胚培养可对这些不育种子进行培养。
例如:Makapuno椰子、焦核龙眼。
种子生活力的快速测定:萌发试验测定休眠的种子生活力所需时间很长,必须要预先进行后熟处理,后熟的种子和后熟的种子的胚在离体培养条件下的发芽速度相同。
8诱导胚性愈伤组织:胚是人工诱导胚性愈伤组织的优良外植体。
转基因技术在基础研究和育种中的应用越来越广泛,植物的转化再生体系是基因遗传转化的一个关键技术。
胚胎工程的操作方法胚胎工程是一种生物技术,旨在使用体外受精和体外培养的方法,以及分子生物学和遗传学技术,对胚胎进行操作和研究。
胚胎工程包括胚胎克隆、胚胎干细胞提取、基因编辑等技术,并用于生物学研究、治疗疾病等领域。
胚胎工程涉及的主要操作方法如下:一、体外受精:体外受精是胚胎工程的起点,即将精子和卵子在体外结合形成受精卵。
首先,从男性提取精子样本,然后从女性提取卵子样本。
通过实验室条件下的体外受精,将精子与卵子结合,形成受精卵。
二、胚胎培养:受精卵形成后,需要进行胚胎培养。
最常用的培养方式是将受精卵置于试管中,提供适宜的培养基,维持胚胎所需的生长条件,如温度、湿度、氧气浓度等。
通过培养,可以让胚胎继续发育,达到特定的发育阶段。
三、胚胎克隆:胚胎克隆是指将一个成熟的细胞核(核提取自器官细胞等成熟细胞)植入去核卵细胞中,形成新的胚胎。
胚胎克隆可以用于研究动物的遗传疾病、生物学发育等方面。
典型的胚胎克隆方法是核移植,即将所需细胞核提取出来,然后植入去核卵细胞内。
四、胚胎干细胞提取:胚胎在早期发育中的细胞称为胚胎干细胞(ES细胞)。
这些细胞具有多能性,可以发育成人体的各种组织和器官。
为了提取胚胎干细胞,通常从培育到一定的时点后,将胚胎的内细胞团或一部分细胞移植至体外环境,培养并分离出胚胎干细胞。
五、基因编辑:胚胎工程还包括基因编辑技术,用于改变胚胎的遗传信息。
例如,通过CRISPR-Cas9技术,可以精确地编辑胚胎的基因,纠正一些遗传缺陷或特定基因突变。
总的来说,胚胎工程涉及到体外受精、胚胎培养、胚胎克隆、胚胎干细胞提取和基因编辑等操作方法。
这些操作方法为研究生物学的发展、治疗疾病等提供了技术手段,但同样也存在着伦理和道德等方面的争议和限制。
因此,在进行胚胎工程研究时,需要遵循相关的伦理规范与法律法规,确保其在合理和可控的范围内进行。