3γ-谷氨酰转移酶(GGT)测定
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γ-谷氨酰氨基转移酶检测结果一致性及正确性分析梅四清;缪希莉【摘要】目的通过40例血清样品比对及参考方法赋值的γ-谷氨酰氨基转移酶(GGT)正确度验证物质将临床实验室的终端结果溯源到酶学的国际单位(SI),同时实现临床实验室的GGT结果可比性.方法将各品牌(德赛、德诺、罗氏、和光、积水、科华、华臣、西门子、迈克)试剂所组成的检测系统,对40例血清样品及2015年国家卫生计生委临床检验中心正确度验证计划GGT项目A、B 2样品进行平行检测,每例样品检测2次,连续检测3 d.根据检测结果统计8种试剂与罗氏试剂在GGT 项目医学决定水平处的偏移,计算9种品牌检测系统检测正确度验证计划A、B 2样品均值与赋值的偏移.结果8种品牌试剂所组成的检测系统中,和光、积水、科华、华臣、西门子、迈克试剂与罗氏试剂在医学决定水平处的各偏移均<5.0%;德诺试剂医学决定水平处的偏移在7%左右;德赛试剂医学决定水平处的偏移均超过14%.9种品牌试剂中,德赛与德诺2试剂所组成的检测系统正确度偏移均超过5.5%的判断标准,而罗氏、和光、积水、科华、华臣、西门子和迈克试剂所组成的检测系统最大正确度偏移均不超过4.8%.结论和光、积水、科华、华臣、西门子、迈克与罗氏所组成的各自检测系统检测结果一致性、正确性均符合判断标准.%Objective Through the comparison of 40 serum samples,gamma-glutamyltransferase(GGT) trueness verification materials with reference method assignment are employed to trace the terminal results of clinical laboratories to the international system of units(SI) of enzymology,in order to realize GGT determination results' comparability in clinical laboratories. Methods Determination systems composed by reagents of different brands (DiaSys,DNTS,Roche,Wako,Sekisui,KHB,Huachen,SIEMENS andMaccura) were employed to conduct parallel test for the 40 serum samples and the A and B samples of trueness verification plan GGT program of the National Center for Clinical Laboratories,with 2-time tests for each sample and 3 d continual test. Meanwhile,based on the results,the bias for GGT program's medical decision level of 8 kinds of reagents and Roche reagent was evaluated,and the mean values and assignment biases of A and B samples of trueness verification plan for the 9 brands' determination systems were calculated. Results For the determination system composed by 8 brands of reagents,the biases amongWako,Sekisui,KHB,Huachen,SIEMENS,Maccura and Roche were <5.0% at medical decision level,the bias of DNTS at medical decision level was about 7%,and the bias of DiaSys at medical decision level is above 14%. In the 9 brands of reagents,the bias of the determination system composed by DiaSys and DNTS was above the judgement standard 5.5%,while the maximum bias of the determination system composed byRoche,Wako,Sekisui, KHB,Huachen,SIEMENS and Maccura was less than 4.8%. Conclusions The result consistency and trueness of the determination system composed byRoche,Wako,Sekisui,KHB,Huachen,SIEMENS and Maccura meet judgement standard.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2017(032)011【总页数】4页(P1051-1054)【关键词】γ-谷氨酰氨基转移酶;正确度验证;溯源性【作者】梅四清;缪希莉【作者单位】武汉大学人民医院检验科,湖北武汉 430060;华中科技大学同济医学院附属武汉普爱医院,湖北武汉 430030【正文语种】中文【中图分类】R446.1血清γ-谷氨酰氨基转移酶(gamma-glutamyltransferase,GGT)是最常用的肝功能检测项目之一,在肝病诊断及治疗中起了积极作用。
γ-谷氨酰基转移酶测定的操作规程1、用途:测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。
2、检验原理:其在GGT的作用下,生成呈色产物5-氨基-2-硝基苯甲酸,后者在405nm波长处有最大吸收,其生成量与血浆中GGT活性成正比。
根据测定405nm波长下吸光度增加的速率,即可测出血清中GGT活性。
3、适用仪器:AU480奥林巴斯全自动生化分析仪。
4、样本要求:4.1、样本种类:新鲜无溶血血清。
4.2、样本采集:常规静脉采血约3ml,不抗凝。
置普通管中,或采用含有分离胶的真空采血管。
4.3、样本干扰:对反映吸光度有干扰的样本,包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果遇上述情况建议重新采集标本。
4.4、样本保存:血清样本2℃—8℃可稳定7天,-20℃可保存一个月,忌反复冻融。
5、检测方法:5.1、试剂的准备:试剂开瓶即可使用。
5.2、检测步骤:1cm)2、全自动生化分析仪操作步骤:参数设置→试剂装载→校准→质控→样品加载→测定→结果审核→报告。
5.3、校准:用K因素进行试剂空白校准,也可使用Roche公司校准品进行校准操作,当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时,须重新校准。
5.4、结果计算:全自动生化分析仪会自动给出检测结果。
6、参考范围:(各医院应该根据本地区实际情况建立自己的参考范围)7、注意事项:7.1、试剂具有一定的酸碱性,避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
7.2、使用后的器具应按照规定处理,扔入指定的垃圾箱内,不可随处乱扔,防止环境污染和二次使用。
7.3、由于运输过程产生渗液或漏夜的产品,或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂,不可使用。
7.4、试剂只用于体外诊断。
8、参考文献:陆永绥、李清华、张伟民主编,临床检验自动化仪器分析标准操作规程,浙江大学出版社,2006.王惠萱、李雪梅、王冈,临床检验操作手册,云南科技出版社,2008.中华人民共和国卫生部医政司,全国临床检验操作规程(第三版),东南大学出版社,2006。
γ-谷氨酰转移酶等级
γ-谷氨酰转移酶(gamma-glutamyl transferase,简称GGT)是一种酶,参与谷氨酰肽的代谢。
根据其活性水平,可以将GGT分为以下等级:
1. 低水平:GGT活性在正常范围内或稍高于正常范围,一般不需要进一步检查或治疗。
2. 中等水平:GGT活性轻度升高,可能与轻度的肝功能异常相关。
进一步检查可能需要,如肝功能测试、超声波检查等。
3. 高水平:GGT活性明显升高,通常提示肝功能异常或胆道系统疾病。
进一步检查可能需要,如肝功能测试、胆道超声、胆管造影等。
4. 极高水平:GGT活性极度升高,可能与严重的肝病(如肝炎、肝硬化)或胆道梗阻相关。
紧急的进一步检查和治疗通常是必要的。
需要注意的是,GGT活性的升高并不一定意味着有肝病或胆道疾病存在,因为GGT也存在于其他组织(如肾脏、胰腺、肺等)。
因此,GGT的等级评估通常需要结合其他临床和实验室检查结果进行综合分析。
1、方法依据:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)测定试剂盒测定方法2、适用范围:适用于人血清γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)的测定。
3、试剂仪器:3.1 试剂:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2 试剂储存:未打开的试剂盒避光保存于2℃~8℃,有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存,在2℃~8℃可稳定30天。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器:迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理γ-GT 催化谷氨酰基转移给受体的反应。
本法以L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸为底物,将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽,生成5-氨基-2-硝基苯甲酸盐。
在405 nm进行吸光度检测,吸光度升高的速率与标本中γ-GT 活力成正比。
γ-GTL-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸 + 双甘肽5-氨基-2-硝基苯甲酸盐 + L-γ-谷氨酰双甘肽4.2样本要求新鲜血清样本,采集后及时测定,应避免溶血和污染。
血清样本于20℃~25℃保存可稳定6天4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”4.3.2 校准:4.3.2.1 标准液的准备:标准液的准备:校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品,按说明书要求稀释后分装,-20℃冷冻保存,用前提前15分钟从冰箱中取出,复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序:首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准:1)换试剂批号或出现质控漂移时;2)当仪器做完保养后;3)仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准,校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控:在标本开始之前做质控,质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围女:9~39 U/L男:11~61 U/L(37℃)(注:各实验室应有自己的参考范围。
血清γ-谷氨酰转移酶(GGT)测定1.实验原理GGTGlupa-C+gly-gly ——→Glu-gly-gly+5-氨基-2-硝基苯甲酸在波长405nm处测定5-氨基-2-硝基苯甲酸的生成速率,计算出GGT活力。
2. 标本:2.1 病人准备:新鲜血清,采血后应及时分离,避免溶血。
2.2 类型:血清、肝素或EDTA血浆,应避光保存。
3. 标本存放:15~25℃保存可稳定2天;2~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定3个月,如冰冻保存,不可反复冻融!。
4. 标本运输:冰冻条件下保存运输。
5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染、脂血等存运输的标本。
6. 实验材料6.1 试剂:中生谷氨酰转移酶试剂盒(试剂1+试剂2)6.1.1 试剂组成6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂有效期为12个月。
试剂必需避光保存。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示:当试剂空白吸光率A405nm(1.0cm)>0.8,或有混浊和可见颗粒时,请不要再使用。
6.1.5 注意事项:试剂请勿直接接触皮肤、眼睛,如有接触,请用大量清水清洗。
请勿吞服。
6.2 校准品:使用Cfas提供的专用校准品对自动分析仪进行校准,参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器:奥林巴斯AU640生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪项目测定参数.SOP文件。
8.2仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪操作规程.SOP 文件。
9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法:以OLYMPUS多项校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算,以U/L报告。
肝功检查各项指标的意义(一)血清转氨酶为氨基酸转移酶的简称,是一组催化氨基酸与α-酮酸之间的氨基转移反应的酶类。
属于细胞内功能酶,肝细胞坏死或肝细胞膜通透性增加时,进入血液,血中酶活性增加,标志着肝细胞损害。
用于肝功能检查者主要有:天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)1.参考区间ALT 10~40 U/L(37℃)AST 10~40 U/L(37℃)AST/ALT 1~1.15(37℃)2.转氨酶异常的分类临界升高:<1.5倍的正常值轻度升高:1.5-5倍的正常值中度升高:正常值的5-10倍重度升高:>10倍的正常值3.临床意义ALT和AST可提示肝细胞损伤程度反应急性肝损伤时,ALT敏感反应损伤程度时,AST较为敏感,AST/ALT增高生理变异较小:新生儿期生理性升高;正常人在剧烈运动后AST也会升高;年龄、性别、妊娠和进餐对转氨酶活性影响不大。
3.1肝源性转氨酶升高感染:肝脏特异性感染,非特异性的全身或局部感染累及肝脏中毒:药物、酒精、工业及生物毒物代谢性肝病:肝脏内脂肪、铜、铁等异常沉积淤血、缺氧:心衰、呼衰、休克、低血压、手术免疫异常:风湿病、自身免疫性肝炎胆胰疾病累及肝脏:胆囊炎、胆石症、胰腺炎、胆汁淤积性肝病其他:肝硬化、肝癌、浸润性肝病、肝脓肿、多囊肝3.1.1.急性肝炎感染(各型病毒性肝炎)中毒(药物、化学毒物)乙醇ALT ↑↑,可达上百上千AST ↑AST/ALT <1.0m-AST/总AST可判断急性肝炎的严重程度急性重症肝炎二种特殊情况:ALT非良性降低ALT升高程度与肝损害程度相关,但两者并非完全一致,早期病人,ALT明显升高,随着肝细胞广泛坏死,不能合成转氨酶。
重症肝炎时的“酶胆分离”胆红素进行性明显升高,ALT活性下降。
3.1.2.慢性肝炎慢性迁延性肝炎转氨酶轻度至中度升高,常介于100-400u/L慢性活动性肝炎转氨酶持续反复升高,较慢迁肝明显,ALT高于AST,AST/ALT<1.0定期测定有助于肝内病变的活动程度3.1.3.肝硬化肝硬化静止期转氨酶在参考区间内或轻度升高肝硬化活动期转氨酶轻度或中度升高(100-300),并有其他肝损表现胆汁性肝硬化转氨酶活性较高,与黄疸程度大致平行肝硬化肝细胞坏死严重时,ALT低于AST,AST/ALT>1.443.1.4.原发性肝细胞癌转氨酶可轻、中度增高或正常转氨酶明显升高提示肝细胞坏死,预后较差半数肝癌m-AST明显增高,AST/ALT>3.03.1.5.胆道疾病胆道病变尤其是胆道梗阻时,转氨酶升高阻塞性黄疸伴有胆道感染时,转氨酶可明显升高一般认为,肝外胆道梗阻,AST不超过300U/L,ALT不超过400U/L,梗阻解除1-2周恢复3.1.6.酒精性肝病酒精对肝细胞线粒体有特异性损害,m-AST↑有特异性,AST/ALT>6m-AST与γ-GT可共同反应酒精对肝脏的损害,戒酒后AST多在3周内恢复,较GGT早。
r-谷胺酰转肽酶(GGT)测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆GGT浓度测定。
【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。
【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。
【方法学原理】GGT催化谷氨酰基转移给受体的反应。
本法以L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸为底物,将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽,生成5-氨基-2-硝基苯甲酸盐。
在405 nm进行吸光度检测,吸光度升高的速率与标本中GGT活力成正比。
GGTL-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸 + 双甘肽5-氨基-2-硝基苯甲酸盐 + L-γ-谷氨酰双甘肽【试剂】1.在测定时各组分和浓度试剂1(R1)双甘氨肽试剂2(R2)L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2-8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
2.校准品:DiaSys TruCal U。
3. 质控品:Randox Assayed Multiseral Level 1 and Level 2。
【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本,适用标本为血清或肝素抗凝血浆(肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l),不可从正在静脉滴注手臂上采血,上机标本不能有凝块,样品采集后2天内离心标本,分离血清,血清或血浆标本室温保存4天,冷藏7天,冷冻保存6个月。
血清或血浆钠结果高于线性不建议稀释。
【操作步骤】1.仪器测定参数设置Test Name:Sample: Volume L LL LLSec. ODMethod: First LLast LReaction Slope:Measuring Last LMeasuring LastLinearity ANo-Lag-Time:Period2.试剂准备:将准备好的试剂置仪器试剂盘中(8℃)。
3.校准校准物的准备:将校准物从冰箱取出,冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶,轻轻颠倒混匀3次,不可用力震摇,室温放置30分钟至完全溶解;液体校准物从冰箱取出,室温放置15分钟以平衡至室温。
血清L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT)活性测定及意义GGT在体内分布较广,如肾、肝、胰等脏器均有此酶,但血清中GGT主要来自肝脏,具有较强的特异性。
所以当肝胆系统病变的时候,GGT活性升高,临床上测定此酶活性来协助诊断肝胆疾病。
1.正常参考值:
速率法:健康成年男性:11-50U/L
健康成年女性:7-32 U/L
重氮反应比色法:健康成年男性:3-17 U/L
健康成年女性:2-13 U/L
2.临床意义
人体各器官中GGT含量按下列顺序排列:肾、前列腺、胰、肝、肓肠和脑。
在肾脏、胰腺和肝脏中,此酶含量之比约为100:8:4。
肾脏中GGT含量最高,但肾脏疾病时,血液中该酶活性增高却不明显。
有人认为,肾单位病变时,GGT经尿排出,测定尿中酶活力可能有助于诊断肾脏疾病。
GGT主要用于诊断肝脏疾病。
原发性肝癌、胰腺癌和乏特壶腹癌时,血清GGT活力显著升高,特别中诊断恶性肿瘤患者有无肝转移和肝癌术后有无复发进,阳性率可高达90%。
嗜酒或长期接受某些药物如苯巴比妥、苯妥因钠、安替比林者,血清GGT活力常常升高。
口服避孕药会使GGT值增高约20%。
但是,GGT作为肝癌标志物的特异性较差,急性肝炎、慢性肝炎活动期、阻塞性黄疸、胆道感染、胆石症、急性胰腺炎等时此酶活性均可以升高。
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导语:很多的人都会出现y谷氨酰基转移酶比较偏高的现象,那么什么叫做y谷氨酰基转移酶呢?y谷氨酰基转移酶又是因为什么原因升高的呢?又是因为什
很多的人都会出现y谷氨酰基转移酶比较偏高的现象,那么什么叫做y谷氨酰基转移酶呢?y谷氨酰基转移酶又是因为什么原因升高的呢?又是因为什么原因偏低的呢?基本上是可以分为两种类型的,生理性和病理性两种,那么我们应该怎么样治疗和预防呢,下面一起来看看吧。
把所有的问题一起普及一下。
γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)广泛分布于人体组织中,肾内最多,其次为胰和肝,胚胎期则以肝内最多,在肝内主要分布于肝细胞浆和肝内胆管上皮中,正常人血清中γ-GT主要来自肝脏。
正常值为3~50U/L(γ-谷氨酰对硝基苯胺法)。
此酶在急性肝炎、慢性活动性肝炎及肝硬变失代偿时仅轻中度升高。
但当阻塞性黄疸时,此酶因排泄障碍而逆流入血,原发性肝癌时,此酶在肝内合成亢进,均可引起血中转肽酶显著升高,甚至达正常的10倍以上。
酒精中毒者γ-GT亦明显升高,有助于诊断酒精性肝病。
1临床意义
谷氨酰转肽酶检测试剂(1)原发性或转移性肝癌时,血中GGT明显升高。
其原因是癌细胞产生的GGT增多和癌组织本身或其周围的炎症刺激作用,使肝细胞膜的通透性增加,以致血中GGT增高。
(2)阻塞性黄疸、急性肝炎、慢性肝炎活动期、胆道感染、肝硬化等都可使GGT升高。
(3)其他疾病如心肌梗塞、急性胰腺炎及某些药物等均可使血中GGT 升高。
谷氦酰转肽酶(y-GT),正常值为50单位。
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