嗜酸性粒细胞直接计数

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娄底市第三人民医院检验科

操作文件 文件编号:JZ-CZ-08

生效日期:2012年6月01日

责任部门:急诊化验室 第 1 页 共 1 页

编写:伍海波 制定日期:2011.01.01

审核:周可成

核准:伍海波 修订日期:2012.06.01

1.项目名称:

嗜酸性粒细胞直接计数

2.测定原理:

用稀释液将血液稀释一定倍数,嗜酸性粒细胞在含有伊红的低渗溶液中被染成红色,而红细胞及其他白细胞破裂或溶解。混匀后充入计数池中,计数一定体积内嗜酸性粒细胞数,即可算得每升血液中嗜酸性粒细胞数。

3.标本要求:

用含EDTA.K2抗凝塑料管抽取静脉血2ml,混匀

4.试剂:

4.1 2%伊红液5ml 丙酮5ml 蒸馏水加至90ml

4.2 保存条件:2-8℃

5.仪器和材料:

计数板、试管、吸管

6.操作程序:

6.1 在试管中加嗜酸细胞稀释液0.38ml;

6.2 血液充分混匀,取血标本20ul,加入稀释液内混匀,待红细胞溶解后两侧充池;

6.3 静置3-5分钟,低倍镜(必要时用高倍镜)下计数10个大方格内嗜酸性粒细胞数;

6.4 计算:10个大方格内嗜酸性粒细胞数×20=嗜酸性粒细胞数/ul。

6.5 注意事项:

a. 血液稀释后应于1小时内计数完毕,否则嗜酸性粒细胞会逐渐被破坏,使结果偏低或不易辨认;

b. 充池前要充分混匀,但又不宜用力过猛;

c. 注意与中性粒细胞区别,以免误认;

d. 住院病人采标本时间力求统一,以免受日间生理变化的影响;

e. 用白细胞总数与分类百分率求得的绝对值不如直接计数结果准确。

7.计算和参考值

正常参考值:0.05×109~0.5×109/L (50-300/ul)

8. 参考文献

全国临床检验操作手册