溶血性贫血的实验室检查

一、红细胞破坏过多的检查

1. 外周血液常规 红细胞计数、血红蛋白含量减低，血涂片中可见破碎红细胞、异形红细胞等。出现典型的异形红细胞或自身凝集现象时，可提供溶血原因的线索。

2. 血浆游离血红蛋白测定意义 正常血浆只有微量游离血红蛋白，>40mg/L是溶血尤其是血管内溶血的重要指标，如阵发性睡眠血红蛋白尿、血型不合输血反应等。血管外溶血，如遗传性球形细胞增多症，一般不增高。

3. 血清结合珠蛋白测定（Hp）意义

1. 血清结合珠蛋白降低见于：

⑴各种溶血性贫血，包括血管内或血管外溶血；

⑵肝细胞损害、传染性单核细胞增多症、先天性无结合珠蛋白血症等。

2. 血清结合珠蛋白增高见于感染、组织损伤、肝外阻塞性黄疸、恶性肿瘤等。

4. 血浆高铁血红素白蛋白试验意义 本试验有助于鉴别血管内或血管外溶血，阳性表示严重血管内溶血。如阵发性睡眠性血红蛋白尿时，出现一条高铁血红素白蛋白区带，而球形细胞增多症系血管外溶血则无此区带。

5. 尿液检查

⑴尿胆原排出增多；

⑵隐血试验阳性，这是因为当血浆游离血红蛋白显著增高，超过结合珠蛋白的量和肾小管再吸收功能时，出现的血红蛋白尿；

⑶尿含铁血黄素试验呈阳性反应，是反映慢性溶血，尤其是血管内溶血。

6. 红细胞寿命测定 是检测溶血的可靠指标，常用51Cr、3P-DFP或二异丙基氟磷酸标记红细胞法，能反映红细胞寿命的指数。此项测定显示红细胞寿命缩短表明有溶血。

二、红细胞代偿性增生的检查

1. 网织红细胞增多在5%～20%以上。

2. 外周血出现幼红细胞，主要是晚幼红细胞。由于网织红细胞及幼红细胞的出现，故可表现大红细胞增多。

3. 骨髓幼红细胞显著增生，以中幼红和晚幼红细胞增生为主，粒红比例常发生倒置。

三、红细胞膜缺陷的检查

1. 红细胞渗透脆性试验意义

1. 红细胞渗透脆性增高见于：遗传性球形细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血伴继发球形细胞增多等。

2.红细胞渗透脆性减低见于：缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血等。

贫血的实验室诊断

贫血的定义

外周血中单位容积内红细胞计数(RBC)、血红蛋白含量(Hb)或红细胞比容（Hct）低于正常下限。其中以血红蛋白含量最为重要。

贫血是一种症状，可以发生于多种疾病。

贫血的检查：

一、贫血的确定

RBC(×1012/L) Hb(g/L) Hct(L/L)

男性 <4.0~4.5 <120 <0.4

女性 <3.5~4.0 <110 <0.35

孕妇 <100

二、确定贫血的程度

程度 Hb值（g/L） 症状

轻度 91~正常值下限（120） 症状轻微

中度 61~90 活动后心悸、气促，需药物治疗

重度 31~60 休息时也有心悸、气促，需药物、输血

极重度 <30 常合并贫血性心脏病

三、确定贫血的类型

（1）按形态学分类

1. 按MCV、MCH、MCHC分类

平均红细胞容积：每升血液中红细胞比容/红细胞数

MCV=HCT×103/(1012×RBC)（fL） 正常参考值：80~90fL

平均红细胞血红蛋白量： 每升血液中血红蛋白量/红细胞数

MCH=Hgb/RBC（Pg） 正常参考值：27~32Pg

平均红细胞血红蛋白浓度： 每升血液中血红蛋白量/血细胞比容

MCHC=Hgb/HCT（g/L） 正常参考值：320~360g/L

可分成四类：

大细胞性贫血——巨幼细胞性贫血

正常细胞性贫血——急性失血性贫血、白血病

小细胞低色素性贫血——缺铁性贫血（IDA）

单纯小细胞性贫血——慢性感染性贫血

2. Bessman分型 即按MCV/RDW分型

平均红细胞容积：每升血液中红细胞比容/红细胞数

MCV=HCT×103/(1012×RBC)（fL） 正常参考值：80~90fL

RDW：红细胞容积分布宽度，反映外周血红细胞异质性的参数即红细胞大小均一程度。

溶血性贫血的实验室检查

1.1原理 红细胞渗透脆性试验是根据红细胞在低渗盐水溶液可逐渐胀大而破坏的原理来测定红细胞对不同浓度低渗盐水溶液的抵抗力。红细胞的表面积大而体积小者对低渗盐水抵抗力较大(脆性减低)；反之，则抵抗力较小(脆性增加)。

1.2试剂 10g/L NaCl溶液：取分析纯氯化钠事先于100℃下烘干，再置于干燥器中冷却，准确称取1.00g置100ml容量瓶中，加适量双蒸馏水溶解后，再加双蒸馏水至刻度[1]。

1.3参考值 开始溶血 4.2～4.6g/L。完全溶血 3.2～3.4g/L。患者与正常对照，溶血管的NaCl浓度相差0.4g/L具有诊断价值。

1.4注意事项 NaCl必须干燥，称量精确，要用前新鲜配制溶液；本试验忌用抗凝血以免影响溶液的渗透压，如需要时可用肝素按10～20IU/ml血液进行抗凝；血液与低渗盐水混匀时避免强烈振荡，以免机械性溶血，黄疸患者开始溶血管不易观察，严重贫血患者红细胞太少，皆可用等渗盐水将红细胞洗涤后再配成50%红细胞悬液进行试验。

2红细胞孵育渗透脆性试验

2.1原理 将血液置于37℃孵育24h，由于葡萄糖消耗，贮备的 ATP减少，需要能量的红细胞膜对阳性离子的主动传递受阻，造成钠离子在红细胞内储积，细胞膨胀，孵育渗透脆性增加。有细胞膜缺陷及某些酶缺陷的红细胞能源限快耗尽，孵育渗透脆性明显增加。

2.2试剂 10g/L缓冲液(pH7.4)：9g NaCl(AR)。1.365g Na2HPO4(AR)。0.184g NaH2PO4(AR)。蒸馏水加至1 000ml。此氯化钠磷酸盐缓冲液中氯化钠的浓度为9g/L，但其渗透压相当于10g/L氯化钠溶液[2]。

2.3操作 取静脉血3ml，肝素抗凝后分为2份，1份立即试验，另1份在37℃温育24h再作试验；将10g/L氯化钠缓冲液按下表稀释成不同浓度；每管加肝素抗凝血0.05ml，轻轻颠倒混匀；放置室温(20℃左右)30min后，将各管混匀1次，1500r/min离心5min，取上清，波长540nm以8.5g/L氯化钠磷酸盐缓冲液调零，以1g/LNaCl完全溶血管的吸光度为完全溶血管A值，测定各溶血管上清液的吸光度并计算出相应的溶血度；红细胞中间脆性(MCF)，以溶血度为纵坐标、不同浓度氯化钠浓度为横坐标作溶血曲线图，在曲线上，50%溶血的氯化钠浓度为红细胞中间脆性。

第三节 溶血性贫血的实验室检查

溶血性贫血是由于各种原因使红细胞生存时间缩短，破坏增多或加速、而骨髓的代偿造血功能不足以补偿其损耗时所发生的一类贫血。正常红细胞的生存时间平均为120天，故体内红细胞每天约有1/120衰老而被破坏。当红细胞生存时间缩短，破坏增加。骨髓将代偿增生以维持平衡。正常人骨髓具有6～8倍的代偿造血功能，当溶血程度较轻，骨髓代偿能力足以补偿细胞的损耗时，可不发生贫血，称为代偿性溶血病。如红细胞生存时间缩短至15～20天以下，破坏速度超过骨髓的代偿能力，才出现贫血，称为溶血性贫血 。

一、溶血性贫血的分类

红细胞内在缺陷所致的溶血性贫血

这种内在缺陷大多是遗传性的，包括红细胞膜缺陷、血红蛋白中珠蛋白肽链的合成量或结构异常、以及与红细胞代谢有关的酶缺陷。常见的疾病如遗传性球形细胞增多症、异常血红蛋白病及海洋性贫血、葡萄糖6-磷酸脱氢酶缺乏症等。但也可有获得性的红细胞内在缺陷．如阵发性睡眠性血红蛋白尿 。

红细胞外来因素所致的溶血性贫血

溶血可因免疫反应、化学、物理及其他生理因素作用于红细胞而发生。如自身免疫性溶血性贫血、化学毒物或药物、心脏瓣膜置换术后或微血管病、溶血性病原体感染等所致的溶血性贫血、脾功能亢进等。这一类溶血性贫血都是后天获得性的。

按溶血发生的部位分类，可分为血管内溶血和血管外溶血。

血管内溶血是红细胞在血管内(循环血液中) 以溶解方式直接破坏，血红蛋白被释放入血浆，形成高血红蛋白血症，多为获得性的溶血性贫血，常表现为急性溶血。

血管外溶血是红细胞在单核-巨噬细胞系统(主要是在脾)，被巨噬细胞吞噬而破坏。释出的血红蛋白就在巨噬细胞内分解代谢，不形成血红蛋白血症，多为遗传性的(遗传性酶缺陷所致的溶血性贫血则为血管内溶血)，常表现为慢性溶血。有些溶血性贫血则兼有血管内和血管外两种溶血方式，如自身免疫性溶血性贫血。