基因工程 课后习题答案

2．质粒DNA和病毒（噬菌体）DNA作为载体的主要特征是什么

为外源基因提供进入受体细胞的转移能力；为外源基因提供在受体细胞中的复制能力或整合能力；为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力；具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点，具有合适的选择标记

3．如何理解质粒的不相容性及其在DNA重组克隆过程中的运用意义

质粒的不相容性：具有相同或相似复制子结构及调控模式的两种不同的质粒不能稳定存在于同一受体细胞内.

4．列举表达质粒、穿梭质粒、探针质粒和cos质粒的不同用途

表达质粒:在多克隆位点的上下游分别装有两套转录效率较高的启动子、合适的核糖体结合位点序列（SD）序列以及强有力的终止子结构，使得克隆在合适位点上的任何外源基因均能在受体细胞中高效表达。

穿梭质粒：质粒分子上含有两个亲缘关系不同的复制子以及相应的选择性标记，能在两种不同的受体细胞中复制并检测。

探针质粒：用来筛选克隆基因的表达调控元件。通常含有报告基因，但缺少相应的调控序列（如启动子或终止子），只有含有启动子或终止子的调控序列被克隆进入载体后，报告基因才能别表达，表达量的大小直接反应了克隆进入的调控元件的强弱。

cos质粒：人工构建的含有λDNA的cos位点序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。具有大的装载量，可以用于构建基因组文库。

5． II类限制性核酸内切酶的主要酶学特征是什么

分子量较小的单体蛋白，双链识别和切割活性仅需Mg2+，识别位点为4-6个bp的回文序列，切割位点在识别序列中或靠近识别序列

7． KLenow酶与大肠杆菌DNA聚合酶I在结构和功能上的主要区别

DNA聚合酶I包括大片段(klenow片段)和小片段

功能上：DNA聚合酶I比klenow酶多了5’→3’核酸外切酶活性，两者都具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性。

8．影响限制性核酸内切酶活性的主要因素有哪些？

温度、盐度等物理因素，DNA样品纯度，DNA甲基化程度，限制性核酸内切酶的缓冲液性质，甘油和微量的金属离子会抑制限制性内切酶的活性

1.2基因工程的基本操作程序

课时演练·促提升

1.下列获取目的基因的方法中需要模板的是( )

①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法直接人工合成DNA

A.①②③④ B.①②③

C.②③④ D.②③

解析:PCR技术利用的是DNA双链复制原理。即将DNA双链之间的氢键打开,变成单链DNA,需要以每条单链DNA作为模板。反转录法是以目的基因转录成的信使RNA为模板,在逆转录酶的作用下,先反转录形成互补的单链DNA,再合成双链DNA。①④则均不需要模板。

答案:D

2.下列关于基因文库的说法,错误的是( )

A.可分为基因组文库和部分基因文库

B.cDNA文库属于部分基因文库

C.基因组文库的基因在不同物种之间均可进行基因交流

D.同种生物的cDNA文库基因数量较基因组文库基因数量少

解析:基因组文库只有部分基因能够在不同物种之间进行交流。

答案:C

3.聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环:90~95 ℃使模板DNA变性、解链→55~60 ℃复性 (引物与DNA模板链结合)→70~75 ℃引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述,不正确的是( )

A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现

B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的

C.延伸过程中需要热稳定DNA聚合酶催化不同核糖核苷酸之间形成磷酸二酯键

D.PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高

解析:延伸过程需要四种脱氧核苷酸为原料,因此会在脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键。

答案:C

4.下列有关PCR技术的说法,不正确的是( )

A.PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术

B.PCR技术的原理与DNA复制的原理不同

【优化设计】2018-2019 学年高中生物 1.3 基因工程的应用课后习题 新人教版选修 3

1. 下列叙述符合基因工程概念的是( )

A. 黑麦与六倍体普通小麦杂交,杂种通过秋水仙素或低温处理得到八倍体小黑麦

B. 将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株

C.用紫外线照射青霉菌,使其 DNA 发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株

D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其 DNA 整合到细菌 DNA 上

解析:A 选项八倍体小黑麦的培育利用的是染色体变异。C 选项利用的原理是基因突变。D 选项属于基因重组,但是发生在自然条件下,不符合基因工程“按照人们的愿望,进行严格的设计”的概念。答案:B

2. 下列关于基因工程的说法中,正确的是( )

A.基因工程的设计和施工是在细胞水平上进行的B.基因工程都是在生物体外完成的

C.基因工程是对蛋白质进行的操作

D.基因工程能打破物种间的界限,定向改造生物性状

解析:基因工程是 DNA 分子水平上进行设计和施工的。DNA 重组技术是在生物体外完成的,目的基因的表达是在细胞内完成的。

答案:D

3. 下列高科技成果中,根据基因重组原理进行的是( )

①我国科学家袁隆平利用杂交技术培育出超级水稻 ②我国科学家将苏云金芽孢杆菌的某些基因移植到棉花体内,培育出抗虫棉 ③我国科学家通过返回式卫星搭载种子培育出太空椒

A.① B.①② C.①②③ D.②③

解析:自然界的基因重组发生在减数分裂过程中,同源染色体的两条非姐妹染色单体间的互换和非同源染色体间的自由组合都可以发生基因重组;人工的基因重组就是基因工程。在题目给出的选项中:①袁隆平利用杂交技术培育出的超级水稻,其原理是自然界的基因重组。②将苏云金芽孢杆菌的某些基因移植到棉花体内,培育出的抗虫棉,属于通过基因工程进行的基因重组,该方法将目的基因移植到某种生物,整合到该生物的 DNA 分子中,并使目的基因得以表达,其最大优点就是克服了远缘杂交不亲和的障碍。③是利用宇宙射线,诱发种子发生基因突变,从而培育出太空椒。

基因工程 试题库（一）

一、单项选择题（共计150题）

1.贝尔奖的科学家是( C )因研究重组DNA技术而获得诺

(a)A.Kornberg (b)W.Gilbert (c)P.Berg (d)B.McClintock

2.第一个作为重组DNA载体的质粒是( C )

(a)pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8

3.关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。

(a)由作用于同一DNA序列的两种酶构成

(b)这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶

(c)这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰

(d)不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统

4.Ⅱ型限制性内切核酸酶： ( )

(a)有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列

(b)仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供

(c)限制性识别非甲基化的核苷酸序列 (d)有外切核酸酶和甲基化酶活性

(e)仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供

5.下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?( )

(a)限制酶是外切酶而不是内切酶

(b)限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割

(c)同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的

(d)一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生黏末端

(e)一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端

6.第一个被分离的Ⅱ类酶是： ( )

(a)EcoK (b)HindⅢ (c)HindⅡ (d)EcoB

7.在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制哪一项最好：

(a)反应时间(b)酶量(c)反应体积(d)酶反应的温度

8.在下列试剂中，那一种可以螯合Ca2+离子?( A )

(a)EDTA (b)柠檬酸钠 (c)SDS (d)EGTA