第二章基因工程习题答案

第⼆章基因⼯程习题答案

基因⼯程课程习题选择题001 基因⼯程操作的三⼤基本元件是【Ａ】

I 供体II 受体III 载体IV 抗体V 配体

ＡI + II + III

ＢI + III + IV

ＣII + III + IV

ＤII + IV + V

ＥIII + IV + V002 根据当今⽣命科学理论，基因⼯程的⽤途是【E】

I 分离纯化基因 II ⼤量⽣产⽣物分⼦ III 构建新型物种 IV 提⾼基因重组效率Ａ I + II + III

Ｂ I + II + IV

Ｃ I + III + IV

Ｄ II + III + IV

Ｅ I + II + III + IV003 根据基因⼯程的定义，下列各名词中不能替代基因⼯程的是【A】

Ａ基因诱变

Ｂ分⼦克隆

Ｃ DNA重组

Ｄ遗传⼯程

Ｅ基因⽆性繁殖004 基因⼯程的单元操作顺序是【B】

Ａ增，转，检，切，接

Ｂ切，接，转，增，检

Ｃ接，转，增，检，切

Ｄ检，切，接，增，转

Ｅ切，接，增，转，检005 下列有关基因的叙述，错误的是【A】

Ａ蛋⽩质是基因表达的唯⼀产物

Ｂ基因是 DNA 链上具有编码功能的⽚段

Ｃ基因也可以是 RNA

Ｄ基因突变不⼀定导致其表达产物改变结构

Ｅ基因具有⽅向性006 限制性核酸内切酶是由细菌产⽣的，其⽣理意义是【D】

Ａ修复⾃⾝的遗传缺陷Ｂ促进⾃⾝的基因重组

Ｃ强化⾃⾝的核酸代谢

Ｄ提⾼⾃⾝的防御能⼒

Ｅ补充⾃⾝的核苷酸消耗007 天然 PstI 限制性内切酶的来源是【D】

ＡBacillus amyloliquefaciens

ＢEscherichia coli

ＣHaemophilus influenzae

ＤProvidencia stuartii

ＥStreptomyces lividans008 T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸⼆酯键将两段 DNA ⽚段连接在⼀起，其底物的关键基团是【D】

Ａ 2' -OH 和 5' -P

Ｂ 2' -OH 和 3' -P

Ｃ 3' -OH 和 2' -P

Ｄ 3' -OH 和 5' -P

Ｅ 5' -OH 和 3' -P009若载体 DNA ⽤ M 酶切开，则下列五种带有 N 酶粘性末端的外源 DNA ⽚段中，能直接与载体拼接的是【D】

M N

Ａ A/AGCTT T/TCGAA

Ｂ C/CATGG ACATG/T

Ｃ CCC/GGG G/GGCCC

Ｄ G/GATCC A/GATCT

Ｅ GAGCT/C G/AGCTC010下列有关质粒分⼦⽣物学的叙述，错误的是【B】

Ａ质粒是共价环状的双链 DNA 分⼦

Ｂ天然质粒⼀般不含有限制性内切酶的识别序列

Ｃ质粒在宿主细胞内能独⽴于染⾊体 DNA ⾃主复制

Ｄ松弛复制型的质粒可⽤氯霉素扩增

Ｅ质粒并⾮其宿主细胞⽣长所必需011带有多个不同种复制起始区的质粒是【A】

Ａ穿梭质粒

Ｂ表达质粒

Ｃ探针质粒

Ｄ整合质粒

Ｅ多拷贝质粒012 下列各常⽤载体的装载量排列顺序，正确的是【A】

Ａ Cosmid > λ-DNA > Plasmid

Ｂλ-DNA > Cosmid > Plasmid

Ｃ Plasmid >λ-DNA > Cosmid

Ｄ Cosmid > Plasmid >λ-DNA

Ｅλ-DNA > Plasmid > Cosmid013 ⽬前在⾼等动物基因⼯程中⼴泛使⽤的载体是【C】

Ａ质粒 DNA

Ｂ噬菌体 DNA

Ｃ病毒 DNA

Ｄ线粒体 DNA

Ｅ叶绿体 DNA014 若某质粒带有lacZ 标记基因，那么与之相匹配的筛选⽅法是在筛选培养基中加⼊【D】

Ａ半乳糖

Ｂ葡萄糖

Ｃ蔗糖

Ｄ5- 溴-4- 氯-3- 吲哚基- b -D- 半乳糖苷（X-gal ）

Ｅ异丙基巯基- b - 半乳糖苷（IPTG ）015质粒是基因⼯程中最常⽤的运载体，它的主要特点是【C】

①能⾃主复制②不能⾃主复制③结构很⼩

④蛋⽩质⑤环状RNA ⑥环状DNA

⑦能“友好”地“借居”

A ①③⑤⑦

B ②④⑥

C ①③⑥⑦

D ②③⑥⑦

016 双脱氧末端终⽌法测定DNA 序列是基于【A】

ＡDNA 的聚合反应

ＢDNA 的连接反应

ＣDNA 的降解反应

Ｄ特殊的DNA 连接酶

Ｅ聚合单体2' 和5' 位的脱氧017 下列三种⽅法中，能有效区分重组⼦与⾮重组⼦的是【E】

I 限制性酶切II PCR 扩增III 抗药性筛选

ＢI + IIＣI + III

ＤII + III

ＥI + II + III018鸟枪法克隆⽬的基因的战略适⽤于【A】

Ａ原核细菌

Ｂ酵母菌

Ｃ丝状真菌

Ｄ植物

Ｅ⼈类019 cDNA 第⼀链合成所需的引物是【D】

ＡPoly A

ＢPoly C

ＣPoly G

ＤPoly T

Ｅ发夹结构020 Taq DNA 聚合酶的发现使得PCR 技术的⼴泛运⽤成为可能，这是因为【D】

ＡTaq DNA 聚合酶能有效地变性基因扩增产物

ＢTaq DNA 聚合酶催化的聚和反应不需要引物

ＣTaq DNA 聚合酶具有极强的聚和活性

ＤTaq DNA 聚合酶能使多轮扩增反应连续化

ＥTaq DNA 聚合酶能使扩增反应在DNA 变性条件下进⾏021 为了利⽤PCR 技术扩增下列染⾊体DNA ⽚段上的虚线部分，应选⽤的引物顺序是【D】

ＡI + II

ＢI + III

ＣI + IV

ＤII + III

ＥII + IV022 构建基因⽂库⼀般使⽤的载体是【E】

I 质粒IIλ-DNA III CosmidＡI

ＢII

ＣIII

ＤII + III

ＥI + II + III023 强化基因转录的元件是【C】

Ａ密码⼦

Ｂ复制⼦

Ｃ启动⼦

Ｄ内含⼦

Ｅ外显⼦024 启动⼦的特征之⼀是【B】

ＡGC 富积区

ＢTATA Box

Ｃ转录起始位点

Ｄ长度平均1 kb

Ｅ含有某些稀有碱基025 下列基因调控元件中属于反式调控元件的是【A】

Ａ阻遏蛋⽩

Ｂ启动⼦

Ｃ操作⼦

Ｄ终⽌⼦

Ｅ增强⼦026包涵体是⼀种【E】

Ａ受体细胞中难溶于⽔的蛋⽩颗粒

Ｂ⼤肠杆菌的亚细胞结构

Ｃ噬菌体或病毒DNA 的体外包装颗粒

Ｄ⽤于转化动物细胞的脂质体

Ｅ外源基因表达产物的混合物027 外源基因在⼤肠杆菌中以融合蛋⽩的形式表达的优点是【Ｅ】

I 融合基因能稳定扩增II 融合蛋⽩能抗蛋⽩酶的降解III 表达产物易于亲和层析分离ＡIII

ＢI + II

ＣI + III

ＤII + III

ＥI + II + III028 第⼆代基因⼯程是指【C】

Ａ途径⼯程

Ｂ代谢⼯程

Ｃ蛋⽩质⼯程

ＤRNA 基因⼯程

Ｅ细胞器基因⼯程029 基因⼯程菌中重组质粒的丢失机制是【Ｃ】

Ａ重组质粒渗透⾄细胞外

Ｂ重组质粒被细胞内核酸酶降解

Ｃ重组质粒在细胞分裂时不均匀分配

Ｄ重组质粒杀死受体细胞

Ｅ重组质粒刺激受体细胞提⾼其通透性030利⽤⽑细管作⽤原理，将凝胶电泳分离后的DNA⽚段转移⾄硝酸纤维素膜上并根据核酸杂交原理进⾏分析的技术是【Ｄ】

ＡWestern 印迹转移技术

ＢNorthern 印迹转移技术

Ｃ基因的表现型分析法

ＤSouthern 印迹转移技术031在翻译过程中．mRNA必需⾸先与核糖体相结合才能进⾏蛋⽩质合成。在原核⽣物中，mRNA分⼦上有两个核糖体结合位点，⼀个是起始密码AUG，另⼀个是【Ｃ】

Ａ启动⼦

Ｂ调节基因

ＣSD序列

Ｄ终⽌⼦

⼆、填空题答案1、Ⅱ型限制性内切酶可特异性地识别呈双重螺旋对称结构的特定双链DNA序列并进⾏切割。如Bst BⅠ(TT CGAA）消化可产⽣含5 ′CG 3′的5′磷酰基端黏性末端末端，PstⅠ（CTGCA G）消化可产⽣5′TGCA 3′的3′－OH端黏性末端，⽽SmaⅠ（CCCGGG）消化产⽣平末端。

2、识别顺序相同但切割位点不同者称同位酶，识别顺序与切割⽅式均相同者称同裂酶，来源与识别顺序均不同，但切割后形成的限制性⽚段有相同的粘性末端，称同尾酶。3、受体细胞经过⼀些特殊⽅法（如：CaCl2等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发⽣变化，成为能容许有外源DNA的载体分⼦通过，这种细胞称为感受态细胞。4、在翻译过程中，mRNA必需⾸先与核糖体相结合才能进⾏蛋⽩质合成。在原核⽣物中，mRNA分⼦上有两个核糖体结合位点，⼀个是起始密码AUG ，另⼀个是SD序列。5、在提取分离DNA的过程中，加⼊酚-氯仿、去垢剂或酶的⽬的是使蛋⽩质变性或⽔解，除去蛋⽩质，使⽤⾦属离⼦螯合剂如EDTA等的原因是细胞内有⾦属离⼦，如Mg2+，是酶活性的辅助因⼦，会使DNA被DNase分解，故除去使DNase活性的Mg2+以保护DNA

不被变性或降解。在⼩批量碱变性提取质粒过程中加⼊醇溶液的⽬的是是DNA变性沉淀，并除去蛋⽩质、糖类等其他⽔溶性杂质，使之分离，加⼊Rnase的⽬的是除去DNA 沉淀中的RNA，是凝胶电泳检测时条带更明显。6、PCR的全称是聚合酶链式反应，它是⼀种在体外模拟DNA复制⽅式选择性地扩增DNA特殊区域的技术。它是在四种脱氧核苷三磷酸存在下，以寡聚核苷酸为引物及单链DNA 为模板，经DNA聚合酶催化合成DNA互补链的过程，其基本反应步骤为⾼温变性、低温退⽕和适温延伸，并循环n次，达到扩增⽬的。7、采⽤光导原位合成或微量点样等⽅法，将⼤量⽣物⼤分⼦或其他⽣物样品有序地固化于⽀持物表⾯，然后与已标记的待测⽣物样品中靶分⼦杂交，通过特定仪器对杂交信号的强度进⾏快速、并⾏、⾼效地检测分析，从⽽判断样品中靶分⼦的数量的技术称为⽣物芯⽚技术，根据固定的探针不同，可分为基因芯⽚、蛋⽩芯⽚、细胞芯⽚和组织芯⽚。该技术具有⾼通量、快速⾼效、⾼度灵敏等特点。8、根据Southern blot的结果可以说明被检测样品中的DNA及其含量，了解基因的状态, 如是否有点突变、扩增重排等，Northern blot 则⽤于检测样品中是否含有基因的转录产物（mRNA）及其含量，⽽Western blot的结果可以明被检测基因在蛋⽩质⽔平上的表达状况。9、基因⼯程中⽤来获得有功能的异源蛋⽩质的体系称为表达系统。

10、⽤⽕药爆炸或者⾼压⽓体加速将包裹了DNA的球状⾦粉或者钨粉颗粒直接送⼊完整的植物组织或者细胞中，这⼀⽅法称为基因枪法。

基因⼯程课程习题问答题1、基因⼯程的操作过程的主要步骤包括哪些？切、接、转、增、筛（检）

（1）切——获得DNA⽚段，取得⽬的基因；载体的选择与制备。

⽅法：从⽣物基因组中分离得到——基因组DNA ——>酶切产物

从总RNA中分离得到mRNA ，再逆转录得到cDNA

⼈⼯合成——化学合成；PCR（聚合酶链式反应）

（2）接——DNA⽚段和载体DNA在体外连接，形成重组⼦。

（3）转——将重组的DNA引⼊宿主细胞

⽅式：转化——某⼀基因型细胞从周围介质中吸收另⼀基因型细胞的DNA，⽽使其基因型和表型发⽣相应变化的现象；转染——除去蛋⽩质外壳的病毒核酸感染细胞或原⽣质体的过程；转导——⽤噬菌体做载体，将⼀个细胞的基因传递给另⼀个细胞的过程。还有显微注射等。

（4）增——培养已转化细胞，使⽬的基因在其中进⾏复制、扩增，并将其整合到受体细胞的基因组中。

（5）筛、检——重组⼦的筛选与鉴定。筛选和鉴定转化细胞，获得使外源基因⾼效表达的基因⼯程菌或细胞。2、什么是限制性核酸内切酶？第⼆型限制酶有何特点？

限制性核酸内切酶（限制酶，restriction endonuclease）是⼀类能够识别双链DNA分⼦中的某些特定核苷酸序列，并对DNA分⼦进⾏切割的核酸内切酶。

第⼆型限制酶特点:2亚基，单辅因⼦;识别序列是由4、5、6或7个核苷酸组成的特定核苷酸序列，识别位点双重旋转对称结构，切割与识别位点相同或相近。分⼦量较⼩，仅需Mg2+