真菌(1-3)-D葡聚糖检测反应机理
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G试验和GM实验的区别及其临床意义
G试验和GM试验的区别及其临床意义一、1，3-β—D葡聚糖检测(简称G试验）1、原理：1，3-β-D葡聚糖可特异性激活鳌变形细胞裂解物中的G因子,引起裂解物凝固，故称G试验.2、诊断：侵袭性真菌感染.可诊断多种致病真菌感染：念珠菌、曲霉菌、肺孢子菌、镰刀菌、地霉、组织胞浆菌、毛孢子菌等.不能用于检测隐球菌和接合菌感染.3、标本采集:静脉采血2ml（肝素抗凝)。
4、参考范围：正常值‹20pg/ml。
5、检测标本:血液、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等。
6、假阳性：血液透析、病人输入白蛋白、球蛋白、脂肪乳、凝血因子；某些抗肿瘤药如香菇多糖和磺胺类药物；某些细菌败血症（尤其是链球菌败血症）。
7、假阴性：隐球菌具有厚壁胞膜,在免疫缺陷患者体内生长缓慢,导致试验呈假阳性。
8、建议：1、与GM试验联合可提高阳性率。
2、2次或2次以上阳性可降低假阳性率。
3、高危患者建议每周检测1—2次.4、高危人群动态监测二、半乳糖甘露醇聚糖抗原检测(简称GM试验）1、原理：是一种微孔板双抗体夹心法。
采用小鼠单克隆抗体EBA—2,检测人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖.半乳甘露聚糖是一种对热稳定的水溶性的物质,是广泛存在于曲霉和青霉细胞壁中的一类多糖。
2、诊断：侵袭性曲霉菌感染（IPA）3、标本采集：（分离胶管或普通管)。
4、参考范围：≥0。
5为阳性。
5、标本采集：血清标本。
6、假阳性：⑴、应用哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林-克拉维酸。
⑵、与其他的细菌成分有交叉反应:皮炎芽生菌、拟青霉、马尔尼菲青霉菌、链格孢等.⑶、谷类食物和脂质甜点中的GM抗原。
⑷、肠道中定值的曲霉释放GM进入血液循环。
建议:高危人群动态监测，结合影像学、培养结果综合分析诊断。
G试验、GM试验鉴定范围对比。
真菌(1-3)-D葡聚糖检测反应机理
真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测反应机理目前临床上随着广谱抗生素、各类免疫抑制剂、移植插管等新技术的不断发展应用,其真菌感染尤其是深部真菌感染出现明显上升趋势,而作为临床诊断的细菌培养其阳性率很低,且检测周期长,不能适应临床治疗诊断的要求,因此迫切需要快速、准确的检测方法.因此对血液中的早期(1-3)-β-D葡聚糖快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中(1-3)-β-D葡聚糖快速检测对早期诊断深部真菌感染具有重要的参考价值。
该试验的基本原理是试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量(1-3)-β-D葡聚糖能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应,通过测定凝集反应过程中的浊度变化从而定量检测血浆中(1-3)-β-D葡聚糖含量.内毒素定量检测的反应机理细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁外层中的脂多糖成份(LPS), 具有多种的生物活性, 微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 因此对血液中的早期内毒素快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值。
反应试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量革蓝氏阴性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应形成凝胶,通过测定在形成凝胶过程中的浊度变化从而定量检测血浆中革蓝氏阴性菌内毒素.一、检测体液内毒素的临床意义由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。
在各类抗生素杀灭革兰氏阴性菌的同时，也会使后者释放出一定数量的内毒素，从而加重内毒素血症。
早期诊断的细菌学培养需时长，而且由于抗生素的应用，其培养阳性率低。
早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键，临床医师仅能根据临床特征与体征推断病源学而带有一定的盲目性，因此，早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。
真菌 D葡聚糖检测反应机理
真菌(1-3)-?-D葡聚糖检测反应机理目前临床上随着广谱抗生素、各类免疫抑制剂、移植插管等新技术的不断发展应用,其真菌感染尤其是深部真菌感染出现明显上升趋势,而作为临床诊断的细菌培养其阳性率很低,且检测周期长,不能适应临床治疗诊断的要求,因此迫切需要快速、准确的检测方法.因此对血液中的早期(1-3)-?-D 葡聚糖快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中(1-3)-?-D葡聚糖快速检测对早期诊断深部真菌感染具有重要的参考价值。
该试验的基本原理是试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量(1-3)-?-D葡聚糖能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应,通过测定凝集反应过程中的浊度变化从而定量检测血浆中(1-3)-?-D葡聚糖含量.内毒素定量检测的反应机理细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁外层中的脂多糖成份(LPS), 具有多种的生物活性, 微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 因此对血液中的早期内毒素快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值。
反应试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量革蓝氏阴性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应形成凝胶,通过测定在形成凝胶过程中的浊度变化从而定量检测血浆中革蓝氏阴性菌内毒素.一、检测体液内毒素的临床意义由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。
在各类抗生素杀灭革兰氏阴性菌的同时，也会使后者释放出一定数量的内毒素，从而加重内毒素血症。
早期诊断的细菌学培养需时长，而且由于抗生素的应用，其培养阳性率低。
早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键，临床医师仅能根据临床特征与体征推断病源学而带有一定的盲目性，因此，早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。
G试验和GM试验的区别及其临床意义
G试验和GM试验的区别及其临床意义一、1，3-β-D葡聚糖检测（简称G试验）1、原理：1，3-β—D葡聚糖可特异性激活鳌变形细胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固故称G试验。
2、诊断：侵袭性真菌感染。
可诊断多种致病真菌感染:念珠菌、曲霉菌、肺孢子菌、镰刀菌、地霉、组织胞浆菌、毛孢子菌等。
不能用于检测隐球菌和接合菌感染.3、标本采集:静脉采血2ml(肝素抗凝）。
4、参考范围:正常值‹20pg/ml.5、检测标本：血液、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等.6、假阳性：血液透析、病人输入白蛋白、球蛋白、脂肪乳、凝血因子;某些抗肿瘤药如香菇多糖和磺胺类药物；某些细菌败血症（尤其是链球菌败血症）.7、假阴性：隐球菌具有厚壁胞膜，在免疫缺陷患者体内生长缓慢，导致试验呈假阳性。
8、建议：1、与GM试验联合可提高阳性率。
2、2次或2次以上阳性可降低假阳性率。
3、高危患者建议每周检测1-2次。
4、高危人群动态监测二、半乳糖甘露醇聚糖抗原检测(简称GM试验）1、原理：是一种微孔板双抗体夹心法。
采用小鼠单克隆抗体EBA—2，检测人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。
半乳甘露聚糖是一种对热稳定的水溶性的物质,广泛存在于曲霉和青霉细胞壁中的一类多糖。
2、诊断：侵袭性曲霉菌感染（IPA)3、标本采集：（分离胶管或普通管）.4、参考范围:≥0。
5为阳性.5、标本采集:血清标本。
6、假阳性：⑴、应用哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林-克拉维酸.⑵、与其他的细菌成分有交叉反应：皮炎芽生菌、拟青霉、马尔尼菲青霉菌、链格孢等。
⑶、谷类食物和脂质甜点中的GM抗原。
⑷、肠道中定值的曲霉释放GM进入血液循环。
建议:高危人群动态监测,结合影像学、培养结果综合分析诊断.。
真菌(1-3)-D葡聚糖检测反应机理
真菌(1-3)--D葡散糖检测反应机理之阳早格格创做暂时临床上随着广谱抗死素、百般免疫压造剂、移植插管等新技能的没有竭死少应用,其真菌熏染越收是深部真菌熏染出现明隐降下趋势,而动做临床诊疗的细菌培植其阳性率很矮,且检测周期少,没有克没有及符合临床治疗诊疗的央供,果此迫切需要赶快、准确的检测要领.果此对于血液中的早期(1-3)--D葡散糖赶快定量检测,将对于临床对于症治疗具备很深的现真意思.人体血浆中(1-3)--D葡散糖赶快检测对于早期诊疗深部真菌熏染具备要害的参照价格.该考查的基根源基本理是试剂中含凝固酶本及凝固蛋黑本的热冻搞燥品. 正在相宜条件下, 微量(1-3)--D葡散糖能激活试剂中的凝固酶本爆收凝集反应,通过测定凝集反应历程中的浊度变更进而定量检测血浆中(1-3)--D葡散糖含量.内毒素定量检测的反应机理细菌内毒素动做革兰阳性菌细胞壁中层中的脂多糖成份(LPS), 具备多种的死物活性, 微量的内毒素加进肌体将会出现收热、血压落矮、热战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 果此对于血液中的早期内毒素赶快定量检测,将对于临床对于症治疗具备很深的现真意思.人体血浆中内毒素检测对于分别诊疗革兰阳性杆菌熏染具备要害的参照价格.反招考剂中含凝固酶本及凝固蛋黑本的热冻搞燥品.正在相宜条件下, 微量革蓝氏阳性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶本爆收凝集反应产死凝胶,通过测定正在产死凝胶历程中的浊度变更进而定量检测血浆中革蓝氏阳性菌内毒素.一、检测体液内毒素的临床意思由革兰氏阳性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是暂时临床上的主要牺牲本果之一.正在百般抗死素杀灭革兰氏阳性菌的共时，也会使后者释搁出一定数量的内毒素，进而加沉内毒素血症.早期诊疗的细菌教培植需时少，而且由于抗死素的应用，其培植阳性率矮.早期的数小时内动做临床上抢救熏染性戚克的闭键，临床医师仅能根据临床特性与体征估计病源教而戴有一定的盲目性，果此，早期体液中内毒素的粗确、赶快定量检测及相映的对于症治疗便隐得格中要害.往日的内毒素检测能定性而没有克没有及定量，而且个体好别战真验室间的缺面较大，无法成为有价格的临床考验名目，北京金山川公司研造的MB-80微死物赶快动向检测系统能定量检测体液内毒素的含量，经海内多家单位使用现已正在其余省市启初动做临床考验名目举止支费.该仪器检测内毒素具备截止宁静、检测快（1小时）、沉复性好、准确率下、分歧的检测人员支配引起的缺面小等便宜.内毒素定量检测正在沉症病人、熏染病人（如脑膜炎）以及其余有宽沉创伤等徐病的病人均有要害的临床意思，那使得内毒素钻研向去是热面，但是往日由于要领的节造，内毒素检测也是临床的易面.两、深部真菌检测的临床意思动向定量检测体液中真菌含量是应用MB-80微死物赶快动向检测系统举止的.该要领不妨赶快诊疗用惯例要领易以确诊的深部真菌熏染，应用MB-80检测真菌，其检出率近近下于保守的血培植要领，使病本体的监测越收准确，更赶快，MB-80系统具备很下的敏捷度战劣同的数据分解功能，检测矮限5pg/ml的真菌1-3--β-D葡散糖量.果连年去，一些罕睹的条件致病真菌引起深部熏染，临床沉症病人，特天是广谱抗死素战化疗药物的应用，真菌熏染已成为熏染引导牺牲的要害本果之一，而有钻研创造早期创造并赋予适合的治疗，真菌熏染不妨较好天得到统造，那便央供一种能赶快决定有无深部真菌熏染的要领，果系统抗真菌药物种类较少，抗菌谱较广，没有果真菌种类而同.当检测到标本中葡散糖含量较下时，马上给予系统造疗，没有必等审定出种属，可则会贻误最好治疗时机.而惯例真菌血培植需时少，审定历程搀纯，阳性率矮，没有克没有及赶快提供粗确临床指示.MB-80应用试剂盒及仪器检测，能赶快天检测出体液中真菌1-3-β-D葡散糖的本质含量，对于沉症病人，有着非常要害的临床意思，对于少久住院病人应用广谱抗死物，肿瘤化疗等等病人，必然戴去一定的临床效率.三、MB-80微死物赶快检测系统技能指标及功能1.敏捷度：最小检出值1pg/ml；2.粗稀度：批间好CV<10%；3.准确性：回支率75-125%；4.尺度直线范畴：1-9000pg/ml；5.相闭系数r：千万于值≥0；6.检测时间：60分钟.可定量检测人体体液（血液、尿液、脑积液、胸积液、背火等）中细菌内毒素、深部真菌的含量，为临床医死早期确诊内毒素血症及真菌熏染症提供有价格的参照依据.一、MB-80微死物赶快定量检测系统本理采与光电变换本理，通过测定死物试剂与微死物细胞的特定身分反应爆收的浊度变更，修坐反当令间（T）与微死物含量（C）闭系的尺度直线，进而定量测定样品中细菌内毒素、真菌葡散糖的含量.二、MB-80微死物赶快定量检测系统用途1.人体体液（血液、尿液、血浑、背火、脑脊液等）细菌内毒素、真菌葡散糖、革兰阳性菌肽散糖定量检测；2.人用及兽用注射药品、死物造品及调理器械（一次性血袋、血小板的一次性管讲、一次性注射器、消毒棉棒、注射死理盐火等）的细菌内毒素（热本）的定量检测；3.血小板保存液、黑细胞保存液及血液造品中的细菌内毒素、真菌葡散糖、革兰阳性菌肽散糖定量检测；三、MB-80微死物动向赶快检测测定系统检测要领1．动向比浊时间分解法2．动向隐色时间分解法3．凝胶法。
1,3-β-D-葡聚糖检验简介
23
1,3-β-D-葡聚糖检测临床价值
早期诊断：侵袭性真菌感染增多且复杂，早期症状无 特异性，往往被原发病掩盖，病程长，发现较晚，死 亡率高。因此对深部真菌感染治疗成败的关键在于早 期诊断。
指导用药：快速确定真菌感染后，选择好治疗方案,有 针对性使用抗真菌类药物。为临床选用副作用小，疗 效高，价格适宜的药物提供准确的依据。
30
小结
1,3-β-D-葡聚糖是侵袭性真菌感染早期 诊断、疗效观察、预后评估有价值的实 验诊断。
1,3-β-D-葡聚糖检验其敏感性优于GM 侵袭性真菌感染的诊断与治疗是一个复
杂过程，实验室与临床应密切联系，为 临床医生提供诸如显微镜检查、真菌培 养、血清学标志物等多方面信息。
31
内毒素定量检测
13
侵袭性真菌感染的诊断标准 EORTC/MSG2008修订版
宿主因素 临床特征 病原学
真菌镜检 真菌培养 组织病理学检查 血清学检查方法（间接证据）
CSF隐球菌抗原阳性——确诊 GM-test, G-test——临床诊断
Clinical Infectious Diseases 2008; 46
外
骨折
感染
内
肝脏疾病
休克
大手术术后
41
内毒素定量检测的临床意义
发热原因的快速辅助诊断（< 1小时）； 早期判断革兰阴性菌的感染情况； （Gˉ菌所致）脓毒症、MODS等重症疾患的早期诊断 帮助临床医生快速合理筛选适当的药物(抗生素)； 判断抗感染治疗效果及预后； 肠源性内毒素血症的预判及评估；
评价效果：应用抗真菌药物后，定期检测血浆中葡聚 糖浓度变化，评价选用药物的有效性。
监护病程：监护深部真菌感染易感人群的病发状态。 动态观察：易感人群，监测临床疗效。
1,3-β-D-葡聚糖检测临床价值
早期诊断：侵袭性真菌感染增多且复杂，早期症状无 特异性，往往被原发病掩盖，病程长，发现较晚，死 亡率高。因此对深部真菌感染治疗成败的关键在于早 期诊断。
指导用药：快速确定真菌感染后，选择好治疗方案,有 针对性使用抗真菌类药物。为临床选用副作用小，疗 效高，价格适宜的药物提供准确的依据。
30
小结
1,3-β-D-葡聚糖是侵袭性真菌感染早期 诊断、疗效观察、预后评估有价值的实 验诊断。
1,3-β-D-葡聚糖检验其敏感性优于GM 侵袭性真菌感染的诊断与治疗是一个复
杂过程，实验室与临床应密切联系，为 临床医生提供诸如显微镜检查、真菌培 养、血清学标志物等多方面信息。
31
内毒素定量检测
13
侵袭性真菌感染的诊断标准 EORTC/MSG2008修订版
宿主因素 临床特征 病原学
真菌镜检 真菌培养 组织病理学检查 血清学检查方法（间接证据）
CSF隐球菌抗原阳性——确诊 GM-test, G-test——临床诊断
Clinical Infectious Diseases 2008; 46
外
骨折
感染
内
肝脏疾病
休克
大手术术后
41
内毒素定量检测的临床意义
发热原因的快速辅助诊断（< 1小时）； 早期判断革兰阴性菌的感染情况； （Gˉ菌所致）脓毒症、MODS等重症疾患的早期诊断 帮助临床医生快速合理筛选适当的药物(抗生素)； 判断抗感染治疗效果及预后； 肠源性内毒素血症的预判及评估；
评价效果：应用抗真菌药物后，定期检测血浆中葡聚 糖浓度变化，评价选用药物的有效性。
监护病程：监护深部真菌感染易感人群的病发状态。 动态观察：易感人群，监测临床疗效。
1,3-β-D-葡聚糖检验简介
注：＊原发性者可无宿主因素，△肺组织、胸液、血液真菌培养阳性（除外肺孢子菌）
15
（1,3） - β- D-葡聚糖检测
16
真菌细胞膜、壁结构
mannoproteins
β1,3 b1,6 葡聚糖 磷脂 双分 子层
b1,3葡聚糖 合成酶
几丁质 麦角固 醇
羊毛固醇C－14去甲基化酶 14位还原和7－8位异构酶 17 角鲨烯环氧化酶
30
小结
1,3-β-D-葡聚糖是侵袭性真菌感染早期 诊断、疗效观察、预后评估有价值的实 验诊断。 1,3-β-D-葡聚糖检验其敏感性优于GM 侵袭性真菌感染的诊断与治疗是一个复 杂过程，实验室与临床应密切联系，为 临床医生提供诸如显微镜检查、真菌培 养、血清学标志物等多方面信息。
31
内毒素定量检测
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1,3-β-D-葡聚糖检测临床价值
早期诊断：侵袭性真菌感染增多且复杂，早期症状无 特异性，往往被原发病掩盖，病程长，发现较晚，死 亡率高。因此对深部真菌感染治疗成败的关键在于早 期诊断。 指导用药：快速确定真菌感染后，选择好治疗方案,有 针对性使用抗真菌类药物。为临床选用副作用小，疗 效高，价格适宜的药物提供准确的依据。 评价效果：应用抗真菌药物后，定期检测血浆中葡聚 糖浓度变化，评价选用药物的有效性。 监护病程：监护深部真菌感染易感人群的病发状态。 动态观察：易感人群，监测临床疗效。
危重病人的存活期延长
延长了真菌感染 的 高 危 期
使此类患者业已增加 的人数进一步扩大
严重真菌感染迅速上升势头
是日益严重的威胁！
5
真菌感染的危险因素：
真菌(1-3)-D葡聚糖检测反应机理之欧阳语创编
真菌(1-3)--D葡聚糖检测反应机理时间：2021.03.01 创作：欧阳语目前临床上随着广谱抗生素、各类免疫抑制剂、移植插管等新技术的不断发展应用,其真菌感染尤其是深部真菌感染出现明显上升趋势,而作为临床诊断的细菌培养其阳性率很低,且检测周期长,不能适应临床治疗诊断的要求,因此迫切需要快速、准确的检测方法.因此对血液中的早期(1-3)--D葡聚糖快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中(1-3)--D葡聚糖快速检测对早期诊断深部真菌感染具有重要的参考价值。
该试验的基本原理是试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量(1-3)--D葡聚糖能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应,通过测定凝集反应过程中的浊度变化从而定量检测血浆中(1-3)--D葡聚糖含量.内毒素定量检测的反应机理细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁外层中的脂多糖成份(LPS), 具有多种的生物活性, 微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 因此对血液中的早期内毒素快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值。
反应试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量革蓝氏阴性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应形成凝胶,通过测定在形成凝胶过程中的浊度变化从而定量检测血浆中革蓝氏阴性菌内毒素.一、检测体液内毒素的临床意义由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。
在各类抗生素杀灭革兰氏阴性菌的同时，也会使后者释放出一定数量的内毒素，从而加重内毒素血症。
早期诊断的细菌学培养需时长，而且由于抗生素的应用，其培养阳性率低。
早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键，临床医师仅能根据临床特征与体征推断病源学而带有一定的盲目性，因此，早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。
真菌检测试剂使用说明书
真菌(1-3)--D 葡聚糖检测试剂盒（光度法） 使 用 说 明 书
【产品名称】 通用名称：真菌(1-3)--D 葡聚糖检测试剂盒（光度法） 英文名称： Test Kit for the Detection of Fungus (1-3)- -D-Glucan (Photometric Assay) 【包装规格】单人份/盒、两人份/盒、6 人份/盒、10 人份/盒、20 人份/盒 【预期用途】用于人血液(1-3)--D 葡聚糖的定量检测，为临床诊断深部真菌感染以及治疗预 后提供参考依据，也可用于真菌相关疾病的医学研究。 【检测原理】在实验条件下，来源于某些真菌细胞壁的(1-3)--D 葡聚糖能够特异性地激活本 试剂盒反应试剂的酶促凝集系统，使反应溶液的透光度发生变化。利用(1-3)--D 葡聚糖标准 品建立-D 葡聚糖生物效应与透光度关系的标准曲线，便可定量地测定人血液的(1-3)--D 葡 聚糖含量。 【主要组成成份】试剂盒由(1-3)--D 葡聚糖检测试剂、试剂复溶液、采血瓶以及血浆稀释液 组成。 【储存条件及有效期】2~10℃避光贮存（切勿冻结） ，有效期 2 年。 【适用仪器】LKM-02 系列动态试管检测仪或具有相同功能的仪器。 【样品要求】 1. 血浆的制备： 用无菌无-D 葡聚糖的采血器具采集受试者静脉血 1~2mL， 注入采血瓶 中，将采血瓶以 400g 离心 10 分钟，取出后置 2-8℃冰箱备用；若在 4 小时内不用， 可分离出血浆置-20℃以下保存 30 天。 注意：在采血以及分离血浆过程应避免样品发生溶血。溶血的样品对检测有干扰， 不能使用。 2. 供试品溶液制备： 取已制备的血浆 0.1mL 加入血浆稀释瓶中， 混匀后置 75℃10 分钟， 即为 1:10 稀释的血浆供试品溶液。 若不立即使用， 应把血浆稀释瓶移至 2~8℃冰箱存 放。 【检验方法】 （以两人份试剂盒使用为例） 1. 取试剂复溶液 1 支，开启备用。 2. 取-D 葡聚糖检测试剂 1 支，加入 0.25mL 试剂复溶液，轻轻摇匀，得试剂溶液备用。
【产品名称】 通用名称：真菌(1-3)--D 葡聚糖检测试剂盒（光度法） 英文名称： Test Kit for the Detection of Fungus (1-3)- -D-Glucan (Photometric Assay) 【包装规格】单人份/盒、两人份/盒、6 人份/盒、10 人份/盒、20 人份/盒 【预期用途】用于人血液(1-3)--D 葡聚糖的定量检测，为临床诊断深部真菌感染以及治疗预 后提供参考依据，也可用于真菌相关疾病的医学研究。 【检测原理】在实验条件下，来源于某些真菌细胞壁的(1-3)--D 葡聚糖能够特异性地激活本 试剂盒反应试剂的酶促凝集系统，使反应溶液的透光度发生变化。利用(1-3)--D 葡聚糖标准 品建立-D 葡聚糖生物效应与透光度关系的标准曲线，便可定量地测定人血液的(1-3)--D 葡 聚糖含量。 【主要组成成份】试剂盒由(1-3)--D 葡聚糖检测试剂、试剂复溶液、采血瓶以及血浆稀释液 组成。 【储存条件及有效期】2~10℃避光贮存（切勿冻结） ，有效期 2 年。 【适用仪器】LKM-02 系列动态试管检测仪或具有相同功能的仪器。 【样品要求】 1. 血浆的制备： 用无菌无-D 葡聚糖的采血器具采集受试者静脉血 1~2mL， 注入采血瓶 中，将采血瓶以 400g 离心 10 分钟，取出后置 2-8℃冰箱备用；若在 4 小时内不用， 可分离出血浆置-20℃以下保存 30 天。 注意：在采血以及分离血浆过程应避免样品发生溶血。溶血的样品对检测有干扰， 不能使用。 2. 供试品溶液制备： 取已制备的血浆 0.1mL 加入血浆稀释瓶中， 混匀后置 75℃10 分钟， 即为 1:10 稀释的血浆供试品溶液。 若不立即使用， 应把血浆稀释瓶移至 2~8℃冰箱存 放。 【检验方法】 （以两人份试剂盒使用为例） 1. 取试剂复溶液 1 支，开启备用。 2. 取-D 葡聚糖检测试剂 1 支，加入 0.25mL 试剂复溶液，轻轻摇匀，得试剂溶液备用。
真菌D葡聚糖检测反应机理
真菌D葡聚糖检测反应机理SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#真菌(1-3)--D葡聚糖检测反应机理目前临床上随着广谱抗生素、各类免疫抑制剂、移植插管等新技术的不断发展应用,其真菌感染尤其是深部真菌感染出现明显上升趋势,而作为临床诊断的细菌培养其阳性率很低,且检测周期长,不能适应临床治疗诊断的要求,因此迫切需要快速、准确的检测方法.因此对血液中的早期(1-3)--D葡聚糖快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中(1-3)--D葡聚糖快速检测对早期诊断深部真菌感染具有重要的参考价值。
该试验的基本原理是试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量(1-3)--D葡聚糖能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应,通过测定凝集反应过程中的浊度变化从而定量检测血浆中(1-3)--D葡聚糖含量.内毒素定量检测的反应机理细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁外层中的脂多糖成份(LPS), 具有多种的生物活性, 微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应, 因此对血液中的早期内毒素快速定量检测,将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值。
反应试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品. 在适宜条件下, 微量革蓝氏阴性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应形成凝胶,通过测定在形成凝胶过程中的浊度变化从而定量检测血浆中革蓝氏阴性菌内毒素.一、检测体液内毒素的临床意义由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。
在各类抗生素杀灭革兰氏阴性菌的同时，也会使后者释放出一定数量的内毒素，从而加重内毒素血症。
早期诊断的细菌学培养需时长，而且由于抗生素的应用，其培养阳性率低。
早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键，临床医师仅能根据临床特征与体征推断病源学而带有一定的盲目性，因此，早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。
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真菌(1-3)- -D葡聚糖检测反应机理
目前临床上随着广谱抗生素、各类免疫抑制剂、移植插管等新技术的不断发展应用，其真菌感染尤其是深部真菌感染出现明显上升趋势,而作为临床诊断的细菌培养其阳性率很低，且检测周期长，不能适应临床治疗诊断的要求，因此迫切需要快速、准确的检测方法.因此对血液中的早期(1-3)- -D葡聚糖快速定量检测，将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中(1-3)- -D葡聚糖快速检测对早期诊断深部真菌感染具有重要的参考价值。
该试验的基本原理是试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品.在适宜条件下，微量(1-3)- -D葡聚糖能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应，通过测定凝集反应过程中的浊度变化从而定量检测血浆中(1-3)- '-D葡聚糖
含量•
内毒素定量检测的反应机理
细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁外层中的脂多糖成份(LPS),具有多种的生物活性，微量的内毒素进入机体将会出现发热、血压降低、寒战、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应，因此对血液中的早期内毒素快速定量检测，将对临床对症治疗具有很深的现实意义。
人体血浆中内毒素检测对分别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值。
反应试剂中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷冻干燥品.在适宜条件下，微量革蓝氏阴性菌内毒素能激活试剂中的凝固酶原产生凝集反应形成凝胶,通过测定在形成凝胶过程中的浊度变化从而定量检测血浆中革蓝氏阴性菌内毒素.
一、检测体液内毒素的临床意义
由革兰氏阴性菌所引起的内毒素血症及脓毒血症是目前临床上的主要死亡原因之一。
在各类抗生素杀灭革兰氏阴性菌的同时，也会使后者释放出一定数量的内毒素，从而加重内毒素血症。
早期诊断的细菌学培养需时长，而且由于抗生素的应用，其培养阳性率低。
早期的数小时内作为临床上抢救感染性休克的关键，临床医师仅能根据临床特征与体征推断病源学而带有一定的盲目性，因此，早期体液中内毒素的正确、快速定量检测及相应的对症治疗就显得格外重要。
过去的内毒素检测能定性而不能定量，而且个体差异和实验室间的误差较大，无法成为有价值的临床检验项目，北京金山川公司研制的MB-80 微生物快速动态检测系统能定量检测体液内毒素的含量，经国内多家单位使用现已在其他省市开始作为临床检验项目进行收费。
该仪器检测内毒素具有结果稳定、检测快（ 1 小时）、重复性好、准确率高、不同的检测人员操作引起的误差小等优点。
内毒素定量检测在重症病人、感染病人（如脑膜炎）以及其他有严重创伤等疾病的病人均有重要的临床意义，这使得内毒素研究一直是热点，但过去由于方法的限制，内毒素检测也是临床的难点。
二、深部真菌检测的临床意义
动态定量检测体液中真菌含量是应用MB-80 微生物快速动态检
测系统进行的。
该方法可以快速诊断用常规方法难以确诊的深部真菌
感染，应用MB-80检测真菌，其检出率远远高于传统的血培养方法，使病原体的监测更加准确，更快速，MB-8 0系统具有很高的灵敏度和优异的数据分析功能，检测低限5pg/ml的真菌1-3-- [3 -D葡聚糖量。
因近年来，一些罕见的条件致病真菌引起深部感染，临床重症病人，特别是广谱抗生素和化疗药物的应用，真菌感染已成为感染导致死亡的重要原因之一，而有研究发现早期发现并给予适当的治疗，真菌感染可以较好地得到控制，这就要求一种能迅速确定有无深部真菌感染的方法，因系统抗真菌药物种类较少，抗菌谱较广，不因真菌种类而异。
当检测到标本中葡聚糖含量较高时，即刻予以系统治疗，不必等鉴定出种属，否则会贻误最佳治疗时机。
而常规真菌血培养需时长，鉴定过程复杂，阳性率低，不能快速提供明确临床指示。
MB-80 应用试剂盒及仪器检测，能快速地检测出体液中真菌1-3- 3 -D葡聚糖的实际含量，对重症病人，有着非常重要的临床意义，对长期住院病人应用广谱抗生物，肿瘤化疗等等病人，必将带来一定的临床效益。
三、MB-80微生物快速检测系统技术指标及功能
1. 灵敏度：最小检出值1pg/ml；
2. 精密度：批间差CV<10%；
3. 准确性：回收率75-125%；
4. 标准曲线范围：1-9000pg/ml ；
5. 相关系数r :绝对值》0.980 ;
6. 检测时间：60 分钟。
可定量检测人体体液（血液、尿液、脑积液、胸积液、腹水等）
中细菌内毒素、深部真菌的
含量，为临床医生早期确诊内毒素血症及真菌感染症提供有价值
的参考依据。
一、MB-80 微生物快速定量检测系统原理
采用光电转换原理，通过测定生物试剂与微生物细胞的特定成分反应产生的浊度变化，建立反应时间（T）与微生物含量（C）关系的标准曲线，从而定量测定样品中细菌内毒素、真菌葡聚糖的含量。
MB-80 微生物快速定量检测系统用途
1. 人体体液（血液、尿液、血清、腹水、脑脊液等）细菌内毒素、
真菌葡聚糖、革兰阳性菌肽聚糖定量检测；
2. 人用及兽用注射药品、生物制品及医疗器械（一次性血袋、血小板的一次性管道、一次性注射器、消毒棉棒、注射生理盐水等）的细菌内毒素（热原）的定量检测；
3. 血小板保存液、红细胞保存液及血液制品中的细菌内毒素、真菌葡聚糖、革兰阳性菌肽聚糖定量检测；三、MB-80 微生物动态快速检测测定系统检测方法
1．动态比浊时间分析法
2．动态显色时间分析法
3．凝胶法
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