体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证ppt课件
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体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证1.血浆血浆样品处理方法主要包括离心、超滤、蛋白沉淀和固相萃取。
首先,通过离心将血清和细胞分离,并将上清液收集。
然后,使用超滤技术去除高分子物质,如蛋白质,以得到更纯净的血浆样品。
接下来,可以使用蛋白沉淀方法去除血浆中的蛋白质,以便进一步分析非蛋白质药物。
最后,固相萃取是常用的药物浓度测定方法,可以通过固相材料吸附目标药物,然后用洗脱液洗脱和浓缩样品,最后定量分析。
2.尿液尿液样品处理方法常采用固相萃取、pH调节、加入稳定剂等技术。
固相萃取可以去除尿液中的杂质,并将药物萃取到固相材料上,然后用洗脱剂将药物洗脱出来。
pH调节可以使药物离子化或去离子化,以提高其固相萃取的效率。
此外,加入稳定剂可以保持样品的稳定性,防止药物分解或降解。
3.组织和细胞组织和细胞样品处理方法包括离心、组织切割、细胞溶解和蛋白沉淀等技术。
首先,通过离心将组织或细胞分离,并收集上清液。
然后,使用组织切割技术将组织样品切成适当的大小。
对于细胞样品,可以使用细胞溶解剂将细胞完全裂解。
最后,蛋白沉淀可以去除样品中的蛋白质,以便进一步分析非蛋白质药物。
方法学验证是为了确保分析方法的准确性和可靠性而进行的步骤和操作流程的验证。
主要包括以下几个方面:1.线性范围验证:验证方法在一定浓度范围内,药物浓度与测定结果之间的关系是否呈线性。
2.灵敏度验证:验证方法的最低检测限、最低定量限和测定范围等指标,以评估方法对药物浓度的敏感度。
3.精密度和准确度验证:通过重复测定和与参考方法比较等方法验证方法的重复性和准确性。
4.选择性验证:验证方法对样品中其他可能存在的干扰物的选择性,以保证药物的测定不受干扰。
5.稳定性验证:验证样品在不同温度、时间、pH条件下的稳定性,以评估样品的保存期限和条件。
综上所述,体内药物分析常用的生物样品处理方法包括血浆的离心、超滤、蛋白沉淀和固相萃取,尿液的固相萃取、pH调节和加入稳定剂,组织和细胞的离心、组织切割、细胞溶解和蛋白沉淀等。