反胶束萃取技术及其在植物蛋白质提取中的应用研究进展_郭珍

反胶束萃取分离生物分子及相关领域的研究进展段金友　方积年3(中国科学院上海药物研究所,上海200031)摘　要　综述了反胶束有关的概念、理论;反胶束萃取蛋白质的传质机制、选择性分离过程及工艺流程;反胶束对氨基酸、抗生素及核酸的萃取分离;反胶束与其他方法、技术相结合的应用状况。

关键词　反胶束,萃取,分离,评述　2001202223收稿;2001206211接受1　引 言传统的液2液萃取分离技术成本低,易于运作,已广泛用于多组分物质的分离。

但是,由于缺乏相应的生化溶剂,采用该技术难以分离蛋白质、核酸等大分子生物活性物质;液相色谱技术,特别是制备型色谱技术的应用,使大多数生物分子的批量分离成为可能,然而由于该技术本身也存在某些局限性,例如一定的固定相,有时会引起目标物的不可逆吸附、甚至变性等现象,在一定程度上限制了其在生化工程中的应用。

近年来,以反胶束溶液为新的溶剂系统的萃取分离技术,可以选择性分离某些生物活性分子,而逐渐引起了人们的重视。

1977年Luisi 等1首先发现胰凝乳蛋白酶可以溶解于含双亲物质(表面活性剂)的有机溶剂中,超离心数据显示有机相中有反胶束的存在,同时,光谱分析(紫外2可见光谱、荧光光谱、旋光光谱)表明这一过程未引起酶的变性;1979年Luisi 等2考察了蛋白质溶液的pH 值、蛋白质和双亲物质的浓度对蛋白质萃取率的影响及蛋白质在反胶束溶液中的光谱特性;1979年Menger 和Y amada 3对反胶束溶液中酶的性质进行了研究。

随后的20多年里,反胶束萃取技术已广泛应用于蛋白质的分离和纯化,并逐渐延伸至其他生物分子(氨基酸、抗生素、核酸)的分离研究;近年来,该技术结合其他一些技术、方法的应用正在研究和开发,显示了良好的应用前景。

2　反胶束的定义、形成条件、特征和研究方法反胶束(reversed micelle )是双亲物质在非极性有机溶剂中自发聚集体,又称为反胶团、逆胶束(inverse micelle )4,5。

反胶束萃取技术及其在植物蛋白质提取中的应用研究进展郭珍;陈复生;李彦磊;李润洁【摘要】Reverse micelle extraction is a new separation technique suitable for macromolecular separation and purification, and has broad application prospect in the extraction of biological active substances . In this paper, the meaning,reaction mechanism and the domestic and foreign research progress of reverse micelle extraction applied to plant protein extraction are summarized, the existing problems are reviewed.%反胶束萃取是一种适合生物大分子分离纯化的新型技术,在生物活性物质的萃取上有着广泛的应用前景.文章阐述反胶束萃取的含义、反胶束萃取蛋白质机理,并对近年来国内外有关反胶束萃取在植物蛋白质提取中的应用研究进行综述,对该领域目前存在的问题进行评述和展望.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2013(029)001【总页数】3页(P240-242)【关键词】反胶束;植物蛋白;萃取;注入法;固溶法;相转移法【作者】郭珍;陈复生;李彦磊;李润洁【作者单位】河南工业大学,河南郑州 450001;河南工业大学,河南郑州 450001;河南工业大学,河南郑州 450001;河南工业大学,河南郑州 450001【正文语种】中文反胶束萃取技术是继双水相萃取之后的一种适合生物大分子分离纯化的新型分离技术，该技术已经在食品工业、医药行业［1］，甚至纳米材料［2，3］的制备上得到了广泛的研究。

复合反胶束后萃花生蛋白提取条件优化郭珍;陈复生;李润洁【摘要】花生是世界上非常重要以及研究最为广泛的一种油料作物,同时又富含24％～ 36％的蛋白质.研究AOT-SDS/异辛烷-正辛醇复合反胶束技术萃取花生蛋白,考察了pH、KCl浓度、温度以及时间对花生蛋白后萃率的影响,采用四因素二次通用旋转组合设计试验,并对试验结果进行方差分析,回归分析建立回归方程,采用频率分析法获得了花生蛋白后萃的最佳工艺条件:pH 7.5、时间30 min、KCl浓度1.1 mol/L、温度35℃,在此条件下得到的后萃率为79.03％.【期刊名称】《中国粮油学报》【年(卷),期】2014(029)004【总页数】5页(P82-85,92)【关键词】花生蛋白;二次通用旋转组合;复合反胶束;优化【作者】郭珍;陈复生;李润洁【作者单位】河南工业大学,郑州450001;河南工业大学,郑州450001;河南工业大学,郑州450001【正文语种】中文【中图分类】TS201.2花生是我国主要的油料资源，同时富含24%～36%的蛋白质。

花生蛋白含有多种必需氨基酸，不含胆固醇［1］。

与大豆蛋白相比，抗营养因子较少，可消化性强。

目前我国利用花生制油过程造成了花生蛋白的损失与变性，因此，探寻一种新型制备花生蛋白技术有着重要的意义。

反胶束萃取技术是一种新型的可用于提取具有生物活性物质的技术［2］。

已有研究显示，反胶束萃取技术可以实现大豆中蛋白质和油脂同时分离，并减少蛋白质的变性，且大多数采用的都是AOT单一反胶束体系，而研究发现，把不同类型表面活性剂混合起来制备可以形成具有良好性质的混合反胶束体系，增加增溶水量［3－4］，因此本试验将阴离子表面活性剂AOT与SDS混合配制复合反胶束进行研究。

本试验采用AOT－SDS/异辛烷－正辛醇复合反胶束对花生蛋白进行提取，考察pH、时间、KCl、温度对后萃率的影响，采用二次通用旋转组合设计，以后萃率为指标获取较佳工艺条件，为反胶束在花生蛋白提取过程中的应用获得数据指导。

反胶束萃取技术及其应用摘要：随着基因工程和细胞工程的发展，反胶束萃取这项新型萃取技术已经引起了人们的注意，本文介绍了反胶束萃取技术的概念、基本原理，反胶束体系的组成、性质以及该技术在食品科学中的应用。

关键词：反胶束；基本原理；应用Reversedmicelle Technology and Its ApplicationAbstract：As genetic engineering and cell engineering development, reversedmicelle the new extraction technology has attracted the attention of the people, this paper introduces the reversedmicelle technology concept, basic principle, by beam system composition, properties and the technology in the application of food science. Keywords：reverse micelle;basic principle ; application反胶束萃取法是一种新型的分离技术，它具有成本低、可连续操作、萃取率高、条件温和、不会引起活性物质的失活以及处理量大等优点，在食品工业领域有着良好的应用前景[1]。

1 反胶束萃取技术的概念、基本原理1.1 反胶束的概念表面活性剂溶于水中，当其浓度超过临界胶束浓度（CMC）时，便形成聚集体，称为正常胶束,表面活性剂溶于有机溶剂，当浓度大于临界胶团浓度时，会在有机相中形成聚集体，称为反胶束。

反胶束中极性头朝内，非极性尾朝外排列形成亲水内核，称为“水池”[2]。

1.2基本原理由于反胶束内存在微水池，故可溶解氨基酸、肽和蛋白质等生物分子，为生物分子提供易于生存的亲水环境。

反胶团萃取蛋白质研究进展S cience and Technology of Food Industr y3262009年第02期反胶团萃取蛋白质研究进展赵喜红1,何小维1,杨连生1,王继华2,彭运平2(11华南理工大学轻工与食品学院,广东广州510640;21广州万孚生物技术有限公司,广东广州510640)摘要:反胶团萃取分离技术是一种新型的、有发展前景的蛋白分离技术。

本文对反胶团的各种影响因素以及目前的开发应用状况等多方面进行综述,提出了反胶团技术目前存在的问题,并对其应用前景作了展望。

关键词:反胶团,萃取,蛋白分离Devel opment in p r otein extracti on by reverse m icellesZHAO X i -hong 1,HE X i a o -we i 1,YANG L i a n -sheng 1,W ANG J i -hua 2,PENG Y un -p i n g2(11College of L ight I ndustry and Food Sciences,South China University of Technol ogy,Guangzhou 510640,China;(21Guangzhou Wondfo B i otech 1Co 1,L td 1,Guangzhou 510640,China )Ab s trac t:The re ve rs e m ic e lle s e xtra c tion is a nove l s ep a ra tion te c hno log y w ith p rosp e c t fo r s ep a ra ting bio -p rod uc t 1The a rtic le in trod uc e d the i nflue nc e fa c to rs of re ve rs e m ic e lle on p ro te i n e xtra c tion a nd ap p lic a ti on of re ve rs e m i c e ll e s 1In the e nd,the e xi s ting p rob l em s a nd the ap p li c a ti on p rosp e c t w e re d is c us s e d 1 Ke y wo rd s:re ve rs e m i c e ll e s;e xtra c tion;p ro te i n s ep a ra tion中图分类号:TS20112+1 文献标识码:A 文章编号:1002-0306(2009)02-0326-04收稿日期:2008-05-14作者简介:赵喜红(1981-),男,博士生,主要从事大分子生物物质纯化等方面的研究。

不同反胶束体系后萃取花生蛋白质的比较高艳秀;陈复生;郭珍;杨颖莹;李润洁【摘要】对AOT[二-(2-乙基己基)琥珀酸酯磺酸钠]/异辛烷,SDS(十二烷基硫酸钠)/异辛烷-正辛醇,DTAC(十二烷基三甲基氯化铵)/正庚烷-正己醇3种反胶束体系萃取花生蛋白质的后萃工艺进行研究.主要研究了缓冲溶液pH值、萃取时间、萃取温度、超声功率、KCl浓度对花生蛋白后萃率的影响,分别得到了3种反胶束体系萃取花生蛋白质的最佳后萃工艺条件,并做验证试验.在最优工艺条件下制备不同的花生蛋白样品.通过色差分析,从宏观上比较不同反胶束体系制备的花生蛋白产品色泽的差异,进一步对比不同反胶束体系制备的花生蛋白的扫描电镜(SEM)照片,分析其微观结构的差别,试验结果表明最适合萃取花生蛋白的反胶束体系是AOT反胶束体系,且该体系萃取花生蛋白的后萃率为83.17％,较另外2种体系的后萃率都高.%Peanut protein was extracted using AOT[sodium bis-(2-ethylhexyl) sulfosuccinate] / isooctane,SDS (sodium dodecyl sulfonate) / isooctane-heptylane capryl alcohol,DTAC (heptanes-hexanol reverse micelle systems,and the backward extraction was studied.The effects ofpH,extraction time,and temperature,ultrasonic power,KCl concentration on the backward extraction rates were investigated.And the optimum conditions of the three reverse micelle systems in the backward extraction were obtained and verification test were designed to verify the results.On the optimum conditions,various peanut protein samples were prepared.Through the color difference analysis,we compared the color difference of respective peanut protein products onmacroscopic.Furthermore,comparing scanning electron microscopy (SEM)pictures of three kinds of peanut proteins extracted from the respective reverse micelle systems,we analyzed the differences of microstructure.The results of the test showed that the most suitable reverse micelle system for the extraction of peanut protein was AOT reverse micelle system; the backward extraction efficiency of this system was 83.17％,which was also higher than the other two reverse micelle systems.【期刊名称】《中国粮油学报》【年(卷),期】2013(028)008【总页数】7页(P12-18)【关键词】花生蛋白;反胶束;色差分析;扫描电镜【作者】高艳秀;陈复生;郭珍;杨颖莹;李润洁【作者单位】河南工业大学粮油食品学院,郑州450001;河南工业大学粮油食品学院,郑州450001;河南工业大学粮油食品学院,郑州450001;河南工业大学粮油食品学院,郑州450001;河南工业大学粮油食品学院,郑州450001【正文语种】中文【中图分类】TQ936.2花生是世界上主要的优质食用植物油料品种之一，花生籽仁的主要成分是蛋白质、脂肪和碳水化合物，其含量分别为24%～36%、50%左右和10%～23%[1]。

利用反胶束萃取技术同时分离植物蛋白和油脂
陈复生;赵俊庭
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】1997(018)008
【摘要】研究ＡＯＴ－异辛烷反胶束体系的性质及其同时萃取花生蛋白和花生油的过程，分析和讨论了影响反胶束萃取的主要因素，确定了最佳工艺条件。

【总页数】4页(P43-46)
【作者】陈复生;赵俊庭
【作者单位】郑州粮食学院;郑州粮食学院
【正文语种】中文
【中图分类】TS224
【相关文献】
1.利用反胶束技术同时分离大豆蛋白和油脂 [J], 张淑霞;陈复生
2.反胶束萃取技术在提取分离生物制品中的应用 [J], 范景辉;李志平;李海燕;赵玉梅
3.反胶束萃取技术及其在植物蛋白质提取中的应用研究进展 [J], 郭珍;陈复生;李彦磊;李润洁
4.反胶束萃取技术及其对植物蛋白质结构特性的影响 [J], 杨趁仙;陈复生;刘昆仑;布冠好;郭珍;徐卫河
5.反胶束技术萃取植物蛋白和油脂的研究进展 [J], 姜崇斌;陈复生
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反胶束萃取技术及其对植物蛋白质结构特性的影响杨趁仙;陈复生;刘昆仑;布冠好;郭珍;徐卫河【摘要】综述反胶束萃取技术的基本原理、体系表征参数,分析表面活性剂的种类和浓度、pH、离子强度和温度等影响萃取的主要因素.对国内外有关反胶束体系萃取的植物蛋白质的结构特性的研究现状进行阐述,提出反胶束萃取技术中存在的主要问题,并展望其应用前景.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2013(029)006【总页数】4页(P240-243)【关键词】反胶束;原理;植物蛋白;结构;特性【作者】杨趁仙;陈复生;刘昆仑;布冠好;郭珍;徐卫河【作者单位】河南工业大学粮油食品学院,河南郑州 450001;河南工业大学粮油食品学院,河南郑州 450001;河南工业大学粮油食品学院,河南郑州 450001;河南工业大学粮油食品学院,河南郑州 450001;河南工业大学粮油食品学院,河南郑州450001;河南工业大学化学化工学院,河南郑州450001【正文语种】中文传统的蛋白质分离方法有沉淀法、离子交换法、吸附法等［1－3］，但缺点是工艺复杂、效率低、能耗高、有溶剂残留等，因此难以满足现代生化分离的需要。

20世纪70年代末新兴的反胶束萃取技术适用于蛋白质或酶类等大分子的分离纯化，具有操作简单、萃取率高、可连续操作、不易引起目标产物变性等优点。

近些年来，反胶束萃取技术已应用于生物［4，5］、化工、食品［6］、材料、医药［7］等诸多方面，具有广阔的应用前景。

文章重点介绍了反胶束萃取蛋白质的基本原理、主要影响因素及国内外有关反胶束体系萃取植物蛋白质的结构与特性的研究现状。

1 反胶束体系的概念及萃取原理反胶束（reverse micelle），又称反胶团，是表面活性剂分散于连续有机相中形成的纳米尺度的一种聚集体（10～100nm），反胶束溶液是透明的、热力学稳定的系统。

将表面活性剂添加到水或有机溶剂中，使其浓度超过临界胶束浓度，表面活性剂就会聚集在一起，极性基团向外，与水接触，非极性基团向内，形成一个非极性核，称为正胶束。

冷冻研钵在核酸或蛋白质提取中的应用
高凌云;陈丽红;卓丽娟;黄培生
【期刊名称】《福建医科大学学报》
【年(卷),期】2002(36)1
【摘要】@@ 分子病理学实验中制备高纯度的核酸或蛋白质是进行研究的首要条件.1年多来笔者利用简便易行的冷冻研钵提取新鲜组织的核酸和蛋白质取得较好效果,现介绍如下.
【总页数】1页(P108-108)
【作者】高凌云;陈丽红;卓丽娟;黄培生
【作者单位】福建医科大学,病理学系,福州,350004;福建医科大学,病理学系,福州,350004;福建医科大学,病理学系,福州,350004;福建医科大学,病理学系,福
州,350004
【正文语种】中文
【中图分类】R361.2
【相关文献】
1.反胶束萃取技术及其在植物蛋白质提取中的应用研究进展 [J], 郭珍;陈复生;李彦磊;李润洁
2.POCT核酸检测试剂的冷冻干燥处理及其应用 [J], 张建中;苏晓崧;张师音
3.三氯乙酸／丙酮蛋白质提取法在白内障晶状体蛋白提取中的应用 [J], 储兆东;卢国华;谭英;刘毅;李朝伟
4.核酸染料在实验教学改革中的应用与思考
——核酸染料Genefinder在基因工程实验教学改革的应用与思考 [J], 王小燕;林军
5.染料配体在蛋白质提取中的应用 [J], 徐伟军
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