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RAPD在绞股蓝种类鉴别应用上的条件摸索

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◇ 国药鉴别◇
Ｒ Ｐ Ａ Ｄ在 绞 股 蓝 种 类 鉴 别 应 用 上 的 条 件 摸 索
罗 育， 李雄 英 ， 吴耀 生 ， 蒋军 富， 赵瑞 强 ， 曾麒 燕
（ 广西 医科 大学 ， 西 南 宁 广 ５ ０２ ） ３ ０ １
摘要： 目的 为采用随机 扩增 多态性技 术鉴别绞股蓝及其 易混品鸟蔹莓 ， 行 Ｒ Ｐ 进 Ａ Ｄ条件摸 索。方法 运 用改进 ＣＡ Ｔ Ｂ法
ＲＡＰＤ ｒ ｅ ｅ ｒ ｈ ｄ．Ｒ ｅ ｕｌ Ｗ ｉｈ ｔ ｍｐｒｖ ｄ ＣＴＡＢ ｅｈ ｄ，ｔ ｘ ｒｃ ｅ ｗｅｅ ｒ ｓ ａ ｃ ｅ ｓ ｔ ｓ ｔ ｈｅｉ ｏｅ ｍ ｔｏ ｈｅｅ ｔａ ｔｄ ＤＮＡ ｒ ｓ ｎｔｄ ｂｅｔｒｑ ｌｔ ｎ ｏ ｌ ｅ ｕ ｅ ｐ ｅ ｅ ｅ ｔ ｕａｉｙ ａ ｄ ｃ ｕ ｄ ｂ ｓ ｄ ｅ
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提取七叶绞股蓝、 叶绞股蓝 、 五 鸟蔹莓以及烟草基 因组 Ｄ Ａ， 索影 响 Ｒ Ｐ Ｎ 摸 Ａ Ｄ的条件 。结 果 用改进 Ｃ Ａ Ｔ Ｂ法提取 所得 的 Ｄ Ａ质量较好 ， 能用于 Ｒ Ｐ Ｎ 均 Ａ Ｄ扩增 ， 并摸 索 出了最优 Ｒ Ｐ Ａ Ｄ扩 增 条件 。结 论 改 进 的 Ｃ Ａ Ｔ Ｂ法 适合 于 这 ４种植 物 的 Ｄ Ａ提 取 ， 索得到的 Ｒ Ｐ Ｎ 摸 Ａ Ｄ扩增条件可 用于绞股蓝种 类鉴 别及 与其 易混品乌蔹莓 的 区别。
维普资讯
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时 珍 国 医 国药 ２ ０ ０ ８年第 ｌ ９卷第 ２期
关键 词 ： 绞股蓝 ； 基 因组 Ｄ Ａ； 随机扩增 多态性 Ｄ Ａ 鉴别 Ｎ Ｎ ；
பைடு நூலகம்
中 图分 类 号 ： ２ ２ ５ Ｒ ８ ．
文献 标识 码 ： Ａ
文章编 号 ：０ ８０ ０ （ ｏ ８ ０ －３ ７ ３ １０ －８ ５ ２ ｏ ） ２ ７ － ０ ０
Ｅｘ ｏ ａ ｉ ｎ ｏ ｎｄ ｔｏ ｓ ｆ ｒ ｔ ｅ Ｉ ｅ ｔｆｃ ｔｏ ｆｔ ｒ ｅ ｙ ｏ ｐｌ ｒ ｔｏ ｆＣｏ ｉｉ ｎ ｏ ｈ ｄ ｎ ｉｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｈｅ Ｖａ ｉ ｔ ｆ Ｇｙｎ ｓｅ ｏ ｔ ｍｍａ ｐｅ ａ ｙｌ ｎｔｐｈ － ｉ ｔ ｌ ｗｉｈ ＲＡＰＤ ｅ ｈ ｄ ｌ Ｍ ｔｏ

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中国部分兰花品种RAPD分析

中国部分兰花品种RAPD分析

中国部分兰花品种RAPD分析
梁红建;刘敏;钟志宇;吴应祥;李文彬
【期刊名称】《园艺学报》
【年(卷),期】1996(23)4
【摘要】用随机引物扩增多态DNA（RAPD）分析技术，对中国兰花迸行品种鉴定和分类研究。

使用10种20个碱基的引物，对19个中国兰花品种的基因组DNA进行扩增，其产生83条扩增带，其中80条大多态性带。

每个兰花品种都有其特有的扩增带可与其它品种区别开来。

这种特异的条带可作为一个品种的分子标记应用于品种鉴定和分类RAPD对基因组的分析结果与传统分类学的结果基本相符。

各个种内的不同品种问亲缘关系接近。

【总页数】6页(P365-370)
【关键词】兰花;RAPD;品种鉴定;分类
【作者】梁红建;刘敏;钟志宇;吴应祥;李文彬
【作者单位】中国科学院遗传研究所,100101
【正文语种】中文
【中图分类】S682.310.2
【相关文献】
1.中国马铃薯部分品种资源遗传多样性的RAPD分析 [J], 邸宏;陈伊里;卢翠华
2.中国兰花（ChineseCymbidium）部分品种的叶片同工酶分析 [J], 梁红健;林鸣
3.中国兰花(Chinese Cymbidium)部分品种的叶片同工酶分析 [J], 梁红健;刘敏;
张纯花;薛淮;林鸣;唐秀芝
4.21个兰花品种的延长RAPD(ERAPD)和PCR-RFLP分析 [J], 蹇黎;武海;张以忠;余丹凤;秦小军;朱利泉
5.中国北方引种的部分越橘品种的RAPD分析 [J], 徐娜;夏秀英;贺建华;魏立君;张鲁杰
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RAPD技术在中药材鉴定中的应用

RAPD技术在中药材鉴定中的应用

第 17 卷第 1 期 2001 年 3 月
综述
广 东 药 学 院学 报
A CAD EM IC JO U RN AL O F GU A N GD ON G CO LLEGE OF PHAR M ACY
Vol. 17 No. 1
M ar. 2001
RAPD 技术在中药材鉴定中的应用
王阳顺* 综述 罗集鹏 审校 ( 广东药学院术是一种 DNA 分子标记技术, 自 90 年代问世以来, 人们即把它试用于 中药材的 鉴定, 并 在该领域 取得可喜的 研 究进展。本文就 RAPD 技术的基本原理以及它应当用于中药格鉴定的优缺点、注意事项、目前国内外研究动态、可能 发展前景等 方 面作了较详细的阐述。 关键词 RAPD 技术; 中药材; 鉴定 中图号 R282. 5 文章编号: 1006-8783( 2001) 01- 0019- 03 文献标识码: A
RA PD 即 随 机 扩 增 的 多 态 性 DNA ( R andom amplified polymorphic DNA ) , 是美 国的 Williams 与 Welsh 两 个研 究小 组 于 1990 年同时提出的一种 DN A 分子标记 技术。Williams 等[ 1] 称之 为 RA PD, Welsh 等[ 2] 称 之 为 A p- PCR ( Arbitarily primed PCR) 。RAPD 技 术建立在 PCR( poly merase chain r eaction) 技术 基础上, 它是 以任 意 顺序 列的 寡 核苷 酸 单链 ( 通 常为 10 个 碱 基,A p- PCR 则为 20~ 30 个碱 基。) 为 引物, 对 所 研究 的基 因组 DNA 进行 随机扩增。RA PD 所用的一系列 引物的 DN A 序列各 不相同, 但对于任一引物, 它同基因组 DNA 序列有 特定的 结合 位点。这些特定的结合 位点 在基 因组某 些区 域 内的 分布 如符 合 PCR 扩增的反应条件, 即在一 定范围内 模板 DNA 上有 与引 物互补的反相 重复 序 列时, 就 可 扩 增出 此 范围 的 DNA 片 段。 在不同物种基 因组 DNA 中, 这 种反相 重复 序列 的数 目和 间隔 的长短不同, 就可导致这些特定的 结合位 点分布发 生相应 的变 化, 而使 P CR 扩 增产物增加、减少 或发生 分子量 的变化。 通过 对 P CR 产物的检 测( 扩 增产 物以 琼脂 糖凝 胶电 泳分 离, EB 染 色,紫 外灯下 测 视, 拍 照。) 和 比 较, 即 可识 别 这 些物 种 基因 组 DNA 的扩增多态性片段。Williams[ 1] 等已用实验证明这 种短的 随机引物可用于扩增从低等到高等各种生物的基因组 DNA, 并 已证明这种多态性是按孟德尔方式遗 传的, 因而可 以用此 作遗 传标记, 研究物种的亲缘关系。
绞股蓝植物特征和鉴定

绞股蓝植物特征和鉴定

绞股蓝的根系由不定根组成，根为须根，初生结构由表皮、皮层和中柱构成，木质部2一4原型，具凯氏带，次生结构中栓内层较厚。

绞股蓝的茎有地上茎和地下茎之分，地上茎细柔，具槽纹，五棱形，富韧性，无毛或被短柔毛，具卷须，生于叶腋，顶端多分二岔，有攀援性，较老的茎在触地处可生出不定根。

茎由表皮、皮层和维管柱构成，髓发达，双韧型维管束，排成两圈，外圈5个，内圈4~5个，周维管纤维发达，连成一环。

地下茎为根状茎，圆柱形，周维管纤维呈不连续的环状，维管束排成一圈，具次生结构，次生韧皮部明显，次生木质部发达，导管孔直径20一155卿，髓射线较宽，髓射线及髓薄壁细胞内含有淀粉。

鸟足状复叶3一9小叶，常5一7小叶，不同产地的绞股蓝小叶数目、形态及大小具有差异。

叶为背腹型叶，气孔类型为不等型。

叶柄具5束维管束，进入小叶时分为5~9束。

不同生态条件下叶片的栅栏组织和海绵组织的分化程度不同，叶表皮形态也不同，如生长在干燥环境中的植株叶片在控制水分散失方面的结构发育得就比较完善(廖衍伦和叶能干1989:周湛芬等1993;丁树利等1994:王亚庆1998;张建军等2000;林如等2002a，2002b)。

嚎果绞股蓝的形态结构与绞股蓝基本相似(余明泉和顾建跃2003)。

绞股蓝的外形易与葫芦科和葡萄科的某些植物相混淆。

不少学者已从形态、结构、淀粉粒及红外光谱特征等方面对绞股蓝与其易混淆种乌蔽墓、雪胆等进行了比较鉴别，以明确正品绞股蓝特征，提高药材质量(饶军1993:肖文和缪细泉1997;绞股蓝雌雄异株，花单性，腋生或顶生圆锥花序。

花尊花瓣5片，雄蕊5枚，花药2室，纵裂。

花梗1条中央维管束进入花蕊时分开。

花瓣的上、下表皮都有膨大的泡状细胞和泡状毛。

雄花花药壁的发育为双子叶型，分泌型绒毡层，花粉母细胞减数分裂同时形成4个小抱子，四分体中小抱子排列成四面体型，二细胞型成熟花粉粒。

雌花具3个心皮和退化雄蕊，开放型花柱3条，子房3室，顶生胎座，倒生胚珠，每室1枚，珠被2层，有珠心嚎。

中药材DNA分子标记研究的技术问题 Ⅱ.RAPD实验技术和方法学论述

中药材DNA分子标记研究的技术问题 Ⅱ.RAPD实验技术和方法学论述

中药材DNA分子标记研究的技术问题Ⅱ.RAPD实验技术和
方法学论述
郭宝林;戴波
【期刊名称】《中草药》
【年(卷),期】2002(33)2
【摘要】主要根据作者的经验 ,对 RAPD实验技术中的扩增仪及扩增程度、DNA 模板浓度及纯度、引物的种类与浓度、Taq酶、缓冲系统、Mg2 +、d NTP的浓度、设立空白对照、扩增产物鉴定、条带统计和同源性认定、RAPD反应程序标准化等问题进行了论述 ,其中降解了的 DNA模板在不同的浓度时会产生不同的扩增式样 ,国产 Taq酶的不同批次间会产生较大的扩增差异为首次报道 ,并提供了获得清晰条带的电泳策略。

概述了 RAPD的主要特点和适用范围。

【总页数】3页(P178-180)
【关键词】RAPD技术;DNA模板;Taq酶;中药;分子标记
【作者】郭宝林;戴波
【作者单位】北京中医药大学中药鉴定室;云南大学
【正文语种】中文
【中图分类】R282.5
【相关文献】
1.中药材DNA分子标记技术的研究进展 [J], 邱永辉;薛兆坤
2.一种新的分子标记技术—DNA随机扩增多态性（RAPD）技术 [J], 蔡其华
3.花粉抗脑衰老大鼠基因组DNA RAPD分子标记的实验研究 [J], 李兴安;蒋滢;王尉平
4.中药材DNA分子标记研究的技术问题Ⅰ.植物药基因组DNA的提取 [J], 郭宝林;李家实;阎玉凝
5.基于RAPD分子标记技术的中药材鉴定研究进展 [J], 任爱农;秦民坚
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