生物化学总复习
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四、结构与功能的关系 正协同效应：血红蛋白（Hb）有4个亚基，其一个 亚基结合氧以后，整个分子构象改变，导致对氧 的亲和力急剧增加，又叫别构效应。因此，Hb的 氧合饱和度与氧分压作图为S形曲线。而肌红蛋 白（Mb）则无此效应，因此其氧合饱和度与氧分 压作图为简单双曲线。 （掌握） 血红蛋白的b肽链第6位氨基酸发生点突变，由Glu 变为Val，可导致镰刀型贫血症。（掌握）
片段用放射性同位素或生物素进行标记，这种带有一定标记的已知顺 序的核酸片段称为探针。 （掌握）
十、核酸酶：凡是能水解核酸的酶都称为核酸酶。凡能从多核苷
酸链的末端开始水解核酸的酶称为核酸外切酶，凡能从多核苷 酸链中间开始水解核酸的酶称为核酸内切酶。能识别特定的核 苷酸顺序，并从特定位点水解核酸的内切酶称为限制性核酸内 切酶（限制酶） 。（了解）
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3. 发生的化学反应（掌握） （1）a-氨基发生的反应：与亚硝酸、醛类、二硝基 氟苯等的反应，酰化、成盐反应 （2）a-羧基发生的反应：酰化、成盐、成酯、脱羧 反应。 （3）羧基与氨基同时发生的反应：茚三酮反应—— 氧化脱羧、脱氨产生紫色化合物（例外，脯氨酸/羟 脯氨酸与与茚三酮反应不放氨，生成黄色化合物） （4）侧链上的基团发生的反应
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第四章 蛋白质化学
一、 氨基酸： 1．结构特点：氨基酸(amino acid)是蛋白质分子 的基本组成单位。构成天然蛋白质分子的氨基酸约 有20种，除脯氨酸为α-亚氨基酸、甘氨酸不含手 性碳原子外，其余氨基酸均为L-α-氨基酸。（了解） 2．分类：根据氨基酸的R基团的极性大小可将氨基 酸分为3类：①酸性氨基酸(Glu和Asp)；②碱性氨 基酸(Lys、Arg和His) ；③中性氨基酸(其余15种) （掌握） 必需氨基酸与非必需氨基酸的概念及种类（掌握）
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五、蛋白质的理化性质（了解）： 1．两性解离与等电点：蛋白质分子中仍然存在游离 的氨基和游离的羧基，因此蛋白质与氨基酸一样具 有两性解离的性质。蛋白质分子所带正、负电荷相 等时溶液的pH值称为蛋白质的等电点。 2．蛋白质的胶体性质：蛋白质具有亲水溶胶的性 质。 3．蛋白质的紫外吸收：蛋白质分子中的色氨酸、 酪氨酸和苯丙氨酸残基对紫外光有吸收，以色氨酸 吸收最强，最大吸收峰为280nm。 4．蛋白质的变性：蛋白质在某些理化因素的作用 下，其特定的空间结构被破坏而导致其理化性质改 变及生物活性丧失，这种现象称为蛋白质的变性。
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第六章 酶化学
一、酶的概念： 酶（enzyme）是由活细胞产生的生物催化剂，这种催化剂具有极高 的催化效率和高度的底物特异性，其化学本质是蛋白质。酶按照其分 子结构可分为单体酶、寡聚酶和多酶体系（多酶复合体和多功能酶） 三大类。（了解） 二、酶的分类与命名： 1．酶的命名：主要有习惯命名法与系统命名法两种，但常用者为习惯 命名法。（了解） 2．酶的分类：国际酶学委员会（IEC）分类：① 氧化还原酶类：催化 氧化还原反应；②转移酶类：催化一个基团从某种化合物至另一种化 合物；③水解酶类：催化化合物的水解反应；④裂合酶类：催化从双 键上去掉一个基团或加上一个基团至双键上；⑤异构酶类：催化分子 内基团重排；⑥合成酶类：催化两分子化合物的缔合反应。 （掌握） 三、酶的分子组成： 酶分子可根据其化学组成的不同，可分为单纯酶和结合酶（全酶） 两类。结合酶则是由酶蛋白和辅助因子两部分构成，酶蛋白部分主要 与酶的底物特异性有关，辅助因子则与酶的催化活性有关。（了解） 与酶蛋白疏松结合并与酶的催化活性有关的耐热低分子有机化合物 称为辅酶。与酶蛋白牢固结合并与酶的催化活性有关的耐热低分子有 机化合物称为辅基。有些酶含有金属离子。（了解）
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八、酶促反应动力学： 1．底物浓度对反应速度的影响： （1）底物对酶促反应的饱和现象：由实验观察到，在酶浓度不 变时，不同的底物浓度与反应速度的关系为一矩形双曲线，即 当底物浓度较低时，反应速度的增加与底物浓度的增加成正比 （一级反应）；此后，随底物浓度的增加，反应速度的增加量 逐渐减少（混合级反应）；最后，当底物浓度增加到一定量时， 反应速度达到一最大值，不再随底物浓度的增加而增加（零级 反应）。(了解) （2）米氏方程： ν= Vmax[S]/(Km+[S])。其中，Vmax为最大 反应速度，Km为米氏常数。 （掌握）
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四、DNA的二级结构： DNA双螺旋 ，以B型为主 ，碱基互补原则 ， 稳定因素为氢键和碱基堆砌力 。（了解） 五、DNA的超螺旋结构： 进一步盘旋形成的超螺旋；真核生物形成 核小体 。（了解） 六、DNA的功能： 作为遗传信息的载体 。（了解）
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七、RNA的空间结构与功能： RNA通常以单链存在，但也可形成局部的双螺旋结构。 （了解） 1．mRNA的结构与功能：为蛋白质的合成提供模板，分子 中带有遗传密码 。mRNA是单链核酸，其在真核生物中的 初级产物称为HnRNA（5’为pppG/pppA）。真核成熟的 mRNA 有5’帽子和3’polyA尾。（掌握） 2．tRNA的结构与功能：活化并携带氨基酸，参与蛋白质合 成。二级结构为“三叶草”形。分五部分：①氨基酸臂： 3’-端带有-CCA-OH顺序，可与氨基酸结合；②DHU臂：二 氢尿嘧啶核苷，与氨基酰tRNA合成酶的结合有关；③反密 码臂：其反密码环中部的三个核苷酸可以用来识别mRNA 上相应的密码，其第一位（对应密码子的第三位）可以摆 动配对；④ TψC臂 ；⑤可变臂。（掌握） 3．rRNA的结构与功能：可与蛋白质一起构成核糖体，作为蛋 白质生物合成的场所。原核生物中的rRNA有三种：5S， 16S，23S。真核生物中的rRNA有四种：5S，5.8S，18S， 28S。 （了解）
生物化学总复习
李成华
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第一章 绪论（了解）
• 生物化学的的概念： 生物化学（biochemistry)是利用化学的原理 与方法去探讨生命的一门科学 。 • 生物化学的发展：1．叙述生物化学阶段； 2．动态生物化学阶段； 3．分子生物学阶段。 • 生物化学研究的主要方面： 1．生物体的物质 组成 ；2．物质代谢；3．细胞信号转导； 4．生物分子的结构与功能；5．遗传与繁殖
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第五章 核酸化学
一、核酸的化学组成：核苷酸=核苷（碱基+核糖or脱 氧核糖）+磷酸（掌握） 二、核酸的分类：DNA、RNA （了解） 三、核酸的一级结构：核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键连 接，DNA或RNA分子中脱氧核糖核苷酸或核糖核苷 酸的种类、数目、排列顺序及连接方式叫做核酸的 一级结构。（了解） DNA一级结构测定:双脱氧测序法（ddNTP）(掌握)
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2. 单糖的性质（掌握） （1）还原性。醛基/酮基，能被氧化成糖醛 酸或糖酸。费林定糖法 （2）氧化性。羰基也可被还原成羟基，形 成多羟基衍生物，如山梨醇等。 （3）酯化——糖酯 （4）甲基化与乙酰化 （5）过碘酸反应 （6）聚合——寡糖、多糖
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四、寡糖的结构和性质（了解） 1. 2-10个单糖通过糖苷键聚合。 2. 还原性的有无：保留半缩醛羟基的，如麦芽糖 和乳糖，有还原性；无游离半缩醛羟基的，如蔗 糖，没有还原性。 五、多糖的结构和性质（了解） 1. 淀粉：a-D-葡萄糖以a(1→4)糖苷键连接形成直 链；支链与主链之间以a(1→6)糖苷键连接。 2. 糖原：结构与淀粉相似 3. 纤维素： b-D-葡萄糖以b(1→4)糖苷键连接
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四、辅酶与辅基 大部分的辅酶与辅基衍生于维生素。辅酶与辅基的作用： ⑴ 运载氢原子或电子。⑵ 运载反应基团。（了解） 五、酶的活性中心： 酶分子上具有一定空间构象的部位，该部位化学基团集 中，直接参与将底物转变为产物的反应过程，这一部位就 称为酶的活性中心。 （掌握） 六、酶促反应的特点： 1．具有极高的催化效率；2．具有高度的底物特异性 ； 3. 活性可调节。（了解） 七、酶促反应的机制：中间复合物学说与诱导契合学说。 （了解）
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三、蛋白质的分子结构（掌握名词）： 1．一级结构：指多肽链中氨基酸的排列顺序， 其维系键是肽键。蛋白质的一级结构决定其空间 结构。 2．二级结构：指多肽链主链骨架盘绕折叠而形 成的构象，借氢键维系。 包括α-螺旋 、β-折叠 、 β-转角 、无规卷曲等 3. 三级结构：指多肽链所有原子的空间排布。其 维系键主要是非共价键（次级键）：氢键、疏水 键、范德华力、离子键等，也可涉及二硫键。 4．四级结构：指亚基之间的立体排布、接触部 位的布局等，其维系键为非共价键。亚基是指参 与构成蛋白质四级结构的而又具有独立三级结构 的多肽链。 5. 构象与构型的概念。
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六、蛋白质的分离、纯化 1．盐析与有机溶剂沉淀 （了解） 2．电泳:蛋白质分子在高于或低于其pI的溶液中带净的负或正电荷，因 此在电场中可以移动。迁移率的大小主要取决于蛋白质分子所带电荷 量以及分子大小。 （掌握） 3．透析（了解） 4．层析: 利用混合物中各组分理化性质的差异，在相互接触的两相 （固定相与流动相）之间的分布不同而进行分离。利用共价连接有特 异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或 其它分子的层析技术叫亲和层析（掌握） 5．超速离心（了解） 七、蛋白质的分析测定（了解） 1. 含量测定：凯氏定氮法、双缩脲法、福林酚法、紫外吸收法 2. 分子量测定：SDS-PAGE、凝胶过滤法 八、蛋白质测序的方法（掌握） 1.N-末端测定：Sanger法、PTH(Edman)法、DNS法、氨肽酶法 2.C-末端测定：肼解法、羧肽酶法 3.肽链水解：CNBr水解、酸水解、酶水解
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八、核酶（掌握）： 具有自身催化作用的RNA称为核酶（ribozyme） 九、核酸的一般理化性质： 1. 核酸具有酸性；粘度大；能吸收紫外光，最大吸收峰为 260nm。 （了解） 2. DNA的变性：在理化因素作用下，DNA双螺旋的两条互补链 松散而分开成为单链，从而导致DNA的理化性质及生物学性质 发生改变 。双链DNA彻底解链成单链DNA的温度范围的中点温 度叫做解链温度(Tm值) 。G、C含量越高，Tm值越高。 （掌握） 3. DNA的复性 ：将变性DNA经退火处理，使其重新形成双螺旋 结构的过程 。（掌握） 4. 分子杂交技术：两条来源不同的单链核酸（DNA或RNA）， 只要它们有大致相同的互补碱基顺序，以退火处理即可复性， 形成新的杂交双链。在核酸杂交分析过程中，常将已知顺序的核酸
四、结构与功能的关系 正协同效应：血红蛋白（Hb）有4个亚基，其一个 亚基结合氧以后，整个分子构象改变，导致对氧 的亲和力急剧增加，又叫别构效应。因此，Hb的 氧合饱和度与氧分压作图为S形曲线。而肌红蛋 白（Mb）则无此效应，因此其氧合饱和度与氧分 压作图为简单双曲线。 （掌握） 血红蛋白的b肽链第6位氨基酸发生点突变，由Glu 变为Val，可导致镰刀型贫血症。（掌握）
片段用放射性同位素或生物素进行标记，这种带有一定标记的已知顺 序的核酸片段称为探针。 （掌握）
十、核酸酶：凡是能水解核酸的酶都称为核酸酶。凡能从多核苷
酸链的末端开始水解核酸的酶称为核酸外切酶，凡能从多核苷 酸链中间开始水解核酸的酶称为核酸内切酶。能识别特定的核 苷酸顺序，并从特定位点水解核酸的内切酶称为限制性核酸内 切酶（限制酶） 。（了解）
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3. 发生的化学反应（掌握） （1）a-氨基发生的反应：与亚硝酸、醛类、二硝基 氟苯等的反应，酰化、成盐反应 （2）a-羧基发生的反应：酰化、成盐、成酯、脱羧 反应。 （3）羧基与氨基同时发生的反应：茚三酮反应—— 氧化脱羧、脱氨产生紫色化合物（例外，脯氨酸/羟 脯氨酸与与茚三酮反应不放氨，生成黄色化合物） （4）侧链上的基团发生的反应
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第四章 蛋白质化学
一、 氨基酸： 1．结构特点：氨基酸(amino acid)是蛋白质分子 的基本组成单位。构成天然蛋白质分子的氨基酸约 有20种，除脯氨酸为α-亚氨基酸、甘氨酸不含手 性碳原子外，其余氨基酸均为L-α-氨基酸。（了解） 2．分类：根据氨基酸的R基团的极性大小可将氨基 酸分为3类：①酸性氨基酸(Glu和Asp)；②碱性氨 基酸(Lys、Arg和His) ；③中性氨基酸(其余15种) （掌握） 必需氨基酸与非必需氨基酸的概念及种类（掌握）
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五、蛋白质的理化性质（了解）： 1．两性解离与等电点：蛋白质分子中仍然存在游离 的氨基和游离的羧基，因此蛋白质与氨基酸一样具 有两性解离的性质。蛋白质分子所带正、负电荷相 等时溶液的pH值称为蛋白质的等电点。 2．蛋白质的胶体性质：蛋白质具有亲水溶胶的性 质。 3．蛋白质的紫外吸收：蛋白质分子中的色氨酸、 酪氨酸和苯丙氨酸残基对紫外光有吸收，以色氨酸 吸收最强，最大吸收峰为280nm。 4．蛋白质的变性：蛋白质在某些理化因素的作用 下，其特定的空间结构被破坏而导致其理化性质改 变及生物活性丧失，这种现象称为蛋白质的变性。
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第六章 酶化学
一、酶的概念： 酶（enzyme）是由活细胞产生的生物催化剂，这种催化剂具有极高 的催化效率和高度的底物特异性，其化学本质是蛋白质。酶按照其分 子结构可分为单体酶、寡聚酶和多酶体系（多酶复合体和多功能酶） 三大类。（了解） 二、酶的分类与命名： 1．酶的命名：主要有习惯命名法与系统命名法两种，但常用者为习惯 命名法。（了解） 2．酶的分类：国际酶学委员会（IEC）分类：① 氧化还原酶类：催化 氧化还原反应；②转移酶类：催化一个基团从某种化合物至另一种化 合物；③水解酶类：催化化合物的水解反应；④裂合酶类：催化从双 键上去掉一个基团或加上一个基团至双键上；⑤异构酶类：催化分子 内基团重排；⑥合成酶类：催化两分子化合物的缔合反应。 （掌握） 三、酶的分子组成： 酶分子可根据其化学组成的不同，可分为单纯酶和结合酶（全酶） 两类。结合酶则是由酶蛋白和辅助因子两部分构成，酶蛋白部分主要 与酶的底物特异性有关，辅助因子则与酶的催化活性有关。（了解） 与酶蛋白疏松结合并与酶的催化活性有关的耐热低分子有机化合物 称为辅酶。与酶蛋白牢固结合并与酶的催化活性有关的耐热低分子有 机化合物称为辅基。有些酶含有金属离子。（了解）
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八、酶促反应动力学： 1．底物浓度对反应速度的影响： （1）底物对酶促反应的饱和现象：由实验观察到，在酶浓度不 变时，不同的底物浓度与反应速度的关系为一矩形双曲线，即 当底物浓度较低时，反应速度的增加与底物浓度的增加成正比 （一级反应）；此后，随底物浓度的增加，反应速度的增加量 逐渐减少（混合级反应）；最后，当底物浓度增加到一定量时， 反应速度达到一最大值，不再随底物浓度的增加而增加（零级 反应）。(了解) （2）米氏方程： ν= Vmax[S]/(Km+[S])。其中，Vmax为最大 反应速度，Km为米氏常数。 （掌握）
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四、DNA的二级结构： DNA双螺旋 ，以B型为主 ，碱基互补原则 ， 稳定因素为氢键和碱基堆砌力 。（了解） 五、DNA的超螺旋结构： 进一步盘旋形成的超螺旋；真核生物形成 核小体 。（了解） 六、DNA的功能： 作为遗传信息的载体 。（了解）
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七、RNA的空间结构与功能： RNA通常以单链存在，但也可形成局部的双螺旋结构。 （了解） 1．mRNA的结构与功能：为蛋白质的合成提供模板，分子 中带有遗传密码 。mRNA是单链核酸，其在真核生物中的 初级产物称为HnRNA（5’为pppG/pppA）。真核成熟的 mRNA 有5’帽子和3’polyA尾。（掌握） 2．tRNA的结构与功能：活化并携带氨基酸，参与蛋白质合 成。二级结构为“三叶草”形。分五部分：①氨基酸臂： 3’-端带有-CCA-OH顺序，可与氨基酸结合；②DHU臂：二 氢尿嘧啶核苷，与氨基酰tRNA合成酶的结合有关；③反密 码臂：其反密码环中部的三个核苷酸可以用来识别mRNA 上相应的密码，其第一位（对应密码子的第三位）可以摆 动配对；④ TψC臂 ；⑤可变臂。（掌握） 3．rRNA的结构与功能：可与蛋白质一起构成核糖体，作为蛋 白质生物合成的场所。原核生物中的rRNA有三种：5S， 16S，23S。真核生物中的rRNA有四种：5S，5.8S，18S， 28S。 （了解）
生物化学总复习
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第一章 绪论（了解）
• 生物化学的的概念： 生物化学（biochemistry)是利用化学的原理 与方法去探讨生命的一门科学 。 • 生物化学的发展：1．叙述生物化学阶段； 2．动态生物化学阶段； 3．分子生物学阶段。 • 生物化学研究的主要方面： 1．生物体的物质 组成 ；2．物质代谢；3．细胞信号转导； 4．生物分子的结构与功能；5．遗传与繁殖
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第五章 核酸化学
一、核酸的化学组成：核苷酸=核苷（碱基+核糖or脱 氧核糖）+磷酸（掌握） 二、核酸的分类：DNA、RNA （了解） 三、核酸的一级结构：核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键连 接，DNA或RNA分子中脱氧核糖核苷酸或核糖核苷 酸的种类、数目、排列顺序及连接方式叫做核酸的 一级结构。（了解） DNA一级结构测定:双脱氧测序法（ddNTP）(掌握)
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2. 单糖的性质（掌握） （1）还原性。醛基/酮基，能被氧化成糖醛 酸或糖酸。费林定糖法 （2）氧化性。羰基也可被还原成羟基，形 成多羟基衍生物，如山梨醇等。 （3）酯化——糖酯 （4）甲基化与乙酰化 （5）过碘酸反应 （6）聚合——寡糖、多糖
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四、寡糖的结构和性质（了解） 1. 2-10个单糖通过糖苷键聚合。 2. 还原性的有无：保留半缩醛羟基的，如麦芽糖 和乳糖，有还原性；无游离半缩醛羟基的，如蔗 糖，没有还原性。 五、多糖的结构和性质（了解） 1. 淀粉：a-D-葡萄糖以a(1→4)糖苷键连接形成直 链；支链与主链之间以a(1→6)糖苷键连接。 2. 糖原：结构与淀粉相似 3. 纤维素： b-D-葡萄糖以b(1→4)糖苷键连接
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四、辅酶与辅基 大部分的辅酶与辅基衍生于维生素。辅酶与辅基的作用： ⑴ 运载氢原子或电子。⑵ 运载反应基团。（了解） 五、酶的活性中心： 酶分子上具有一定空间构象的部位，该部位化学基团集 中，直接参与将底物转变为产物的反应过程，这一部位就 称为酶的活性中心。 （掌握） 六、酶促反应的特点： 1．具有极高的催化效率；2．具有高度的底物特异性 ； 3. 活性可调节。（了解） 七、酶促反应的机制：中间复合物学说与诱导契合学说。 （了解）
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三、蛋白质的分子结构（掌握名词）： 1．一级结构：指多肽链中氨基酸的排列顺序， 其维系键是肽键。蛋白质的一级结构决定其空间 结构。 2．二级结构：指多肽链主链骨架盘绕折叠而形 成的构象，借氢键维系。 包括α-螺旋 、β-折叠 、 β-转角 、无规卷曲等 3. 三级结构：指多肽链所有原子的空间排布。其 维系键主要是非共价键（次级键）：氢键、疏水 键、范德华力、离子键等，也可涉及二硫键。 4．四级结构：指亚基之间的立体排布、接触部 位的布局等，其维系键为非共价键。亚基是指参 与构成蛋白质四级结构的而又具有独立三级结构 的多肽链。 5. 构象与构型的概念。
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六、蛋白质的分离、纯化 1．盐析与有机溶剂沉淀 （了解） 2．电泳:蛋白质分子在高于或低于其pI的溶液中带净的负或正电荷，因 此在电场中可以移动。迁移率的大小主要取决于蛋白质分子所带电荷 量以及分子大小。 （掌握） 3．透析（了解） 4．层析: 利用混合物中各组分理化性质的差异，在相互接触的两相 （固定相与流动相）之间的分布不同而进行分离。利用共价连接有特 异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或 其它分子的层析技术叫亲和层析（掌握） 5．超速离心（了解） 七、蛋白质的分析测定（了解） 1. 含量测定：凯氏定氮法、双缩脲法、福林酚法、紫外吸收法 2. 分子量测定：SDS-PAGE、凝胶过滤法 八、蛋白质测序的方法（掌握） 1.N-末端测定：Sanger法、PTH(Edman)法、DNS法、氨肽酶法 2.C-末端测定：肼解法、羧肽酶法 3.肽链水解：CNBr水解、酸水解、酶水解
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八、核酶（掌握）： 具有自身催化作用的RNA称为核酶（ribozyme） 九、核酸的一般理化性质： 1. 核酸具有酸性；粘度大；能吸收紫外光，最大吸收峰为 260nm。 （了解） 2. DNA的变性：在理化因素作用下，DNA双螺旋的两条互补链 松散而分开成为单链，从而导致DNA的理化性质及生物学性质 发生改变 。双链DNA彻底解链成单链DNA的温度范围的中点温 度叫做解链温度(Tm值) 。G、C含量越高，Tm值越高。 （掌握） 3. DNA的复性 ：将变性DNA经退火处理，使其重新形成双螺旋 结构的过程 。（掌握） 4. 分子杂交技术：两条来源不同的单链核酸（DNA或RNA）， 只要它们有大致相同的互补碱基顺序，以退火处理即可复性， 形成新的杂交双链。在核酸杂交分析过程中，常将已知顺序的核酸
