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Lab Manual

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Lab Manual

Version 1.05.30

By spombe 细菌病毒篇 ..................................................................................................................... 1

一．SDS裂解法大量提取细菌质粒 ................................................................................ 1

二．CACL2法制备大肠杆菌感受态细胞.......................................................................... 2

三．RBCL法制备超级感受态细胞 .................................................................................. 2

四．提取Λ噬菌体基因组DNA....................................................................................... 3

五．提取M13MP19噬菌体单链DNA ............................................................................. 4

六．大肠杆菌表达蛋白（小量） .................................................................................... 5

七．大肠杆菌表达蛋白（大量） .................................................................................... 6

酵母篇............................................................................................................................. 7

生化篇............................................................................................................................. 7

一．提取酵母基因组DNA.............................................................................................. 7

二．基因组DNA的酶切体系 ......................................................................................... 8

三．提取酵母染色质提取物............................................................................................ 8

四．CDS1的IP富集以检测磷酸化 ............................................................................... 10

五．体外磷酸化实验..................................................................................................... 11

六．DNA 双向琼脂糖电泳实验 .................................................................................... 12

遗传篇........................................................................................................................... 14

一．电转化 ................................................................................................................... 14

二. FACS分析 ............................................................................................................... 15

三. DAPI染色 ............................................................................................................... 15

四．DILUTION ASSAY ..................................................................................................... 16

多细胞真核生物篇 ........................................................................................................ 17

一．真核细胞S期同步化 ............................................................................................. 17

二．HELA细胞核的制备 .............................................................................................. 18

三．HELA细胞核及染色质提取物的制备..................................................................... 18

四．磷酸钙法转染真核细胞 ......................................................................................... 19

五．HELA细胞的RNAI转染 ....................................................................................... 20

六．提取HELA细胞的MTDNA ................................................................................... 21

七．昆虫细胞的培养及蛋白质的表达........................................................................... 22

（一）. 昆虫细胞的培养............................................................................................... 22

（二）. 病毒的获得，培养与转染 ................................................................................ 23

（三）. 蛋白的表达和回收 ........................................................................................... 24

其它 .............................................................................................................................. 26

一．蛋白胶的银染 ........................................................................................................ 26

二．WESTERN BLOT实验 ............................................................................................. 26 Lab Manual

Version 1.05.30

By spombe 三．电镜相关实验 ........................................................................................................ 28

（一）．TMP的紫外偶联 .............................................................................................. 28

（二）．BND富集单链DNA......................................................................................... 29

（三）．电镜展膜 .......................................................................................................... 30

（四）．SSDNA与单链结合蛋白的电镜展膜................................................................. 31

四. 纯化OLIGO DNA ....................................................................................................... 31

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lab详解

lab详解

L、A、B值

红、黄、蓝定义为色彩三原色

红、绿、蓝定义为色光三原色

<（L标-L测）平方+（A标-A测）平方+（B标-B测）平方>开根号＝Ｅ值

Lab 颜色标尺按如下标识：

L （亮度） 轴 表示黑白， 0 为黑， 100 为白

A （红绿）轴 正值为红，负值为绿， 0 为中性色

B （黄蓝）轴 正值为黄，负值为蓝， 0 为中性色

所有的颜色都可以通过任何一种 Lab 标尺被感知并测量。这些标尺也可以用来表示标样同试样的色差，并通常有 Δ为标识符。 如果Δ L为正，说明试样比标样浅，如果ΔL为负，说明试样比标样深。

如果Δ a 为正，说明试样比标样红（或者少绿），如果为负，说明试样绿（或者少红）

如果Δ b为正，说明试样比标样黄（或者少蓝），如果为负，说明试样蓝（或这少黄）

L，a，b 颜色差异还可以通过一个单独的色差符号ΔE来表示出来，ΔE被定义为样品的总色差，但不能表示出样品的色差的偏移方向，ΔE数值越大，说明色差越大，它通过下面的公式计算得来：△E*=[(△L*)2+(△a*)2+(△b*)2]1/2

从这可知并无定值

注意大多数情况下，数据是相对色差，而不是绝对色差。

有些公司只要求总色差小于2，有些要求比较严格的，就会要求到L a b值△ a△ b △c △l一般情况下均没有定值,但严格要求的话,应该是各有要求.

△ △E*=[(△L*)2+(△a*)2+(△b*)2]1/2

△ △c*=[(△a*)2+(△b*)2]1/2

△ 如果△E小于等于,建议△a△b△l均小于等于

△ 一般的,△E在时目视可以分辨.

CIE Lab和Lch的色彩空间图

CIE 色空间坐标图

CIE LAB

LAB色空间是基于一种颜色不能同时既是蓝又是黄这个理论而建立。所以，单一数值可用于描述红/绿色及黄/蓝色特徽。当一种颜色用CIE L*a*b*时，L* 表示明度值；a*表示红/绿及b*表示黄/蓝值。

Marvell NanoLab成员登录实验室手册说明书

Marvell NanoLab成员登录实验室手册说明书

Marvell NanoLab Member login Lab Manual Contents MercuryWeb Berkeley Microlab

Chapter 1.10

Miscellaneous Etchants Table of Contents

Aluminum Etchant

► Type A (Transene Co., Inc.)

► for VLSI

► Others Antimony Etchant Aqua Regia Bismuth Etchant Brass

Cadmium

► Sulfide Etchant (CdS)

► Telluride (CdTe) Chromium Etchant Chromium/Nichrome Etchant Cobalt Columbium Copper

Dislocation Etchants

► Sirtl

► Secco

► Wright-Jenkins

► ASTM

Gallium

► Arsenide

► Phosphide Germanium Etchant (and Germanium-Silicon) Gold Indium

► Antimonide

► Phosphide

► Tin Oxide (ITO) Iron Etchant Kovar Lead Lucite Magnesium Magnesium Fluoride Mercury Molybdenum (Moly) Monel Nichrome Nichrome Etchant Nickel

► Nickel Etchant

► Nickel Oxides Niobium P-Etchant Palladium Miscellaneous Etchants Chapter 1.10 Picein Wax Piranha Platinum Polish – Fairchild’s “Magic Polish” Polysilicon Etchant (see also Silicon Etchant) Preferential Etch (see Dislocation Etchant Wright Jenkins Etchant) Rhodium Ruthenium

3.3.2_VLAN的配置、检验与故障排除

3.3.2_VLAN的配置、检验与故障排除

3.3.2_VLAN的配置、检验与故障排除

CCNA Discovery 企业中的路由和交换简介

实验 3.3.2 VLAN 的配置、检验和故障排除

⽬标 观察默认交换机的 VLAN 配置和操作。 ? 在交换机上配置静态 VLAN 。 ? 检查 VLAN 的配置和操作。 ?

修改现有的 VLAN 配置。

背景／准备⼯作

本实验的主要内容是使⽤Cisco IOS 命令为Cisco 2960 交换机（或同类交换机）执⾏基本的VLAN 配置。

其说明信息同样适⽤于其它交换机，但命令语法可能会有所差异。根据交换机型号，接⼝标识可能有所不同。

例如，模块化交换机有多个插槽；因此快速以太⽹端⼝可能是FastEthernet 0/1 或FastEthernet 1/1，具体

取决于插槽和端⼝。可以使⽤任何路由器。

本实验需要以下资源：⼀台Cisco 2960 交换机或同类交换机

⼀台Cisco 1841 路由器或同类路由器

两台基于Windows 的计算机，其中装有终端仿真程序

⾄少⼀根RJ-45 转DB-9 连接器控制台电缆，⽤以配置交换机和路由器

三根直通以太⽹电缆，⽤以连接计算机和Switch 1

注意：确保已经擦除路由器和所有交换机的启动配置。有关详细信息，请参见Academy Connection 中Tools （⼯具）部分的Lab Manual（实验⼿册）。

注意：SDM 路由器－如果在SDM 路由器中擦除了启动配置，那么在重新启动该路由器后SDM 不会默认启动。

⽽必须使⽤IOS 命令创建基本路由器配置。必要时与教师联系。

步骤1：连接设备a. ⽤直通电缆将路由器的Fa0/0 接⼝连接到Switch 1 的Fa0/8 接⼝。

b. ⽤直通电缆将Host 1a 的以太⽹接⼝连接到Switch 1 的Fa0/2 接⼝。

c. ⽤直通电缆将Host 1b 的以太⽹接⼝连接到Switch 1 的Fa0/3 接⼝。

d. ⽤控制台电缆连接计算机，以配置路由器和交换机。

电子电路芯片设计 真值表Truth Table

电子电路芯片设计 真值表Truth Table

Please see the attached “For Your Eyes Only” document describing the objectives of this

lab before proceeding.

Part I: Truth Table

Based on the mission statement, draw a truth table. The table should have three inputs (W

= West, C = Case, S = Sprague) and three outputs (L = LAX, R = Route 66, P = Pitzer

Field).

Get your truth table checked off before proceeding.

Part II: Schematics

Using your schematics from part 1, draw a circuit that solves the problem. Use three of

your switches as inputs and three LEDs as outputs. Then label each gate with the number

of the chip on which it is located and the pin numbers of each input and output. You may

find the 7411 3-input AND gates and 7404 NOT gates especially useful.

Digital Electronics

Chip Design&

Lab Manual II:Invasion of the Caltech Barbarians© 1999 David HarrisLab Manual II: 2