蕨类植物组织培养研究进展

蕨类调查研究报告一、选题背景：蕨类（fern）是泥盆纪阶段的低地生长发育木生绿色植物的统称。

他们必须水份做为再造循环系统的一部分，且此后逐渐衍化出各种各样不一样的类型，在今日仍是一种活力很强的绿色植物。

蕨类植物门是植物界中的一门，约有两万个上下的种群，归属于输导组织绿色植物。

蕨类（羊齿类绿色植物）相比较初始的石松门多了真真正正的叶片，但相比较演变的种子植物（裸子植物和高等植物）则缺乏了种籽。

和全部的维管植物一样，蕨类拥有一个世代交替的生命期，由双套的孢子体和单做一套有点贵的配子体二者循环系统著。

和裸子植物与高等植物不一样的，配子体是一分散的人体器官。

就一般的印像来讲，蕨类是生长发育在昏暗湿冷的林地类角落，但实际上蕨类能够生长发育的栖地范畴要比这空出很多，亦有定居在高原地区的山区地带、干躁的荒漠岩地、水中或田野等地域的种群。

蕨类一般觉得大多数生长发育在特殊的边缘地带，一般是在自然环境限定了种子植物强盛的地区。

但一些蕨类则是这世界上最讨厌的野草，包含生长发育在美国堡垒的蕨属或生长发育在地球赤道周边湖水的满江红属，两者都产生了普遍且具攻击性的行业。

蕨类的栖地关键有四种特殊的种类：湿暗的山林、岩地的缝隙，尤其是能够遮挡所有太阳光的地区、泥塘和沼泽地等酸碱性湿地公园、及其地球赤道的树枝，在其中很多种群为附生植物。

很多蕨类和具备菌根的食用菌拥有关连性。

很多蕨类只生长发育在特殊的ph酸碱度下，如海金沙只生长发育在湿冷且强酸碱性的土地资源上，而球茎冷蕨则只生长发育在玄武岩上。

因而，掌握这种经常可以看到的“野草”，能够使我们知道蕨类在人们文化生活中的使用价值及其在大自然中的实际意义。

二、活动目标本探究性学习主题活动致力于掌握科学研究蕨类的种类、环境要素、繁殖方式及蕨类在生态体系的功效和经济价值。

促进大家对这类绿色植物有一定的掌握，使大家能得到一定的绿色生态专业知识，塑造大家鉴别蕨类的工作能力。

三、主题活动执行的实际全过程：（全部全过程详细介绍、实验步骤、基本原理、結果、剖析）1、机构开展网上查看材料,掌握蕨类的种类、生长发育自然环境、繁殖方式、特点及实际意义；另外制订科学研究的方位和和预估做到的实际效果。

Ａ ｂｓｔ ａｃ ｒ ｔ： Ｔｈ ａ ａ ｃ ｓ ｎ ｉｓ ｅ ｕ ｔ ｒ ｏｆ ｆ ｒ ａ ｅ ｅ ｉ ｗｅ ｉ ｔ ｉ Ｐ ｐ ｒ ｈ ｅ ｅ ｄｖ ｎ ｅ ｉ ｔｓ ｕ ｃ ｌｕ ｅ ｅ ｎｓ ｒ ｒ ｖ ｅ ｄ ｎ ｈ ｓ ａ ｅ ．Ｔ
ｔ ｃ ｎｉ ｅ ｎ ｖ ｔｏ ｐ ｏ ｇａｉ ｎ ａ ｅ ｄ ｓ ｒｂｅ ，ｉ ｌ ｉ ｐｏ ｅ ｇ ｒ ｎａ ｏ ｄ ｃｏｎ ｌ ｅ ｈ ｑｕ ｓｏｆｉ ｉｒ ｒ ｐａ ｔｏ ｅ ｃ ｒ ｉ ｄ ｎｃｕｄｎｇ ｓ ｒ ｅ ｍｉ ｔ ｎ ａ ｌ ａ ｉ ｎ ｐ ｏ ｇ ｔｏ ｆｏｍ ｐｏ ｏ ｈｙ ｅ ．Ｔｈ ｅｆ ｃ ｓ ｆ ｃ ｔ ａ ｍｅ ｕ ，ｃ ｔ ａ ｍｅ ｈ ｄ ｎ ｄ ｒ ｐａ ａｉ ｎ ｒ ｓ ｒ ｐ ｔｓ ｅ ｆｅ ｔ ｏ ｕｌ ｕｒ ｌ ｄｉ ｍ ｕｌ ｕｒ ｌ ｔ ｏ ａ ｃ ｌｕｒ ｌ ｏ ｉｉ ｎ ｎ ｉｓ ｕ ｃ ｌｕｒ ｏ ｆ ｒ Ｓ ｒ ｅ ｕ ｕ ｔ ａ ｃ ｎｄ ｔｏ ｏ ｔ ｓ ｅ ｕ ｔ ｅ ｆ ｅ ｎ ａ ｓ ｍｍ ａ ｉ ｅ ｒｚ ｄ．Ｔｈ ｉ ｕ ｅ ｎ ａ ｄ ｅ ｎｄ ｃ ｍｅ ｔ ｎ ｒ ｇ ｌ ｔｏ ｆａ ｔｒｎ ｎｅ ａ ｏ ｎ ｔｓ ｕ ｕｌｕ ｅｏｆｆ ｒ ｓａ ｅ ａ ｓ ｒ ｕｃ ｄ． ｅ ｕ ａ ｉ ｎ ｏ ｌｅ ｇ ｇｅ ｒ ｔ ｎｓｉ ｉｓ ｅ ｃ ｔ ｒ ｎ ｌｏ ｉ ｏｄ ｅ ｉ ｉ ｅ ｒ ｎｔ
Ａ ｅ ｉｗ ｔ ｙ ｉ ｔｓ ｕｅｃ ｔ ｅｏ ｒ ｒ ｖ ｅ ｏｆｓ ｕｄ ｎ ｉｓ ｕｌｕｒ ｆｆ ｎｓ ｅ
ＺＥ ＮＧ ａ Ｚ Ｘｉ ， ＨＵＡＮＧ ａ —ｈ ｎ Ｎ ｎｓｅ ｇ
（ ｌ ｇ ｆＡｇ ｏ ｏ ，Ｓ ｕｈ Ｃｏｌ ｅ ｏ ｒ ｎ ｍｙ ｏ ｔ Ｃｈｎ ｉ ｅｓｔ ｆ Ｔ ｏ ｉａ ｒｃ ｌ ｒ，Ｄａ ｚ ｏ ７１ ３ ，Ｈａｎ ｎ Ｃｈ ｎ ） ｅ ｉ ａ Ｕｎ ｖ ｒ ｉ ｏ ｒ ｐ ｃ ｌＡｇｉｕ ｔ ｅ ｙ ｕ ｎｈｕ５ ７７ ｉ ａ ｉ ａ

孢子萌发培养基分别 以 ＭＳ １ ２ 、／ Ｍ８为基本 、／ Ｍｓ １４ 培养基 ； 球状体增殖 、 丛生苗诱导 、 生根培养 以 Ｍ 为基 Ｓ
本 培养 基 ， 附加 不 同浓度 的 ６Ｂ Ｉ Ａ、 Ａ等 激 素。 － Ａ、Ａ ＮＡ 以上基本 培养基 均添加 蔗糖 （０ｇ Ｌ 和琼脂 （ ／ ） ３ ／ ） ７ｇ Ｌ ， ｐ ． 。培养温度 （５Ｉ ） 光照时 间为 １ ／ ， Ｈ ５８ ２ －１ ℃， － ４ｈ ｄ 光强
８ ０ １５ ０ ｌ ０ ￣ ０ ｘ。
回羽状深裂 ， 先端渐 尖 ， 叶轴 、 沿 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ轴与 中脉疏生 短毛 ； 中部羽片长约 ９ｃ 宽 １ ． ｍ， ｍ， ～１５ｃ 下部 ３ ～４对羽 片略 缩短 ； 片全缘或仅顶部有数个小 圆钝齿 。孢子囊群 长 裂 圆形 ， 囊群盖新月形。分 布于河北 、 河南 、 陕西等省 。株
摘
要： 以野生观 赏植物 河北峨眉蕨 的孢 子为材料 ， 建立组培快繁体 系。结果表 明： 河北峨
眉蕨孢子萌发的 最适培 养基 为１２ ， ／ Ｍｓ 原叶体 增殖最 适培养基 为 ＭＳ － Ａ ０ ２ｍ ／ ＋Ｎ Ａ ＋６Ｂ ． ｇ Ｌ Ａ ｏ２ｍ ／ ， ． ｇ Ｌ 孢子体诱导最适培养基为 ＋ｌ Ａ １ ￣ Ｌ 最适生根培养基为 ＭＳ Ｂ １ ｍｄ 。 Ａ ． ｒ ， ０ｒ ＋ＩＡ ｌ ｒＬ ０
关键词 ： 河北峨眉蕨 ； 组织培养 ； 孢子繁殖 中图分类号 ： ８． ５ 文献标识码 ： 文章编号 ： ０ －００ （００ １—０７ —０ Ｓ６２３ Ａ ｉ １ ０９２ １ ）０ ｌ８ ３ ０
河 北 蛾 眉 蕨 （ ｕ ａｈ ｒ ｍ ｖｇｔ ｓ（ ｉ ｇ ） ｈ ｇ Ｌ ｎ ｔｙｉ ｅｅ ｕ Ｋ ｔ ．Ｃ ｉ ） ｕ ｉ ａ ｎ

理 论广 角
ｌ ■
Ｃａｉｅｄｃｌ ｉ ｈ ｅ ｈｏＲｅ ｉｓｎａＴｎｇｅｗ ｎｃｃｎｅｏｙｖ
蕨类植物组 织培 养研究进展
廖文海
（ 山市林业 局 江 浙 江 ３４ ０ ） ２ １０
中图分类 号 ：９９ ３ Ｑ ４ ．６
文 献标 识码 ： Ａ
文章编 号 ：０９ ９４ （０ ０ ２—２ ４０ １０— １Ｘ ２ １） １０９ —２
用【 。
自然 条件 下， 类 植物 主要 通过 孢 子进 行繁 衍， 蕨 或通 过根 、根 状 茎 、叶 等部 位产 生无 性 芽孢和 顶 端分 生组 织产 生新 植株 。然而 ， 自然 繁殖 的蕨 类 植物 远远 不能满 足人类 的需 求， 一些蕨类 植物 也 因生境 的恶化 而 日趋 减少 ， 组 织培 养 作 为一种 有 效 的快 速繁 殖 手段运 用 于 蕨类 植 物生 产 中 。蕨 类植 物 组 织培 养 可 分为 以孢 子 为外 植 体和 以孢子 体 （ 状 茎 、茎 尖 、幼 叶， 根 鳞片 ）６ ［ 为外 植 体两 种途 径 ， 本文 就 蕨类 植 物 组织 培养 作 一概 述 １以孢子 为外 檀 体 蕨 类 植物 中 已有许 多采 用孢 子 组织 培 养获 得 成 功的 报道 ［ ～ 。蕨类 ＝ ！ 、 植物 的孢 子采集 要 掌握好 时期 。大多数 蕨类 的孢 子成 熟 在夏秋 季 节， 成熟 的 标志 是 用 肉眼 判 断叶 上 的孢 子 囊 丰满 鼓 胀 、颜 色近 褐 色 ， 子 成熟 、孢子 孢 囊即 将脱 落 而孢 子 未进 落 出来 时为 最佳 采 收 期 。采 用孢 子 培养 方法 既不破 坏资源 ， 又利 于其 大量繁 殖， 为保护 种质 资源和 大规模 栽培 利用提 供 了一条可 能 的途 径 【、 ８ ９。 １ １ 孢子体 发生 及受 精过程 ． 曾汉 元 、张开梅 等研 究 了对 ２ Ｏ余种蕨 类植 物进 行 了孢 子萌发 和 原叶体 发育 ｌ、 ： 】 “。曹建 国等 利用 扫描 电镜 技术 和 树脂 切片 技术 对蕨 类植 物桂 皮紫 ０ 萁 （ｓ ｕ ｄ ｉｎ ｍ ｍ ａ ｖｔ ａ ｉ ｔ ｃ） Ｏ ｍｎ ａ ｃｎ ａ ｏ ｅ ａ ． Ｓａ ｉａ 的颈卵 器和 精子 器 的形态 和发育 进 行 了 细致 的研 究 。颈 卵 器 发生 于 雌配 子 体 的腹 面 ， 颈部 由 ４列壁 细胞 构 成， ～７ ６ 个细 胞高， 内部含 有颈沟 细 胞、腹沟细 胞 和卵 细胞， 细胞在 整个 发 卵 育 过程 中， 体和 囊泡最 为显 著， 造粉 颈卵器 内的卵细 胞成熟 时产 生卵膜 和分离 腔 。精细 胞 自精 子器 中溢 出时呈 圆 球形， 外被 薄膜 ， 时停 留在 精子 器 的顶 暂 端， 不能游 动， １ 约 分钟 后， 薄膜 溶解 ， 子先做 几秒 钟 的快速 旋转 运动 而后 迅 精 速 游动 。游动 精子 借 助原 叶体 表面 的 自由水 游 进颈 卵器 ， 完成 受精 作用 “ 。 ｚ １２ 孢子 萌发 的条 件 ． 影响孢 子萌 发 的因素 有很 多 ： 又分 为环 境 因素和 植物激 素 。环境 因 素有 光 照 、 温 度 、 湿 度 ：植物 激 素 有 赤霉 素，乙烯 、 茉莉 酸 、脱 落 酸 、 重 金 属 离 子 、酸性 气 体 及 酸 雾 、盐 类 、蔗 糖 和 生 长 辅 助物 质 等 ［ Ｉ ３］。 孢 子萌 发常用 １２ Ｓ ／ Ｍ 不添 加激 素 的培养 基 。孢子接 种 后一 般于 ２ ～４周 萌 发， 但蕨 类 植物 中有 些种 类 如狼 尾 巴蕨 （ａ ａ ｉ ｂ ｌ ａ ａ 、鹿 角 蕨 Ｄｙ¨ ａ Ｕｌｔ） （ｌｔ ｃｒ ｕ ｉｕｃ ｔ ｍ 的孢子 具有休 眠特 性， 使从孢 子萌发 到形 成原 Ｐ ａ ｙ ｅ ｉｍｂ ｆｒ ａ ｕ ） 致 叶体 的阶 段延 长， 有些 种类 萌发 时间长达 １ 年 。在 蕨类 孢子 萌发 中， ～２ ８ 也 可采 用 单 一基 质 进行 培 养， 蛭 石 、珍 珠岩 、河沙 。但相 较 于 以过 筛 园土 如 和 过筛 腐殖 土 （ 积 比 １： 的培 养 基 质而 言 ， 对 天南 星 蕨 （ ｒ ｏ 体 ２） 在 Ｍｉ ｏｓ Ｃ ｒｕｆｒｕ ｅ） ｉ ｍ ｏ ｔ ｎ ｉ 孢子 繁殖 的试 验中 ４ １。 ２以孢 予体 为 外檀 体 ’ 除利 用 孢子 作 为外植 体 外， 在蕨 类植 物 中还 利用 孢 子体 通过 愈 伤组 织 、 不定芽 、Ｇ Ｂ（ Ｇ 绿色 小球 ｇ ｅ ｎ ｇ ｏ ｕ Ｒ ｏ ｙ 等方 式进 行试 管 增殖 ， ｒ ｅ ｌ ｂ ｌｒ ｂ ｄ ） 具 有 快速 、取 材 不 受季 节 限制 等 优 点 。 ２ １ 以根 、根 状茎 为 外植 体 ． 对荚 果蕨 （ａ ｔｕ ｃａｓｒ ｔｉ ｐｅ ｉ） ￣ ｔｅ ａ ｉ ｔｕ ｈｏ ｔｒ Ｓ根状 茎作为外 殖体 的培养发现 ， 卜 ２ ｍ Ｌ １ Ｔ 芽生 长增 殖效 果佳 ， Ｎ Ａ对 芽的 生长 增殖 无促 进作 用 。 ｇ・ 一 Ｋ 对 而 Ａ 在 几种 蕨类植 物组 培 中也发 现， 佳 的培养基 是用 １ ２Ｓ培养 基 。最佳 激素 最 ／Ｍ 组 合为 Ｋ Ｔ和 Ｎ Ａ Ｋ Ａ ， Ｔ范围 ｌ ｇ・ — ， Ａ ～２ ｍ Ｌ ｌ Ｎ Ａ范 围 ０ １ ． ｇ・ 一 ６ ． ～１ ０ ｍ Ｌ 。 楔 叶铁线 蕨 的培养 基用 １ ２ Ｓ加活性 炭， 后能 见到 由孢 子萌 发而 来 的松软 ／Ｍ 之 的丝状 体 ： 再过 １一 ５ ｄ 形成 类似 于兰 花原 球 茎的绿 色 的小球 。根 的发 Ｏ ２ ， 生 可被 ２ ４ Ｄ Ａ 等 促进 ， 并非 必需 。根 的发 生在 基本 培养 基 中即可 完 ， － 、Ｎ Ａ 但 成 ， Ｂ 对 于蕨 类 植 物 组 织 培养 的 作 用 也 非 常重 要 ， 可 以促 进蜈 蚣 草 但 Ａ 它 （ｔｒ ｓ ｖ ｔ ａａ 、 Ｐ ｅ ｉ ｉ ｔ ｔ ） 二叉 鹿角 蕨 （ ｌ ｔ ｃ ｒ ｕ ｉ ｕ ｃ ｔ ｍ 茎端 叶片 形成 Ｐ ａ ｙ ｅ ｉｍ ｂ ｆｒ ａ ｕ ） 不 定芽 。而在 鸟巢 蕨 （ｓ ｌ ｎ ｕ ｉｕ ） 生根培 养 基 中发 现 ， Ｂ Ａｐ ｅｉｍｎ ｄｓ的 ＩＡ和 Ｎ Ａ Ａ 对 生根 有 效 果。 此外 ， 它还 可 以改变 试 管苗 的再 生途 径 。在 鹿 角蕨 无 根 苗 生根 培养 中， 随着 Ｂ 含量 的减 少直至 不加 Ｂ ， 株根 数不 断增加 ， 以在 鹿 角 Ａ Ａ每 所 蕨 生根过 程 中不 加 入 Ｂ Ａ效果 最 佳 ２。 ２ ２ 以叶 、 叶柄 为 外 植体 ． 选 取 叶、 叶柄作 为外 殖 体与 用茎 尖相 比， 是可 有更 多 的实 验材 料 ： 一 二

蕨类研究报告一、引言蕨类是一类早期陆地植物，被认为是地球上最早出现的种子植物。

它们分布广泛，生长在湿润的环境中，包括丛林、沼泽和山间溪流。

蕨类植物具有独特的叶子形态和生物学特征，因此被广泛研究。

二、分类学蕨类植物属于植物界蕨类门蕨纲，目前已知的蕨类植物约有1.1万种。

根据叶子类型的不同，它们被分为净叶蕨和裸子蕨两个亚纲。

净叶蕨的叶子是密集排列的，呈羽状复叶，具有叶柄和叶基。

常见的净叶蕨有毛蕨、离蕨和真蕨等。

裸子蕨的叶子相对较短，没有叶柄和叶基。

常见的裸子蕨有乌毛蕨、薄荷齿蕨等。

三、形态特征蕨类植物的叶子通常呈羽状复叶，由主轴和多个小叶片组成。

叶片上生有真正的叶子，负责光合作用。

蕨类植物没有真正的根系，而是通过根状茎吸收水分和养分。

它们繁殖方式多样，包括孢子和无性繁殖。

四、生态功能蕨类植物在生态系统中具有重要的功能。

它们能够保护土壤，并减少水土流失。

同时，它们还为动物提供栖息地和食物。

一些蕨类植物还具有药用价值，被用于民间草药治疗。

五、蕨类研究进展蕨类植物的研究涉及分类学、解剖学、生态学、生理学、分子生物学等多个方面。

近年来，随着高通量测序技术的发展，研究者对蕨类植物的基因组学、转录组学和表观遗传学等方面进行了深入研究。

同时，一些研究还涉及蕨类植物的逆境适应机制、繁殖系统和物种形成等问题。

六、结论蕨类植物作为早期陆地植物的代表，具有重要的生态功能和研究价值。

随着科技的进步，对蕨类植物的研究将会更加深入，为我们理解植物的进化和生态适应提供重要的线索和参考。

2009年第4期云南农业科技Yunnan Nongye Keji曾道光1，李春华2（1.永胜县农业局，云南永胜674200；2.丽江市农业科学研究所，云南丽江674100）凤尾蕨组培快繁技术研究摘要：对凤尾蕨进行外植体诱导、继代培养和生根培养试验，结果表明，最适的原叶体诱导培养基为M S+6-BA0.5mg/L+NAA 0.1mg/L ，孢子体诱导培养基和孢子体增殖培养基均为M S+NAA 2.0mg/L ，生根培养基为1/2M S ，培养温度23℃±2℃，光照强度1000lux 左右，利用该技术可实现凤尾蕨组培苗规模化生产。

关键词：凤尾蕨；组培；快繁许多蕨类植物具有较高的观赏价值，他们虽然没有鲜艳夺目的花和果，然而它那千姿百态的叶形、叶姿和青翠碧绿的色彩，使人赏心悦目。

随着室内观赏植物的发展，人们对蕨类植物的需求越来越大，传统的蕨类植物繁殖方法是分株繁殖和孢子繁殖，但分株繁殖数量少，不能在短期内获得大量小苗；孢子繁殖由于自然环境中孢子成苗率很低，影响了繁殖速度。

因此进行蕨类植物离体快繁是解决上述问题的有效途径。

本文对蕨类植物中倍受消费者喜爱的凤尾蕨进行了组培快繁试验研究，得到了一套行之有效的工厂化组培苗生产技术。

1材料与方法1.1材料8月份从盆栽植株上采下带成熟孢子的叶片作为外植体进行诱导。

1.2试验方法1.2.1原叶体诱导培养1.2.1.1外植体消毒外植体采用常规方法消毒后，剪成0.5cm 2大小带孢子的叶片，每瓶接种1块，接种时叶片正面接触培养基，孢子朝上。

1.2.1.2原叶体诱导培养设置3个培养基配方，外加蔗糖30g/L+卡拉胶4g/L 。

M1：M S+3g/L 活性炭M2：1/2MS+3g/L 活性炭M3：MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L 1.2.2孢子体诱导培养设置3个培养基配方，外加蔗糖30g/L+卡拉胶4g/L 。

M4：MS+NAA 2.0mg/L M 5：MS+NAA 1.0mg/L M 6：MS+NAA 0.5mg/L 1.2.3孢子体增殖培养设置4个培养基配方，外加蔗糖30g/L+卡拉胶4g/L 。

3
在我国各地的分布 黔 粤 桂 琼 湘 赣 浙 闽
+ + + + + + + + + + + + + 3 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 26 11 9 10 8 9 3 4 5 9 3 3 2 7 1 11 3 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 3 + + + + + + + + + + +

简述蕨类植物孢子萌发培养基质的研究进展论文关键词:蕨类植物培养基质孢子萌发孢子体论文摘要:作者概述了在蕨类孢子萌发研究中所使用的培养基质，包括了以自然土壤为主的培养基质和以营养液为主的液体或琼脂培养基。

并简略分析了影响蕨类孢子萌发的其它因素。

1前言蕨类植物是古老的维管植物，也是植物界系统演化中一个独特的自然类群，在其生活史中明显地存在可独立生活的配子体和孢子体。

蕨类植物与人类生活有着比较重要的关系，体现在其食用性、药用性及工业上的某些特殊用途等方面[1](如石松属的孢子含油达40%，可在冶金工业的模型铸造中作为优良的分型剂，也可用作照明工业的闪光剂)。

经典的蕨类植物研究着重蕨类植物的系统分类及孢子体形态的描述。

近年来，也出现了许多关于蕨类植物配子体发育的研究，为蕨类植物的大量繁殖和开发利用提供了理论基础。

2常见的培养基质在蕨类孢子繁殖的研究中，常采用以土壤为主的培养基质和以营养配方为主的液体或琼脂培养基质。

2.1以土壤为主的培养基质(1)过细筛的草炭土与细沙混合的培养基质，培养乌毛蕨[2](Blechnum orientale)、剑叶凤毛蕨[3](Pterisensiformis)及三角鳞毛蕨[4](pryoteris subtriangularis)的孢子，保持盆土湿润，约1周左右萌发。

(2)在蕨类孢子萌发中，也可采用单一基质进行培养，如蛭石、珍珠岩、河沙。

但相较于以过筛园土和过筛腐殖土(体积比1:2)的培养基质而言，在对天南星蕨(M i c r o s o r i u mfortunei(Moore)Ching)孢子繁殖的试验中[5]，以上各种基质对天南星蕨孢子萌发基本无差异。

但从原叶体生长发育来看，园土和腐殖土的混合基质相对较好，在河沙上原叶体部分出现了软腐或黄化现象，以上各种基质播种的孢子均能正常产生孢子体。

(3)在以蕨(Pteridium aquilinum varLatiusculum)孢子为繁殖材料的试验中[6]，采用自配土(泥炭:粉碎田园土:洗净河沙体积比1.5:1.5:5)和自然生长土壤分别作培养基质，第一株孢子体出现时间分别是前者90天，后者为80天，配子体发育成孢子体比率为10%。

ｇＬ ［ ／ 附加 不 同 浓 度 的 ＩＡ （ ． 、０２ ． 、０４ Ｂ ０ １ ． 、０３ ．
ｍ ／ ）及 Ａ ． Ｌ 的 基本 培养 基 中 培养 。培 ｇＬ Ｃ ０３ ］
１２ １ 外植 体 处 理 及 诱 导 培 养 ． ．
嫩 叶用 中性 洗 衣
粉浸 泡 １ ｉ， 自来 水 冲洗 ２ ｉ，在 超净 工 作 台 ５ｍｎ ０ｍｎ 无 菌条 件下 ，用 ７ ％酒 精 浸 泡 ３ ，无 菌 水 冲洗 ３ ５ ０ｓ
养温 度为 （５± ）Ｃ，光 照强度 为 ２０ ３０ ｘ ２ ２ｏ ５０— ５０Ｌ ， 光照 时间为 １ ／ 。试验 采用 单 因子试 验 设计 ，每 ０ｈ ｄ
次 ， ． ％ Ｈ Ｃ 消毒 ６ ８ｍｎ ０１ ｇ１ — ｉ，再用无菌水 冲洗 ５
次 ，无 菌 滤纸 吸干 外植 体 表 面 的水 分 ，切 成０５ｃ ． ｍ
色浓 绿 ；最佳 移栽基 质 为 ３ ． ％锯 木 屑 ＋ ３ ３ 泥炭土 ＋ ３ ３ 红 心土 ，成 活率 为 ８ ． ７ 。 ３３ ３．％ ３ ．％ ２ ６％ 关 键 词 ：鸟巢蕨 ；嫩 叶 ；组 织培 养 ；移植 鸟 巢蕨 又名 山苏 花 、雀 巢 蕨 、雀巢 养 齿 ，为 铁
见 方 的小 块 ，正 面 向上 接入 Ｍ Ｓ＋蔗 糖 ３ ／ Ｏｇ Ｌ基 本
苗基质 ，即 １０ 锯 木 屑 、１ ０ 泥 炭 土 、１ ０ 红 ０％ ０％ ０％
１１ 材料 ．
ｍ ／ ） 及 Ａ ／ 。培 养 温 度 为 （５±２ ℃ ，光 ｇＬ Ｃ １ｇＬ ２ ）
照 强度为 ２ ０ ５ ０～３０ ｘ ５ ０ Ｌ ，光 照 时 问 为 １ ／ 。试 ０ｈ ｄ
验采 用二 因 素 三 水 平 试 验 设 计 ，每 处 理 ５ ０瓶 ，每 瓶接 ｌ 芽 。每代 培 养 ３ ，连 续 增 殖 ３代 ，统 ０个 ５ｄ 计增 殖倍 率 。

ＭＳ ６ Ｂ ｍｇＬ ＧＡ ３ ／ Ａ ）共 ９个 组 合 的培 养基 类 ＋ 一 Ａ ３ ／ ＋ ｍｇＬ（ 。
型， 每个 组合 重复 ３次 。 培养基 共 １０ ０ ０ ｍＬ， 用塑 料三 角瓶 分 装 ， 瓶 装 ３ ｍＬ左 右 ， 每 ０ 共装 ２ ７瓶 ， 每瓶 接 种 ２个 芽 ， 接 共 ５ ４个 芽 。
表 １ 不 同 类 型 的 Ｍ Ｓ培 养 基 对 芽 生 长 的 影 响 （ ）
本试 验 的材 料 由河 南农 业 职 业学 院 花 圃 提供 ， 生长 取
期 的龙爪蕨 根状 茎 上的芽 为组 织培 养材 料 。
１ ． 试 验 处 理 ２
生长 期 龙爪 蕨 根 状 茎 芽 的诱 导培 养基 ： ＭＳ ６ Ｂ ① ＋一Ａ
把 生长 期 的龙 爪蕨 芽 接种 在 ９种 不 同浓度 的 ＭＳ培 养
基 上 ， 培 养 室 内培 养 ３ 在 ｄ开 始观 察 ． 开始 萌 动 缓慢 生长 芽 无 明显 差别 ，ｄ以后 ， ９种 变化 ， 和 Ａ 培 养基 上 的组 培芽 生长 Ａｌ
选取 的材 料 用 自来 水 冲 洗 ２ ｈ 用 洗 衣 粉 浸泡 １ ｒｉ ， ４。 ０ ｎ ａ 然后 用 自来 水 冲 洗干 净 。 在超 净 工作 台 上 用 ７ ％的酒 精 灭 ０ 菌 １ｓ 右 ， ０左 再用 无 菌水冲 洗 ５ ６遍 ， 后 用 ０１ － 然 ．％的升汞 灭 菌， 分别 灭菌 ６ ｎ和 ８ ｉ 用 无菌水 冲洗 ６ ７遍 。 用无菌 ｍｉ ａ ｒ ｎ． － 再
１ ． 试 验 方 法 ３
２２ 消毒 时间不 同对 芽 的影 响 ． 分别 以 ６ ｎ ８ ｎ消 毒 时 间 ， 其 接 种 数 、 染数 、 ｍｉ、ｍｉ 对 污 死 亡数 、 染 率 、 亡率 进行 比较 （ 表 ２ 。 污 死 见 ）

Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｍｉｃｒｏｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｏｆ Ｎｅｐｈｒｏｌｅｐｉｓ
ｅｘａｌｔａｔａ‘Ｂｏｓｔｏｎｉｅｎｓｉｓ’
Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｑ砬强咖５１０６，０） ＬＩＡＯ Ｆｅｉ··ｘｉｏｎｇ ＷＡＮＧ Ｄａｉ··ｒｏｎｇ ＨＵＡＮＧ Ｏｕｎ·－ｈｕｉ ＺＨＡＮＧ Ｍｅｎｇ－ｊｉｎ
２．２激素对培养的效应和再生途径 诱导的增殖培养物在ＭＳ和附加６－ＢＡ或ＫＴ的培
养基上，培养２—３代后，逐渐形成褐色增殖体，不 形成或产生极少小的绿色芽。在这种情况下增殖变缓 慢，每代增殖量１—２倍。提高细胞分裂素也不明显 促进增殖，而且会加强增殖体的褐化，增殖体变紧 密，分泌褐色物质多，增长慢。将褐色增殖体转入无 机盐减量、不含激素的培养基上后，褐变程度减轻， 增殖量较大，经２—３代培养后，逐渐恢复生长和增 殖活力，增殖体色变淡，疏松并出现金黄色绒毛状 物，逐代出现绿色叶体或绿球体（ｇｒｅｅｎ ｇｌｏｂｕｌａｒ ｂｏｄｉｅｓ，ＧＧＢ）的组织块增多，最后形成大量绿色的 叶丛，而褐色类愈伤组织和根状茎比例明显下降，这 种增殖体繁殖量非常大（图３）。由此可见盐分过量 的ＭＳ培养基中盐分浓度过高极不利于波士顿蕨绿球 体和绿苗的生长和增殖，通过诱导后的增殖体在不含 激素１／２或者１／３ＭＳ便能生长出绿苗并大量繁殖。
参考文献
１．Ｌｏｅｓｅｈｅｒ，Ｗ．Ｈ ｅｔ ａｌ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｏｆ Ｎｅｐｈｒｏｌｅｐｉｓ ｅｘａｌｔａｔａｃｖ．Ｂｏｓｔｏｎｉｅｎｓｉｓ ｒｕｎｎｅｒ ｔｉｓｓｕｅ，Ｐｈｓｉ０１．Ｐｌａｎｔ，１９７９， ４７：２５０—２５４
２．Ｈｉｇｕｃｈｉ．Ｈ ｅｔ ａｌ Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｎｅｐｈｒｏｌｅｐｉｓ ｃｏｒｄｉ—

生蕨 已有灭绝 的危险 。面临这种现状 ， 我们 开展了 。 一 些试验研究 ， 试 图通 过组织培养和微繁殖保 护 ． 以提高它 的繁殖 能力 ． 增加物种 的丰 富度 ． 达到保护和合理 利用的 目的 ． 同时也利于洞 口县 山区生物多样 性的持续发展
＼
外植体
带顶芽茎段 不带顶芽茎段
科技・ 探索・ 争鸣
Ｓ ｃ 科 ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ＆ 技 Ｔ ｅ ｃ ｈ 视 ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ 界 Ｖ ｉ ｓ 口县 第二 中学 ， 湖南 洞口 ４ ２ ２ ３ ０ ２ ）
１ 目的 和 意 义
将 培养 基上顶芽膨大且 带有愈伤组织 的茎 段 ．转移到新鲜 的 ２
１ ６ ￣ ＭＳ ＋ ６ Ｂ Ａｌ ｍｇ ／ Ｌ ＋ Ｉ Ｂ Ａ ｌ ｍ ｇ ／ Ｌ ＋ 活性炭 １ ． ５ ｇ ／ Ｌ 不可缺少的一部分 ７ ＭＳ ＋ ６ ＢＡ０． ５ ｍｇ ／ Ｌ＋ ＮＡＡ０ ． １ ｍｇ ／Ｌ １ ． ２ 随着 环境对栽培蔬菜 的污染与 “ 绿色食 品” 的兴起 ． 使野生蔬 菜 上述培养 基均加入 ２ ％的蔗糖 、 ０ ． ８ ％的琼脂 ， ｐ Ｈ值为 ５ ． ８ 。 受到邵 阳市们普遍青睐。蕨也不 例外 ． 蕨菜制 品成 了人们餐桌上 的佳 （ ２ ） 接种与培养 肴。 山区人们 由于经济的需求 ． 无 计划地大量采摘野生蕨 出售 ， 多年来 外植体取在破休眠期 已经萌发 出地面 的绿色幼嫩根状茎 （ 无菌方 对这种野生植物的人为破坏越来 越严重 据调查 ． 洞口 县 野生蕨的蕴 法同上无菌条件下切成 Ｏ ． ８ ～ １ ｃ ｍ的带顶芽 和不带顶芽的茎段 ． 分别接 藏量 大约有 ６ ． ４ 万公斤 ． 但 现在许 多地区野生蕨 已很少见 ． 洞 口县 蕨 种在 ２ 种不 同的培养基上 ． 置于 ２ ５ ℃一 ２ ８ 。 ｃ 光照条件下培养 。 菜 收购量大 幅下降也证明了资源的 日 趋减少 ． 盲目 地采摘 与收购对 自 （ ３ ） 生长与分化（ 表３ ） 然资源 的破坏令人担忧 表 ３ 生长与分化

蕨菜根状茎的组织培养技术研究吴春华;石元亮;王淼【摘要】[目的]找出蕨菜根状茎快繁中最适培养基配方.[方法]以东北野生蕨菜根状茎为试验材料,研究细胞分裂素、无机盐和糖浓度对出芽外植体数、诱导率、增殖芽数、平均芽数和GGB(原球茎-green globular body)形成率的影响.[结果]对蕨菜根状茎的不定芽分化最适细胞分裂素是2 mg/L KT,平均芽数4.2棵;在BA培养基中诱导出大量的GGB,1 mg/LBA对GGB的诱导率达100％.对蕨菜芽分化最适无机盐浓度是3/4MS,最适糖浓度是3％,此时芽诱导率是95％,平均芽数达4.9棵.[结论]研究结果可为蕨菜产业化快繁体系提供理论依据.【期刊名称】《园艺与种苗》【年(卷),期】2013(000)011【总页数】4页(P41-44)【关键词】蕨菜;根状茎;组织培养;培养基成分【作者】吴春华;石元亮;王淼【作者单位】辽宁省大连市农业科学研究院,辽宁大连116036;中国科学院沈阳生态研究所,辽宁沈阳110000;辽宁省大连市农业科学研究院,辽宁大连116036【正文语种】中文【中图分类】S647蕨菜原本是医食两用的林下野生蔬菜，东北蕨菜即东北蹄盖蕨，味道鲜美，营养丰富，深受消费者喜爱，也是很好的出口创汇蔬菜。

在自然条件下，蕨菜繁殖系数非常低，加上近年来对其需求量的增加使蕨菜资源遭到严重破坏。

基于资源、环境、生态及市场需求的考虑，对蕨菜进行人工繁殖是必由之路[1-2]。

目前关于蕨菜的人工栽培研究者作了大量的研究，孢子播种繁殖、根茎繁殖及组织培养是蕨菜主要的人工繁殖法[3-5]。

蕨菜具有配子体和孢子体繁殖的羊齿植物，因此掌握一套蕨菜繁殖的一系列成熟技术较重要。

该试验利用东北野生蕨菜根状茎作为外植体，探究蕨菜根状茎快繁中最适细胞分裂素、无机盐和糖浓度，筛选出最佳培养基配方，为蕨菜产业化快繁体系培育出优良的组培种苗。

1 材料与方法1.1 材料蕨菜外植体材料于2011年5月采自大连南山（图1）。

植物组织培养和植物再生技术的研究进展植物组织培养和植物再生技术是现代植物学中的重要研究领域。

通过对植物细胞和组织的培养、分化和再生，可以实现对植物的表型改造、遗传改良以及大规模繁殖的目标。

本文将对植物组织培养和植物再生技术的研究进展进行综述。

一、植物组织培养的基本原理植物组织培养是指通过培养植物细胞和组织，在无菌条件下创造适合生长的环境，利用培养基中的营养物质来满足植物生长的需求。

植物组织培养的基本原理包括组织感应、无菌培养和生长激素的调控。

在组织感应过程中，通过适当的培养基配方和生长激素的添加，可以诱导植物细胞和组织发生分化和再生。

无菌培养则是保证培养环境的纯净和无菌状态，以防止外界的微生物对培养组织的污染和干扰。

生长激素的调控则是通过添加不同浓度和比例的生长激素来控制植物组织的分化、增殖和再生。

二、植物组织培养技术的应用植物组织培养技术在植物育种和产业生产中有着广泛的应用。

首先，植物组织培养可以实现植物杂交的加速和扩大，提高新品种的选育效率。

通过培养花药、胚胎等组织，可以实现花粉的精确控制和胚胎的人工选择，降低杂交的成本和时间。

其次，植物组织培养可以实现植物体的无性繁殖和大规模繁殖。

通过培养离体器官如茎尖、叶片等，可以实现植物的扩繁和无性繁殖，为大规模生产提供基础材料。

此外，植物组织培养还可以用于植物物质代谢的研究，如次生代谢产物的提取和生物合成途径的探究。

三、植物再生技术的研究进展植物再生技术是指通过植物细胞和组织的培养、分化和再生，实现植物体的完整重建和再生。

植物再生技术可以分为离体再生和原位再生两种形式。

离体再生是指将植物细胞和组织离体培养，通过适当的培养条件和生长激素的调控，实现植物的分化和再生。

原位再生则是通过对植物体进行创伤处理和生长环境的改变，诱导植物组织的再生和修复。

植物再生技术在植物育种和基因工程中有着重要的应用，可以实现植物的基因转化和遗传改良。

四、植物组织培养和植物再生技术的挑战与展望尽管植物组织培养和植物再生技术在理论和应用上取得了重要的突破，但仍然面临着一些挑战。

兑 水 摇 匀 后 喷 洒 在 播 种 床 上 。 也 可用 软 质 小 毛 刷 蘸 取 孢 子粉 均 匀撒 播 于床 面上 ， 再 用 喷雾 器 或 细 眼
蕨菜 （ Ｐ ｔ ｅ ｒ ｉ ｄ ｉ ｕ ｍ ａ ｇ ｕ ｉ ｌ ｉ ｎ ｕ ｍ） 为 凤 尾 蕨 科 蕨 属 多
年生草 本植 物 的嫩苗 ， 营养 丰富 ， 被 称 为 山 菜 之
的繁殖 提供 参考 。
１ 有 性繁殖 （ 孢 子繁殖 ）
１ ． １ 孢子 采集
较低的条件下 ， 配子体颜色发黄 ， 假根 明显 ， 不利于 配子体 的培养 ； 同样较高温度条件 ， 也不利于配子 体 的生长 ； 温度在 ２ ５ 左右 时 ， 最 适合配子 体生 长， 孢 子 的成苗 数也 较多 ” 】 。
ｌ ＿ ３ 苗期 管理 孢 子 在 播 种 后 ４～５ ｄ开 始 萌 发 ， 并 出 现 原 丝
蕨 菜孢 子 通 常 在 ７ 月 中下 旬 至 ８ 月 中旬 成 熟 。
密生于成熟 叶片背面 ， 沿 边 缘 生 成 粉 状 的 即 是 孢
体， 且逐 渐 发育 成 心形 的原 叶体 。前 期 的原 叶体 不 需要 过 多 的水分 。萌 发 后 １ 个月左右 ， 当原 叶体 成
叶出齐后 ， 停止浇水 ， 土壤水分控制在 ６ ０ ％左右 ， 以 后逐渐生长出羽状叶片。当幼苗长到 ４ ～ ５ ｃ ｍ时 ， 结合间苗进行分苗 ， 株行距均为８ ｃ ｍ。移栽时要保 持土壤湿润 ， 并适当遮荫。分苗床的土壤条件要 和 原培养基相 同 。为满足幼 苗生长 的需 要 ， 可喷施
子， 在 显 微 镜 下是 一 些 褐 色 齿 轮 状 的球 体 。选 择
外观棕 褐色 ， 孢子囊 未开裂的孢子囊群 ， 将带孢 子 的叶片剪成小段 ， 置于干净的 白纸上或培养皿 内， ７～１ ０ ｄ 后 当孢 子 完全 脱 落 后 ， 除 去杂 质 ， 收集 散 落 的孢子 ， 装入干净 的磨 口瓶中保存待用 ， 存放处 要

龙爪蕨组织培养技术研究摘要以龙爪蕨生长期间根状茎上的芽为组培材料进行试验，结果表明：芽诱导培养基以MS+6-BA 1mg/L+GA3 1mg/L为最佳壮苗培养基，用0.1%的升汞消毒，以消毒8min为最佳消毒时间。

关键词龙爪蕨；组织培养；芽生长量；消毒时间龙爪蕨为小型附生蕨，株高20cm，根状茎长而横生，叶片阔卵状三角形，3～4回羽状复叶。

孢子囊群着生于叶缘小脉顶端，囊群盖近圆形。

小叶细致为椭圆或羽状裂叶，革质，叶面平滑浓绿，富光泽，叶长10～30cm，由细长叶柄支撑，叶柄色稍深，长10～30cm。

龙爪蕨生长缓慢，具有棕色的根状茎鳞片，半耐寒，用高盆或吊篮栽种，银白色的匍匐茎下垂，叶形优美，形态潇洒，根状茎和叶都具极高的观赏价值，是非常流行的室内观赏蕨类；也可以作为景观植物配植于假山岩石边。

其根状茎还能入药，有祛风除湿、清热凉血之功效。

1材料与方法1.1试验材料本试验的材料由河南农业职业学院花圃提供，取生长期的龙爪蕨根状茎上的芽为组织培养材料。

1.2试验处理生长期龙爪蕨根状茎芽的诱导培养基：①MS+6-BA 1mg/L+GA3 1mg/L （A1）；②MS+6-BA 2mg/L+GA3 1mg/L（A2）；③MS+6-BA 3mg/L+GA3 1mg/L （A3）；④MS+6-BA 1mg/L+GA3 2mg/L（A4）；⑤MS+6-BA 2mg/L+GA3 2mg/L （A5）；⑥MS+6-BA 3mg/L+GA3 2mg/L（A6）；⑦MS+6-BA 1mg/L+GA3 3mg/L （A7）；⑧MS+6-BA 2mg/L+GA3 3mg/L（A8）；⑨MS+6-BA 3mg/L+GA3 3mg/L （A9）。

共9个组合的培养基类型，每个组合重复3次。

培养基共1 000mL，用塑料三角瓶分装，每瓶装30mL左右，共装27瓶，每瓶接种2个芽，共接54个芽。

1.3试验方法选取的材料用自来水冲洗24h，用洗衣粉浸泡10min，然后用自来水冲洗干净。

野生蕨的组织培养和微繁殖保护作者：刘立峰来源：《科技视界》 2014年第29期刘立峰（洞口县第二中学，湖南洞口 422302）1 目的和意义1.1 邵阳市洞口县山区的雪峰山地区生长着一种野生经济植物——蕨(Pteridium aquilinum var. latiusculum)，属蕨类，凤尾蕨科，多年生草本。

当地人称“蕨菜”，因富含营养，幼叶可食，并可用做中草药治疗疾病，具有很高的营养价值和经济价值，是洞口县山区野生植物多样性不可缺少的一部分。

1.2 随着环境对栽培蔬菜的污染与“绿色食品”的兴起，使野生蔬菜受到邵阳市们普遍青睐。

蕨也不例外，蕨菜制品成了人们餐桌上的佳肴。

山区人们由于经济的需求，无计划地大量采摘野生蕨出售，多年来对这种野生植物的人为破坏越来越严重。

据调查，洞口县野生蕨的蕴藏量大约有6.4万公斤，但现在许多地区野生蕨已很少见，洞口县蕨菜收购量大幅下降也证明了资源的日趋减少，盲目地采摘与收购对自然资源的破坏令人担忧。

1.3 蕨类植物的繁殖主要依靠营养繁殖与孢子繁殖。

洞口县的野生蕨由于受到气候的影响，孢子繁殖困难，通常利用地下茎进行营养繁殖，繁殖率低。

人们食用的蕨菜是野生蕨的幼苗，采摘幼苗又破坏了地下茎，使得野生蕨的繁殖更加困难。

有人提出警告：洞口县部分地区野生蕨已有灭绝的危险。

面临这种现状，我们开展了，一些试验研究，试图通过组织培养和微繁殖保护，以提高它的繁殖能力，增加物种的丰富度，达到保护和合理利用的目的，同时也利于洞口县山区生物多样性的持续发展。

2 组织培养和微繁殖2.1 材料的来源2013年11月采自邵阳市洞口县府君山家植试验田。

此时植株正值休眠期，将未萌动的地下茎移栽至花盆内，移入温室，使部分地下茎提前萌动。

2.2 外植体的灭菌方法外植体先用少量洗衣粉做清洁处理，然后水流冲洗30分钟，用滤纸将外植体表面水分吸净后再用HgCl2灭菌10分钟，最后用无菌水冲洗5遍。

2.3 第一阶段的工作，由2013年12月18日开始（１）制备3种类型的培养基，MS培养基作为基本培养基1# MS+2.4D－2mg／L+NAA0.5mg／L2# MS+2.4D－0.5mg／L+NAA0.1mg／L3# MS+6BA2mg／L+NAA0.2mg／L+CH100mg／L上述培养基中均加3％的蔗糖、0.8％的琼脂，pH值为5.8。