饲料学课件实验三、四 饲料粗蛋白质测定
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饲料中粗蛋白测定方法??1、?原理凯氏法测定试样中的含氮量,即在催化剂作用下,用硫酸破坏有机物,使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,测出氮含量,将结果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白含量。
??2??2.1?—920)—1220)0.5入注入????2.7?蔗糖(HG?3—1001):分析纯。
????2.8?硫酸铵(GB?1396):分析纯,干燥。
????2.9?硼酸吸收液:1%硼酸水溶液1?000mL,加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL,0.1%甲基红乙醇溶液7mL,4%氢氧化钠水溶液0.5mL,混合,置阴凉处保存期为一个月(全自动程序用)。
???3、?仪器设备???3.1?实验室用样品粉碎机或研钵。
????3.2?分样筛:孔径0.45mm(40目)。
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????5.1.2?氨的蒸馏:将试样消煮液冷却,加入20mL蒸馏水,转入100mL容量瓶中,冷却后用水稀释至刻度,摇匀,做为试样分解液。
将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有20mL硼酸吸收液和2滴混合指示剂的锥形瓶内。
蒸汽发生器?的水中应加入甲基红指示剂数滴,硫酸数滴,在蒸馏过程中保持此液为橙红色,否则需补加硫酸。
准确移取试样分解液10~20mL注入蒸馏装置的反应室中,用少量蒸馏水冲洗进样入口,塞好入口再蒸馏氮量为盐酸标0.3mL。
????粗蛋白质(%)=(V2-V1)·c×0.0140×6.25/(m×V'/V)?×100?????式中:V2──?滴定试样时所需标准酸溶液体积,mL;?????V1──?滴定空白时所需标准酸溶液体积,mL;?????c──?盐酸标准溶液浓度,mol/L;?????m──?试样质量,g;?????V──?试样分解液总体积,mL;?????V──?试样分解液蒸馏用体积,mL;?????0.0140──?与1.00mL盐酸标准溶液〔c(HCl)=1.000mol/L〕相当的、以克表示的氮的质量。
实验三、饲料中粗蛋白质的测定【学习目标】掌握饲料中粗蛋白质的测定方法,并能用此方法测定饲料中粗蛋白质的含量。
一、原理饲料中纯蛋白质和非蛋白氮总称粗蛋白质。
凯氏法的基本原理是用浓H2SO4在催化剂(CuSO4、K2SO4、Na2SO4等)的催化作用下消化饲料样本,使其中的蛋白质和非蛋白氮都转变为 (NH4)2SO4,(NH4)2SO4在浓碱作用下放出NH3,通过蒸馏,氨气随水蒸汽沿冷凝管流入硼酸吸收液被硼酸吸收并与之结合成为四硼酸铵,然后以甲基红、溴甲酚绿作指示剂,用标准HCL溶液滴定,求出氮含量,根据氮含量再乘以系数(通常为 6.25),即为粗蛋白质的含量。
上述原理的主要化学反应如下:催化剂1.2CH3CHNH2COOH+13H2SO (NH4)2SO4+6CO2↑+12SO2↑+16H2O加热2.(NH4)2SO4+2NaOH 2NH3↑+2H2O+Na2SO43.4H3BO3+NH3 NH4HB4O7+5H2O4.NH4HB4O7+5H2O+HCL NH4CL+4H3BO3系数6.25是根据饲料蛋白质平均含氮量为16.0%而来的,而实际上,各种样本的蛋白质种类不同,含氮量有差异,变动为14.7~19.5%之间,故一般饲料换算系数用6.25,已确定的最好用实际系数。
为方便使用,将已知几种饲料的系数介绍如下:肉类6.25,玉米6.00,小麦、燕麦、黑麦、大豆、箭舌豌豆、蚕豆5.70,牛奶及制品6.28,坚果及油饼类5.30。
二、仪器设备1.样品粉碎机 40目分样筛;2.分析天平感量0.0001g;3.电子天平感量0.0001g;4.工业天平感量0.01g;5.六联电炉 6×800-1000W;6.半微量凯氏定氮仪或改良式半微量凯氏定氮仪(图1、图2);7.酸式滴定管 25.0ml或50.0ml;8.凯氏烧瓶 100.0ml;9.烧杯 250.0ml;10.三角瓶 150.0ml;11.容量瓶 100.0ml;12.移液管 10.0ml;13.量筒 10.0ml、25.0ml。
一、实验目的1. 掌握饲料粗蛋白测定的原理和方法;2. 熟悉实验操作步骤,提高实验技能;3. 了解饲料粗蛋白含量的重要性及其对动物营养的影响。
二、实验原理饲料粗蛋白是指饲料样品中含氮物质的总量,包括蛋白质和非蛋白质含氮化合物。
测定饲料粗蛋白含量,可以了解饲料的营养价值,为动物饲料配方提供依据。
凯氏定氮法是测定饲料粗蛋白的常用方法,其原理如下:1. 将饲料样品与浓硫酸、无水碳酸钠混合,加热消化,使蛋白质和氨态氮转化为硫酸铵;2. 消化液在浓碱的作用下进行蒸馏,释放出的氨随汽水顺着冷凝管流入硼酸吸收液中,并与其结合成硼酸铵;3. 用盐酸标准溶液滴定,求出氨的含量,再乘以一定的换算系数(6.25),即得出试样中粗蛋白的含量。
三、实验材料1. 饲料样品:玉米粉、豆粕、鱼粉等;2. 试剂:浓硫酸、无水碳酸钠、氢氧化钠、硼酸、盐酸标准溶液、甲基红-溴甲酚绿指示剂等;3. 仪器:凯氏瓶、消化炉、冷凝管、滴定管、分析天平等。
四、实验步骤1. 样品消化(1)称取0.5-1g饲料样品,置于凯氏瓶中;(2)加入0.4g无水硫酸铜、6g无水碳酸钠,与试样混合均匀;(3)加入10ml浓硫酸,摇匀;(4)将凯氏瓶置于消化炉上,加热消化,直至溶液呈透明蓝绿色。
2. 滴定(1)将消化液转移至500ml容量瓶中,用蒸馏水定容;(2)取25ml消化液于锥形瓶中,加入5ml氢氧化钠溶液、5ml硼酸溶液、1滴甲基红-溴甲酚绿指示剂;(3)用盐酸标准溶液滴定至溶液由蓝绿色变为灰绿色;(4)记录盐酸标准溶液的消耗体积。
3. 计算(1)根据滴定结果,计算氨的物质的量;(2)乘以换算系数(6.25),得出饲料样品中粗蛋白的含量。
五、实验结果与分析1. 实验数据样品名称 | 样品质量(g) | 盐酸标准溶液消耗体积(ml) | 粗蛋白含量(%)------- | -------- | ------------------- | --------玉米粉 | 0.5 | 25.00 | 9.20豆粕 | 0.5 | 30.00 | 38.40鱼粉 | 0.5 | 35.00 | 58.002. 结果分析通过实验,我们得到了玉米粉、豆粕、鱼粉的粗蛋白含量分别为9.20%、38.40%、58.00%。
饲料中粗蛋白质的测定一、目的掌握饲料中粗蛋白质的测定方法,并测定饲料中粗蛋白质的含量。
二、原理饲料中纯蛋白质和非蛋白氮总称粗蛋白质。
凯氏法的基本原理是用浓H2SO4在还原性催化剂(CuSO4、K2SO4、Na2SO4等)的催化作用下消化饲料样本,使其中的蛋白质和非蛋白氮都变为NH4+,NH4+立即被浓H2SO4吸收成为(NH4)2SO4,(NH4)2SO4在浓碱作用下放出NH3,通过蒸馏,氨气随水蒸汽沿冷凝管流入硼酸吸收液被硼酸吸收并与之结合成为四硼酸铵,然后以甲基红溴甲酚绿混合指示剂作指示剂,用标准HCL溶液滴定,求出氮含量,根据不同饲料再乘以一定的换算系数(通常用6.25计算),即为粗蛋白质的含量。
上述原理的主要化学反应如下:2.(NH4)2SO4+2NaOH→2NH3↑+2H2O+Na2SO43.H3BO3+NH3→NH4H2BO34.NH4H2BO3+HCL→NH4CL+H3BO3三、仪器设备1.实验室用样品粉碎机:40目网筛。
2.分析天平:感量0.0001。
3.电子天平: 感量0.001。
4. 六联电炉: 6×1000W。
5.改良式半微量凯氏定氮仪(图1)。
6.酸式滴定管:25ml。
7.凯氏烧瓶:100ml。
8.烧杯:250ml。
9.三角瓶:150ml。
10.容量瓶:100ml。
11.移液管:10ml。
12.量筒: 10ml 。
13.量筒:25ml。
四、试剂1.浓H2SO4:化学纯,含量为98%,无氮。
2.混合催化剂:CuSO4:Na2SO4=1:10 化学纯。
3.甲基红—溴甲酚绿混合指示剂:0.1%甲基红酒精溶液与0.5%溴甲酚绿酒精溶液等体积混合,阴凉处保存期不超过三个月。
此混合指示剂在碱性溶液中呈蓝色,中性溶液中呈灰色,强酸性溶液中呈红色。
在硼酸吸收液中呈暗紫色,在吸收氨的硼酸溶液中呈兰色。
4.2%硼酸吸收液:溶2g化学纯硼酸于100ml蒸馏水中,加甲基红—溴甲酚绿混合批示剂0.4ml。
饲料中粗蛋白的测定一、实验目的通过饲料样品中粗蛋白的测定,掌握饲料粗蛋白质含量的测定方法。
二、适用范围本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。
三、实验原理凯氏法测定试样中的含氮量,即在催化剂作用下,用浓硫酸破坏有机物,使含氮物转化成硫酸铵。
加入强碱进行蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,测出氮含量,将结果乘以换算系数,计算出粗蛋白含量。
四、试剂(1)硫酸:化学纯,含量为98%,无氮。
(2)混合催化剂:0.4g硫酸铜,5个结晶水;6g硫酸钾或硫酸钠,均为化学纯,磨碎混匀。
(3)氢氧化钠:化学纯,40%水溶液(m/V)。
(4)硼酸:化学纯,2%水溶液(m/V)。
(5)混合指标剂:甲基红%乙醇溶液,溴甲酚绿%乙醇溶液,两溶液等体积混合,在阴凉处保存期为3个月。
(6)盐酸标准溶液:基准无水碳酸钠法标定;① L盐酸标准溶液:盐酸注入1000ml蒸馏水中。
② L盐酸标准溶液:盐酸注入1000ml蒸馏水中。
(7)蔗糖:分析纯。
(8)硫酸铵:分析纯,干燥。
(9)硼酸吸收液:1%硼酸水溶液1000mL,加入%溴甲酚绿乙醇溶液10mL,%甲基红乙醇溶液7mL,4%氢氧化钠水溶液,混合,置阴凉处保存期为1个月(全自动程序用)。
五、仪器设备(1)实验室用样品粉碎机或研钵。
(2)分样筛:孔径0.45mm(40目)。
(3)分析天平:感量0.0001g。
(4)消煮炉或电炉。
(5)滴定管:酸式,10、25mL。
(6)凯氏烧瓶:250mL。
(7)凯氏蒸馏装置:常量直接蒸馏式或半微量水蒸汽蒸馏式。
(8)锥形瓶:150、250mL。
(9)容量瓶:100mL。
(10)消煮管:250mL。
(11)定氮仪:以凯氏原理制造的各类型半自动、全自动蛋白质测定仪。
六、分析步骤试样的选取和制备: 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g,粉碎后全部通过40目筛,装于密封容器中,防止试样成分的变化。
(1)仲裁法①试样的消煮称取试样~1g(含氮量5~80mg)准确至0.0002g,放入凯氏烧瓶中,加入6.4g混合催化剂,与试样混合均匀,再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠,将凯氏烧瓶置于电炉上加热,开始小火,待样品焦化,泡沫消失后,再加强火力(360~410℃)直至呈透明的蓝绿色,然后再继续加热,至少2h。
动物营养学实验
袁颖版
目录
第一章饲料营养成分分析
第一节饲料样品的采集与制备
实验一样品的采集
实验二样品的制备
第二节饲料中营养成分的常规分析
实验三饲料中水分的测定
实验四饲料中粗蛋白质的测定
实验五饲料中粗脂肪的测定
实验六饲料中纤维物质的测定
实验七饲料中粗灰分的测定
实验八饲料中无氮浸出物的计算
第三节饲料中部分纯养分的分析
实验九饲料中钙的测定
实验十饲料中总磷的测定
实验十一饲料中水溶性氯化物的测定
实验十二饲料中氨基酸的测定
第四节饲料热能的测定
实验十三饲料总能的测定
第二章畜禽的消化代谢实验
第一节体内消化代谢实验
实验十四饲料中某养分消化率的测定
实验十五饲料中某养分代谢率的测定
实验十六饲料中钙、磷的代谢试验
实验十七瘤胃内饲料营养物质降解率的测定(尼龙袋法)第二节体外消化实验
实验十八饲料中粗蛋白质体外消化率的测定(胃蛋白酶法)第三章畜禽饲养试验设计
实验十九畜禽饲养试验设计
附录1 国际原子量表
附录2 常用酸碱指示剂
附录3 混合酸碱指示剂
附录4 普通酸碱溶液的配制
附录5 容量分析基准物质的干燥条件
附录6 化学试剂滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备
参考文献。