13病原细菌

・９８・　植物保护第３２卷第２期（２００６）ＰＩ　ＡＮＴ　ＰＲＯＴＥＣＴＩＯＮ　Ｖｏ１．３２　Ｎｏ．２（２００６）　

韭菜黄叶病病原细菌的鉴定　

丁彩平　，　黄思良　，　陆少峰　

（１．广西大学农学院植物病理学专业，南宁５３０００５；　２．广西农业科学院，南宁５３０００７）　

摘要在桂中地区韭菜上发现一种由细菌引起的病害，该病主要发生在外叶，表现出纵向半片叶或全片叶变黄。从　叶片的病组织中分离到具有致病性的杆状细菌，将分离的病原菌接种于健康的韭菜上，表现与田问一致的症状。接　种发病的病斑与田间标本上分离的病原菌菌落形态完全相同。根据菌株的培养性状、常规生理生化特性及透射电　镜下菌体形态观察结果，将病原菌鉴定为草生欧文氏菌菠萝变种（Ｅｒｗｉｎｉａ　ｈｅｒｂｉｃｏｌａ　ｖａｒ．ａｎａｎａｓ）。　

关键词韭菜；　黄叶病；分离；　病原鉴定　中图分类号Ｓ　４３６．３３　

韭菜（Ａｌｌｉｕｍ　ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ　Ｒｏｔｔ１．盱Ｓｐｒｅｎｇ．），百　合科葱属，多年生草本植物，是一种家常蔬菜。将　

韭菜进行遮光处理可将其培育成韭黄。韭黄，颜色　

浅黄，鲜嫩味美，经济价值高。近年，广西柳州市　

韭黄生产基地，韭菜严重感染了一种细菌性黄叶　

病。主要症状是病斑从叶尖、叶缘开始发生向叶中　

脉扩展，表现出纵向半片叶片变黄或整张叶片变　

黄。病斑初期为淡黄褐色，后期转变为深黄褐色，　

水渍状坏死，最终整张叶片枯死。感病组织在显微　

镜下观察可见大量细菌溢出。该病主要在外叶发　

生，心叶很少感染。韭菜从４月中旬开始发病，田　

间发病株率高于５７　，平均病叶率高于２７　。此　

病发展速度快，死亡率高，给韭菜生产带来严重经　

济损失。查阅国内外有关韭菜病害文献，未见有此　

类症状的病害报道，因此，作者对该病的病原菌进　

行了鉴定。　

１材料与方法　

１．１病原细菌分离　

标本采自柳州市韭黄生产基地，选取病叶上典　

型病斑作为分离材料。在ＮＡ（肉汁胨培养基）平板　

上按常规方法划线分离，２７℃温箱中培养４８　ｈ，挑　

病原细菌的形态与结构试卷及答案

1. 溶菌酶杀死G＋菌的机制是： [单选题] *

A．切断聚糖骨架β-1，4糖苷键(正确答案)

B．抑制四肽侧链上

D-丙氨酸与五肽桥的联结

E．损伤细胞膜的通透性

2. 青霉素对革兰阳性菌有杀菌作用，通常对人体细胞无影响，原因是 [单选题] *

A．人体细胞表面无青霉素受体

B．人体细胞中含有青霉素酶，能分解青霉素

C．人体细胞无细胞壁和肽聚糖(正确答案)

D．人体细胞膜能阻止青霉素进入细胞内

E．人体细胞的核糖体为80S，青霉素不能与之结合

3. 革兰染色所用染液的顺序是 [单选题] *

A. 稀释复红一碘液一乙醇一结晶紫

B．结晶紫一乙醇一碘液一稀释复红

C．结晶紫一碘液一乙醇一稀释复红(正确答案)

D．稀释复红一乙醇一结晶紫一碘液

E．稀释复红一结晶紫一碘液一乙醇

4. 细菌的芽胞是 [单选题] *

A．细菌的繁殖形式

B．细菌的有性遗传物质

C．仅在肠杆菌科出现 D．通常是在缺氧条件下形成

E．细菌在不利环境条件下形成的休眠体(正确答案)

5. 与内毒素有关的结构是 [单选题] *

A．外膜(正确答案)

B．核膜

C．线粒体膜

D．荚膜

E．细胞膜

6. 细胞壁的主要功能是 [单选题] *

A．生物合成

B．维持细菌的外形(正确答案)

C.参与物质交换

D．呼吸作用

E.产生能量

7. 细菌具有抗吞噬作用的结构是 [单选题] *

A．细胞壁

B．荚膜(正确答案)

C.芽胞

D．鞭毛

E．菌毛

8. G＋菌细胞壁的特点是 [单选题] *

A．较疏松

B．无磷壁酸 C．有脂多糖

D．有脂蛋白

E.肽聚糖含量多(正确答案)

9. 普通菌毛是细菌的一种 [单选题] *

A．细长波浪状的丝状物

B．运动器官

C.多糖质

D．可传递遗传物质的器官

E．黏附结构(正确答案)

10. “核质以外的遗传物质”是指细菌的 [单选题] *

A．mRNA

B．核蛋白体

C．质粒(正确答案)

植物病原细菌的分离、纯化及鉴定

1实验目的及意义

植物病原菌的分离、鉴定是植物病理学实验最基本的操作技术之

一，通过本实验，要求掌握植物病原菌分离培养、纯化鉴定的一般原则

和方法。

2实验材料及准备

2.1 实验材料：新发病的植物组织

2.2 培养基准备（LB培养基）：胰蛋白胨1%，NaCl 1%，酵母浸粉

0.5%，pH7.0-7.2，121℃灭菌20 min，备用。

2.3 实验用具：载玻片、盖玻片、酒精灯，手术剪，镊子，培养皿

（Φ9cm），斜面培养基，灭菌水，1% NaClO，打火机。

3 实验方法及步骤

3.1 植物样品的采集

选取发病初期植株，样本尽量保持完整，至少包含病健交界处；将

样品放入纸袋保存或邮寄，并做好记录；需要分离的标本应尽快完成分

离工作（1-5d），长期保存需压干，未压干的标本勿装塑料袋。

3.2 发病组织的显微检查

准备好洁净的载玻片、盖玻片和水；取小的整块标本洗净、晾干/

吸干；切取约2×4mm大小病健交界组织；从上述组织中切取尽可能薄的

小片平放在载玻片上；加一滴水，盖好盖玻片，防止气泡；先用低倍镜

(4×，10×)检查，看到白色、半透明、雾状的喷菌现象；换用40倍物镜

观察，看到杆状、透明、活动的菌体，证明的确为细菌性病害。

3.3 病原物的分离和培养

选取镜检有喷菌现象的组织进行划线分离：所取组织用自来水洗净，吸干；（以下进入超净工作台操作）将植物组织剪成1×4mm的大

小，1%的次氯酸钠消毒2-10min，灭菌水洗2-3次；将组织从病斑处剪碎

放入约0.5-1ml水中，并让组织碎块在水中浸泡5-15min，让细菌释放到

灭菌水中；取病汁液1-3环，在LB平板上划线。28℃温箱中培养，每天

观察菌落生长情况并记录：菌落长出的时间、菌落大小、颜色、形态。

3.4 病原物的纯化和保存

3-4 d后选取生长量较多且形态一致的菌落，LB平板上划线纯化。

若仍然生长不纯，则需多次纯化。划菌采用三线法。挑取纯化后的单菌

落移入斜面生长，每菌移3管。24小时后从斜面上再次转移菌体，并且保存该病原菌。

简述我国病原微生物分类情况

我国病原微生物按照不同的分类方法可以分为多个大类，包括细菌、病毒、真菌、寄生虫和原生动物等。下面将对每种分类进行详细介绍。

1.细菌：细菌是一类微小的单细胞生物，可以存在于自然界的空气、水、土壤、植物和动物体内等各种环境中。它们可以被分为五个主要类别：革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、厚壁菌、拟杆菌和放线菌。在我国，一些常见的病原细菌包括大肠杆菌、沙门氏菌、鼠疫杆菌等，它们可以引起人们常见的细菌性疾病，如肺炎、腹泻等。

2.病毒：病毒是一种非细胞的微生物，只能寄生于细胞内进行繁殖。根据病毒的核酸类型，病毒可以分为RNA病毒和DNA病毒两大类。在我国，常见的病毒有流感病毒、乙肝病毒、艾滋病病毒等，它们可以引起人们各种呼吸道、消化道、性传播等疾病。

3.真菌：真菌是一类真核微生物，广泛存在于空气、土壤和水中。根据真菌的生活形态，真菌可以分为酵母菌和菌丝菌两大类。在我国，常见的病原真菌包括白色念珠菌、皮肤癣菌等，它们可以引起人们的真菌感染，如白色念珠菌感染和皮肤癣等。

4.寄生虫：寄生虫是一类依靠其他生物寄生而生活的生物。它们可以寄生在人体的不同器官中，如肠道、肝脏、血液等。在我国，一些常见的病原寄生虫包括蛔虫、钩虫、血吸虫等，它们可以引起人们的寄生虫病，如蛔虫病、钩虫病和血吸虫病等。

5.原生动物：原生动物是一类单细胞的生物，广泛存在于自然界的水体和土壤中。根据原生动物的生活方式和细胞结构，原生动物可以分为滑动型和胞内型两大类。在我国，一些常见的病原原生动物包括阿米巴原虫、银屑病虫等，它们可以引起人们的原虫病。

总体而言，我国的病原微生物种类繁多，包含细菌、病毒、真菌、寄生虫和原生动物等。这些病原微生物可以通过不同的途径侵入人体，并引起各种不同的感染和疾病。因此，在预防和控制疾病的过程中，对病原微生物的分类和了解是非常重要的。