淀粉酶生产工艺
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a-淀粉酶的生产工艺
淀粉酶是一类能够水解淀粉并将其转化为糖类的酶。
它广泛用于食品、饲料、纸浆、
发酵等行业中。
1. 酶菌的选育和培养
淀粉酶可由多种细菌、真菌和原生动物合成,其中最常用的是泌秀菌和枯草芽孢杆菌。
选用高产菌株和适合生产的菌株进行发酵,产生高效淀粉酶。
2. 发酵工艺
发酵工艺是淀粉酶生产的关键步骤。
其主要过程是菌种培养、接种、发酵、分离等。
泌秀菌的发酵条件为温度35℃-42℃,pH为6.0-7.0,培养液中含有可溶性淀粉、氮源、
矿物质以及适量的辅助物质,如表面活性剂等。
枯草芽孢杆菌的发酵条件为温度37℃-55℃,pH为6.5-7.5,培养液中含有可溶性淀粉、氮源和矿物质等。
3. 酶液的提取和纯化
对发酵液进行酶液的提取和纯化,可以采用离心、过滤、超滤、稳态层析等方法。
离
心可将大颗粒杂质和沉淀物去除。
过滤和超滤可去除小颗粒杂质和未溶解物质。
稳态层析
能够去除其他蛋白质等酶外蛋白。
为增强淀粉酶的稳定性,可以将其进行稳定化处理。
稳定化的方法包括添加保护剂、
离子交换、交联、酯化等。
保存时,应避免酶液暴露在空气中、光照下或高温中。
一般情
况下,淀粉酶的保存温度应低于0℃。
总之,淀粉酶的生产工艺涵盖了选育和培养酶菌、发酵、酶液的提取和纯化、稳定化
和保存等多个环节。
只有采取稳定的生产工艺和高效的酶菌,才能获得高质量的淀粉酶产品。
药 物 生 物 技 术Pharm aceutical Biotechno logy 2006,13(3):211~213猪胰淀粉酶的制备工艺研究*杨东来,高学军*(东北农业大学动物医学学院动物生物化学教研室,黑龙江哈尔滨150030)摘 要 以猪胰脏为原料,利用(N H4)2SO4盐析、凝胶层析及真空低温冻干等方法制备胰淀粉酶。
该工艺制备的胰淀粉酶的活性为108.57ku/g,收率为1.4%,纯度为59%,低成本。
结果表明本方法能生产出高活性低成本的胰淀粉酶。
关键词 猪胰淀粉酶;胰脏;制备中图分类号:Q55 文献标识码:A 文章编号:1005 8915(2006)03 0211 03猪胰淀粉酶和其他的哺乳类动物的胰淀粉酶一样都是 淀粉酶[1],其分子质量约为46ku。
猪胰 淀粉酶主要作用是分解糊化后的直链淀粉和支链淀粉中直链部分 1,4键[2],对 1,6键不分解,分解淀粉产物为糊精、麦芽糖[3,4]。
胰淀粉酶作用的最佳pH为6.7~7.0。
胰淀粉酶在工业生活中应用广泛,如畜牧业、皮革业、纺织业、生物制药、洗涤剂等。
当前国内市场上主要为高纯度的胰淀粉酶,其制备成本很高,操作复杂并且收率非常低。
猪胰淀粉酶制备在国内尚未见报道。
目前市场上胰淀粉酶主要为国外进口,价格昂贵。
作为猪胰淀粉酶原料的猪胰脏来源充足,因此改进猪胰淀粉酶的生产工艺,提高回收率,在生化制药中有着重要意义。
1 试验材料新鲜猪胰脏,猪胰淀粉酶标准品(Sigm a公司),Sephdex G 100,胰淀粉酶检测试剂盒(南京建成),低温离心机,真空冻干机,Alphaimag er P TMP 2200凝胶扫描系统,CDM C 21V3.0层析工作站系统,低温层析柜,紫外分光光度计,磁力搅拌器,真空泵。
2 试验方法2.1 猪胰淀粉酶测定方法用胰淀粉酶检测试剂盒测定胰淀粉酶活性。
2.2 粗胰淀粉酶的制备[5,6]取新鲜猪胰脏搅碎成胰浆,加入少量蒸馏水继续在室温搅拌1h,然后在4 继续搅拌8h。
a-淀粉酶的发酵生产工艺扌商要:a•淀粉酶广泛分布于动物、植物和微生物中,能水解淀粉产生糊精、麦芽糖、低聚糖和葡萄糖等,是工业生产中应用最为广泛的酶制剂之一。
目前,a•淀粉酶已广泛应用于变性淀粉及淀粉糖、焙烤工业、啤酒酿造、酒精工业、发酵以及纺织等许多行业。
1•菌种的选育1. 1细菌的分离与初步鉴定:将土壤系列稀释,把10乞10-\10腐分别涂布到淀粉培养基上,27C倒置培养2天,将长出的菌落接入斜面。
将细菌从斜面接种到淀粉培养基培养2天,用碘液染色,记录透明圈大小和菌落直径,计算D/d值。
保菌供下次实验用。
1. 2紫外线诱变育种:取活化后的菌种配成菌悬液、稀释;倒淀粉培养基平板,将菌悬液涂布其表面;用紫外线处理平板0、2min.4min.6min、8min.10min,每个处理2次重复;放到黑暗中倒置培养,37C培养48h,分别计•数诱变组和对照组平板上的菌落数,并计算致死率;加入碘液,分别测量诱变组和对照组菌落的透明圈直径和菌落直径,计算D/d值;将D/d值最大的菌种保存到斜面培养基上。
1.3诱变方法以及变异菌株的筛选①诱变出发菌株在完全培养基中培养至对数生长期后期。
②以NTG为诱变剂,按一定处理剂量(包/ml),在一定pH值的缓冲液中30T恒温振荡处理1~4h°③经高速离心分离,移植于液体完全培养基进行后培养。
④经稀释涂布在含有1%淀粉BY固体培养基上,经24h培养形成小菌落。
⑤把单菌落分别移植于含2%淀粉B丫液体培养基中,30E培养36ho⑥用2#定性滤纸制成5mmdisc(小圆纸片),并用2%琼脂BY培养基灭菌后加入较大剂量青霉素(抑菌)。
倒入200mmx300mm长方形不锈钢玻璃培养皿中,冷却凝固。
然后把5mmdisc纸顺序放在培养基表面。
⑦用微量注射器分别吸取培养液,移植到相应的disc上。
把disc培养皿经37C,24h分别培养。
⑧把KI-I2液用喷雾器均匀分布在disc培养皿培养基的表面上,并挑出淀粉水解圈大的disc,用相对应的1ml培养液接种摇瓶,进行发酵测定酶活力。
饲料中常用酶制剂及生产过程(ɑ——淀粉酶为例)摘要:随着生活水平的提高,人们对肉类食品的需求大大提高,畜禽养殖业大力发展。
养殖动物的品种,饲料的种类,疾病的预防等在养殖业中起着重要作用。
在饲料处理中,酶制剂的应用不仅提高了饲料的应用率还有利于畜禽的生长。
常用于饲料的酶制剂包括植酸酶、果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶、蛋白质酶。
酶制剂在饲料生产中作用巨大,有广阔的应用前景。
ɑ——淀粉酶是酶制剂中经常使用的一种,其市场需求量大,具有成熟的生产工艺。
关键词:酶制剂种类作用ɑ—淀粉酶生产工艺前景一、酶制剂的种类及作用植酸酶:是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶。
自然界的微生物(霉菌、细菌和酵母菌)能产生植酸酶,特别是曲霉菌属(微生物,如黑曲霉、无花果曲霉、米曲霉等能产生活性较高的植酸酶。
植酸酶能水解植酸而释放出无机磷。
植酸酶一般只适于在单胃动物中使用。
反刍动物由于瘤胃微生物能合成植酸酶,因此在饲料中一般不需要使用植酸酶。
纤维素酶:是一种重要的酶产品,是一种复合酶,主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成,还有很高活力的木聚糖酶活力。
纤维素酶广泛存在于自然界的生物体中。
细菌、真菌、动物体内等都能产生纤维素酶。
一般用于生产的纤维素酶来自于真菌,比较典型的有木霉属、曲霉属和青霉属。
纤维素酶种类繁多,来源很广。
不同来源的纤维素酶其结构和功能相差很大。
由于真菌纤维素酶产量高、活性大,故在畜牧业和饲料工业中应用的纤维素酶主要是真菌纤维素酶。
常见的畜禽饲料如谷物、豆类、麦类及加工副产品等都含有大量的纤维素。
除了反刍动物借助瘤胃微生物可以利用一部分外,其它动物如猪、鸡等单胃动物则不能利用纤维素。
果胶酶:是分解果胶类物质的多种酶的总称,包括原果胶酶、解聚酶和果胶酯酶(PE)等。
普遍存在于细菌、真菌和植物中,一般果胶酶由黑曲霉、根霉、盾壳酶经发酵精制而得。
淀粉酶加工技术制造高蛋白米粉黑米高蛋白米粉有较高含量的蛋白质及米糠纤维,添加适量的维生素、矿物质可以成为婴幼儿及老年人的营养辅餐食品,且具有食物纤维的功能性,具有很高的持水力,自然的甜味和轻微的坚果味,可用作面包、谷物制品、饼干、甜鲜饼及快餐食品的添加物。
通过使用淀粉酶工艺加工制造高蛋白白米粉,工艺流程如下:(一)生产工艺流程原料米→焙烤→粉碎→调浆→热糊化→液化→灭酶分离→沉积渣→干燥→粉碎→高蛋白米粉(二)操作步骤焙烤:将黑米放入远红外线烤炉进行干燥热处理,120℃的恒温持续20~30min,以钝化米皮中的过氧化酶及解酯酶等酶类,抑制其活性,杀死其中的微生物和虫类,分解天然有害成分。
粉碎:烘烤后的原料米在爪式粉碎机内粉碎,过60目筛制得米粉。
调浆糊化:原料米的成浆可采用两种工序,磨浆和干粉碎后调浆。
这两种方法各有特点,均可选择。
磨浆法粉浆细腻,易于酶解,米皮磨碎效果好,米粉产品口感较好,但控制粉浆浓度较麻烦。
干粉碎后调浆浓度较好控制,干粉又易于保存,使用较灵活,但其米粉产品略为粗糙。
经试验显示,米粉浓度过低,高蛋白米粉产量低,不但消耗大量能源,而且增加设备容量,不够经济;米粉浓度过高,则需提高酶的用量,且搅拌困难,混匀效果差。
一般而言选择米粉:水为1:5的比例调浆,充分搅拌,使米粉充分吸水。
加热米粉浆使其充分糊化,每1L米浆还加入40mL 2%的CaCl_2溶液,利用0.1mol/L的NaOH溶液调节pH至6.4左右得到糊浆。
液化:α-淀粉酶耐热性良好,但对pH变化极为敏感,pH对酶活性影响很大;pH在6.2~6.5时,酶活性最高,基产物值也最高。
液化条件为每100g米粉酶添加量0.05mL,90~95℃持续40min。
灭酶分离:在灭酶前用柠檬酸调节pH为4~5,再加热煮沸5~8min灭酶,效果最好。
灭酶后的溶液稍冷却,5000~7000 r/min离心分离。
干燥:分离后所得的固形物,放入80℃的恒温箱中,干燥至水分含量为6%~10%,再经粉碎得高蛋白米粉。
淀粉酶的生产及应用淀粉酶是一种重要的工业酶制剂,具有广泛的应用前景。
以下将就淀粉酶的生产和应用进行详细阐述。
一、淀粉酶的生产淀粉酶是通过发酵工艺生产的,主要来源于微生物、动物和植物。
1. 微生物源生产微生物源生产淀粉酶是目前主要的生产方式,常用的微生物有真菌和细菌。
常见的真菌有Aspergillus、Penicillium、Trichoderma等,常见的细菌有Bacillus、Streptomyces等。
微生物源生产淀粉酶的步骤一般为:选材→筛选高效菌株→发酵→提取淀粉酶→纯化淀粉酶。
2. 动物源生产动物源淀粉酶主要来自猪胰腺。
提取过程一般为:猪胰腺养殖→收集猪胰腺→粉碎破碎→提取淀粉酶→纯化淀粉酶。
3. 植物源生产植物源淀粉酶主要来自马铃薯、玉米等植物中。
提取过程一般为:马铃薯破碎→破菌、杀菌、酶解→提取淀粉酶→纯化淀粉酶。
二、淀粉酶的应用1. 食品工业中的应用淀粉酶在食品工业中有着广泛的应用,主要用于食品加工中的葡萄糖浆、糖化醇、果胶等的制备和糖化工艺的调控。
例如,淀粉酶可将淀粉酶解为较小的糖分子,提高食品中糖的含量,改善口感和稳定性。
此外,淀粉酶还可用于面包、饼干等面粉制品的改良,并提高其贮存性和食用品质。
2. 纺织工业中的应用淀粉酶在纺织工业中主要用于织物的整理处理,如退浆、硫酸盐还原等。
其作用是分解纺织原料中的淀粉,提高降解淀粉成分的活性和效果,从而达到改善织物的柔软度、光泽度和手感等目的。
3. 制浆造纸工业中的应用淀粉酶在造纸工业中广泛应用于原料中的淀粉和非淀粉物质的降解处理。
通过添加适量的淀粉酶,可以有效降低造纸原料中淀粉的含量,提高浆料的筛选效率和纸张的强度、光泽度等性能。
4. 医药工业中的应用淀粉酶在医药工业中主要用于药物的合成和改良。
例如,淀粉酶可以用于制备药物辅料,改变其物化性质,提高药物的稳定性和可溶性。
此外,淀粉酶还可用于药物的表面活性剂、缓释剂等的改良,提高药效和降低毒副作用。
第1篇一、引言淀粉作为一种重要的天然高分子多糖,广泛应用于食品、医药、化工、纺织、造纸等行业。
随着我国经济的快速发展,淀粉的需求量逐年增加。
淀粉的生产工艺主要包括淀粉提取、淀粉精制和淀粉改性等环节。
本文将详细介绍淀粉的生产工艺流程。
二、原料准备1. 原料选择:淀粉生产的主要原料为谷物、薯类、豆类等富含淀粉的植物。
常用的原料有玉米、小麦、土豆、红薯等。
2. 原料预处理:原料预处理包括清洗、破碎、浸泡等步骤。
清洗可去除原料表面的杂质;破碎可提高原料的出粉率;浸泡可软化原料,有利于淀粉的提取。
三、淀粉提取1. 溶解:将预处理后的原料加入适量的水,搅拌均匀,使淀粉颗粒充分吸水膨胀,形成淀粉乳。
2. 沉淀:将淀粉乳在搅拌条件下进行静置,使淀粉颗粒沉淀到底部,形成淀粉浆。
3. 洗涤:将淀粉浆进行洗涤,去除淀粉颗粒表面的蛋白质、脂肪等杂质。
4. 滤饼干燥:将洗涤后的淀粉浆进行过滤,得到滤饼。
然后将滤饼进行干燥,得到湿淀粉。
四、淀粉精制1. 精制目的:提高淀粉的纯度、降低杂质含量、改善淀粉的物理性能。
2. 精制方法:根据淀粉的用途和需求,选择合适的精制方法。
常见的精制方法有:(1)湿法精制:将湿淀粉加入适量的水,进行搅拌、加热,使淀粉颗粒充分溶解,然后通过离心分离、洗涤、干燥等步骤,得到精制淀粉。
(2)干法精制:将湿淀粉进行干燥,得到干淀粉,然后通过研磨、筛选等步骤,得到精制淀粉。
(3)化学法精制:利用化学试剂对淀粉进行精制,如酸法、碱法、氧化法等。
五、淀粉改性1. 改性目的:提高淀粉的稳定性、改善淀粉的加工性能、拓宽淀粉的应用范围。
2. 改性方法:根据淀粉的用途和需求,选择合适的改性方法。
常见的改性方法有:(1)酸改性:利用酸对淀粉进行改性,如醋酸、硫酸等。
(2)碱改性:利用碱对淀粉进行改性,如氢氧化钠、氢氧化钙等。
(3)氧化改性:利用氧化剂对淀粉进行改性,如过氧化氢、臭氧等。
(4)交联改性:利用交联剂对淀粉进行改性,如交联剂A、交联剂B等。
宜宾职业技术学院论文α-淀粉酶的生产工艺系部生物与化工工程系专业名称酿酒技术班级酿酒11103姓名王梦韵李艳梅严红俊学号201117315 201117404 201117346指导教师兰小艳二〇一二年十月二十九日α-淀粉酶的生产工艺摘要α-淀粉酶广泛分布于动物、植物和微生物中,能水解淀粉产生糊精、麦芽糖、低聚糖和葡萄糖等,是工业生产中应用最为广泛的酶制剂之一。
目前,α-淀粉酶已广泛应用于变性淀粉及淀粉糖、焙烤工业、啤酒酿造、酒精工业、发酵以及纺织等许多行业。
本次设计的淀粉酶发酵,分别以玉米粉为碳源,以豆饼为氮源,以BF-7658枯草芽孢杆菌为生产菌种,同时做出了生产工艺流程图,详细的介绍了α-淀粉酶的生产工艺。
关键词:α-淀粉酶;生产工艺设计;深层发酵法Alpha amylase production technologyAbstractAlpha amylase widely distributed in animals, plants and microbes, can be hydrolyzed starch produce dextrin, maltose, oligosaccharide and glucose and so on, it is the industrial production in the most widely used one of enzyme preparation. At present, the alpha amylase has been widely used in modified starch and starch sugar, baking industry, brewing, alcohol industry, hair leaven and textile and many other industries. The design of amylase fermentation, respectively with corn flour for carbon source, nitrogen source for bean cake, with BF - 7658 bacillus subtilis strains for the production, at the same time, make the production process flow diagram, detailed introduces the alpha amylase production technology.Keywords: Alpha amylase, Production process design; Deep fermentation前言 (1)1 α-淀粉酶的生产方法 (1)1.1 生产方法的选择 (1)1.2 α-淀粉酶培养基的制作 (3)1.2.1耐高温α-淀粉酶的生产方法 (4)1.2.2耐高温α-淀粉酶的生产原料 (4)1.2.3耐高温α-淀粉酶培养基制作 (5)1.2.4耐高温α-淀粉酶的另一种生产方法 (5)1.2.5用菌种枯草芽孢杆菌来提取耐高温α-淀粉酶 (5)2α-淀粉酶的菌种选育 (6)2.1 菌株与培养方法 (6)2.1.1 培养基 (7)2.1.2仪器设备 (7)2.2 实验方法 (7)2.2.1 细菌的分离与初步鉴定 (7)2.2.2 紫外线诱变育种 (7)2.3 诱变方法以及变异菌株的筛选 (7)3α-淀粉酶分离纯化 (8)3.1 α-淀粉酶的分离 (8)3.2 实验方法 (9)3.2.1分析和测试方法 (10)4 讨论 (10)5 结论 (10)根据淀粉酶对淀粉的水解方式不同,可将其分为α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和异淀粉酶等。
淀粉酶生产工艺
淀粉酶作为一种重要的工业酶,广泛应用于食品、医药、饲料、糖化、纺织、皮革等领域。
下面将主要介绍淀粉酶的生产工艺。
淀粉酶的生产工艺通常分为两个步骤:种子培养和发酵生产。
1. 种子培养
淀粉酶的种子一般由菌丝体制备而得,种子菌株的选取非常重要。
首先,从土壤、植物、食品中分离得到淀粉酶产生菌株,并经过传代培养筛选出优良菌株。
然后,选择合适的培养基进行菌株的预培养,以获得高活性和高产量的种子菌株。
培养基的选择要考虑到菌株的特性和经济性。
在种子培养过程中,通常采用摇瓶培养或容器培养的方式,控制好温度、pH值和氧
气供应等条件,优化菌株的生长。
2. 发酵生产
种子培养完成后,将种子菌株接种到大型发酵罐中进行发酵生产。
发酵过程需要控制好发酵温度、pH值、氧气供应和添加
剂的投放等条件。
温度:淀粉酶的产生通常在30-50°C之间,具体温度要根据菌
株的特性来确定。
温度过高或过低都会影响酶活性和产量。
pH值:淀粉酶一般在中性或微酸性环境下活性最高,一般在pH 5.0-7.0 的范围内进行发酵。
氧气供应:氧气供应对淀粉酶的产生有重要影响,因为淀粉酶
属于需要氧气的好氧菌株。
因此,在发酵过程中需要控制好氧气的供应,提供充足的氧气以促进酶的产生。
添加剂:为了提高淀粉酶的产量和稳定性,常常会在发酵过程中添加一些助产剂或诱导剂,如优质动物蛋白、磷酸盐和氨基酸等。
这些添加剂能够提供菌株合成淀粉酶所需的营养物质,增加产酶能力。
发酵时间一般为24-72小时,根据菌株的生长速率和淀粉酶产量进行调整。
发酵过程中,可以通过监测酶活性和生物量的变化来掌握发酵的进程和产酶情况。
在发酵结束后,可通过离心、超滤等技术手段将淀粉酶提取和分离出来,经过加工和精制,最终得到纯净的淀粉酶产品。
综上所述,淀粉酶的生产工艺主要包括菌株的培养和发酵生产两个步骤。
通过控制好培养条件和发酵参数,能够提高淀粉酶的产量和质量,达到产业化生产的要求。