临床生物化学试验室基本技术与管理
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生化检验习题第一章临床生物化学实验室基本技术与管理一、A型选择题1.在荧光定量分析法中,下列哪种不是影响荧光强度的因素A.荧光物质的浓度 B.溶剂的性质C.荧光物质的摩尔吸光系数D.温度E.溶液的pH值2.琼脂糖凝胶电泳用pH8.6的巴比妥缓冲液可以把血清蛋白质分成五条区带,由正极向负极数起它们的顺序是A.白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白B.白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白C.白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β-球蛋白D.α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白、白蛋白E.白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、α2-球蛋白3.在区带电泳中,能产生电荷效应和分子筛效应的固体支持介质有A.醋酸纤维素薄膜、纤维素、淀粉B.纤维素、淀粉、琼脂糖C.硅胶、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶D.淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶E.醋酸纤维素薄膜、硅胶、纤维素4.利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是A.凝胶层析法B.吸附层析法C.分配层析法D.亲和层析法E.离子交换层析法5.通过在波片或硅片上制作各种微泵、阀、微电泳以及微流路,将生化分析功能浓缩固化在生物芯片上称A.基因芯片B.蛋白质芯片C.细胞芯片D.组织芯片E.芯片实验室6.离心机砖头的旋转速度为20000γ/min的离心为A.低速离心B.平衡离心C.高速离心D.超速离心E.等密度离心7.标本条码下有10个阿拉伯数字,其中第4~5位表示A.标本号B.标本类型C.组合号D.月份E.日期8.由实验室自己配置或为商品,其中有关物质的量由参考方法定值的标准品为A.一级标准品B.二级标准品C.控制物D.参考物E.原级参考物9.经过详细的研究,没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法为A.决定性方法B.推荐方法C.参考方法D.常规方法E.对比方法10.测定恒定误差的试验是A.重复性试验B.回收试验C.线性试验D.干扰试验E.检测能力试验二.X型选择题1.酶免疫分析的基本技术组成为 A B C EA.应有高活性的酶和高质量的酶标抗体B.最佳固相载体和抗体包被技术C.最佳酶作用的底物D.通过电场来精确控制整个分析过程E.检测放大系统及再生技术2.免疫比浊测定应注意的事项为 A B C D EA.抗原或抗体量不能大大过剩 B.应维持反应管中抗体蛋白量始终过剩C.高血脂标本易受干扰D.易受环境温度和pH值的影响E.加入聚合剂可促进免疫复合物的形成3.流式细胞仪接受并分析的信号主要有 A CA.光散射讯号B.光吸收讯号C.荧光讯号D.电流讯号E.生物发光讯号4.鉴定纯酶度的常用方法是 B CA.比活力测定B.电泳分析C.免疫学分析D.活性浓度测定E.Km测定5.影响血标本成份变化的因素有 A B C D EA.生理 B.饮食 C.药物 D.溶血 E.储存6.一级标准品主要用于 A B CA.校正决定性方法 B.评价及校正参考方法 C.为次级标准品定值D.常规方法的标化 E.质量控制7.常规方法的选择在可靠性方面应具有 A B EA.较高的检测精密度 B.较大的检测能力 C.较低的检测费用D.较快的检测速度 E.较好的检测准确度8.方法比较试验测定的是侯选方法的 B C EA.偶然误差 B.比例误差 C.恒定误差 D.总误差 E.系统误差9.临床生化检验方法的性能标准应 C D EA.由临床医学家研究制定 B.由临床化学家研究制定C.由临床医学家和临床化学家共同制定 D.反映临床应用与解释结果的要求E.基本符合实验室所能达到的技能状态10.方法的性能标准也称分析目标,应根据不同的应用目的而异;由下列决定C DA.参考值 B.参考范围 C.医学决定水平 D.允许分析误差E.临床特异度三.名词解释题1.亲和层析法是利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力,从而达到分离目的的一类特殊层析技术;2.电化学分析法利用物质的电化学性质,测定化学电池的电位、电流或电量的变化进行分析的方法;3.均相EIA 主要通过酶标抗原同抗体结合形成酶标记的免疫复合物,改变了标记酶的活性,通过催化底物呈色反应,测定酶活性变化,即可推算出被测样品中待测抗原含量的方法;4.流式细胞术是综合光学、流体力学、电子计算机技术,利用荧光素产生荧光的特点,快速灵敏的对单个细胞进行多参数定量测定和分选的技术;5.生物芯片是通过微加工技术和微电子技术在固格体芯片表面构建的微型生化分析系统;四.问答题1.所谓光谱分析影响光谱分析的主要因素有哪些利用各种化学物质所具有的发射、吸收或散射光谱谱系的特征,来确定其性质、结构或含量的技术,称为光谱分析技术;光谱分析的基础是被测物质的浓度与吸光度成正比,导致误差的主要原因有①化学因素,是指被测溶液不遵守光吸收定律所引起的误差;②主观因素,是由于操作不当所致;③光学因素,主要是指分析仪器的性能低劣所引起的误差;2.什么叫摩尔吸光系数检测法Beer定律的数学表达式为A=kbc,式中的c为1mol/L,b为1cm时,则系数k称为摩尔吸光系数,以ε表示,A=kbc可写为A=εC;把被测物稀释成适当浓度时测定吸光度,利用被测物的摩尔吸光系数进行运算的方法;许多脱氢酶活性的测定以及用脱氢酶作指示酶的代谢物测定大多采用这种方法;第二章血浆蛋白质以及非蛋白含氮化合物的代谢紊乱一、 A型题1.血浆白蛋白下降见于很多病理情况,但除外A .手术后 B.吸收功能紊乱 C.营养不良 D.肾病综合征 E.急性肝炎早期2.白蛋白作为血浆载体蛋白,以下哪项特性错误A.等电点4.7左右B.带许多负电荷C.能结合Ca2+、Mg+2、Cu2+等正离子D.能运载水溶性好的物质E.能运载胆汁酸、类固醇激素、长链脂肪酸等3. AAT的遗传表型以哪型最多A PiMM B. PiSS C. PiMS D. PiSZ E. PiZZ4.以下哪项不是急性时相反应蛋白A. ALBB. AAGC. HPD. C3E.LDL5.在急性时相反应中,以下哪项蛋白不增高A. HPB. CRPC. AAGD. ALBE. Cp6.在急性时相时升高最早的是哪种蛋白A. CpB. TRFC. AAGD. CRPE. AMG7.哪项蛋白减少与肝功能不全无关A.白蛋白B.转铁蛋白C.前白蛋白D.α2巨球蛋白E.α1酸性糖蛋白8.诊断有无缺铁性贫血可检测以下哪项指标A. AATB. AAGC. TRFD. HPE. AMG9.血管内溶血时浓度下降的是哪项指标A. AATB. AAGC. TRFD. HPE. AMG10.年青肺气肿者,可能为哪项蛋白缺陷A. ALBB. AAGC. HPD. AMGE. AAT二、 X型题1. 以下哪些是血浆蛋白质的功能A 营养作用B 维持血浆胶压C 运输载体D 代谢调控E 免疫防御2. 属于α1 区带的血浆蛋白质有A AAGB AFPC HDLD CpE AAT3. 属于α2区带的血浆蛋白质有A HPB AMGC CpD AFPE TRF4. 属于β区带的血浆蛋白质有A TRFB LDLC β2mGD C3E C45. 属于γ区带的血浆蛋白质有A IgAB IgGC IgMD CRPE Fg6. 肾病综合征患者血清蛋白各电泳区带常有的变化是A ALB降低B α1降低C α2升高D β升高E γ降低7. 肝硬化患者血清蛋白各电泳区带常有的变化是A ALB降低B α1降低C α2升高D β升高E γ升高8. 浆细胞病患者检测血清蛋白的常有变化是A ALB降低B α1降低C α2升降低D γ升高E 总蛋白升高9. 蛋白质浓度测定可基于下述哪些结构和性质A 重复的肽链结构B 酪氨酸和色氨酸对酚试剂的反应C 与色素结合的能力D 酪氨酸和色氨酸对紫外光的吸收E 沉淀后形成的浊度10.哪个方法测定蛋白质需要较纯的蛋白质样品A 凯氏定氮法B 双缩脲法C 比浊法D 紫外分光光度法E 染料结合法三、名词解释题1.M蛋白为浆细胞病患者异常浆细胞克隆增殖,而产生的大量单一的免疫球蛋白或其轻链或重链片段,病人血清或尿液中的M蛋白在蛋白电泳时呈现一条色泽深染的窄区带;2.C反应蛋白在急性炎症病人血清中出现的可以结合肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质,是急性时相反应时极灵敏的指标,升高早且程度高;3.急性时相反应蛋白在炎症性疾病如手术、创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等情况下,血浆中一系列浓度发生变化的蛋白质的总称,其中大部分蛋白质如AAT、AAG、Hp、Cp、CRP、C3和C4等浓度升高,PA、ALB和TRF等浓度下降;这些血浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白4.血浆运载蛋白在血浆中能结合其他物质并对之起运输载体作用的蛋白质,如ALB、PA、HDL、LDL、TRF等;5.前清蛋白由肝细胞合成、分子量比清蛋白小,电泳位置在清蛋白之前的蛋白质,主要起运输载体和营养蛋白作用;四、问答题1.肝硬化、肾病综合征和M蛋白血症患者血清蛋白电泳有何特征肝硬化:ALB下降,γ带升高,甚至出现β-γ桥;肾病综合征:ALB下降,γ带不变或下降,α2和β带尤其是α2带显着升高;M蛋白血症:ALB下降,出现一个色泽深染的窄区带即M蛋白带,多位于γ带之中,也可出现在α或β带;2.请述人体蛋白质及血浆蛋白质的功能,缺乏蛋白质对机体可产生哪些影响人体蛋白质几乎在所有的生理过程中都起着关键作用,包括肌肉收缩蛋白的作用,载体蛋白对血浆和细胞内外物质的转运,酶催化作用,众多多肽和蛋白质激素的代谢调节,抗体、补体等免疫防御,凝血因子的血液凝固,等等;血浆蛋白质作用为营养修补、维持胶压、运输载体、缓冲pH、抑制蛋白酶、酶催化、代谢调控、参与凝血纤溶和免疫防疫等;机体若缺乏蛋白质,会发生一系列生化改变、病理改变和临床表现:肠粘膜和消化腺较早累及,肝脏不能维持正常结构和功能而出现脂肪浸润,血浆蛋白合成发生障碍,酶活性降低,肌肉萎缩,抗体合成减少对传染病抵抗力下降,肾上腺皮质功能减退而难以克服应激状态,胶原合成障碍使伤口不易愈合,儿童骨骼生长缓慢、智力发育障碍等;3.血清蛋白醋纤膜电泳的五个蛋白区带各含哪些主要蛋白质4.血清白蛋白有哪些功能,测定血清白蛋白有哪些临床意义5.请述测定总蛋白六种方法的方法性能特点及其适用范围;第三章糖代谢紊乱一、A型题:1. 胰岛素由何种细胞分泌A. 胰岛α细胞B. 胰岛β细胞C. 胰腺δ细胞D. 胰岛α细胞和β细胞E. 皆不是2. 胰岛素的化学本质是A. 蛋白质B. 类固醇C. 氨基酸衍生物D. 脂肪酸衍生物E. 核苷酸3. 胰岛素在体内的生物半寿期为A. 5~10秒钟B. 5~10分钟C. 5~10小时D. 5~10天E. 5~10月4. 胰岛素样生长因子IGF的化学本质是A. 多肽B. 脂肪酸衍生物C. 氨基酸衍生物D. 儿茶酚胺E. 类固醇5. 有关1型糖尿病的叙述错误的是A. 胰岛β细胞的破坏B. 胰岛素绝对不足C. 常见于青少年D. 常检出自身抗体E. 胰岛素抵抗6. 有关2型糖尿病的叙述错误的是A. 胰岛β细胞的功能减退B. 胰岛素相对不足C. 常见于肥胖的中老年成人D. 常检出自身抗体E. 胰岛素抵抗7. 有关果糖胺的叙述错误的是A. 主要是测定糖化清蛋白B. 所有糖化血清蛋白都是果糖胺C. 反映过去2~3周的平均血糖水平D. 可替代糖化血红蛋白E. 是糖尿病近期控制水平的监测指标8. 当血糖超过肾糖阈值时,可出现A. 生理性血糖升高B. 病理性血糖升高C. 生理性血糖降低D. 病理性血糖降低E. 尿糖9. 测定血糖的标本最常采用的抗凝剂和防腐剂组合是A. 碘乙酸钠-EDTA.Na2B. 叠氮钠-肝素锂C. 氟化钠-草酸钾D. 氟化钠-肝素钠E. 冰醋酸-肝素10. 随机血糖的参考值范围为A. 2.8~7.8mmol/LB. 3.89~6.11mmol/LC. 4.5~5.9mmol/LD. 7.0~11.1mmol/LE. <11.1mmol/L二、B型题:A. 己糖激酶法B. 葡萄糖氧化酶法C. Follin-Wu法D. 邻甲苯胺法E. 同位素稀释-质谱分析法1. 血糖测定的常规方法是 B2. 血糖测定的参考方法是 AA. 尿硝酸盐B. 血浆白蛋白C. 尿酮体D. 全血乳酸E. 胰岛素抗体3. 怀疑糖尿病酮症酸中毒时需检测 C4. 1型糖尿病常伴有哪一指标阳性 E5. 怀疑糖尿病乳酸酸中毒时需检测 D三、X型题:1. 影响糖代谢的激素有 ABCDEFGA. 胰岛素B. 胰高血糖素C. 肾上腺素D. 生长激素E. 皮质醇F. 甲状腺激素G. 生长抑素2. 升高血糖的激素有 .BCDEA. 胰岛素B. 胰高血糖素C. 肾上腺素D. 生长激素E. 皮质醇F. 甲状腺激素G. 生长抑素3. 胰高血糖素的生理作用有 ABCDA. 促进肝糖原分解B. 促进糖异生C. 促进脂肪动员D. 促进肝脏生成酮体E. 抑制胰岛素释放4. 最新的按病因将糖尿病分为以下几类 .CDEFA.Ⅰ型糖尿病B.Ⅱ型糖尿病C. 1型糖尿病D. 2型糖尿病E. 特殊类型的糖尿病F. 妊娠期糖尿病G. 糖耐量异常5. 有关糖化血红蛋白的叙述正确的是 ABCDA. 包括HbA1和HbA0B. 糖化血红蛋白的形成是不可逆的C. 反映过去6~8周的平均血糖水平D. 用胰岛素治疗的糖尿病人,应将糖化血红蛋白作为常规检测指标E. 是最长期的糖尿病控制指标6. 先天性缺乏哪些酶可引起糖代谢的先天性异常 ABCA. 1-磷酸半乳糖苷转移酶B. 果糖激酶C. 葡萄糖6-磷酸酶D. 肌酸激酶E. LDH7. 胰岛素对糖代谢调节的主要作用有 ABCDEA. 促进肌肉、脂肪细胞摄取葡萄糖B. 促进糖原合成,减少糖原分解C. 促进糖氧化分解,加速糖的利用D.促进糖转变为脂肪,减少脂肪分解E. 抑制糖异生作用8. 具有促进糖异生作用的激素有 BCDEA. 胰岛素B. 胰高血糖素C. 肾上腺素D. 糖皮质激素E. 生长激素四、名词解释:1糖尿病是一组由于胰岛素分泌不足或和胰岛素作用低下而引起的代谢性疾病,高血糖是其特征;长期高血糖将导致多种器官的损害、功能紊乱和衰竭,尤其是眼、肾、神经、心脏和血管系统;两种病理过程参与糖尿病的发病机制:胰腺细胞的自身免疫性损伤及机体对胰岛素的作用产生抵抗;2.妊娠期糖尿病指在妊娠期间任何程度的糖耐量减退或糖尿病发作;3. 低血糖指血糖浓度低于空腹参考水平下限;低血糖由多种原因引起,其症状主要是由交感神经兴奋和脑缺血所致,临床分为空腹性低血糖和反应性低血糖;其诊断主要依据多次连续测定空腹血浆葡萄糖浓度或在发作时测定血糖和OGTT、胰岛素和C肽等其他相关指标;4.反应性低血糖一种临床疾病,病人在日常生活中有餐后症状,毛细血管血或动脉血浆葡萄糖浓度低于2.5~2.8mmol/L;五、问答题:1. 简述2001年颁布的糖尿病诊断标准;1出现糖尿病症状加上随机静脉血浆葡萄糖浓度≥11.1mmol/L;2空腹至少8h内无含热量食物的摄入静脉血浆葡萄糖浓度≥7.0mmol/L;3OGTT中2h静脉血浆葡萄糖浓度≥11.1mmol/L;其中任何一项阳性时,随后再复查三项中任一项阳性可确诊;2. 简述在糖尿病的临床诊断上检测C肽比胰岛素好的理论依据胰岛素原被分解为胰岛素与31个氨基酸的C肽,二者以等摩尔数分泌入血,C肽虽然没有生物学活性但对于保证胰岛素的正常结构是必需的;C肽的半寿期约35min,比胰岛素更长,且其降解不在肝脏而在肾脏,肝脏的代谢可以忽略,所以与外周血胰岛素浓度相比,可更好地反映胰岛β细胞功能;而且C肽不受外源性胰岛素干扰,也不与胰岛素抗体反应;第四章血浆脂蛋白及其代谢紊乱一、A型选择题1. 下列各种脂蛋白中,脂质含量最多的脂蛋白是A CMB VLDLC LDLD HDL2. 下列各种脂蛋白中,蛋白质含量最多的脂蛋白是A CMB β-脂蛋白C 前β-脂蛋白D α-脂蛋白3. 下列各种脂蛋白中,能够抑制纤溶酶活性的脂蛋白是A VLDLB LDLC HDLD Lpa4. HDL中存在的主要载脂蛋白是A ApoAB ApoB100C ApoCD ApoE5. LDL中存在的主要载脂蛋白是A ApoAB ApoB100C ApoCD ApoE6. 下列哪一项是肝脏清除胆固醇的主要方式A 转变成类固醇B 转变成维生素DC 在肝细胞内转变成胆汁酸D 合成低密度脂蛋白7. 下列关于Lpa叙述错误的是A Lpa是动脉粥样硬化性疾病的独立危险因子B Lpa在脂蛋白电泳时属于β-脂蛋白部分C Apo a与纤溶酶原具有高度同源性D Apo a可从Lpa上脱落下来,剩下不含Apoa仅含ApoB100的颗粒称LDL8. 下列哪种脂蛋白可以将肝脏合成的内源性胆固醇运转至肝外组织A CMB VLDLC LDLD HDL9. 下列哪种脂蛋白参与胆固醇的逆向转运A CMB VLDLC LDLD HDL10. 人群中ApoE可有几种不同的表型A 3种B 4种C 5种D 6种二、X型选择题1. 正常人空腹12小时后抽血做血清脂蛋白电泳,会出现哪几条电泳谱带BCDA CMB β-脂蛋白C 前β-脂蛋白D α-脂蛋白2. 下列哪几项是载脂蛋白的功能ABCDA 构成并稳定脂蛋白的结构B 修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性C 作为脂蛋白受体的配体D 参与脂蛋白代谢过程3. ApoE具有基因多态性,常见的异构体有BCDA E1B E2C E3D E44. 下列哪几项是ApoE的生理功能 ABCA 是LDL受体的配体和肝细胞CM残粒受体的配体B 具有基因多态性,与个体血脂水平及动脉粥样硬化发生发展密切相关C 参与激活水解脂肪的酶类,参与免疫调节及神经组织的再生D 参与胆固醇的逆向转运5. 目前研究得最详尽的脂蛋白受体有ABDA LDL受体B VLDL受体C HDL受体D 清道夫受体6. LDL受体的配体是BDA 含ApoA的脂蛋白B 含ApoB100的脂蛋白C 含ApoC的脂蛋白D 含ApoE的脂蛋白7. 下列哪些是清道夫受体的配体ABCDA 修饰的LDLB 某些磷脂C 细菌脂多糖D 多聚次黄嘌呤核苷酸8. 下列哪些酶是HDL代谢中的关键酶,对HDL的产生与转化有重要的作用ABDA LPLB HLC ALPD LCAT9. 根据1970年世界卫生组织对高脂蛋白血症的分型方案,对脂代谢紊乱患者血清标本需进行哪些检测,才能确定其分型 ABCDA 测定血清胆固醇浓度B 测定血清甘油三酯浓度C 血清脂蛋白电泳图谱分析D 血清置于4℃过夜后,观察血清混浊程度10. 某实验室收到一个血标本,经离心后上层血清呈云雾状浑浊,其原因是可能由于 BCA 胆固醇增高B 甘油三酯增高C 乳糜微粒存在D 磷脂增高三、名词解释1. 血脂血浆脂类简称血脂,包括游离胆固醇、胆固醇酯、磷脂、甘油三酯、糖酯、游离脂肪酸等,无论是外源性或内源性脂类均以脂蛋白复合体形式在血液循环中运输;2. 载脂蛋白脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白;它构成并稳定脂蛋白的结构,修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性,还可以作为脂蛋白受体的配体,参与脂蛋白与细胞表面脂蛋白受体的结合及其代谢过程;3. LDL受体途径LDL或其他含ApoB100、E的脂蛋白如VLDL、β-VLDL均可与LDL受体结合,内吞入细胞使其获得脂类,主要是胆固醇,这种代谢过程称为LDL受体途径;该途径依赖于LDL受体介导的细胞膜吞饮作用完成;4. SRCR清道夫受体富含半胱氨酸域;是I型清道夫受体C-端侧特异域肽段,该段富含半胱氨酸;清道夫受体的8个半胱氨酸有6个在此范围,半胱氨酸的二硫键交联而成的区域非常紧密、牢固,形成球状,足以经受细胞外环境的影响,属于细胞外区域;5. 胆固醇的逆转运周围组织细胞膜的游离胆固醇与HDL结合后,被LCAT酯化成胆固醇酯,移入HDL核心,并通过CETP转移给VLDL、LDL,再被肝脏LDL及VLDL受体摄取入肝细胞,以完成胆固醇从周围末梢组织细胞经HDL转运到肝细胞的过程,称之为胆固醇的逆转运;四、问答题1. 试用超速离心技术对血浆脂蛋白进行分类;答:超速离心法是根据各种脂蛋白在一定密度的介质中进行离心时,因漂浮速率不同而进行分离的方法;脂蛋白中有多种比重不同的蛋白质和脂质,蛋白质含量高者,比重大,相反脂类含量高者,比重小;从低到高调整介质密度后超速离心,可依次将不同密度的脂蛋白分开;通常可将血浆脂蛋白分为乳糜微粒CM、极低密度脂蛋白VLDL、低密度脂蛋白LDL和高密度脂蛋白HDL等四大类;2. 试用电泳技术对血浆脂蛋白进行分类;答:由于血浆脂蛋白表面电荷量大小不同,在电场中,其迁移速率也不同,从而可用电泳方法将血浆脂蛋白分为乳糜微粒、β-脂蛋白、前β-脂蛋白和α-脂蛋白等四种;α-脂蛋白中蛋白质含量最高,在电场作用下,电荷量大,分子量小,电泳速度最快;CM的蛋白质含量很少,98%是不带电荷的脂类,特别是甘油三酯含量最高,在电场中几乎不移动,所以停留在原点,正常人空腹血清在一般电泳谱带上无乳糜微粒;第五章诊断酶学一、A型题1.转氨酶的作用需下列哪一种维生素A.烟酸B.泛酸C.硫胺素D.磷酸吡哆醛E.四氢叶酸2.酶促反应进程曲线通常可用于确定A.酶反应线性范围B.适宜的pHC.适宜的酶量范围D.反应线性的时间范围E.底物的浓度3. SI制中酶活性单位为A.U/LB.KatalC.g/LD.ml/LE.pmol4.下列哪一种辅因子的生成可通过测定340nm处吸光度的降低数来表示A.FADH2B.NAD+C.NADH+D.FMNE.NADPH5.人体含ALT最丰富的组织是A.肝细胞B.心肌C.骨骼肌D.红细胞E.肾脏6.用ACP诊断前列腺疾病时,为防止红细胞干扰,应加入何种抑制剂A.苯丙氨酸B.L-酒石酸C.尿酸D.EDTAE.L-半胱氨酸7.为保证酶动力学分析,要求底物浓度必须是A.>Km值10倍以上B.与Km值相同C.等于1/2Km值D.<1/2Km值E.<1/10Km值8.LD测定的全部方法中,所必需的物质是A.丙酮酸B.2,4-二硝基苯肼C.乳酸D.NAD+或NADHE.氢氧化钠9.急性心肌梗死时,最先恢复正常的酶是A.ALTB.LDC.CKD.ASTE.ALP10.血清肌酸激酶比色法,即利用磷酸肌酸+ADP→肌酸+ATP反应测定肌酸生成量,在试剂中加入半胱氨酸,其目的是A.激活剂B.调整缓冲液的pHC.维持缓冲液的pH稳定D.提供-SHE.提供高能磷酸基团二、B型题A.ASTB.LDC. α-HBDD.CKE.ACP1.急性心肌梗死时,最先恢复正常的血清酶是 D2.对前列腺癌诊断价值最大的血清酶是 EA.LD2>LD1>LD3>LD4>LD5B.LD5>LD1>LD2>LD3>LD4C.LD3>LD1>LD2>LD4>LD5D.LD1>LD2>LD3>LD4>LD5E.LD4>LD1>LD2>LD3>LD53.正常成人血清LD同工酶电泳结果为 A4.急性心肌梗死发作后9h后血清LD同工酶电泳结果为 DA. ALT和ASTB. ALP和CKC. AMY和LPSD. AST和AMYE. CK和CK-MB5.多用于急性心肌梗死诊断的酶是 E6.多用于肝脏疾患诊断的酶是 A7.多用于骨疾患诊断的酶是 B8.多用于胰腺炎诊断的酶是 CA. Ca2+B. Fe2+C. Cl-D. Zn2+ E .Mg2+9.激酶参与的酶促反应需要哪种离子参加 E10.碱性磷酸酶和羧基肽酶A整体结构中含 D11.能加速淀粉酶反应的离子为 C三、X型题1.ACP与ALP的区别在于 ABDEA.最适pH不同B.组织来源不同C.所作用的底物种类相近D.缓冲液种类不同E.稳定性不同2.标本溶血对下列哪些酶测定结果有影响 ABCDA. CKB. LDC. ALTD. ASTE. GGT3.下列哪些组织器官在病理情况下血清及尿液中淀粉酶可增高 BDA.肾脏B.胰腺C.肺脏D.唾液腺4.下列哪项是CK的变异体 .ADA.巨CK1B.CK-MBC.CK-MMD.巨CK2E.CK-BB5.下列酶中具有酶原形式的酶有 ABEA.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.ALTD. ALPE.糜蛋白酶6.连续监测法进行酶学测定中常见的干扰因素有 ABCDEA.样本本身含有其它酶和物质干扰B.工具酶中混有其它酶的污染C.非酶反应的干扰D.分析容器的污染E.沉淀形成7. 影响血清酶的生理变异的因素有 ABCDEA.性别B.年龄C.进食D.运动E.妊娠与分娩四、名词解释1.米氏常数Km Km是酶反应速度为最大速度一半时的底物浓度;一般在10-6~10-2mol/L之间;Km是酶的特征性常数之一,只与酶的性质有关,而与酶浓度无关;2."酶胆分离"现象重症肝炎时血中ALT常逐渐下降,而胆红素却进行性升高,出现所谓"酶胆分离"现象,是肝坏死的前兆;3.同工酶同工酶是同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体,具有相同的催化功能,但其分子组成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布和细胞内定位不同的一类酶;4.同工酶亚型某些酶或同工酶从组织进入体液后,可进一步变化为数个不同类型即所谓"亚型isoform"; 即指基因在编码过程中由于翻译后修饰的差异所形成的多种形式的一类酶;亚型往往在基因编码产物从细胞内释入血浆时因肽酶作用降解而形成;5.零级反应期在酶反应的最初阶段,底物常处于过量状态,产物的增加与时间成正比,而与底物浓度无关的这段时间;五、问答题1.根据米-曼式方程计算,当S=3Km时,其反应速度V为多大V=VmS/Km+S=Vm3Km/Km+3Km=3/4Vm=0.75Vm,即V/Vm=0.75 ;。
物化生专业的实验室设备与技术要求实验室是物化生专业的重要学习和研究场所,为了保证实验室工作的顺利进行,合适的实验室设备和技术要求至关重要。
本文将着重介绍物化生专业实验室所需要的设备和技术要求。
一、设备要求1. 基本实验仪器:物化生专业实验室需要配备一系列基本实验仪器,如酸碱度计、天平、显微镜、离心机、恒温器等。
这些仪器是进行实验的基础工具,能够帮助学生进行各种实验操作和数据采集。
2. 分析仪器:物化生实验室还需要配备各类分析仪器,如气相色谱仪、液相色谱仪、质谱仪等。
这些仪器在物质分析和鉴定方面具有重要作用,能够提供准确的实验结果和数据。
3. 生化实验设备:物化生专业的实验室还需要配备一些生化实验设备,如PCR仪、DNA测序仪等。
这些设备可以用于生物学和生物化学的研究,对于分子生物学的实验有着重要的应用价值。
二、技术要求1. 安全技术要求:实验室是一个高风险的环境,安全要求是实验室工作的重中之重。
物化生实验室需要学生和教师具备基本的实验室安全意识,熟悉各类实验仪器的安全操作规程,并遵守实验室的安全管理制度。
2. 实验技术要求:物化生实验室需要学生具备一定的实验技术,包括实验操作技能和实验数据处理分析能力。
学生应该学会正确使用各类实验仪器,掌握实验的方法和步骤,并能独立进行实验操作和数据分析。
3. 仪器维护要求:物化生实验室的仪器设备需要定期进行维护和保养,以确保其正常运行和准确性。
学生和教师应该学会仪器的基本维护方法,并配合实验室管理人员做好仪器的维修和更新工作。
物化生专业的实验室设备和技术要求对于学生的实验能力培养和科研工作具有重要意义。
只有具备了一定的实验操作技能和仪器使用能力,学生才能够更好地进行实验研究,并取得好的实验成果。
因此,学校和实验室管理部门应该重视实验室设备的购置和维护,并关注学生的实验技能培养,为物化生专业学生提供良好的实验环境和条件。
实验室管理规章制度生物第一章总则第一条为了规范实验室管理,提高实验室工作效率,保障实验室安全,特制定本规章制度。
第二条本规章制度适用于实验室内所有工作人员,包括研究人员、技术人员、实验室管理员等。
第三条实验室应当遵守国家相关法律法规、标准和规范,保证实验室工作的正常运行。
第四条实验室内所有设备设施的使用、维护和管理应当按照规定进行,不得私自调整或损坏设备设施。
第五条实验室内所有实验材料和设备的采购、管理和使用应当符合相关规定,不得擅自挪用或浪费。
第六条实验室应当建立健全安全管理制度,确保实验人员的人身安全和实验室设施的安全。
第七条实验室内所有工作人员应当具备相应的技术能力和专业知识,严守实验室纪律,保持良好的工作态度。
第八条实验室管理员应当负责协调实验室工作,监督实验室内各项事务的落实,并定期进行检查和评估。
第九条实验室内所有工作人员应当积极开展科研活动,提升自身技术水平,为实验室的发展和进步做出贡献。
第二章实验室安全管理第十条实验室内严禁吸烟、喧哗和私自带食物,保持实验室内环境整洁,确保工作的正常进行。
第十一条实验室内所有工作人员应当穿着符合要求的工作服装,戴好防护用具,注意个人安全防护。
第十二条实验室内应当建立完善的应急预案,定期进行演练,以确保在突发事件发生时能够迅速有效地应对。
第十三条实验室内所有实验材料和废弃物应当按照规定分类存放和处理,不得随意倾倒或弃置。
第十四条实验室内所有实验操作应当严格按照操作规程进行,避免因操作不当导致事故的发生。
第十五条实验室内所有设备设施的使用和维护应当由专人负责,定期进行检查和维护,确保设备设施的正常使用。
第十六条实验室内应当定期进行安全检查和评估,发现安全隐患及时整改,确保实验室安全稳定。
第三章实验室设备管理第十七条实验室内所有设备设施的采购应当按照规定程序进行,确保设备设施符合相关要求。
第十八条实验室内所有设备设施的维护保养应当按照规定的周期和标准进行,确保设备设施的正常使用。
生化检验习题第一章临床生物化学实验室基本技术与管理一、A型选择题1.在荧光定量分析法中,下列哪种不是影响荧光强度的因素()A.荧光物质的浓度B.溶剂的性质C.荧光物质的摩尔吸光系数D.温度E.溶液的pH值2.琼脂糖凝胶电泳用pH8.6的巴比妥缓冲液可以把血清蛋白质分成五条区带,由正极向负极数起它们的顺序是()A.白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白B.白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白C.白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β-球蛋白D.α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白、白蛋白E.白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、α2-球蛋白3.在区带电泳中,能产生电荷效应和分子筛效应的固体支持介质有()A.醋酸纤维素薄膜、纤维素、淀粉B.纤维素、淀粉、琼脂糖C.硅胶、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶D.淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶E.醋酸纤维素薄膜、硅胶、纤维素4.利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是()A.凝胶层析法B.吸附层析法C.分配层析法D.亲和层析法E.离子交换层析法5.通过在波片或硅片上制作各种微泵、阀、微电泳以及微流路,将生化分析功能浓缩固化在生物芯片上称()A.基因芯片B.蛋白质芯片C.细胞芯片D.组织芯片E.芯片实验室6.离心机砖头的旋转速度为20000γ/min的离心为()A.低速离心B.平衡离心C.高速离心D.超速离心E.等密度离心7.标本条码下有10个阿拉伯数字,其中第4~5位表示()A.标本号B.标本类型C.组合号D.月份E.日期8.由实验室自己配置或为商品,其中有关物质的量由参考方法定值的标准品为()A.一级标准品B.二级标准品C.控制物D.参考物E.原级参考物9.经过详细的研究,没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法为()A.决定性方法B.推荐方法C.参考方法D.常规方法E.对比方法10.测定恒定误差的试验是()A.重复性试验B.回收试验C.线性试验D.干扰试验E.检测能力试验二.X型选择题1.酶免疫分析的基本技术组成为(A B C E )A.应有高活性的酶和高质量的酶标抗体B.最佳固相载体和抗体包被技术C.最佳酶作用的底物D.通过电场来精确控制整个分析过程E.检测放大系统及再生技术2.免疫比浊测定应注意的事项为(A B C D E )A.抗原或抗体量不能大大过剩B.应维持反应管中抗体蛋白量始终过剩C.高血脂标本易受干扰D.易受环境温度和pH值的影响E.加入聚合剂可促进免疫复合物的形成3.流式细胞仪接受并分析的信号主要有(A C )A.光散射讯号B.光吸收讯号C.荧光讯号D.电流讯号E.生物发光讯号4.鉴定纯酶度的常用方法是( B C )A.比活力测定B.电泳分析C.免疫学分析D.活性浓度测定E.Km测定5.影响血标本成份变化的因素有(A B C D E )A.生理B.饮食C.药物D.溶血E.储存6.一级标准品主要用于(A B C )A.校正决定性方法B.评价及校正参考方法C.为次级标准品定值D.常规方法的标化E.质量控制7.常规方法的选择在可靠性方面应具有(A B E )A.较高的检测精密度B.较大的检测能力C.较低的检测费用D.较快的检测速度E.较好的检测准确度8.方法比较试验测定的是侯选方法的(B C E )A.偶然误差B.比例误差C.恒定误差D.总误差E.系统误差9.临床生化检验方法的性能标准应(C D E )A.由临床医学家研究制定B.由临床化学家研究制定C.由临床医学家和临床化学家共同制定D.反映临床应用与解释结果的要求E.基本符合实验室所能达到的技能状态10.方法的性能标准也称分析目标,应根据不同的应用目的而异。
・实验教学 - 126 -2017年10月下 第20期(总第422期)10.3969/j.issn.1671-489X.2017.20.0126加强生物化学实验课管理的体会*◆丁航 李彩虹 马卫列 张志珍摘 要 为适应高等教育的发展和对人才培养目标的需求,高等医学院校需要培养基础知识扎实、动手和适应能力强,具有较强实践技能和创新精神的高素质应用型人才。
实验教学在生物化学课程教学中占有重要地位,是关系到能否实现医学本科生培养目标的一个重要因素,必须加强对实验课程的管理,保证生物化学实验教学质量。
关键词 生物化学;实验管理;实验室中图分类号:G642 文献标识码:B 文章编号:1671-489X(2017)20-0126-03Experience in Strengthening Management of Biochemistry Ex-periment Course //DING Hang, LI Caihong, MA Weilie, ZHANG ZhizhenAbstract Medical colleges and universities are supposed to train high-quality innovative practical talents with a solid foundation of professional knowledge, high adaptability and considerable practical skills. The attainment of this goal depends in part on the laboratory teaching of biochemistry. Therefore, it’s imperative to strengthen the management of experimental courses to ensure effective laboratory teaching of biochemistry.Key words biochemistry; experimental management; laboratory1 前言生物化学是医学本科生一门重要的基础课程,由于其理论教学内容抽象复杂,记忆内容多,学生普遍感觉难以理解、记忆和学习。
生化检验实训室管理制度第一章总则第一条为了规范生化检验实训室管理,保障实验室的正常运行,提高实验室的管理水平和服务质量,特制定本管理制度。
第二条生化检验实训室是临床医学专业学生进行实验教学的场所,必须严格执行实验室管理规范,确保实验室的安全和效率。
第三条实验室管理贯穿于实验室日常工作的全过程,涉及实验室设备、仪器、试剂、耗材的采购、保管、使用和维护等方面。
第四条实验室管理应遵循科学、规范、严谨、公正、文明的原则,保证实验室的环境卫生、设备安全、教学秩序。
第五条实验室管理应当按照国家法律法规和学校相关规定,加强对实验室人员的管理和培训,提高实验室服务水平和人员素质。
第二章实验室管理组织机构第六条实验室管理委员会是实验室管理的最高决策机构,由实验室主任、副主任及实验室相关负责人组成。
第七条实验室管理委员会负责编制实验室发展规划与年度实验计划,确定实验室各项管理政策和制度。
第八条实验室管理办公室负责日常管理工作的具体执行,具体实行实验室管理委员会的决策。
第九条实验室管理委员会成员应当按时参加会议,认真履行职责,确保实验室管理工作顺利进行。
第十条实验室管理办公室人员应当严格执行实验室各项管理规定,保证实验室的正常运转及教学工作的顺利进行。
第三章实验室设备管理第十一条实验室设备的采购应当按照学校招标采购规定,确保设备的质量和性能符合实验室教学的需求。
第十二条实验室设备的保养维护应当由专业维修人员进行,确保设备的安全使用。
第十三条实验室设备的存放应当分类摆放,注明设备名称、型号、数量等信息,保持设备的整洁和易查。
第十四条实验室设备的借用应当填写借用单,经有关负责人签字确定后方可借用,并按时归还,确保设备的合理利用。
第十五条实验室设备的报废管理应当根据设备的实际情况报废处理,并填写报废单,办理相关手续,确保设备的安全处理。
第四章实验室试剂管理第十六条实验室试剂的采购应当按照学校采购政策,选购质量稳定、来源可靠的试剂,确保实验室教学的准确性。
学校生物实验室管理规则范文一、实验室进出规定1. 所有进入实验室的人员必须佩戴实验室提供的个人防护装备,包括实验室专用的实验服、手套、护目镜等。
进入实验室时,应注意保持安静,避免影响其他人员的实验工作。
2. 在进入实验室之前,必须接受实验室安全培训,并了解实验室的安全规章制度。
3. 实验室内不得携带食品、饮料等与实验无关物品。
进入实验室前,应将个人物品妥善放置在指定的地方。
4. 实验室内严禁吸烟,禁止使用明火。
5. 实验室内不得随意更改实验装置,不得私自借用他人实验器材。
二、实验室安全规定1. 实验室内必须保持干净整洁。
实验过程结束后,应将实验台面、地面等清理干净,无论是否有实验室助手或实验员在场,都应自觉完成实验台面、地面的清扫工作。
2. 使用化学试剂时,必须按照实验操作规程,正确佩戴个人防护装备,并在通风良好的条件下进行。
遇到有毒、易燃、易爆等危险物质时,必须严格按照安全操作规程进行处理。
3. 实验室内严禁进行非实验活动,严禁在实验台上进食、喝水,避免造成交叉感染和实验物品污染。
4. 学生进行实验操作时,必须遵循实验操作规程,按照老师或实验指导员的指导进行操作。
5. 使用实验仪器和设备时,应注意仪器的正确使用方法和注意事项,避免操作不当导致设备损坏或人员受伤。
三、实验室废弃物处理规定1. 实验室废弃物应分类收集,按照有害废弃物、可回收物、一般生活垃圾分别放置于相应的垃圾桶中。
2. 有害废弃物应用特殊标识袋包装,并上交给实验室管理员统一处理。
3. 可回收物应进行分类收集,包括废纸、废塑料等。
废纸应进行压缩处理,塑料瓶等应尽量清洗干净后放置在相应的垃圾桶中。
4. 实验室一般生活垃圾应及时清理,垃圾桶内应加盖,避免散发异味和引起细菌滋生。
5. 涉及生物实验废弃物的处理,应按照相关法规和规章制度进行,严禁随意倾倒到自然环境中。
四、实验室紧急事态处理规定1. 在实验过程中,如遇生化危险品泄漏、实验设备故障、火灾等紧急情况,应立即向实验室管理员报告,并按照紧急处理预案进行处置。
生物实验室管理制度模版一、综述本实验室管理制度旨在规范和保障生物实验室的正常运行,确保实验室人员的安全和实验数据的可靠性。
请全体实验室人员认真遵守并执行以下规定,以确保实验室的安全和科研工作的顺利进行。
二、实验室入场管理1. 进入实验室前,每位实验室人员必须佩戴个人防护用品,包括实验服、手套、面罩和护目镜等,个人防护用品必须保持干净整洁,及时更换损坏或脏污的防护用品。
2. 实验室内严禁进食、饮水和吸烟,禁止在实验室内储存或食用食品。
3. 实验室内不得携带非实验所需的物品进入,如衣物、书籍等,严禁将私人物品存放在实验室内。
三、实验室仪器设备管理1. 实验室仪器设备必须定期进行检修和维护,设备使用完毕后及时清理、归位,并做好相应记录。
2. 使用实验室仪器设备前,必须熟悉设备的使用方法和操作规程,并经专业人员培训合格后方可操作。
3. 禁止私自更改和拆卸实验室仪器设备,如有需求,必须经过主管人员批准并进行相关记录。
四、实验室安全管理1. 实验室内严禁随意存放化学品和有害物品,所有化学品和有害物品必须按照规定分类、标识、储存,并做好相应的安全记录。
2. 使用化学品和有害物品前,必须了解其性质、安全操作要求和紧急处理方法,并按照规定佩戴相应的个人防护用品,禁止单独操作。
3. 实验室内禁止超员操作,严禁未经授权的人员进入实验室。
4. 实验室内必须配备灭火器、防护装置、急救箱等安全设备,并及时进行检查和维护。
五、实验室废物管理1. 实验过程中产生的废物必须按照规定分类、储存和处理。
2. 严禁将废物随意倒入下水道或垃圾桶,必须按照规定的方式进行处理或交由专业机构处理。
3. 废弃化学品容器必须进行正确的处理和回收,不得乱倒废液。
六、实验室文档管理1. 实验室工作日志、实验记录和实验数据等文档必须按规定进行记录,并标明日期、操作人员等相关信息。
2. 重要的实验数据和资料必须备份并妥善保管,实验室内禁止随意拷贝和外泄相关资料。
第二章临床生物化学实验室根本技术与管理实验室的根本技术与管理是临床生物化学检验工作的重要根底。
本章所涉及的实验室根本技术与管理主要是应用于临床生物化学检测的分析技术与质量管理,目的在于加强根底,提高生物化学检验的质量。
对于实验室的其他根本知识,根本技术以及实验室的管理方法,可参阅其他相关教材。
第一节常用临床生物化学分析技术临床生物化学分析技术很多,常用的主要有光谱分析技术、电泳技术、离心技术、层析技术、电化学分析技术等。
一、光谱分析技术利用各种化学物质所具有的发射、吸收或散射光谱谱系的特征,来确定其性质、结构或含量的技术,称为光谱分析技术。
根据光谱谱系的特征不同,可把光谱分析技术分为发射光谱分析、吸收光谱分析和散射光谱分析三大类。
在临床生物化学检验中,光谱分析是一类十分重要的技术,应用极为广泛。
分光光度法(spectrophotometry)I. 光谱分析法(photometry)1. 定义:根据物质吸收、发射或散射辐射能而建立起来的一类分析方法。
2. 光的根本性质:高速传播的电磁辐射;具有波动性( =c/v)和微粒性(E=h v);短波能量大,长波能量小3. 物质对光吸收的根本原理:能量转移----当光辐射通过某种物质时,组成该物质的分子与光子发生“碰撞〞,光子的能量就转移至分子、原子上,使它们由基态(低能态)跃迁到激发态(高能态),这种跃迁称为激发。
选择吸收----组成物质的分子仅吸收与其内能变化(基态与激发态能量差)相对应的波长或频率的光,所得到的光谱称为吸收光谱。
能量释放----处于较高能态的分子(激发态分子)不稳定,当其返回基态时,以热或发射光谱的形式将能量释放出来。
所发射出的相应光谱,称分子发射光谱。
4. 分类(1) 吸收光谱分析法:根据溶液能吸收由光源发出的某些 波长的光后所形成的特征光谱来鉴定该物质的性质和含量的方法。
(2) 发射光谱分析法:根据物质受到热能或电能等的激发后所发射出的特征光谱来进行定性及定量分析的一种方法。
生物化学实验室技术生物化学实验室是进行生物化学研究和相关实验的重要场所。
本文将介绍生物化学实验室的一些常用技术和方法,包括常用设备、实验操作以及实验室管理等方面。
一、常用设备1. 分光光度计:用于测定物质的吸光度,常用于酶活性、蛋白质含量的测量等实验中。
2. 离心机:用于分离液体中的固体颗粒或液体成分,常用于离心沉淀、血液分离等实验中。
3. 冷冻离心机:用于对样品进行低温离心或冷冻保存,常用于蛋白质结晶、细胞培养等实验中。
4. 超速离心机:用于高速离心,常用于DNA提取、细胞碎化等实验中。
5. 水浴锅:用于恒温加热,常用于酶反应、DNA扩增等实验中。
6. 水质检测仪:用于测定水样中的各项理化指标,常用于培养基配置、实时监测等实验中。
7. 厌氧箱:用于提供无氧环境,常用于微生物培养、酶还原实验等。
二、实验操作1. 样品制备:根据实验需求,进行样品的收集、预处理、提取等操作,确保实验所使用的样品质量可靠。
2. 试剂配置:根据实验需求,准确称取试剂,配置所需的缓冲液、培养基等,注意保持实验室的洁净和消毒操作。
3. 光度测定:使用分光光度计测定物质的吸光度,根据所得数据进行曲线绘制和计算分析。
4. 蛋白质分离:使用凝胶电泳技术对蛋白质进行分离,根据所得结果进行蛋白质的定量和分析。
5. DNA/RNA提取:使用离心和酶解等技术,从细胞或组织中提取DNA/RNA,常用于遗传学研究等实验。
6. 酶反应:通过加入底物和酶来观察酶的催化作用,常用于酶动力学研究和酶抑制剂筛选等实验。
7. 细胞培养:使用细胞培养技术,培养和繁殖不同类型的细胞,常用于生物药物研发和细胞生物学研究。
三、实验室管理1. 实验室安全:严格遵守实验室安全规定,佩戴个人防护用品,避免接触危险试剂和高温设备。
2. 设备维护:定期检查和维护实验设备,保证设备的正常运行和准确性。
3. 资源管理:正确使用和管理实验室资源,包括试剂、耗材、设备等,避免浪费和过期。
第二章临床生物化学实验室基本技术与管理实验室的基本技术与管理是临床生物化学检验工作的重要基础。
本章所涉及的实验室基本技术与管理主要是应用于临床生物化学检测的分析技术与质量管理,目的在于加强基础,提高生物化学检验的质量。
对于实验室的其他基本知识,基本技术以及实验室的管理方法,可参阅其他相关教材。
第一节常用临床生物化学分析技术临床生物化学分析技术很多,常用的主要有光谱分析技术、电泳技术、离心技术、层析技术、电化学分析技术等。
一、光谱分析技术利用各种化学物质所具有的发射、吸收或散射光谱谱系的特征,来确定其性质、结构或含量的技术,称为光谱分析技术。
根据光谱谱系的特征不同,可把光谱分析技术分为发射光谱分析、吸收光谱分析和散射光谱分析三大类。
在临床生物化学检验中,光谱分析是一类十分重要的技术,应用极为广泛。
分光光度法(spectrophotometry)I. 光谱分析法(photometry)1. 定义:根据物质吸收、发射或散射辐射能而建立起来的一类分析方法。
2. 光的基本性质:高速传播的电磁辐射;具有波动性( =c/v)和微粒性(E=h v);短波能量大,长波能量小3. 物质对光吸收的基本原理:能量转移----当光辐射通过某种物质时,组成该物质的分子与光子发生“碰撞”,光子的能量就转移至分子、原子上,使它们由基态(低能态)跃迁到激发态(高能态),这种跃迁称为激发。
选择吸收----组成物质的分子仅吸收与其内能变化(基态与激发态能量差)相对应的波长或频率的光,所得到的光谱称为吸收光谱。
能量释放----处于较高能态的分子(激发态分子)不稳定,当其返回基态时,以热或发射光谱的形式将能量释放出来。
所发射出的相应光谱,称分子发射光谱。
4. 分类(1) 吸收光谱分析法:根据溶液能吸收由光源发出的某些波长的光后所形成的特征光谱来鉴定该物质的性质和含量的方法。
(2) 发射光谱分析法:根据物质受到热能或电能等的激发后所发射出的特征光谱来进行定性及定量分析的一种方法。
(3) 比浊/散射光谱分析法:测定光线通过溶液混悬颗粒后的光吸收或光散射程度的一类定量方法。
可见、紫外分光光度法(visible and ultraviolet spectrophotometry ) *原子吸收光谱法(atomic absorption spectrophotometry ):微量金属元素 红外分光光度法火焰发射光谱法(flame emission photometry ):碱金属/碱土金属元素 荧光光谱法(fluorometry):少量无机物、酶活力、激素等比浊法(turbidimetry):在光源的光路方向上测定透射光强度(透射光&散射光)与入射光强度的比值和胶体溶液中质点浓度间的关系。
散射测浊法(nephelometry):在光路的垂直方向上测量散射光强度和胶体溶液中质点间的关系。
5.特点:灵敏度高;测定简便、快速;试样不被破坏等。
II. 可见、紫外分光光度法1.定义:根据物质分子对于200nm~700nm光区电磁辐射的吸收特性进行分析的方法。
可见光:400~700nm,有色物质溶液紫外光:200~400nm,无色物质2.特点:灵敏度高(10-4~10-7g/ml); 选择性强;精确度和准确度高;仪器设备简单,操作易掌握3.吸收光谱(1)光谱的产生:化合物分子的价电子跃迁(2)吸收光谱曲线:电子跃迁的吸收波长和吸收强度可用仪器测定,在可见、紫外光区内绘制或扫描得到一条以波长( )为横坐标,吸光度(A)为纵坐标的吸收曲线。
4.光吸收的基本定律(Lamber-Beer’s Law)(1) 定律:单色光通过吸光溶液后,吸光度与浓度或厚度之间呈正比关系。
Lamber定律:说明吸收与厚度间的关系Beer定律:说明吸收与浓度间的关系(2) 表达式:-lgI t/I o=a⋅b⋅c *⋯⋯I t/I o为透光率(transmittance, T) (%)⇓A=-lgT= a⋅b⋅c *⋯⋯A为吸光度(aborbance)*a为吸光系数(absorptivity),即吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸光度。
b为液层厚度c为溶液浓度(concentration)5.比色法(colorimetry)(1)定义:用可见光作光源,比较溶液的颜色深浅度以测定所含有色物质浓度的方法(2)所用仪器:分光光度计(spectrophotometer)(i) 基本原理:溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光吸收的效应,物质对光的吸收是具有选择性的。
各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,故当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系。
(ii) 结构组成(以722分光光度计为例)光源:可见光区的光源为钨灯,波长范围是320~1000nm。
(紫外光区的光源为氢灯或氘灯,波长是200~320nm)单色器:一种将光源产生的混合光分解为单一波长的光学系统。
一般是根据通过棱镜的折射或光栅的衍射而获得的。
试样室:由比色皿座架及光门组成。
可见光区用光学玻璃比色皿(紫外光区用石英比色皿)光电管暗盒:由光电管(可将光能转变为可以放大检测和记录的电能)和微电流放大器组成。
显示器:由放大器和读数元件组成。
(3)比色法的定量方法:(i) 标准曲线法:将一系列浓度不同的标准溶液按照一定操作过程显色后,分别测吸光度(A),以A为纵坐标,浓度为横坐标制标准曲线(至少要5点)。
在相同条件下处理待测物质并测定其吸光度,即可从标准曲线找出相对应的浓度。
(ii)对比法:将标准品与待测样品在相同条件下显色并测定各自的吸光度。
由于测定体系温度、厚度及入射光波长一致,故标准与待测样品a&b值相等,可用下式比较计算待测样品浓度C x=C s⨯A s/A xIII. 实验内容1. 可见光分光光度计波长校正(1)原理:镨钕玻璃是一种含有金属镨与钕的玻璃制品,在可见光波长范围内,它具有特征性的吸收光谱,吸收峰的波长固定,可作校对仪器波长正确性的依据。
(2)操作:用镨钕玻璃与空白光路作对照,作出波长从512~541nm的镨钕玻璃吸收曲线,以横坐标为波长,纵坐标为吸光度,每隔2nm作一个点,查找529nm处是否有一个吸收峰的极值,若这个吸收峰的极值相对应的波长大于529nm,则反时针方向调节波长调节螺杆,使这个极值相对应地靠近529nm,一直调到波长误差在允许范围内(529±2nm);反之,吸收峰极值相对应的波长小于529nm,则顺时针方向调节螺杆。
2.红蛋白及衍生物吸收光谱测定(见书)分光光度计的使用1.开电源开关,打开箱盖,预热10mins2.将空白管、对照管、测定管分别装入比色皿(3/4vol),并用吸水纸擦干光面外壁。
3.选定波长4.打开箱盖(光路开关自动关闭),用空白管调T=05.盖上箱盖(光路开关自动打开),再用空白管调T=100%(若调不到,则可调节灵敏度开关)6.将选择开关旋至A,此时显示数值应为0,否则调节“消光零”旋钮调至0。
7.逐步拉出试样架拉手,读取各管吸光度值A。
8.全部测定结束后,取出比色皿(洗净),关闭开关。
二、电泳技术电泳Electrophoresis一、定义电泳—带电粒子在直流电场中向着电性相反电极移动的现象。
电泳分析技术—利用电泳现象进行物质分离的技术。
二、电泳分析技术发展概况1809年俄国物理学家Рейсе首次发现电泳现象。
他在湿粘土中插上带玻璃管的正负两个电极,加电压后发现正极玻璃管中原有的水层变混浊,即带负电荷的粘土颗粒向正极移动,这就是电泳现象。
1909年Michaelis首次将胶体离子在电场中的移动称为电泳。
他用不同pH的溶液在U形管中测定了转化酶和过氧化氢酶的电泳移动和等电点。
1937年瑞典Uppsala大学的Tiselius对电泳仪器作了改进,创造了Tiselius电泳仪,建立了研究蛋白质的移动界面电泳方法,并首次证明了血清是由白蛋白及α、β、γ球蛋白组成的,由于Tiselius在电泳技术方面作出的开拓性贡献而获得了1948年的诺贝尔化学奖。
1948年Wieland和Fischer重新发展了以滤纸作为支持介质的电泳方法,对氨基酸的分离进行过研究。
从本世纪50年代起,特别是1950年Durrum用纸电泳进行了各种蛋白质的分离以后,开创了利用各种固体物质(如各种滤纸、醋酸纤维素薄膜、琼脂凝胶、淀粉凝胶等)作为支持介质的区带电泳方法。
1959年Raymond和Weintraub利用人工合成的凝胶作为支持介质,创建了聚丙烯酰胺凝胶电泳,极大地提高了电泳技术的分辨率,开创了近代电泳的新时代。
30多年来,聚丙烯酰胺凝胶电泳仍是生物化学和分子生物学中对蛋白质、多肽、核酸等生物大分子使用最普遍,分辨率最高的分析鉴定技术,是检验生化物质的最高纯度:即“电泳纯”(一维电泳一条带或二维电泳一个点)的标准分析鉴定方法,至今仍被人们称为是对生物大分子进行分析鉴定的最后、最准确的手段,即“Last Check”。
由80年代发展起来的新的毛细管电泳技术,是化学和生化分析鉴定技术的重要新发展,己受到人们的充分重视。
三、电泳分析技术的分类1.根据被分离样品的量多少分析电泳制备电泳2.根据电泳电压的高低常压电泳0~500 V高压电泳500~3000V3.根据电泳中是否使用支持物自由电泳—不使用支持物,在溶液中进行。
区带电泳—使用支持物(1) 按支持物的物理性状不同,可分为①滤纸及其他纤维薄膜电泳,如醋酸纤维素、玻璃纤维、聚氯乙烯纤维②凝胶电泳,如琼脂、琼脂糖、硅胶、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳③粉末电泳,如纤维素粉、淀粉、玻璃粉电泳④丝状电泳,如尼龙丝、人造丝电泳(2)按支持物的装置形式不同,可分为①平板式电泳②垂直板式电泳③垂直柱式电泳4.根据电泳系统pH是否连续▪连续pH电泳—指电泳过程中pH保持不变,如滤纸电泳、醋纤膜电泳▪不连续pH电泳—指电极缓冲液和电泳支持物的不同区段也有不同的pH,如PAGE、IFE 优点是在不同pH区之间形成高的电位梯度区,使蛋白质移动加速压缩为一极狭的区带而达到浓缩的目的。
电泳技术的特点:▪凡是带电物质均可应用某一电泳技术进行分离,并可进行定性或定量分析;▪样品用量极少;▪设备简单;▪可在常温进行;▪操作简便省时;▪分辨率高.电泳技术应用▪基础理论研究;▪临床诊断;▪工业制造.双向凝胶电泳和质谱技术的建立和联用,提供了蛋白质组研究所需的技术体系,使得蛋白质组的研究成为可能.四、电泳的基本原理▪一个质点,如能解离或能吸附带电质点,在电场中便会向正极或负极移动。
▪电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。
许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。